Neutrófilos en la activación y regulación de la inmunidad innata y adaptativa

Resumen

Los neutrófilos, durante mucho tiempo, han sido considerados como células efectoras finales de una aguda respuesta inflamatoria, teniendo un papel principal en la liquidación de los patógenos extracelulares. Sin embargo, la evidencia más reciente ha ampliado las funciones de estas células. El reciente repertorio descubierto de moléculas efectoras en el arsenal de neutrófilos incluye una amplia gama de citoquinas, trampas extracelulares y moléculas efectoras del brazo humoral del sistema inmune innato. Además, los neutrófilos están implicados en la activación, en la regulación y en las funciones efectoras de las células de la inmunidad innata y adaptativa. En consecuencia, los neutrófilos tienen un papel crucial en la patogénesis de una amplia gama de enfermedades, incluyendo infecciones causadas por patógenos intracelulares, autoinmunidad, inflamación crónica y cáncer.

Los neutrófilos, durante mucho tiempo, han sido considerados como células efectoras de corta vida del sistema inmune innato. Poseen una capacidad limitada para la actividad biosintética y con un papel principal en la resistencia contra patógenos extracelulares y en la inflamación aguda. Estas células son caracterizadas básicamente por su capacidad para actuar como células fagocíticas, para liberar enzimas líticas de sus gránulos y para producir intermediarios reactivos de oxígeno (ROI) con potencial antimicrobiano.

Sin embargo, en la década de 1990, este punto de vista fue desafiado por la demostración de que los neutrófilos sobreviven mucho más tiempo de lo que fue sugerido por primera vez y pueden ser inducidas a expresar genes que codifican mediadores inflamatorios clave, incluyendo los componentes del complemento, receptores de Fc, quimiocinas y citocinas. Además, la evidencia reciente sugiere que los neutrófilos también pueden producir moléculas anti-inflamatorias y factores que promueven la resolución de la inflamación. El uso de enfoques micro matriz basado ha añadido una nueva dimensión a nuestro conocimiento del potencial de biosíntesis de neutrófilos que afecta de manera más amplia los procesos de inmunidad innata. Por otra parte, el desarrollo de nuevas herramientas para el aislamiento de neutrófilos altamente purificados (>99.7%) ha sido fundamental en la ampliación de nuestra comprensión de discriminar transcripcionalmente eventos temporales de los neutrófilos en el ámbito clínico. La evidencia más reciente destaca que la novo inducción de micro ARN podría ser parte de los circuitos reguladores cruciales que controlan la expresión génica de los neutrófilos. Los datos recientes también han sugerido que los neutrófilos pueden ser polarizados hacia fenotipos distintos en

respuesta a señales ambientales. Los neutrófilos han surgido tanto como componentes clave del efector y como circuitos de regulación de los sistemas inmune innato y adaptativo, y esto ha llevado a un renovado interés en su biología.

También se ha hecho evidente que los neutrófilos son mediadores importantes de la T helper 17 (TH17) y de la vía controlada por resistencia a patógenos, así como de inmunopatología. En consecuencia, la interleucina-17 (IL-17) esta relacionada con las citoquinas secretadas por las células TH17 e induce mediadores que promueven la granulopoyesis y la consecuente proliferación y acumulación de neutrofilos. Por otra parte, las citoquinas derivadas de células TH17 (tales como IL-17, CXC-quimiocina ligando 8 (CXCL8; también conocido como IL-8), interferón-γ (IFN), factor de necrosis tumoral (TNF) y el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF)) reclutan a favor en la activación y supervivencia prolongada de los neutrófilos en los sitios inflamatorios. Por lo tanto, las células TH17 orquestan y amplifican las funciones de los neutrófilos en la resistencia contra las bacterias extracelulares. Aquí, nos centramos en cómo los neutrófilos se integran en los mecanismos de activación, regulación y la reacción ante algún estimulo de los sistemas inmune innata y adaptativa, y a su vez, en la función como principales determinantes de diversas patologías, más allá de su largo y conocido papel en las respuestas inflamatorias agudas y la resistencia a los patógenos extracelulares.

Papel en la inmunidad innata

Los neutrófilos son esenciales para la inmunidad innata y la resistencia a los patógenos, como lo ilustra el debilitante y las condiciones potencialmente mortales asociados con anomalías congénitas o adquiridas en la función del ciclo de vida de los neutrófilos. Una descripción completa de las funciones de los neutrófilos en el sistema inmune innato es más allá del alcance de esta sección y se remite al lector a los comentarios anteriores. Por lo tanto, nos centramos aquí en nuevos panoramas que resaltan la versatilidad y sofisticación de estas células.

La activación de los neutrófilos. Durante mucho tiempo se ha sabido que los péptidos N-formilo inducen la quimiotaxis de neutrófilos y la activación funcional a través del receptor de la proteína G de siete transmembrana acoplados FPR1. La producción de proteínas formilados se limita a las bacterias y mitocondrias, y por lo tanto, FPR1 cumple los criterios de un receptor de reconocimiento de patrones (PRR) reconoce restos microbianos y daño tisular.

De hecho, los péptidos formilados mitocondriales derivados, cuando se inyectan, inducen el reclutamiento de neutrófilos, y la inflamación en diferentes tejidos (tales como los pulmones) y, en conjunción con CXCL2 intravascular, guía a los neutrófilos a sitios de inflamación estéril.

Los neutrófilos expresan un vasto repertorio de derechos y responsabilidades parentales (además de FPR1), incluidos todos los miembros de la familia de receptores tipo Toll (TLR), con la excepción de TLR3 (REF. 14); los receptores de lectina de tipo C Dectin 1 (también conocidos como CLEC7A) y CLEC2 (también conocido como CLEC1B); y sensores citoplasmáticos de los ácidos ribonucleico (RIG-I y MDA5). Es de destacar

que CLEC2 no se expresa por los neutrófilos de ratón, un hallazgo que advierte en contra de la extrapolación entre especies. Además, los neutrófilos expresan la proteína de nucleótidos dominio de oligomerización de unión 1 (NOD1), aunque la expresión y función de los receptores NOD, como (NLRs) que son componentes de la inflamasoma, no se han estudiado cuidadosamente. La detección de patógenos y daño en los tejidos a través de estos PRRs, junto con las señales derivadas de células linfoides (véase más adelante), activan las funciones efectoras de los neutrófilos. Estos incluyen la producción de ROI, enzimas líticos y péptidos antimicrobianos, así como más funciones recientemente descritas (ver más abajo).

El repertorio en expansión de citoquinas derivadas de neutrófilos, resume el repertorio de citocinas que los neutrófilos pueden expresar. Aquí nos centramos en los resultados y perspectivas recientes y remitimos al lector a los comentarios anteriores para un fondo. La producción de citocinas por los neutrófilos es controlada por los mecanismos reguladores que actúan a diferentes niveles, incluyendo la transcripción del RNAm, la estabilidad o la traducción (por ejemplo, a través de la focalización microRNA mediada, como en el caso de ratón IFNγ), así como la secreción de proteínas. Con respecto a la secreción de proteínas, fracciones significativas de factor de células de activación de B (BAFF; también conocido como BLYS), ligando inductor de apoptosis relacionado con TNF (TRAIL), CXCL8, CC-ligando quimiocinas antagonista 20(en la lectura esta como CC-chemokine ligand 20) (CCL20) y la IL-1 receptor (IL-1RA) no se liberan directamente después de la síntesis, pero se almacenan en piscinas intracelulares. Estas citoquinas solamente se secretan rápidamente cuando los neutrófilos son agudamente estimulados por moléculas secretagogue-like.

Estudios recientes han demostrado que los neutrófilos humanos son una fuente importante de citocinas, son cruciales para la supervivencia, maduración y diferenciación de células B. Estas moléculas incluyen BAFF y un inductor de la proliferación ligando (APRIL, la molécula más estrechamente relacionado con BAFF). Sorprendentemente, los neutrófilos, en el líquido sinovial inflamado de pacientes con artritis reumatoide, en el tejido linfoide asociado a la mucosa inflamada (MALT) o en diversos tumores malignos de células B y tumores sólidos, expresan y secretan altos niveles de APRIL. APRIL promueve la supervivencia y proliferación de células B normales y malignas. Por lo tanto, los neutrófilos derivados de APRIL podrían sostener la producción de auto anticuerpos, como en la artritis reumatoide, o el crecimiento y la progresión maligna, como en el linfoma de células B.

Las citoquinas derivadas de neutrófilos también están involucradas en la resorción ósea. Los neutrófilos humanos y murinos (roedores miomorfos) han demostrado que pueden regular el alza de la expresión de RANKL, unido a la membrana funcionalmente activa (el ligando para el receptor activador de NF-kB (RANK)) después de la activación in vitro e in vivo. Además, se encontró neutrófilos en el líquido sinovial de pacientes con Artritis Reumatoide Exacerbada. Para expresar altos niveles de RANKL y después de la interacción con los osteoclastos, estos neutrófilos son mostrados para activar la osteoclastogénesis de una manera RANKL-dependiente. Dada la presencia de un gran número de neutrófilos en los sitios de pérdida de masa ósea inflamatoria, así como la expresión por estos neutrófilos de otros factores reguladores implicados en la remodelación ósea, tales como RANK y la osteoprotegerina (también conocido como

TNFRSF11B), estas células podrían tener el potencial para orquestar la resorción ósea en la artritis reumatoide.

Las diferencias en la capacidad de expresar citoquinas fueron ocurridas en los neutrófilos de humanos y de ratones. En particular, si los neutrófilos humanos pueden expresar IL-6, IL-17A, IL-17F e IFN, al igual que sus homólogos de ratón, es objeto de informes contradictorios. El posible papel de un número bajo de contaminación de monocitos en las poblaciones de neutrófilos aislados advierte contra la interpretación de algunos de estos hallazgos. Además, no hay un consenso en la literatura en cuanto a si los neutrófilos humanos producen IL-10. Aunque estudios previos reportaron resultados negativos, lipopolisacárido (LPS) y suero amiloide, estos pueden inducir altos niveles de IL-10 por los neutrófilos humanos. Sin embargo, estos resultados no pueden ser reproducidos en otros laboratorios (Ref. 30 y MAC y AM, observaciones no publicadas), de nuevo destaca la necesidad de procedimientos de purificación estrictos para controlar la contaminación de monocitos. Curiosamente, varios estudios han demostrado que los neutrófilos de ratón producen IL-10 durante la neumonía, infección por Staphylococcus aureus resistente a la meticilina y la infección diseminada de Candida albicans. Los mecanismos subyacentes a las diferencias entre el ratón y neutrófilos humanos aún no han sido definidos.

Por lo tanto, en respuesta a diferentes señales de neutrófilos, estos expresan un vasto y diverso repertorio de citocinas que son cruciales para el papel de los neutrófilos en la respuesta inmune innata y adaptativa, y a su papel en la defensa y la patología.

Trampas extracelulares de neutrófilos. En adición a producir moléculas efectoras clásicas, tales como ROI y citosinas, los neutrófilos pueden producir redes extracelulares fibrilares denominadas trampas extracelulares de neutrófilos (NETs). Estas redes están compuestas principalmente de ADN, pero también contienen proteínas de gránulos neutrófilos. Los NETs actúan como mallas que atrapan microrganismos y, a su vez, facilitan la interacción con moléculas efectoras derivadas de neutrófilos. De forma importante, las NETs también contienen algunas moléculas de reconocimiento de patrones derivadas de neutrófilos (PRMs), con propiedades tipo-anticuerpo.

Los neutrófilos como una fuente de moléculas de reconocimiento de patrones. El sistema inmune innato incluye un brazo celular y humoral. Este último incluye a las PRMs, como las colectinas, las ficoilas y las pentraxinas. Estas PRMs solubles actúan como moléculas tipo-anticuerpo que interactúan con estructuras microbianas conservadas (como segmentos glicosidicos que contienen manosa en la lectina que se une a manosa) o con proteínas conservadas ( como la proteína A de la membrana externa de las enterobacterias, que esta unida a la pentraxin3 (PTX3)). Los neutrófilos son reservorios ya listos de algunos PRMs tales como PT3, proteína corta de reconocimiento de peptidoglicanos (PGRP-s, también conocida como PGRP1) y M-ficolina (También conocida como ficolina 1).

Los neutrófilos maduros sirven como un reservorio importante de PTX3 preformado, que puede ser rápidamente liberado y que se localiza en parte en NETs. La PTX3 asociada a neutrófilos es esencial para la resistencia contra los patógenos fúngicos Aspergillus fumigatus. PTX3 interactúa con receptores Fcy (FcyRs) y tiene actividad

opsonica y activa la vía clásica de la cascada del complemento. El PTX3 derivado de leucocitos tiene una función regulatoria durante el reclutamiento neutrófilo y la inflamación al interactuar con la P-selectina, por tanto inhibiendo la extravasación neutrofila.

Los neutrófilos, ya sea espontáneamente o después de una estimulación apropiada, han mostrado expresar o producir numerosas citosinas, quimiocinas y factores angiogenicos. La expresión y/o producción de estos factores ha sido validada no solo por técnicas de expresión de genes sino por inmunohistoquimica, ELISA o pruebas biológicas para citosinas especificas realizadas en células humanas y/o de ratones. Para una descripción mas exhaustiva de las condiciones experimentales que resultan en la producción individual de citosinas por neutrófilos, asi como la regulación molecular y la relevancia biológica de este proceso, el lector puede dirigirse a revisiones epsecificas.

PGRP-S y M-ficolina son almacenados en gránulos secundarios y terciarios y liberados por neutrófilos activados, y, al menos en el caso de PGRP-s, localizados en NETs. PGRP-S se une a los peptidogicanos, reconoce microorganismos selectos y ejerce actividades bacteriostáticas y bactericidas. Las ficolinas, incluyendo M-ficolina, tienen la habilidad de interactuar con dominios glicosidicos microbianos, activar la via de las lectinas de la cascada del complemento y ejercer actividad opsonica. Sin embargo, en contraste con PTX3 y PGRP-S, un rol especifico para la M-ficolina asociada a neutrófilos no ha sido definido.

Tomado en conjunto, estas observaciones indican que, después de la activación, los neutrófilos contribuyen al brazo humoral de la respuesta inmunitaria innata, al liberar PRMs solubles que mejoran la fagocitosis, activan el complemento (tanto la via clásica como la de las lectinas) y regulan la inflamación. En términos mas generales, la participación de estos “héroes no reconocidos” en mecanismos de resistencia innata va mas alla de la producción de moléculas que dañan microorganismos –y tejido-, para incluir una producción de citosinas diversa, altamente regulada y personalizada, junto con la liberación de NETs y PRMs tipo-anticuerpo.

Caja 2: Trampas extracelulares de neutrófilosLas trampas extraceulares de neutrófilos (NETs) están compuestas de componentes nucleares (como ADN e histonas) y están decoradas por proteínas de gránulos primarios (tales como mieloperoxidasa y elastasa neutrofila), gránulos secundarios (como lactoferrin y pentraxin 3 (PTX3)) y gránulos terciarios (como metaloproteinasa 9 de matriz (MMP9) y proteína corta de reconocimiento de peptidoglicanos (PGRPS)). Las mitocondrias también pueden servir como fuente de ADN para la formación de NET. Las NETs han mostrado poder atrapar microorganismos –tales como Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella flexneri, Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium, Candida albicans and Leishmania amazonensis- y promover la interacción de estos patógenos con proteínas derivadas de gránulos. Moléculas localizadas en la NET tienen un repertorio diverso de funciones, incluyendo reconocimiento microbial (por ejemplo, por PGRP-s y PTX3), actividad antimicrobiana (por ejemplo, por el péptido antimicrobiano catelicidina (la forma no modificada de LL37) y la proteína bactericida de aumento de permeabilidad) y remodelamiento de tejidos (por ejemplo, por elastasa y MMP9). La formación de NET es un proceso rápido y activo (que ocurre en minutos) que se cree esta mediado por procesos dependientes de muerte celular referidos como NETosis (ver figura). Los microorganismos han desarrollado estrategias para huir de los NETs. Por ejemplo, cepas de serotipo M1 de Streptococcus pyogenes y Streptococcus pneumoniae expresan DNasa que impide el

asesinato mediado por NETs y promueve la virulencia in vivo. Por tanto, los neutrófilos producen trampas venenosas de NETs para atrapar a las bacterias, mientras que el escape de NETs es una estrategia evolutiva desarrollada por bacterias.En el lupus sistémico eritematoso (SLE), la presencia de anticuerpos específicos para ribonucleoproteinas (RNPs) y el péptido antimicrobiano LL#7, estimula la liberación de NETs por neutrófilos via CD32 (también conocido como FcyRIIB) y LL37 expresado en superficie, respectivamente. Autoanticuerpos específicos para péptidos antimicrobianos presentes en NETs promueven el transporte de ADN a células dendríticas plasmacitoides (pDCs) via CD32 y la producción de interferón-alfa (IFNa) en una manera dependiente de receptores tipo Toll 9 (TLR-9). IFNa a su vez, aumenta la expresión superficial de LL37 en neutrófilos y amplifica la liberación de NET que es inducida por autoanticuerpos.Diafonía celular (la palabra es crosstalk, según google la traducción es diafonía)

Una vez reclutados en tejidos celulares inflamados, los neutrófilos pueden iniciar interacciones bidireccionales complejas con macrófagos, células dendríticas, célula natural killer, linfocitos y células madre mesenquimatosas.

Control de la supervivencia neutrofila. A pesar de que los neutrófilos no proliferan y tienen una vida media estimada de 10-12 horas bajo condiciones de cultivo in-vitro, señales tales como la adhesión, transmigración, hipoxia, citosinas y productos microbianos, pueden demorar su muerte celular programa y por tanto extender su supervivencia in vivo. Un tiempo de vida prolongado, combinado con la habilidad adquirida de sintetizar y liberar citosinas inmunoregulatorias, es probablemente esencial para que los neutrófilos pueden eliminar más eficientemente agentes dañinos, así como para que interactúen con otras células. Por ejemplo, los macrófagos pueden atraer neutrófilos al sitio de la herida y producir citosinas para controlar la actividad y el tiempo de vida de las células reclutadas. En adición, las células madre mesenquimatosas pueden afectar el tiempo de vida y activación de los neutrófilos. Las células madre derivadas de la medula ósea activadas TLR3- o TLR4- son más eficientes que células quiescentes mediando los efectos anti apoptoticos en neutrófilos humanos, por tanto preservando una fracción significativa de los neutrófilos viables y funcionales hasta 72 horas in vitro. Estos efectos son mediados por la IL-6, IFNB y GMCSF producidos por células madre mesenquimatosas activadas TLR-3, y mas que nada a través de GM-CSF en el caso de las TLR4-. Ya sea que las células madre mesenquimatosas contribuyen a la modulación de la supervivencia de neutrófilos in vivo se mantiene indeterminado.

Diafonía de células inmunitarias. La primera evidencia de que los neutrófilos pueden cooperar con DCs (dendritic cells) vino de estudios mostrando que el sobrenadante de cultivos con neutrófilos de ratón estimulados con Toxoplasma gondii inducia la maduración de DCs derivadas de la medula ósea in vitro, asi como la producción de IL-12 y TNF La relevancia in vivo de esta diafonía fue probada al observar DCs del bazo aisladas en ratones sin neutrófilos infectados con T. gondii mostro una producción reducida de IL-12 y TNF. Los neutrófilos humanos también han mostrado, al menos in vitro, inducir la maduración de DCs derivadas de monocitos a través de estimulación dependiente de contacto. Estas interacciones involucran CD18 y CEACAM1 (moléculas de adhesion celular 1 relacionada con antigenos carcinoembrionicos) en neutrófilos y

DC-SIGN ( no-integrina atrapa-ICAM3 especifica para DC) en DCs derivados de monocitos. Como resultado, los DCs derivados de monocitos que han madurado en neutrófilos adquieren el potencial de inducir la proliferación de células T y polarización hacia el fenotipo celular Th1. En adición, los neutrófilos fueron encontrados frecuentemente en contacto con DCs de señalización DC positiva en la mucosa colonica de pacientes con la enfermedad de Chron.

Interesantemente, la diafonía entre neutrófilos humanos y CDs no siempre resulta en la activación de DC. Por ejemplo, la elastasa derivada de neutrófilos ha mostrado disminuir la habilidad allostimultoria de DCs derivados de monocitos humanos Similarmente, los ectosomas liberados por los neutrófilos humanos – ya sea después de la estimulación in vitro o en el sitio de inflamación in vivo- inhiben la maduración de tanto DCs derivadas de monocito y macrófagos derivados de monocito, posiblemente incrementando su producción de la citosina inmunosupresiva factor transformante de crecimiento B1 (TGFB1). Es más, los DC’s derivados de monocitos tratados con ectosomas mostraron desarrollar un fenotipo tolerogenico, caracterizado por la actividad fagocitica reducida y la expresión de marcadores de superficie celular, asi como una capacidad dañada de producir citosinas e inducir proliferación celular T una vez que se dio la estimulación por LPS.

La relevancia de estos estudios in vitro sobre la interferencia biológicamente (crosstalk: no sé exactamente a que se refiere) entre los neutrófilos y las células dendríticas (CD) requiere validación in vivo, por ejemplo por imagen directa y estudios funcionales más fuertes. Recientemente se ha demostrado que, en los ratones tratados con LPS o bacterias Gram-negativas, monocitos periféricos migran a los

ganglios linfáticos, donde se diferencian en células dendríticas para convertirse en las predominantes células presentadoras de antígeno (Fig. 1). Dado que los neutrófilos también pueden migrar y localizar los ganglios linfáticos (véase más adelante), se podría prever que las células dendríticas derivadas de monocitos y neutrófilos interactúan en órganos linfoides, así como en los tejidos.

Los neutrófilos humanos también pueden modular el estado de activación de las células NK, ya sea por sí mismos o en cooperación con otros tipos de células. En el estado estacionario, los neutrófilos son requeridos para la maduración y función de las células NK, tanto en humanos y ratones (BN Jaeger, C. Cognet, S. Ugolini y E. Vivier, comunicación personal), lo que abre nuevas perspectivas en nuestra comprensión de la deficiencia de células NK observado en pacientes con enfermedades asociadas a neutropenia. In vitro, los neutrófilos pueden modular la supervivencia de las células NK, la proliferación, la actividad citotóxica y la producción de IFN a través de la generación de ROI y prostaglandinas y / o la liberación de los componentes granulares (recientemente revisado en Ref. 55). Por el contrario, al interactuar con CD, los neutrófilos humanos potencian específicamente la liberación de IFN por las células NK, pero no regulan la actividad citotóxica de estas células.

Diferencias específicas de subgrupos de CD en sangre periférica afectaN a la cooperación entre los neutrófilos y las células NK (Fig. 2). En los seres humanos, CD de sangre periférica pueden ser divididas en CD plasmocitoide (PDC) y CD mieloide, que puede ser dividido en tres subgrupos, llamados CD1c+ CD, CD141+ CD y CD16+ o 6 sulfo LacNAc (SLAN)+ CDs. Se ha demostrado que, por algunas razones aún no determinadas, los neutrófilos mejoran potentemente la liberación de IFN por las células NK cultivadas con SLAN+ CD, pero no con CD1c+ DC o pCDs. Una red tripartito in vitro se ha descrito, en la que los neutrófilos promueven la liberación de IL-12p70 por SLAN+ CDs a través de CD18-ICAM1 (molécula de adhesión intercelular 1) interacción, y esta IL-12p70 estimula las células NK para producir IFN.

El IFN, a su vez, potencia la interacción entre los neutrófilos y SLAN+ CD y la liberación de derivados de CD SLAN+ L-12p70, creando así un lazo de retroalimentación positiva. Además, los neutrófilos puede estimular directamente la producción de IFN-gamma por las células NK; esto es mediado a través ICAM3 expresadas por los neutrófilos y, probablemente, el complejo CD18-CD11d expresado por células NK (Fig. 2). Es importante destacar que la diafonía entre los neutrófilos humanos y las células NK es recíproca, así como el cultivo de los neutrófilos con células NK o factores solubles de células NK (tales como GM-CSF y IFNγ61) promueve la supervivencia de los neutrófilos, la expresión de marcadores de activación, el cebado de la producción de ROI y la síntesis de citoquinas (como recientemente revisada). El relevancia fisiopatológica potencial de una red celular de célula neutrófilo-NK SLAN+ CD ha sido resaltada por estudios de inmunohistoquímica, que han revelado la colocalización de los neutrófilos, células NK y SLAN+ CDs en los sitios de varias patologías inflamatorias crónicas, incluso en la mucosa del colon de pacientes con la enfermedad de Crohn y en las lesiones de la piel de los pacientes con psoriasis. La colocalización de neutrófilos y las células NK también se ha observado en la dermis de los pacientes con dermatosis neutrofílica febril aguda (también conocido como el síndrome de Sweet).

Los neutrófilos humanos también pueden interferirse biológicamente con células B (como se discutió anteriormente) y con las células T (Fig. 3). Un primer nivel de interacción entre las células T y neutrófilos está relacionado con la capacidad de estas células para modular el reclutamiento de cada una a los tejidos inflamados. Recientemente ha sido mostrado que los neutrófilos activados pueden atraer células Th1 y Th17 a sitios de inflamación a través de la liberación de CCL2, CXCL9 y CXCL10 o CCL2 y CCL20, respectivamente. Además, las células T activadas pueden reclutar neutrófilos, aunque el mecanismo utilizado por los subgrupos de células T individuales difiere. Por ejemplo, las células T reguladoras activadas (Treg) o células Th17, pero no las células Th1, pueden liberar CXCL8, que atrae poderosamente a los neutrofilos. Por el contrario, las células Tγδ promueven la liberación de CXCL8 en cultivo con los neutrófilos, y esto puede amplificar su propia reclutamiento. Además, las células Th1 de humanos, siguiendo estimulación in vitro, potentemente puede reclutar neutrófilos, pero el mediador responsable (o mediadores) involucrado aún no ha sido identificado.

Un segundo nivel de interacción entre los neutrófilos y las células T está relacionada con la capacidad de estas células para modular las funciones de cada una (Fig. 3). De hecho, las células T CD4+ y CD8+ activas, incluyendo las células Th17, producen citoquinas (tales como IFN, GM-CSF y TNF) que modulan la supervivencia y la expresión de la activación de neutrófilos marcadores en sistemas de cultivo in vitro. Del mismo modo, celulas Tγδ promueven fuertemente la supervivencia y activación de neutrófilos, según lo determinado por la regulación positiva de CD64 y la expresión de HLA-DR. Además, tanto la IL-17A y IL-17F liberadas por las células Th17 estimulan las células epiteliales para secretar factores granulopoyéticos (tales como G-CSF y factor de células), así como proteínas quimioatrayentes de neutrófilos (por ejemplo, CXCL1, CXCL2, CXCL5 y CXCL8), que…

Pag.7 …por lo tanto amplían el reclutamiento y activación de neutrófilos. Además, se ha demostrado recientemente que los neutrófilos de ratón pueden ser inducidos por las células T para expresar moléculas MHC-II de clase in vitro y por consiguiente a promover la diferenciación de TH1 específica de antígeno y células Th17. Además, neutrófilos humanos y de ratón fueron mostrados para presentes antígenos exógenos in vitro, y la inyección de ratones con antígeno pulsado de neutrófilos promovieron la diferenciación de células T CD8+ vírgenes en células T citotóxicas.

En conjunto, estos datos sugieren que los neutrófilos no son solo jugadores aislados que realizan rápidamente sus acciones antes de ser sustituido por células más especializadas. Ellos también orientan y apoyan la respuesta del sistema inmunológico innato y adaptativo a lo largo de su desarrollo, a través de la interferencia con la mayoría, si no todos, de los mediadores celulares.

Regulación de la inmunidad adaptativa.

Contrariamente a las vistas comunes llevadas a cabo anteriormente de que los neutrófilos se agotan rápidamente en los sitios periféricos, la evidencia reciente

sugiere que los neutrófilos pueden migrar a los ganglios linfáticos después de la captura del antígeno en la periferia a través de un receptor de quimiocinas CC-7 (CCR7) de manera dependiente, similares a las CDs (Fig. 1). La relevancia funcional de los neutrófilos que han migrado a los ganglios linfáticos se evaluó en ratones utilizando tres proteínas antigénicas diferentes. En tal modelo, se encontró que los neutrófilos suprimen la célula B y respuestas de células T CD4 +, pero no la respuesta de células T CD8 +, a los tres antígenos. Sin embargo, ROI derivado de neutrófilos, óxido nítrico e IL-10 no participaron en esta supresión. Además, se encontraron neutrófilos para interferir con la capacidad de CDs y los macrófagos para presentar antígeno en breve después de su migración a los ganglios linfáticos, presumiblemente al competir con las células presentadoras de antígeno para el antígeno disponible 69 (FIG. 1). Por otra parte, los neutrófilos de antígeno-pulsado inyectados por vía subcutánea se mostraron a células T CD8+ vírgenes, lo que sugiere una interacción entre los neutrófilos y las células inyectadas T CD8 + en los ganglios linfáticos de drenaje.

Colectivamente, los datos de ambos sistemas de cultivo in vitro y en modelos in vivo resaltan la complejidad de la función de neutrófilos en términos de las células que interactúan y sus sitios de acción. Por un lado, los neutrófilos puede influir en la maduración de las CDs y, a su vez, en la proliferación y la polarización de las células T, y que pueden cebar un antígeno-especifico de células TH1 y TH17 in vitro. Por otro lado, los neutrófilos parecen ejercer un papel inmunorregulador in vivo, tanto periférico como en los ganglios linfáticos.

Rol en la resolución de la inflamación.

Los neutrófilos son generalmente considerados por ser los componentes pasivos de la resolución de la inflamación, cuyo destino es la muerte, por eliminación rápida y silenciosa. Sin embargo, la reciente la evidencia sugiere que están involucrados en la inducción activa de la resolución a través de la producción de mediadores lipídicos pro-resolución. Durante lo último, las fases finales de las respuestas inflamatorias agudas, los neutrófilos cambian su biosíntesis eicosanoide de leucotrieno B4 (LTB4) a lipoxina A4 (LXA4), que puede inhibir el reclutamiento de neutrófilos a través de su interacción con su receptor acoplado LXA4R de proteina G (también conocido como fpr2). Los neutrófilos también pueden contribuir a la biosíntesis de resolvinas (como resolvina E1, E2 resolvina, resolvina D1 y D2 resolvina) y protectina D1, que se derivan de ácidos grasos esenciales poliinsaturados de omega-3. Estos mediadores lipídicos pro-resolución y el reciente compuesto descrito maresin1 de macrófagos derivados inhiben la migración transendotelial de neutrófilos e infiltración al tejido. (Fig. 4). Por ejemplo, E1 resolvina interactúa con el receptor de LTB4 BLT1 (también conocido como LTB4R1) en los neutrófilos y bloquea la estimulación por LTB4. Por consiguiente, en un modelo de ratón de la peritonitis, los efectos antiinflamatorios de resolvina E1 se perdieron en Ratones deficientes en BLT1.

La contribución de los neutrófilos a la resolución de la inflamación también incluye el bloqueo y limpieza de quimiocinas y citocinas. Los mediadores lipídicos pro-resolucion (como LXA4, resolvina E1 y D1 protectin) aumentan la expresión de CCR5 por los neutrófilos apoptóticos, que puede entonces actuar como señuelos funcionales y

carroñeros para CCL3 y CCL5. Tambien se ha informado que los neutrófilos expresan el receptor CC-quimiocinas D6, un receptor señuelo y carronero para prácticamente todos las CC-quimicionas inflamatorias. La IL-1 de tipo 2 receptor señuelo (IL-1R2) se expresa en altos niveles por los neutrófilos y su expresión es aún más aumentada por señales anti-inflamatorias, como hormonas corticoides. Este receptor señuelo (tanto unidos a la membrana como en formas liberadas) se une IL-1 e impide su interacción con el receptor de transducción de señales de IL-1R1. Los neutrófilos – en especial los que han sido estimulados con la citocina anti-inflamatoria IL-10 – son también la mayor fuente de IL-1RA, una molécula soluble que se une a IL-1R1 sin la necesidad de inducir señales intracelulares. Entonces, la producción y expresión de estos receptores señuelos y citocinas ayudan a regular los efectos pro-inflamatorios de IL-1.Finalmente, la disposición de neutrófilos apoptóticos es un paso importante en la resolución de la inflamación que es finamente regulada por la expresión de señales “cómeme” (eat-me signals: son señales que le indican al neutrófilo que puede fagocitar “comer” a una célula), que desencadena un programa anti-inflamatoria en los fagocitos envolventes. De hecho, el reconocimiento e ingestión de neutrófilos apoptóticos moldea el fenotipo funcional de los macrófagos. La fagocitosis de neutrófilos apoptóticos estimula al fagocito envolvente para desarrollar un fenotipo parecido a IL-10highIL-12lowM2 (IL-10hiIL-12low M2-like phenotype), y este regula

negativamente la inflamación y promueve la reparación de tejidos. Por lo tanto, los neutrófilos, que actúan en múltiples niveles, son parte de la red celular que orquesta la resolución de la inflamación.

El papel de los neutrófilos en la patología

Dadas las amplias funciones de los neutrófilos, que recientemente se han descubierto, no es de extrañar que los neutrófilos se han convertido en actores importantes en la patogénesis de numerosas enfermedades, incluyendo la infección causada por patógenos intracelulares, autoinmunidad, inflamación crónica y el cáncer.

Infección e inflamación crónica. Aunque se creía tradicionalmente que el papel principal de los neutrófilos era la eliminación eficiente de los patógenos extracelulares, varios resultados apuntan a la participación de los neutrófilos también en la eliminación de patógenos bacterianos intracelulares, tales como Mycobacterium tuberculosis. Tal característica puede ser debido a varios factores, entre ellos el aumento de la actividad microbicida de los neutrófilos en comparación con los macrófagos y la diferencia conocida en el pH intrafagosomal entre estos fagocitos.

En consonancia con la idea de que los neutrófilos también pueden contribuir a la respuesta del huésped hacia patógenos intracelulares, Berry et al identificó una secuencia genética que involucra 86 genes en los neutrófilos de sangre en pacientes infectados con M. tuberculosis. Esta secuencia consistió específicamente de los transcritos que son inducidos por los IFNs de tipo I y de tipo II, y se asoció con la enfermedad de tuberculosis activa. Tal firma IFN-inducible no está presente en los neutrófilos de pacientes con Streptococcus del grupo A o infección por Staphylococcus spp. o la enfermedad de Still, lo que indica una participación específica de los neutrófilos en la respuesta inmune al M. tuberculosis. Curiosamente, en un modelo de ratón infectado con M. tuberculosis, se requirieron neutrófilos para la producción de derivados Los neutrófilos son requeridos para la producción de IFNγ derivado del sistema inmune innato (probablemente por las células NK). Por lo tanto, el ratón y los estudios en humanos sugieren un papel crucial para los neutrófilos en la inmunidad frente al patógeno intracelular prototipo de M. tuberculosis.

Además de sus funciones durante la infección por M. tuberculosis, los neutrófilos se han convertido en importantes factores determinantes de la inflamación crónica. La prolina-glicina-prolina tripéptido (PGP) es un quimioatrayente selectivo de neutrófilos que ha sido implicado en la persistencia de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD). El PGP normalmente se degrada en los pulmones por la actividad aminopeptidasa de leucotrieno A4 hidrolasa (LTA4H), que también es responsable de la síntesis de la molécula quimiotáctica LTB4. Sin embargo, en la presencia de humo de cigarrillo (el principal factor de riesgo para la EPOC), la actividad aminopeptidasa (pero

no hidrolasa) de LTA4H se inhibe, lo que resulta en la acumulación de PGP. En estas condiciones, las acciones combinadas de LTB4 y PGP promueven fuertemente el reclutamiento de neutrófilos y la inflamación pulmonar crónica. Un mecanismo similar puede estar en el trabajo en la fibrosis quística, que se caracteriza por una inflamación neutrofílica crónica.

Nuevas perspectivas han sido obtenidas también en la función y regulación de los neutrófilos en la sepsis. IL-33, un miembro de la familia IL-1, se ha demostrado que regulan la función de los neutrófilos durante la inflamación sistémica. En un modelo de ratón con sepsis polimicrobiana, la administración de IL-33 protegió a los ratones reduciendo de la inflamación sistémica. IL-33 - a través de la inhibición de proteína G acoplada a quinasa del receptor 2 (GRK2; también conocido como ADRBK1) - previno la baja regulación de CXC-quimiocina receptor 2 (CXCR2) en los neutrófilos circulantes y por lo tanto aumentó la migración de neutrófilos a los tejidos inflamados y promovió la eliminación de bacterias . Además, las plaquetas activadas por TLR4 han demostrado que se unen a los neutrófilos adherentes durante la sepsis y promueven la formación de NET, que no solo puede conducir al atrapamiento bacteriano, sino que también ayuda a reparar el daño tisular y endotelial in vitro e in vivo

Por otra parte, después de la lesión del vaso y durante la infección sistémica por Escherichia coli, las plaquetas inducen la formación de NET, que promueve la cascada de coagulación. Al promover la coagulación intravascular en sinusoides hepáticos, se demostró que los neutrófilos promovidos por la deposición de fibrina previenen la diseminación de patógenos. Los neutrófilos también tienen un papel importante en la patología vascular, incluyendo en la aterosclerosis y la trombosis. Por lo tanto, los neutrófilos pueden cooperar con las plaquetas y las células endoteliales para evitar la diseminación de patógenos a través del tejido vascular pero también pueden promover la inflamación vascular y trombosis.

Autoinmunidad. En el lupus eritematoso sistémico (LES) - una enfermedad autoinmune multiorgánica caracterizada por un firma de IFN y granulopoyesis , así como la función de células B y T anormal - la degradación de las NETs por la DNasa I, que se encuentra normalmente en el suero humano sano, se altera en un subconjunto (36,1%) de los pacientes (recuadro 2). Este defecto se correlaciona con niveles elevados de anticuerpos antinucleares (un sello del desarrollo de la enfermedad), con la presencia de autoanticuerpos NET-específicos y con un desarrollo más frecuente de la nefritis lúpica. Por lo tanto, un defecto en el despeje del NET podría conducir a una fuente de autoantígenos y patrones moleculares asociados a daños (tales como proteasas) que se sabe que desencadenan y promueven la inflamación. En consecuencia, se demostró que el suero de pacientes con SLE contienen complejos inmunes formados por autoanticuerpos específicos para ribonucleoproteínas, propio ADN y péptidos antimicrobianos (tales como catelicidina péptido antimicrobiano (la forma no escindida de LL37) y los péptidos de neutrófilos humanos (HNPs; también conocido como

defensinas neutroPhil)), y todos estos componentes están asociados con las NETs. Estos complejos inmunes bloquean la degradación del ADN propio y promueven su captación por pDCs a través de interacciones entre los autoanticuerpos y CD32 (también conocido como FcγRIIB). Tras la absorción, el ADN propio desencadena la activación TLR9 y la liberación de IFNα, que, a su vez, induce la producción adicional NET por los neutrófilos.

En vasculitis de pequeños vasos (SVV), la presencia de anticuerpos anti-neutrófilos citoplasmáticos (ANCAs) es una característica de las patologías conocidas colectivamente como "vasculitis asociado a ANCA", incluyendo la granulomatosis de Wegener, poliangeítis microscópica y el síndrome de Churg-Strauss. Curiosamente, las NETs son producidos por los "neutrófilos estimulados por ANCA" y fueron encontrados en los glomérulos y en el intersticio del riñon en biopsias de pacientes con SVV, en los que pueden estar implicados en el daño a los capilares glomerulares. Además, la producción de NETs dio como resultado niveles elevados de los autoantígenos proteinasa 3 (también conocido como mieloblastina) y mieloperoxidasa, que están contenidos en las NETs, proporcionando así autoantígenos adicionales para promover la respuesta autoinmune. En el modelo de ratón transgénico K/BxN de artritis inflamatoria, se ha demostrado que el reclutamiento de neutrófilos en las articulaciones son promovidos por el lipido quimiotáctico LTB4 a través de su receptor BLT1, ambos de los cuales se expresan por los neutrófilos. La activación de neutrófilos por complejos inmunes en las articulaciones promueve la producción de IL-1β, que a su vez estimula las células sinoviales para producir quimiocinas, y esto amplifica el reclutamiento de neutrófilos en las articulaciones. Además, la activación de neutrófilos dependiente de CXCR2 y la consiguiente inducción de la inflamación se han demostrado en dos modelos de ratón de esclerosis múltiple.

Cáncer. Las células inflamatorias son un componente esencial del microambiente tumoral y juegan un papel en la progresión tumoral. La infiltración de neutrófilos de los tumores generalmente no es prominente, con macrófagos asociados a tumores (TAM) siendo un componente principal del infiltrado. Sin embargo, cada vez hay mayor evidencia de la presencia, las características funcionales y la importancia de los neutrófilos asociados a tumores (TANS) pueden haber sido subestimado y por lo tanto necesitan una cuidadosa reevaluación.

Figura 5/ Tumor asociado a neutrófilos. Las quimiocinas CXC producidas por células tumorales y tumores asociados a macrófagos promueven la reclutamiento de neutrófilos en los tumores. Los neutrófilos pueden promover la inestabilidad genética (posiblemente debido a la producción de intermediarios reactivos de oxígeno (ROI)) y estimular la angiogénesis ( por la producción de metaloproteinasa de matriz tipo 9 (MMP9) y factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF)). Los neutrófilos son inducidos por el factor transformante de crecimiento β ( TGFβ ) para que adquiera un fenotipo N2 pro-tumoral y polarizado (caracterizado por altos niveles de expresión de arginasa). En contraste, la inhibición de TGFβ promueve la reprogramación de los neutrófilos a un fenotipo N1. Este está asociado a una mayor actividad

citotóxica, mayor capacidad de generar peróxido de hidrógeno, mayor expresión de factor de necrosis tumoral ( TNF) y moléculas de adhesión intercelular 1 ( ICAM 1), y baja expresión de

arginasa. En presencia de neutrófilos N1, aumenta la activación de células T CD8+ y esto resulta en una actividad antitumoral efectiva.

Las células tumorales producen de manera constitutiva muchas quimiocinas inflamatorias, incluyendo quimiocinas CXC neutrófilo-atrayentes (fig. 5).En efecto, la activación de distintas clases de oncogenes resulta en la producción de CXCL8 y otras quimiocinas relacionadas.

La relación entre la infiltración de TAN y la prognosis en el cáncer humano no se ha investigado sistemáticamente, aunque hay evidencias que sugieren un rol del TAN en la intensificación del progreso de la enfermedad en tumores humanos específicos. Por

ejemplo, el progreso de tumores inducidos por TNF en el cáncer ovárico involucra células T

H17, que fomentan

el reclutamiento de neutrófilos.

En un estudio seminal, Hans Schreiber y colegas, encontraron que una reducción de neutrófilos resultaba en la inhibición del crecimiento de sarcomas. Desde ese momento, el papel de los neutrófilos en la promoción y progreso del cáncer ha sido observada en varios estudios. Los mecanismos descritos en estos son diversos e incluyen la liberación de factores de crecimiento almacenados en gránulos en los

hepatocitos y la producción de oncostatina M. Sorprendentemente, la elastasa liberada de los gránulos primarios de neutrófilos se lleva a unos compartimientos endosómicos específicos de células epiteliales tumorales adyacentes. donde hidrolizará al sustrato receptor de insulina 1*(IRS1). IRS1 se liga a una subunidad de fosfoinositol- 3- kinasa ( PI3K) y bloquea su interacción con el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR). Por consiguiente, en este contexto, la elastasa derivada de neutrófilos libera la actividad promotora de tumores de la vía PDGFR-PI3K.

Los IFN de tipo I tienen un rol crucial en el desarrollo de respuestas inmunes antitumorales. En particular en la “inmunoedición” en el cáncer, y son usados para el tratamiento de diversos canceres. En modelos de trasplante tumoral, se observó un aumento de la angiogénesis y metástasis en ratones con deficiencia de IFNβ, en comparación con ratones control. Curiosamente, el numero de TANs estaba incrementado en dichos ratones, y la merma de TANs redujo el crecimiento tumoral. Estos resultados sugieren que la reducción de las

Inmunoedición: El proceso por el cual la interacción de poblaciones heterogéneas de células tumorales con el sistema inmune genera variantes tumorales con reducida inmunogenicidad que pueden, por lo tanto, escapar las respuestas inmunes.

Angiogénesis: el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos provenientes de vasos preexistentes. Es un proceso normal y vital en el crecimiento y desarrollo, así como en la curación de heridas y formación de tejido granular. Es también un paso importante para el crecimiento de tumores latentes.

Células supresoras derivadas de mieloides: una colección heterogénea de células en diversos estadios del proceso de diferenciación de mielocitos y monocitos que tienen funciones inmunosupresoras. Incluyen monocitos bona fide y neutrófilos.

funciones pro-tumorales de TAN es un importante componente para la actividad anticancerígena de IFNβ .

Los TAMs y TANs también son potentes inductores de angiogénesis tumoral. Las quimiocinas CXC neutrófilo-atrayentes están presentes con frecuencia en tumores y promueven la angiogénesis. En efecto, CXCL 1 ha demostrado in vivo poseer actividad angiogénica mediada por el factor de crecimiento endotelial vascular derivado de neutrófilos (VEGF – A). En un modelo murino de cáncer genéticamente desarrollado (modelo ratón de RIP1- Tag2 de tumorigenesis en islotes pancreáticos), la expresión de metaloproteinasa de matriz de tipo 9 (MMP9) - que cataliza la angiogénesis tumoral mediante la inducción de la expresión de VEGF dentro del tejido neoplásico pancreático- fue encontrada exclusivamente en neutrófilos, y la disminución del número de neutrófilos inhibió el cambio angiogenético. Además, en un modelo de xenoingerto de tumor, G-CSF-induced neutrophil upregulation of BV8 *(También conocido como prokineticina 2) demostró la capacidad de promover la angiogénesis tumoral.

El proceso de mielopoyesis se ve profundamente modificado durante la inflamación y el cáncer, y esto conlleva a la aparición de mielocitos maduros alterados y células supresoras derivadas de mieloides ( MDSCs). En general, aunque un neutrófilo humano maduro no es un componente mayoritario de la actividad de las MDSCs, un número aumentado de mielocitos maduros se ha evidenciado en casos de pacientes inmunodeprimidos con carcinoma de células renales. Además, en melanomas humanos, la producción de IL-10 por neutrófilos inducidos por la proteína sérica amiloide A1 (SAA1) se ha reportado como capaz de suprimir la proliferación antígeno-especifica de células T CD8+ . Sin embargo, el hallazgo de IL-10 producida por neutrófilos humanos activados no pudo ser reproducido en otros laboratorios (REF. 30 y M.A.C. and A.M, observaciones no publicadas) por lo que requiere mayor investigación.

El cáncer ha mostrado indicios de que los neutrófilos pueden exhibir una considerable plasticidad en respuesta a señales del ambiente (fig. 5). En un modelo murino de adenocarcinoma mamario, la co-inyección de células cancerosas junto con neutrófilos de ratas afectadas por tumores, más no con neutrófilos de ratas normales, se incremento marcadamente la metástasis. Este descubrimiento sugiere que el microambiente tumoral moldea profundamente el estatus funcional de los neutrófilos, un hecho confirmado por reportes recientes.

TGFβ actúa como promotor o supresor de la iniciación de tumores, progresión y metástasis, dependiendo del contexto y el estadio en el que se encuentre dicho tumor, es también un regulador de las funciones de los neutrófilos. En adenocarcinomas pulmonares y modelos de mesotelioma, la inhibición de TGFβ aumenta la infiltración de TAN, así como su perfil tumoral citotoxico e inmunoestimulador (esto es, una mayor expresión de TNF, CCL3 y ICAM1 y una menor expresión de arginasa 1) . Curiosamente, en animales con tumores, una disminución del número de neutrófilos (incuyendo TANs) condujo a un incremento en la activación de células T CD8+ , mientras que, siguiendo la inhibición de TGFβ la disminución del número de neutrófilos tuvo el efecto contrario. Entonces, de manera parecida a lo que ocurre con macrófagos M1 y M2, los neutrófilos se han propuesto como diferenciados en fenotipos N1 y N2. El TGFβ promueve la diferenciación de TANs en el fenotipo pro-tumoral N2, mientras que la inhibición

de TGFβ los conduce a un fenotipo N2 de propiedades anti-tumorales. Entonces, estos resultados demuestran que el bloqueo de TGFβ en tumores desata una respuesta inmunitaria dependiente de células T CD8+ , que involucra la activación de neutrófilos con propiedades antitumorales. Como corresponde, estudios recientes demuestran que los neutrófilos pueden ejercer actividades antitumorales in vitro e in vivo. Entonces, como los macrófagos, los neutrófilos pueden tener efectos opuestos en el crecimiento de tumores según las señales del ambiente ( como TGFβ).

Conclusiones y perspectivas:

Los neutrófilos han surgido como un importante componente en los circuitos reguladores y efectores del sistema inmune innato y adaptativo. En contraste con la perspectiva tradicional de estas células como efectores de corta vida, la evidencia ahora indica que tienen diversas funciones. Al responder a señales derivadas del tejido y de células inmunes y al diferenciarse, los neutrófilos se asemejan a los macrófagos. Los neutrófilos se someten a interacciones bidireccionales con diferentes componentes tanto del sistema inmune innato como del adaptativo, y pueden de manera diferente influenciar en la respuesta dependiendo del contexto.

Estudios recientes también nos han provisto de nuevas percepciones de la función efectora de los neutrófilos. Estos gladiadores de la respuesta inmune innata pueden lanzar NETs venenos y producir componentes del arma humoral de la respuesta inmune innata. Estas nuevas perspectivas también evocan nuevas preguntas. Estas incógnitas incluyen el grado de plasticidad y diversidad de los neutrófilos, la base molecular de esta plasticidad, y su relevancia en la activación, expresión y regulación de las respuestas inmunitarias adaptativas. Se necesitan mejores herramientas (tanto basadas en genética y en anticuerpos) para diseccionar la función de los neutrófilos in vivo. Las nuevas perspectivas propuestas gracias a descubrimientos recientes llaman a una reevaluación del rol de los neutrófilos en las patologías humanas, especialmente el cáncer. Finalmente, es tiempo de reconsiderar a los neutrófilos como un blanco valioso para el tratamiento de patologías inflamatorias y el cáncer.