Universidad autónoma de Chiapas extensión … · Prueba de Benedict para azucares reductores ......

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Universidad autónoma de Chiapas extensión Ocozocoautla Identificación de biomoléculas Practica 1 y 2 Biología celular Dra. Ana Olivia cañas Urbina Integrantes Andrea Pérez Ochoa Diana Laura Vázquez Vázquez Blanca Guadalupe Penagos Gómez

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Universidad autónoma de Chiapas extensión

Ocozocoautla

Identificación de biomoléculas

Practica 1 y 2

Biología celular

Dra. Ana Olivia cañas Urbina

Integrantes

Andrea Pérez Ochoa

Diana Laura Vázquez Vázquez

Blanca Guadalupe Penagos Gómez

¿Que son las biomoléculas?

Son moléculas constituyentes de los seres vivos los cuatro constituyentes más

abundantes de los seres vivos son carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno. Las

biomoléculas se pueden clasificar en: inorgánicas y orgánicas, en esta práctica solo

abordaremos las biomoléculas orgánica: hidratos de carbono, lípidos y proteínas.

Los carbohidratos son moléculas compuestas por H, C, O con dos funciones

principales en los seres vivos, que son energética y estructural. Su grupo funcional

es un grupo carbonilo, cetona. Algunos glúcidos forman importantes estructuras

esqueléticas, como la celulosa, constituyentes de la pared celular vegetal o la quitina

que forma la cutícula de los artrópodos. Los lípidos son hidrofóbicas y cuentan con

tres funciones: estructural, energética y reguladora. Su grupo funcional es el

carboxilo, los lípidos cuentan con 9kc/g. se pueden clasificar en dos grupos:

saponificables estas cumplen dos funciones importantes por una parte,

los fosfolípidos forman el esqueleto de las membranas celulares (bicapa lipídica);

por otra, los triglicéridos son el principal almacén de energía de los animales y no

saponificables que desempeñan funciones reguladoras.

Los carbohidratos

Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las células y son

además una forma importante de almacenar energía; los que conocemos como las

azúcares y polímeros de azúcares. Estas moléculas usualmente contienen carbono,

hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos,

disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la

molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.

Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más

se unen se produce un polisacárido.

Prueba de benedict

Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacáridos, son

azúcares reductores porque poseen un aldehído libre (no enlazado a los otros

grupos en la molécula). La Prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de

azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre que se reduce

en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se oxida. La

reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción

(“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede simultáneamente con la reacción

de reducción del cobre

Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor,

el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea

la abundancia de azúcares reductores.

Un cambio a color verde indica la

presencia de menos azúcares

reductores. Las azúcares que no

reducen, como la sacarosa, no producen

cambios en color y la solución se

mantiene azul.

Los monosacáridos que forman anillos

no son azúcares reductores porque no

tienen un grupo aldehído libre, pero

pueden reducir si se convierten en

monosacáridos abiertos.

Azucares reductores

Las soluciones problema a utilizar son: jugo de naranja natural y procesado,

solución de edulcorante light y refresco o bebida light. Como solución testigo se

empleará solución glucosada al 10% y como blanco de reactivo se usará agua.

Procedimiento

Agregar 1 ml de la solución testigo, blanco de reactivo y soluciones problema a un

tubo de ensayo de 13x100 y añadir 2 ml de reactivo de Benedict a cada tubo. Una

vez preparadas las soluciones, los tubos se calentarán por separado a baño maría

(agitación constante) durante tres minutos.

Azucares complejos

Las muestras problema a utilizar son: una rebanada de zanahoria fresca, una

rebanada de zanahoria congelada, una rebanada de papa, una rebanada de

manzana, un cuarto de tortilla de maíz natural, un cuarto de tortilla de mazeca, un

cuarto de tortilla de trigo.

Prueba de Yodo:

La prueba de yodo se usa para detectar almidón.

El almidón es un polímero de glucosa producido por las plantas y es una

fuente importante de energía almacenada.

La molécula de almidón forma hélices entre las cuales se inserta el yodo,

tiñendo el almidón de azul oscuro a negro.

Procedimiento

Añade a cada muestra problema, dos gotas de lugol, reposa durante 5 minutos y

enjuaga.

Tabla 1. Prueba de Benedict para azucares reductores

Solución Color después de la reacción

Intensidad de color

Blanco de reactivo azul(no cambio) Medio intenso

Solución glucosada Verde y entre color rojizo ladrillo (cambio)

Intenso

Jugo de naranja natural Amarillo (cambio) Intenso

Jugo de naranja procesado Naranja (cambio) Medio intenso

Solución de edulcorante light

Azul (negativo ) Medio intenso

Refresco o bebida light Verde jade (negativo) Intenso

Tabla 2. Prueba de Lugol para azucares complejos (almidón)

Solución Color después de la reacción Azúcar reductor (+)(-)

Zanahoria fresca No se definió el color - Zanahoria congelada No se definió el color -

Papa Violeta + Manzana Café +1/2

Tortilla de maíz natural Violeta + Tortilla de mazeca Violeta +1/2

Tortilla de trigo No hubo color -

Grasas (o Lípidos)

Los lípidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía

almacenada. Los lípidos son componentes importantes de las membranas

celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol. Los lípidos

son solubles en solventes no-polares y son muy poco solubles en agua porque se

componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos.

Prueba de Sudán para identificación de grasas:

Detecta las cadenas de hidrocarbonos.

El reactivo de Sudán produce una reacción

hidrofóbica donde los grupos no-polares (los

hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por

moléculas del reactivo.

La prueba de Sudán tiñe los hidrocarbonos de rojo

Los alimentos problema a utilizar son: leche de vaca

light, leche o bebida de soja, queso panela, tortilla de

maíz en suspensión, aceite vegetal y margarina

derretida.

Procedimiento

Añada 2 ml de alimento a un tubo de ensayo de 13x100

y añada 5 gotas de Sudán III. Registre sus

observaciones (Tabla 3) y discuta.

Tabla 3. Determinación de lípidos (Sudan III)

Solución Color después de la reacción Lípidos (+)(-)

Leche vaca light lila (cambio) + Leche o bebida de soja Naranja(cambio) +

Tortilla de maíz en suspensión Amarillo(cambio) + Aceite vegetal Naranja (cambio) +

Margarina derretida Mas amarilla(cambio) +

Proteínas

Las proteínas son componentes estructurales de las células, controlan sus procesos

metabólicos y actúan como mensajeros químicos. Además, son parte importante de los

anticuerpos, enzimas y receptores celulares. Las proteínas están formadas por cadenas de

aminoácidos. Debido a la presencia de los grupos amino y carboxilo, los aminoácidos

resisten cambios en pH y son amortiguadores importantes en soluciones biológicas.

Reactivo de biuret

El reactivo de Biuret se compone de

hidróxido de sodio y sulfato de cobre.

El grupo amino de las proteínas reacciona

con los iones de cobre del reactivo de

Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta

Los alimentos problema a utilizar son: caldo de

frijoles (concentrado), solución de caldo de pollo

knorr, papilla de salchicha, caldo de sopa nissin,

suspensión de tortilla de maíz, leche de vaca light y

leche o bebida de soja.

Procedimiento

Colocar en un tubo de ensayo de 13x100, 1 ml de de soluciones de alimento y 12

gota de reactivo de Biuret

Resultados

Tabla 4. Determinación de proteínas (Biuret)

Solución Color después de la reacción Proteínas (+)(-)

Caldo de frijoles No hubo cambio - Solución de caldo de pollo

knorr No hubo cambio -

Papilla de salchicha No hubo cambio - Caldo de sopa nissin No hubo cambio +1/2 Leche de vaca light Lila (cambio) +

Leche o bebida de soja Rosa (cambio) +

Discusión de ideas

En la práctica realizada de determinación de biomoleculas se determinaron distintos

tipos de alimentos, light, natural, vegetal entre otros, se pudo observar con la prueba

del lugol que con los alimentos como la papa, la zanahoria congelada y la tortilla de

maíz fueron positivos al presenciar almidón el único que no se marco fue el de la

tortilla de maíz ya que hubo entre unas y otras tortillas que si marcaban. La prueba

de benedict se presenció la intensidad de color en jugo de naranja. El de sudan lll

todos sus alimentos fueron positivos, el biuret presenciamos los positivos que

fueron leche de vaca light, leche de soja y medio de sopa nissi.

Conclusión

En esta práctica aprendimos identificar los biomoléculas y a saber sobre los

diferentes reactivos que utilizamos, comprobamos muchas cosas que nosotros no

crecíamos como la salchicha que solo tiene almidón (harina)

CUESTIONARIO

1- Defina cada una de las biomoléculas identificadas

Moléculas que son compuestas por Hidrogeno, Carbono y Oxigeno que contienen tres

funciones las cuales son:

Lípidos

Son sustancias que contienen en sus moléculas grupos hidrocarbonados de cada cadena

larga, que está presente en organismos vivientes, o que derivan de los mismos. Son

insolubles en agua, pero solubles en solventes orgánicos como el cloro formo, metanol, éter

o benceno. En las células vivientes, forman parte de la estructura de las membranas,

almacenan energía para las células, y a partir de ellas la célula fabrica prostaglandina.

Proteínas

Son biomoléculas que más diversidad de funciones realizan en los seres vivos, todos los

procesos biológicos dependen de su presencia o actividad. Son proteínas casi todas las

enzimas, catalizadores de reacciones metabólicas de las células.

Hemoglobina: Es la que trasporta oxígeno en la sangre. Anticuerpos encargados de

acciones de defensa natural contra infecciones o agentes extraños.

Carbohidratos

Son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxigeno (CHO) e incluyen algunas

moléculas más relevantes en la vida de los organismos, como son la glucosa, que es

universalmente utilizada por las células para la obtención de la energía metabólica, el

glucógeno contenido en el hígado y el musculo que forma la reserva de energía más

fácilmente para las células.

2- Proporcione la clasificación de cada una de las biomoléculas identificadas

Lípidos

Se clasifican en saponificables se dividen en simples y complejos y no saponificables son

esteroides y terpeno.

Proteínas

Se clasifican en fibrosas, globulares y de membranas.

Estructura primaria: consta de una secuencia lineal de aminoácidos

Estructura secundaria: son las de forma laminar plegada

Estructura terciaria: es una cadena peptídica se dobla en sí

Misma para formar una proteína globular.

Estructura Cuaternaria: se forma por la agrupación de dos o más cadenas peptídicas de

tipo globular.

Carbohidratos

Monosacáridos: son aldosas y cetosas, Oligosacáridos: son disacáridos de trisacáridos a

decasacaridos y polisacáridos.

3- Describa el principio de cada una de las pruebas realizadas en la presente

práctica (Benedict, lugol, SUDAN III y Biuret)

Benedict

Identifico los azucares reductores, aquellos que contienen libre su SU OH. Como la glucosa,

maltosa y lactosa, en soluciones puede producir Cu2+, ya que teníamos el objetivo de

obtener el color entre naranja rojizo o como ladrillo.

Lugol

El lugol lo utilizamos para identificar al almidón en alimentos con azucares más complejos,

cuando nos daba positivos el color que obtendríamos seria celeste violeta y si no se

presenciaba nada sería negativo.

Sudan III

Es un tinte diazo del tipo lisocromo tinte soluble en grasas lo usamos para manchar los

triglicéridos en secciones congeladas y algunos lípidos y lipoproteínas.

Biuret

El reactivo contiene CuSo4 en solución acuosa alcalina, lo utilizamos para determinar la

presencia de las proteínas en la solución cuando es positivo la concentración tendrá un

color violeta.

4- Mencione la función de cada una de las biomoléculas identificadas

Lípidos

Estructural, energética y reguladora de hormonas

Proteína

Estructurales, defensa, bioreguladoras, funcional etc.

Carbohidratos

Energética y estructural

5- ¿Cuáles son las estructuras celulares que conjuntan la presencia de las

principales biomoléculas?

Citoplasma: contiene proteínas y carbohidratos

Membrana plasmica: forma bicapas lipidas y dobles capas los fosfolípidos

Núcleo: contiene proteínas como histonas

Citoesqueleto: contiene fibras proeteicas

Peroxisomas: contiene enzimas para catalizar carbohidratos

Aparato de Golgi: recepción de proteínas lípidos y carbohidratos

Centrosoma: contiene proteínas

6- ¿Qué beneficios obtenemos al consumir alimentos que contienen azucares reductores y qué beneficios obtenemos al consumir edulcorantes light?

Beneficios con azucares reductores En cierta parte nos beneficia porque obtenemos es la que produce energía en nuestro cuerpo

Beneficios con edulcorantes Light Nos ayuda a mantener la glucosa en el peso de nuestro cuerpo.

7- En términos de lípidos, ¿qué beneficios presentan los alimentos light frente a

los naturales? Explique su respuesta Los alimentos light nos beneficia en su bajo consumo de azúcar ya que estabiliza el peso en nuestro cuerpo y mantiene la glucosa y no contiene excesos de azucares y en las alimentos naturales son los que no son sometidos a ningún proceso de azucares o químicos para reducir el azúcar así es como se le llama es natural su contenido.

8- ¿Por qué los lípidos y las proteínas deben incluirse en la dieta humana? Los lípidos son ácidos grasos que nos dan energía, consumirlo es importante ya que nos

aportan una cierta cantidad de kilo calorías. Y Las proteínas son la base de nuestro cuerpo

para mantenerlo en forma.

REFERENCIAS

Medel, R. (2015) Biomoleculas. Recuperado el 20 de agosto del 2015 :

https://biochemiapuntesdermedelparatodos.wikispaces.com/file/view/BIOMO

L%C3%89CULAS.pdf

Bioquímica interactiva (2008) los carbohidratos. Recuperado el 19 de agosto del

2015: http://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/carbohidrato/index.html

Bloomfiel M. (1992): Química de los organismos vivos. Limusa, México

D.F. recuperado el 19 de agosto del 2015:

https://anacanas.files.wordpress.com/2015/01/lipidos_bloomfield.pdf