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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN. Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis: Análisis in vitro de dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y Propóleo. Autora: Nataly Soledad Aguirre Tobar. Tutor: Dra. María Isabel Zambrano Gutiérrez. Proyecto de investigación presentada como requisito para la obtención del título de Odontólogo. Quito, Abril 2015
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL
ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN.
Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis: Análisis in
vitro de dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y Propóleo.
Autora: Nataly Soledad Aguirre Tobar.
Tutor: Dra. María Isabel Zambrano Gutiérrez.
Proyecto de investigación presentada como requisito para la obtención del título de
Odontólogo.
Quito, Abril 2015
ii
DEDICATORIA
Este trabajo es dedicado de manera muy especial en primer lugar a Dios por darme la
fortaleza de seguir mi sueño a pesar de los obstáculos que se presentaron en mi camino, también
con todo el amor del mundo a mis padres quienes día a día supieron guiarme, aconsejarme para
no dejarme decaer, gracias a su esfuerzo pude alcanzar esta meta que es una de las primeras en mi
vida, sin dejar de lado a mis hermanos, sobrinos y familiares quienes de una u otra forma siempre
han estado pendientes de mis triunfos y fracasos y me han dado el aliento para seguir adelante.
iii
AGRADECIMIENTO
Agradezco con todo mi corazón a mis padres, pilares fundamentales en mi vida, a mis profesores por
los conocimientos impartidos y por fomentar en mi amor por mi hermosa carrera.
A mi tutora Dra. María Isabel Zambrano, y a los miembros de mi tribunal por guiarme en la
elaboración de este trabajo para la obtención de mí anhelado título.
iv
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL
Yo, AGUIRRE TOBAR NATALY SOLEDAD, en calidad de autora de la tesis
realizada sobre “Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis:
Análisis in vitro de dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y
Propóleo”.
Por la presente autorizó a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, hacer uso
de todos los contenidos que me pertenecen o de parte de los que contienen esta obra,
con fines estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente
autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los
artículos 5, 6, 8,19 y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su
Reglamento.
C.I. 1718395583
v
CERTIFICADO DEL TRIBUNAL
“Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis: Análisis in vitro de
dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y Propóleo”.
Autora: NATALY SOLEDAD AGUIRRE TOBAR
APROBACIÓN DEL JURADO EXAMINADOR
El presente trabajo de investigación, luego de cumplir con todos los requisitos
normativos, en nombre de la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR,
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA se aprueba; por lo tanto el jurado que se detalla a
continuación, autoriza al postulante la presentación a efectos de la sustentación pública.
Quito, 06 de abril del 2015
vi
INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR
En mi carácter de Tutor del Trabajo de Grado, presentado por la señorita AGUIRRE
TOBAR NATALY SOLEDAD, para optar por el Grado de ODONTÓLOGA cuyo
Título es “Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis: Análisis in
vitro de dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y Propóleo”.
Considero que dicho Trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser
sometido a la presentación pública y evaluación por parte del jurado examinador que se
designe.
En la ciudad de Quito a los 05 días del mes de noviembre del 2014.
Dra. María Isabel Zambrano Gutiérrez
C.I. 1713722120
Directora de Proyecto
vii
ÍNDICE DE CONTENIDO
DEDICATORIA .......................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO .................................................................................................................. iii
DECLARACIÓN ......................................................................................................................... iv
APROBACIÓN DEL TUTOR ...................................................................................................... v
CERTIFICADO DEL TRIBUNAL ............................................................................................. vi
AUTORIZACION DE LA AUTORÍA INTELECTUAL ........................................................... vii
ÍNDICE DE ANEXOS .................................................................................................................. x
ÍNDICE DE FIGURAS ................................................................................................................ xi
ÍNDICE DE TABLAS ............................................................................................................... xii
ÍNDICE DE GRÁFICOS ........................................................................................................... xiii
RESUMEN ................................................................................................................................. xiv
ABSTRACT ................................................................................................................................ xv
I INTRODUCCIÓN .............................................................................................................................. 1
II PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................................................................... 3
III JUSTIFICACÓN ................................................................................................................................... 4
IV OBJETIVOS ....................................................................................................................................... 5
OBJETIVO GENERAL....................................................................................................................... 5
OBJETIVOS ESPECÍFICOS ............................................................................................................... 5
V HIPÓTESIS ......................................................................................................................................... 6
VI MARCO TEÓRICO ............................................................................................................................ 7
2. MEDICACIÓN INTRACONDUCTOS ENTRE SESIONES ............................................................... 8
2.1. OBJETIVOS DE LA MEDICACIÓN INTRACONDUCTO ............................................................... 9
2.2. SUSTANCIAS UTILIZADAS COMO MEDICACIÓN INTRACONDUCTO ..................................... 10
2.2.1. COMPUESTOS FENÓLICOS ......................................................................................... 10
2.2.2. ALDEHIDOS................................................................................................................. 10
2.2.3. COMPUESTOS HALOGENADOS .................................................................................. 10
3. PARAMONOCLOROFENOL ALCANFORADO .......................................................................... 11
3.1. CONCEPTO ............................................................................................................................... 11
3.3 CONCENTRACIONES .............................................................................................................. 12
3.4. MECANISMO DE ACCIÓN DEL PARAMONOCLOROFENOL ALCANFORADO .......................... 13
4. PROPÓLEO .............................................................................................................................. 13
4.1. CONCEPTO ............................................................................................................................... 13
4.2. CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS DEL PROPÓLEO ........................................................ 14
viii
4.3. PRINCIPALES COMPONENTES DEL PROPÓLEO..................................................................... 14
4.4. PROPIEDADES DEL PROPÓLEO ............................................................................................. 15
4.5. MECANISMO DE ACCIÓN DEL PROPÓLEO ............................................................................ 16
4.7. REACCIONES ADVERSAS DEL PROPÓLEO ............................................................................ 17
5. CARACTERÍSTICAS GENERALES DEL GÉNERO ENTEROCOCCUS ................................................. 17
5.1 ENTEROCOCCUS FAECALIS .................................................................................................... 18
5.2. BIOPELÍCULAS ...................................................................................................................... 19
5.3. MICROBIOTA DE LOS CONDUCTOS RADICULARES ......................................................... 20
VII MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................................................ 21
7.1 TIPO DE ESTUDIO ...................................................................................................................... 21
7.2.POBLACIÓN Y MUESTRA ........................................................................................................... 22
7.2.1. CÁLCULO DE MUESTRA ..................................................................................................... 23
7.3. CRITERIOS DE INCLUSIÓN ............................................................................................... 24
7.4. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ................................................................................................... 24
VIII VARIABLES .................................................................................................................................. 24
Variables del estudio ....................................................................................................................... 25
IX PROCEDIMIENTO .......................................................................................................................... 26
9.1. PREPARACIÓN DEL CULTIVO BACTERIANO .......................................................................... 26
9.2. SIEMBRA BACTERIANA ......................................................................................................... 26
9.3. INOCULACIÓN E INCUBACIÓN ............................................................................................. 28
9.4. COMPROBACIÓN DE HALOS INHIBITORIOS ......................................................................... 28
X RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................................................. 30
10.1. RESULTADOS ESTADÍSTICOS: ................................................................................................. 30
10.2.DISCUSIÓN .............................................................................................................................. 37
XI CONCLUSIONES .............................................................................................................................. 39
XII RECOMENDACIONES ..................................................................................................................... 40
XIII BIBLIOGRAFIA ............................................................................................................................... 41
ix
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO 1. Preparación de los materiales y sustancias utilizadas en el estudio. ........... 44
ANEXO 2: preparción de las lacas y siembre del enterococcus faecalis ....................... 44
ANEXO 3: Colocación de los discos de papel impregnados de las sustancias .............. 44
ANEXO 4: Colocación de la jarra en la estufa ..................................................... ……..45
x
ÍNDICE DE FIGURAS
FIGURA 1. Paramonoclorofenol, agar para el cultivo, propóleo. .................................. 22
FIGURA 2: materiales a utilizar, comprobación de turbidez ......................................... 26
FIGURA 3: Siembra por escobillón ............................................................................... 27
FIGURA 4: Colocado papel filtro con Paramonoclorofenol y Propóleo. ...................... 27
FIGURA 5: Placas dentro de jarra Gas Pak, en estufa. .................................................. 28
FIGURA 6: Regla para medir halos de inhibición. ........................................................ 29
FIGURA 7: Halos de inhibición ..................................................................................... 29
xi
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1.COMPONENTES DEL (PMCF) ............................................................................... 12
Tabla 2.COMPONENTES DEL PROPÓLEO ........................................................................ 15
Tabla 3. VARIABLES ............................................................................................................ 25
Tabla 4 ESTADÍSTICAS DESCRIPTIVAS DE LAS SUSTANCIAS EN ANÁLISIS ......... 30
xii
ÍNDICE DE GRÁFICOS
GRÁFICO 1: Medición de los halos de inhibición ........................................................ 31
GRÁFICO 2: Demostracion e resumtados .................................................................... 32
GRÁFICO 3: Representación en porcentajes de las cuatro sustancias .................................. 33
GRÁFICO 4: Resultados del propóleo .......................................................................... 34
GRÁFICO 5: Resultados en promedios para comparación .......................................... 35
xiii
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FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
“Acción antimicrobiana para inhibir el Enterococcus faecalis: Análisis in vitro de
dos medicamentos de uso externo, Paramonoclorofenol y Propóleo”.
RESUMEN
Introducción: En estudios realizados sobre fracasos endodóncicos se reporta
un predominio de Enterococcus faecalis, bacteria a la que se le atribuye la capacidad
de formar biopelículas que le permiten subsistir en el interior de los conductos
radiculares, en razón de lo cual, el presente estudio analiza la actividad
antimicrobiana del paramonoclorofenol, y un extracto natural el propóleo como una
alternativa en el tratamiento. Objetivos: Determinar la efectividad antimicrobiana in
vitro del Paramonoclorofenol y Propóleo sobre Enterococcus faecalis. Materiales y
Métodos: Se realizó un estudio en vitro en donde se comparó la medición de los
halos de inhibición del paramonoclorofenol y el extracto de propóleo de origen
natural sobre una cepa pura de Enterococcus faecalis líquida. Resultados: En este
análisis se observó que las dos sustancias tuvieron acción antimicrobiana con una
diferencia no significativa entre los promedios de halos ante el Enterococcus
faecalis; Conclusión: Se demostró que el paramonoclorofenol y los extractos del
propóleo al 70% y 90% son efectivos sobre esta bacteria.
Palabras Claves: ACCIÓN ANTIMICROBIANA ENTEROCOCCUS FAECALIS,
PARAMONOCLOROFENOL, PROPÓLEO,
xiv
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FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
“Antibacterial properties against Enterococcus faecalis: In vitro analysis of
Paramonochlorophenol and Propolis, two external-use medicaments”
ABSTRACT
Introduction: Studies on endodontic failures report a predominance of
Enterococcus faecalis, a bacteria attributed with the ability to form biofilms that
allow it to subsist inside root canals. This study analyzes the antibacterial properties
of paramonochlorophenol and a natural Propolis extract as treatment alternatives.
Objective: To determine the antibacterial in vitro effectiveness of
paramonochlorophenol and Propolis against Enterococcus faecalis. Materials and
Methods: This is an in vitro study that compared inhibition halos for
paramonochlorophenol and Propolis on a pure, liquid Enterococcus faecalis strain.
Results: The analysis verified that both substances had antibacterial properties, with
a non-significant difference in inhibition halos between them. Conclusion: 70%
paramonochlorophenol and 90% Propolis extract are effective against Enterococcus
faecalis.
Keywords: ANTIBACTERIAL PROPERTIES, ENTEROCOCCUS FAECALIS,
PARAMONOCHLOROPHENOL, PROPOLIS
1
I INTRODUCCIÓN
Al realizar un tratamiento endodóncico con los procedimientos químico-
mecánico se pretende la eliminación de las bacterias y sus toxinas que pueden
encontrarse en el interior de los conductos; sin embargo, en algunos casos solo con la
instrumentación e irrigación no se puede desinfectar completamente los conductos
antes mencionados, por lo que se necesita la aplicación de medicamento entre citas.
En su estudio sobre irrigadores en endodoncia Arias (2009), ha indicado que las
infecciones endodóncicas primarias están constituidas principalmente por anaerobios
facultativos y gram positivos, siendo el Enterococcus faecalis el más importante, es
su habilidad para crecer formando biopelículas una de las características que le
permite resistir a la terapia endodóncica.
Iriza (2004) en su investigación sobre número de sesiones en la terapia
endodóncica encontró a esta bacteria con mayor frecuencia en dientes que tuvieron
fracasos en el tratamiento endodóncico, por otro lado en el mismo estudio manifiesta
que el paramonoclorofenol alcanforado es el medicamento más utilizado
intraconducto debido a su acción antibacteriana, que es atribuida a los dos radicales
que lo componen, fenol, cloro, y en unión con el alcanfor disminuye el dolor.
En un estudio sobre actividad antibacteriana y composición del propóleo
realizado por Ortega (2010) indicó que es una sustancia resinosa producida por las
abejas para el aislamiento y protección del panal especialmente contra bacterias
patógenas. Ha sido utilizada en la medicina tradicional desde la antigüedad debido a
2
su largo espectro de actividad biológica como antioxidante, antiinflamatoria,
antibacteriana, antiviral.
La presente investigación busca mediante un análisis comparativo, determinar cuál
de los dos medicamentos (paramonoclorofenol y propóleo) es más eficaz en la
eliminación del Enterococcus faecalis.
3
II PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Teniendo en cuenta que en el tratamiento endodóncico la utilización de la
medicación entre sesiones es necesaria para ayudar a la desinfección de los
conductos radiculares, se ha tomado para este estudio al paramonoclorofenol
considerando que su uso ha disminuido por la toxicidad que se le atribuye y las
reacciones adveras que puede presentar. Por otra parte Pinheiro (2003) ha
mencionado que en los fracasos endodóncicos predominan anaerobios facultativos y
gram positivos, siendo E. faecalis la especie que predomina.
En base a lo anteriormente expuesto se presenta como problema el desuso del
paramonoclorofenol como medicación entre sesiones y el predominio del
enterococcus faecalis en los conductos radiculares siendo esta la principal causa de
los fracasos en el tratamiento endodóncico, por este motivo se plantea el análisis y
comparación de dos sustancias, paramonoclorofenol y propóleo este último como
una alternativa que se podría implementar en el tratamiento de endodóncia para la
eliminación del Enterococcus faecalis.
4
III JUSTIFICACÓN
En el tratamiento de endodóncia es recomendable utilizar medicamento
intraconducto debido a que puede ayudar a la eliminación de bacterias, por lo cual es
necesario determinar la efectividad antimicrobiana in vitro del Paramonoclorofenol y
Propóleo sobre Enterococcus faecalis.
Es por este motivo que en el presente estudio se analiza las cualidades
del paramonoclorofenol, el cual es muy utilizado por su acción antibacteriana, que
es atribuida a los dos radicales que lo componen. De igual manera en diversos
estudios sobre el propóleo varios investigadores le atribuyen propiedades
antiinflamatorias, antimicrobianas y regenerativas, que se las puede utilizar en
distintos tratamientos entre ellas en endodoncias.
Este estudio nos permite establecer una comparación a través de
medición en milímetros de halos de inhibición entre estas sustancias para determinar
cuál de los dos es más efectivo sobre Enterococcus faecalis.
5
IV OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Determinar la efectividad antimicrobiana in vitro del Paramonoclorofenol
alcanforado y Propóleo sobre Enterococcus faecalis.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Evaluar in vitro la acción antimicrobiana sobre Enterococcus faecalis, a
través de medición de halos de inhibición del Paramonoclorofenol alcanforado.
Evaluar in vitro la acción antimicrobiana sobre Enterococcus faecalis, a
través de medición de halos de inhibición del Propóleo.
Comparar mediante los resultados cuál de las dos sustancias es más
efectiva sobre Enterococcus faecalis.
6
V HIPÓTESIS
El Paramonoclorofenol y el extracto de propóleo son igualmente efectivos
en el control bacteriano de Enterococcus faecalis.
7
VI MARCO TEÓRICO
1. MARCO TEÓRICO
2. MEDICACIÓN INTRACONDUCCTO ENTRE SESIONES
2.1.Objetivos de la medicación intraconducto
2.2. Sustancias utilizadas como medicación intraconducto
2.2.1 Compuestos fenólicos
2.2.2 Aldehídos
2.2. Compuestos halogenados
3. PARAMONOCLOROFENOL ALCANFORADO
3.1.Concepto
3.2.Componentes
3.3.Concentraciones
3.4.Mecanismo de acción
4. PROPÓLEO
4.1.Concepto
4.2.Características organolépticas del propóleo
4.3.Principales componentes del propóleo
4.4.Propiedades del propóleo
4.5.Mecanismo de acción
4.6.Reacciones adversas
5. ENTEROCOCCUS FAECALIS
5.1.Características generales del género enterococcus
5.2.Enterococcus faecalis
5.3. Biopelículas
5.4. Microbiota de los conductos radiculares
8
1. MARCO TEÓRICO
Uno de los protocolos endodóncicos es la utilización de medicamentos
intraconducto, la elección de éstos hace referencia a la minificación de sus efectos
adversos, dentro de este contexto las investigaciones proponen un replanteo del uso
indiscriminado del paramonoclorofenol con la utilización de sustancias alternativas
de origen natural
2. MEDICACIÓN INTRACONDUCTOS ENTRE SESIONES
Cuando se habla de medicación intraconducto también denominada medicación
tópica, se refiere al uso interno de un medicamento antibiótico o analgésico que
tiene la intención de lograr efectos terapéuticos beneficiosos locales y que no pasen a
circulación.
En algunas ocasiones es necesario realizar el tratamiento de conducto en más de una
sesión, cuando esto ocurre es recomendable el uso de antibióticos orales para evitar
el desarrollo de microorganismos de una cita a otra.
Canaldas (2006) ha explicado la utilización de una gran variedad de antisépticos y
medicamentos antimicrobianos en el interior de los conductos radiculares para
ayudar a la desinfección de dichos conductos sobre todo en lugares inaccesibles a la
instrumentación, como las ramificaciones en los túbulos dentinarios y tener como
resultado un buen tratamiento de endodoncia. Los antisépticos actúan sobre los
microorganismos por desnaturalización de las proteínas celulares.
La medicación intraconducto se la aplica entre sesiones en una torunda de algodón el
interior de la cavidad pulpar para ayudar al tratamiento endodóncico y concluirlo.
Para elegir una medicación intraconducto que se vaya a utilizar entre sesiones en un
9
tratamiento es necesario tener las mismas consideraciones que la aplicación de
cualquier medicamento en cualquiera otra región el cuerpo humano, (Soares, 2009)
cree necesario considerar:
a) Cantidad: es necesario precisar la cantidad y concentración del
medicamento a utilizar para evitar lesionar los tejidos circundantes.
b) Localización: se necesita conocer el mecanismo de acción de la
sustancia que se va a utilizar para una adecuada colocación y localización.
c) Tiempo de aplicación: se debe conocer el tiempo de acción del
medicamento que se va a colocar ya que cada uno tiene cierto tiempo de vida
útil.
2.1.OBJETIVOS DE LA MEDICACIÓN INTRACONDUCTO
Estrela (2005) ha expuesto entre los principales objetivos de la medicación
intraconducto se encuentran que ayuda a eliminar las bacterias que pueden resistir a
la preparación mecánica de los conductos radiculares, neutraliza los residuos tóxicos
y antigénicos de microorganismos que pueden quedar como remanentes en el espacio
pulpar, ayuda a disminuir la inflamación y el exudado en la zona periapical, mejorar
la sensibilidad de la pulpa inflamada para ayudar al efecto anestésico.
10
2.2. SUSTANCIAS UTILIZADAS COMO MEDICACIÓN
INTRACONDUCTO
1. Compuestos Fenólicos
Eugenol
Paramonoclorofenol alcanforado (PCMA)
Cresol, creosota
2. Aldehídos
Formaldehído
Glutaraldehído
3. Compuestos halogenados
Hipoclorito sódico
4. Antibióticos
2.2.1. COMPUESTOS FENÓLICOS
Los compuestos fenólicos son anillos bencénicos con una unión hidróxila De
Lima (2009) también indicó que “son agentes antimicrobianos potentes con acción
por contacto directo a través de la ruptura de lípidos y proteínas de la membrana.
Poseen también acción antiinflamatoria llevando al alivio del dolor.” P. 300
2.2.2. ALDEHIDOS
Los aldehídos según Canaldas (2006) son potentes antibacterianos pero
pueden causar necrosis de los tejidos circundantes, se lo utiliza principalmente en el
tratamiento de la pulpa expuesta en los dientes temporales. p. 201
2.2.3. COMPUESTOS HALOGENADOS
Canaldas (2006) ha expuesto que “en los compuestos halogenados, los que se
utilizan con frecuencia son los que pueden liberar cloro, un potente agente
11
bacteriano, la solución más utilizada como irrigante en el tratamiento endodóncico es
el hipoclorito sódico, en soluciones del 1 al 5%.” P. 201
3. PARAMONOCLOROFENOL ALCANFORADO
3.1. CONCEPTO
El paramonoclorofenol es uno de los antisépticos y antimicrobianos más
utilizados en odontología en los tratamientos de Endodoncia, fue introducido por
Walhoff en el año de 1891. Es un derivado del fenol, sólido a temperatura ambiente,
se obtiene al triturar cristales de paraclorofenol con alcanfor, el resultado de este
procedimiento es un líquido aceitoso, de un color pardusco, y un olor penetrante que
lo hace característico de esta sustancia.
Posteriormente Soares (2009) señaló que “el alcanfor con el cual se asocia es
utilizado como vehículo y ayuda a disminuir la acción irritante del fenol.” P.215
provocando una liberación más lenta del paramonoclorofenol haciendo que este
fármaco tenga una bajo poder de agresión a los tejidos.
Estrela (2005) indicó que “el paramonoclorofenol alcanforado (PMCF) ha
sido una de las sustancias intraconducto más utilizado, el fenol y el cloro son sus
principales componentes y estos le confieren su acción antibacteriana, es el
compuesto sencillo del fenol, que resulta de la introducción de un ion cloro.”
3.2. COMPONENTES DEL (PMCFA)
12
Tabla 1.
COMPONENTES DEL (PMCFA)
COPOMPONENTES
Paramonoclorofenol 2 partes
Alcanfor 3 partes
Principales Componentes del paramonoclorofenol alcanforado
Fuente: Nataly Aguirre
Leonardo (2009) explicó que el Paramonoclorofenol, se lo ha utilizado en diversas
concentraciones; sin embargo, se ha dejado de utilizar a medida que se usa el
hidróxido de calcio. P. 899
Mientras tanto Soares (2009) ha añadido como una característica desfavorable del
paramonoclorofenol alcanforado que en presencia de materia orgánica pierde su
efecto. El paramonoclorofenol alcanforado es una alternativa especialmente en
conductos demasiado pequeños y es complicada la colocación de pastas alcalinas”.
p.215
3.3 CONCENTRACIONES
En un estudio realizado por Ferreira (2005) ha indicado que “la concentración del
paramonoclorofenol disminuye de acuerdo al solvente, debemos tener presente que
este medicamento aparece como citotóxico; sin embargo ha demostrado buenas
propiedades antimicrobianas y es uno de los medicamentos más usado en conductos
infectados.”P. 38
13
“Posteriormente De Lima (2009) ha señalado que normalmente “el (PMCF) se
encuentra diluido en agua destilada al 1% o 2%, o alcanforado en la proporción de
3,5:6,5. Además, actúa como agente antimicrobiano inespecífico con un pequeño
potencial antiinflamatorio”P. 300
De acuerdo con Love en el 2001, el paramonoclorofenol alcanforado cuando se lo
coloca en una torunda de algodón en la cámara pulpar penetra 0,40 milímetros en el
tercio coronal de la dentina, 0,25 milímetros en el tercio medio y 0,05 milímetros en
el tercio apical.
3.3. MECANISMO DE ACCIÓN DEL PARAMONOCLOROFENOL
ALCANFORADO
Se ha demostrado en estudios realizados por Kauai, Hasegawa, Ogra (1991) que “el
paramonoclorofenol elimina la pared celular bacteriana, inactiva el sistema de
enzimas esenciales, de igual manera se ha reportado que detiene la producción de
prostaglandinas.”
Por otra parte se debe tener en cuenta que el paramonoclorofenol disminuye la
capacidad de adherencia de los macrófagos inflamatorios siendo este el primer paso
para que la fagocitosis de macrófagos sea exitoso.
4. PROPÓLEO
4.1. CONCEPTO
Bankova, Castro, Marcucci (2000) han conceptualizado“al propóleo como un
producto derivado de las abejas, de consistencia pegajosa, color oscuro, que se
recolecta de diversas plantas y es mezclado con cera, las paredes internas del panal
son cubiertas con propóleo con la finalidad de reparar o proteger la colmena de
14
invasores, ya que éste es responsable de la baja incidencia de bacterias dentro de la
colmena.” P. 3
4.2. CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS DEL PROPÓLEO
Bracho (2003) aclaró que “el propóleo gracias a su contenido rico en aceites
esenciales, suele ser aromático y en función del lugar de recolección y del clima de
origen cambia la coloración, el sabor y la consistencia las principales características
son:
Aspecto: Se puede recolectar en forma de esferas, granos.
Color: Hay variedad desde verde oscuro, amarillo, pardo, pardo oscuro, hasta
negro.
Consistencia: Suele ser espesa, presenta algunas impurezas y cera. Blando
cuando se encuentra a temperaturas superiores a 300C, y temperatura menor de
150C duro y quebradizo.
Olor: Existen propóleos inodoros, aromático.
Sabor: Por lo general amargo, picante, insípido en raras ocasiones.
Solubilidad: Tiene baja solubilidad en agua se lo puede disolver con alcohol
etílico ya que es más recomendado porque permite extraer con más eficiencia los
principios activos y bajas concentraciones de cera.
4.3. PRINCIPALES COMPONENTES DEL PROPÓLEO
Sus principales componentes representados en la Tabla 2.
15
Tabla 2.
COMPONENTES DEL PROPÓLEO
COMPONENTES
Flavonoides y ácidos fenólicos 50%
Ceras variables 7.5-35%
Aceites volátiles 10%
Polen 4-5%
Impurezas 4.4- 19.5%
Principales Componentes del propóleo
Tabla. Fuente. Tomado de López (2004)
Además contienen pequeñas cantidades de restos de la secreción de las
glándulas salivales de las abejas y posibles contaminantes. Durk. (1997) “ha
explicado también que se atribuye a los flavonoides la mayor parte de las
propiedades biológica del propóleo.”
4.4. PROPIEDADES DEL PROPÓLEO
Según Banskota, Tezuda, Kadota. (2001) y Farre, Frasquet, Sánchez. (2004) las
siguientes propiedades son las más importantes: p. 561-571
Antibacteriano: Principales responsables los flavonoides actúa sobre Gram
positivos, Gram negativos, en particular con Staphylococcus aureus,
Streptococcus mutans.
16
Fungicidas: Se han obtenido óptimos resultados en micosis Cándida
albicans.
Antiviral: El propóleo inactiva los virus de herpes simple tipo 1 y 2. Gracias
a los flavonoides.
Antiinflamatoria: Por la presencia de flavonoides.
Analgésica: Se debe a la presencia de flavonoides.
Antioxidante: Se le atribuye a los compuestos fenólicos y los flavonoides
que posee.
Actividad cicatrizante: ayuda a la cicatrización, porque estimula la
regeneración epitelial.
Abhishek, Thomas. (2010) han demostrado en estudios realizados que “el extracto de
propóleos tiene propiedades antibióticas de uso endodóncico como medicamento
intraconducto y como irrigante.” p. 210-15
4.5. MECANISMO DE ACCIÓN DEL PROPÓLEO
Al mismo tiempo Sofocan (2007) ha señalado que “el propóleo tiene la capacidad de
estimular una respuesta inmunitaria y promover la actividad fagocítala e impide la
producción de prostaglandinas.”
El propóleo tiene mayor actividad antimicrobiana contra bacterias Gram-
positivas que las gram negativas según Martos, Ruiz, Fernández, Pérez. (2008),
neutraliza el RNA polimerasa bacteriana, también el mecanismo de acción consiste
en degradar la membrana citoplasmática de las bacterias, haciendo que las bacterias
pierdan su capacidad de motilidad, transporte de membrana y síntesis de ATP. p.4.
17
4.7. REACCIONES ADVERSAS DEL PROPÓLEO
Fernández, Alemán, Figueroa, Fagoaga, Rivera, Purroy (2004) han mencionado que
se presentan escasas manifestaciones a la aplicación local del propóleo aunque
puede haber casos de hipersensibilidad de tipo dermatitis de contacto y se han visto
reacciones alérgicas, incluso en la mucosa oral, manifestadas como ulceraciones.
5. CARACTERÍSTICAS GENERALES DEL GÉNERO ENTEROCOCCUS
En la flora normal de la boca y el tracto gastrointestinal se encuentran con
frecuencia Enterococcus que son los microorganismos que han sido reconocidos
como patógenos en los humanos, son responsables de infecciones del tracto urinario,
infecciones entra-abdominales y endocarditis infecciosa. Tiene la habilidad de crecer
y sobrevivir en medios ambientes áridos pudiendo encontrarlos en la comida, suelo,
agua, plantas.
Tendolkar (2003) han explicado que “los Enterococcus eran clasificados como los
Streptococcus por portar el antígeno D del grupo Lancefield, en la actualidad gracias
a estudios taxonómicos y de ácidos nucleicos se ha demostraron su relación distante
entre Streptococcus y el género Enterococcus.”
Arias (2009) considera el enunciado de Piard quien explica que los
Enterococcus son células de forma circular u ovoide, son gram positivos, se
presentan en pares o como cadenas cortas, son catalasa negativos. (Koneman, 2013)
También explicó que los Enterococcus se distinguían de los streptococos y de
especies relacionadas por su capacidad para crecer a 10°C y 45°C, en presencia de
NaCl al 6,5%, a un pH de 9,6.
18
5.1 ENTEROCOCCUS FAECALIS
E. faecalis es un coco Gram positivo anaerobio facultativo se encuentra solo, en
pares o en cadenas cortas, su tamaño oscila entre 0,5 y 0,8 micrómetros, su
crecimiento adecuado es a 35°C; aunque también se ha observado crecimiento entre
10 y 45°C.
El pH alcalino normalmente evita el crecimiento y supervivencia de muchos
microrganismos entre estos se encuentra el E. faecalis que tiene como característica
importante su habilidad de crecer en medios con pH ácido y alcalino, se necesita un
pH mayor de 11,0 para la erradicación de este microorganismo.
Rôcas & Siqueira (2004) mencionaron que “el Enterococcus faecalis tiene múltiples
factores de virulencia que le proporcionan la capacidad de sobrevivir incluso en la
región periapical, así como poder crecer y predominar en un ambiente bajo en
nutrientes de esta manera poder ingresar por los túbulos dentinarios de distintas
formas."
Por su parte Lee, Lim Son & Bae (2004) han asegurado que “el enterococcus
faecalis puede adherirse a las células del hospedador y expresar proteínas que
compiten con otras células alterando la respuesta del mismo. A demás el E. faecalis
es capaz de eliminar la acción que tienen los linfocitos, esto ayuda a los fracasos del
tratamiento de conductos.”
Rôcas, Siqueira (2004) explicaron que esta bacteria puede sobrevivir en el interior de
los conductos radiculares gracias a la resistencia que puede desarrollar, esto lo puede
conseguir por los siguientes motivos:
19
El enterococcus faecalis crece formando biopelículas que lo vuelven más
resistente a los mecanismos de defensa como la fagocitosis, anticuerpos y
antimicrobianos. Distel, Hatton & Gillespie (2002)
El enterococcus faecalis produce proteína de unión al colágeno que le
ayuda a unirse a la dentina. Hubble, Hatton, Nallapareddy, Muray,
Gillespie. (2003).
Su tamaño es lo suficientemente pequeño para vivir en los túbulos
dentinarios.
Enterococcus faecalis puede resistir largas temporadas con ausencia de
nutrientes. Arias (2009).
Estudios realizados por Canaldas (2006) han indicado que “una de las peculiaridades
de esta bacteria, es que tolera bien pH cercano a 12, se cree que esta capacidad se
debe a que puede sintetizar proteínas cuando se expone a condiciones adversas de
supervivencia, como pueden ser la irrigación con hipoclorito de sodio.”(p. 38)
Por otra parte Negroni (2009) ha relacionado al Enterococcus faecalis con varios
factores de virulencia, entre los que se incluyen: la agregación; el intercambio de
material genético y debido a su tamaño puede penetrar dentro de los túbulos
dentinarios con facilidad.
5.2. BIOPELÍCULAS
Se puede definir a las biopelículas como sociedades de microorganismos
adheridas a una superficie e impregnadas en una matriz que por lo general
representa el 85% del volumen de las biopelículas, esta matriz contiene
polisacáridos y proteínas que forman una capa viscosa.
20
Negroni (2009) ha expuesto que las bacterias en los conductos radiculares se
organizan conformando una biopelícula, estas agregaciones bacterianas se
localizaron sobre las paredes de los conductos infectados, es por este motivo que se
cree que hasta las bacterias más susceptibles son capaces de sobrevivir a la
preparación químico-mecánica y a la medicación intraconducto que se utiliza en el
tratamiento endodóncico razón por la cual se producen los fracasos en endodoncias.
(p. 321)
5.3. MICROBIOTA DE LOS CONDUCTOS RADICULARES
Estrella (2005) ha explicado que “como resultado de la actividad metabólica de los
microorganismos que consumen oxígeno dentro del conducto, el microclima se
transforma progresivamente en anaerobio apropiado para el crecimiento de las
bacterias.”
Canaldas (2006) Ha expuesto que una de las principales causas del “fracaso
endodóncico” es la persistencia, multiplicación y migración de bacterias desde el
interior de los conductos hacia los tejidos periapicales. La incompleta desinfección
químico-mecánica de los conductos mantiene una capa residual infectada que
potencia la capacidad de los microorganismos en progresar hacia el interior de los
túbulos dentinarios intrarradiculares, actuando como reservorio de microorganismos.
(p.37), Negroni (2009) afirma que en la actualidad, la gran mayoría de las bacterias
aisladas de una infección endodóncica, son anaerobias siendo el Enterococcus
faecalis el más predominante en "lesiones inflamatorias periapicales asintomáticas,
refractarias al tratamiento endodóncico" (p. 321)
21
VII MATERIALES Y MÉTODOS
7.1 TIPO DE ESTUDIO
Este estudio in vitro fue realizado en el laboratorio de la Facultad de Ciencias
Químicas de la Universidad Central del Ecuador. Se procedió a la siembra del
microorganismo en las placas con agar sangre y a la colocación de los discos con
cada uno de las sustancias utilizadas para luego evaluar los resultados.
Es un estudio de tipo comparativo experimental y descriptivo:
COMPARATIVO: Porque podemos establecer una comparación entre un
medicamento que contienen sustancias químicas, el paramonoclorofenol y un
extracto natural el propóleo para establecer cuál es el más eficaz en su acción
antibacteriana.
EXPERIMENTAL: Porque se pudo describir la manera en que fue realizado
pudiendo observar las técnicas, procedimientos y resultados para determinar las
variables de esta investigación.
DESCRIPTIVO: En cuanto a la descripción de cada uno de los
procedimientos realizados en el laboratorio para la obtención de los resultados que se
plantearon en el estudio, se mide halos de inhibición frente al Enterococcus faecalis
para un análisis en milímetros.
22
7.2. POBLACIÓN Y MUESTRA
En esta investigación se utilizó una cepa líquida pura de Enterococcus
faecalis, junto a un medicamento de uso externo el Paramonoclorofenol
alcanforado, y un extracto natural Propóleo al 5%, 70% y 90%.
Figura 1. Paramonoclorofenol, agar para el cultivo, propóleo.
Fuente: Nataly Aguirre.
23
7.2.1. CÁLCULO DE MUESTRA
Se utiliza la siguiente fórmula para proceder al cálculo de muestra:
𝑛 =𝑍𝛼2 ∗ 𝑝 ∗ 𝑞
𝑒2
Donde:
n: el tamaño de la muestra
p: Valor de probabilidad de éxito, donde el mayor valor es 0,5.
q: Valor de probabilidad de fracaso, donde el mayor valor es 0,5.
𝑍: Valor obtenido mediante niveles de confianza. Para nuestro caso es un
valor constante que se lo toma en relación al 90% de confianza equivale a 1,96 (es
un valor que queda a criterio del investigador).
𝑒 : Límite aceptable de error muestral que para nuestro caso es de 0,15;
además es un valor que queda a criterio del encuestador.
Así
𝑛0 =1,962 ∗ 0,5 ∗ 0,5
0,152=0,9604
0,0225= 43
Por tanto la muestra a ser analizada con un nivel de confiabilidad del 95% y
un error de 15% es de 43 unidades para el estudio.
De acuerdo al análisis estadístico se necesitaron 43 unidades muestrales las
mismas que se distribuyeron en cuatro grupos de estudio de acuerdo a las sustancias
utilizadas, en las que se midió el halo de inhibición.
24
7.3. CRITERIOS DE INCLUSIÓN
a) Enterococcus faecalis
b) Paramonoclorofenol alcanforado
c) Propóleo al 5%, 70% y 90%.
7.4.CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
Halos en los que se dificulte la medición del diámetro.
VIII VARIABLES
25
Tabla 3.
VARIABLES
Tabla 3.Variables del estudio
Fuente. Nataly Aguirre
VARIABLE CONCEPTUALIZ
ACIÓN
DETERMINANTE INDICADORES ESCALA
Dependiente
Enterococcus
faecalis
Stuart (2006). Ha
indicado que el E.
faecalis es un
microorganismo
anaerobio
facultativo, Gram
positivo que puede
aparecer solo, en
pares o en cadenas
cortas.
Arias (2009) ha
mencionado que este
microorganismo se
encuentra
frecuentemente en
retratamientos
endodóncicos gracias a
una amplia variedad de
factores de virulencia.
Pueden adherirse a
células del hospedador
y expresar proteínas que
compiten con otras
células alterando la
respuesta del mismo.
Medida de los Halos
de inhibición en mm.
Cuantitativa
De intervalo.
Independiente
Agente activo
antimicrobiano
Soares (2009) ha
explicado que la
medicación
intraconducto son
sustancias que nos
ayudan a la
desinfección del
sistema de
conductos
radiculares.
Capacidad inhibidora
frente a Enterococcus
faecalis.
Composición del
agente activo:
Paramonoclorofenol
alcanforado,
Propóleo
Cualitativa
Nominal
26
IX PROCEDIMIENTO
9.1. PREPARACIÓN DE MATERIALES
Preparación de los materiales y de las sustancias para utilizar en el estudio
placas con agrar sangre
Figura 2: Materiales a utilizar, comprobación de turbidez
Fuente: Nataly Aguirre.
9.2. SIEMBRA BACTERIANA
Procedimos a la siembra del Enterococcus faecalis cepa pura en forma líquida
en las placas, se utilizó la técnica por escobillón, seguido colocaremos nuestros
discos de papel de 6mm dividiendo la caja en cuatro y colocando uno por uno los
discos de papel con los medicamentos, se procede a cultivar en agar sangre por 24h a
370C.
27
Figura 3: Siembra por escobillón
Fuente: Nataly Aguirre
Figura 4: Colocado papel filtro con Paramonoclorofenol y Propóleo.
Fuente: Nataly Aguirre.
28
9.3. INOCULACIÓN E INCUBACIÓN
Después de la inoculación se incubó sobre la placa en una estufa durante
24horas, procediendo a continuación a la lectura de los halos.
Figura 5: Placas dentro de jarra Gas Pak, en estufa.
Fuente: Nataly Aguirre.
9.4. COMPROBACIÓN DE HALOS INHIBITORIOS
Se comprobó los halos de inhibición microbiana que fueron expresados en
milímetros luego de transcurridas las 24h.
29
Figura 6: Regla para medir halos de inhibición.
Fuente: Nataly Aguirre.
Figura 7: Halos de inhibición
Fuente: Nataly Aguirre.
9.5. RECOPILACIÓN DE DATOS
La recopilación de datos se realizó mediante las mediciones en milímetros
con los halos de inhibición a las 24, 48 y 168 horas.
30
X RESULTADOS Y DISCUSIÓN
10.1. RESULTADOSESTADÍSTICOS:
El presente estudio tiene el propósito de establecer la acción antimicrobiana
del paramonoclorofenol alcanforado y del propóleo al 70% y 90% y realizar una
comparación entre estas sustancias en donde los resultados fueron:
Con respecto al diámetro de los halos de inhibición del paramonoclorofenol
se obtuvo un promedio de 13.08mm, para el propóleo al 70% un promedio de
12.58mm, y para el propóleo al 90% es de 12.91mm. Se realizó un estudio previo
con propóleo al 5% en donde sus halos de inhibición en promedio fueron de 9.16mm
este valor será tomado en cuenta para una comparación entre los porcentajes del
propóleo para establecer qué porcentaje es mejor (tabla 4)
Tabla 4
ESTADÍSTICAS DESCRIPTIVAS DE LAS SUSTANCIAS EN ANÁLISIS
Fuente: Investigador
HALOS DE INHIBICIÓN EN mm
REPETICIÓN PARAMONOCLOROFENOL
ALCAFORADO
PROPÓLEO
AL 5%
PROPÓLEO
70%
PROPÓLEO
90%
1 12 10 11 14
2 14 10 12 12
3 13 8 14 13
4 13 10 13 12
5 12 8 12 12
6 15 10 12 14
7 13 8 14 13
8 12 10 13 12
9 15 8 12 12
10 14 8 11 13
11 12 10 14 14
12 12 10 13 14
PROMEDIOS 13.083 9.166 12.583 12.916
31
0
2
4
6
8
10
12
14
16
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Hal
os
de
inh
ibic
ión
en
mm
Repeticiones
Resultados obtenidos.
PARAMONOCLOROFENOL
PROPÓLEO AL 5%
PROPÓLEO 70%
PROPÓLEO 90%
Para una mejor visualización de los resultados se representan de forma gráfica
los promedios.
Grafico 1. Representación gráfica de los resultados en milímetros.
Fuente: Investigador
Con los resultados obtenidos en el laboratorio se realizó un análisis
estadístico demostrando que hubo diferencia en los halos de inhibición:
El paramonoclorofenol alcanforado llega más alto con un halo de 15mm.
Los extractos de propóleo al 70% y 90% tienen similares topes en
mediciones siendo el más alto 14mm.
Mientras que el propóleo al 5% se mantiene con un tope de 10mm siendo
el más bajo de todos.
32
0
2
4
6
8
10
12
14
16
0 2 4 6 8 10 12 14
PARAMONOCLOROFENOL PROPÓLEO AL 5%
PROPÓLEO 70% PROPÓLEO 90%
Hal
os
de
inh
ibic
ión
en
Gráfico 2.Histograma para demostración de resultados.
Fuente: Investigador
En este gráfico se puede observar:
La línea que representa el propóleo al 5% está más baja con un pico más alto en
sus halos de 10mm.
El paramonoclorofenol alcanforado tiene un pico más alto con 15mm.
Propóleo al 70% y 90% no representan una diferencia marcada entre ellas, tiene
un pico de 14mm en sus halos.
33
PRÓPOLEO 5% 19%
PROPÓLEO 70% 26% PROPÓLEO 90%
27%
PARAMONOCLOROFENOL 28%
Media de los medicamentos Propóleo y Paramonoclorofenol
PRÓPOLEO 5% PROPÓLEO 70% PROPÓLEO 90% PARAMONOCLOROFENOL
Gráfico 3. Representación en porcentajes de las cuatro sustancias.
Fuente: Investigador
Se puede observar que hay diferencia no tan significativa entre el
paramonoclorofenol alcanforado y el propóleo al 70% y 90% que fueron los más
efectivos sobre el enterococcus faecalis diferencia del propóleo al 5%.
34
0
2
4
6
8
10
12
14
Hal
os
de
inh
ibic
ión
en
mm
Repeticiones
Propóleo en diferentes porcentajes.
PROPÓLEO AL 5%
PROPÓLEO 70%
PROPÓLEO 90%
Gráfico 4. Resultados obtenidos del propóleo en diferentes porcentajes 5%, 70% y 90%.
Fuente: Investigador.
Se ha realizado una comparación entre los diferentes porcentajes de los
extractos de propóleo para establecer su eficacia y poder compararlo con la otra
sustancia:
El propóleo al 5% es el más bajo con un promedio de sus halos de
9.16mm.
El extracto de propóleo al 70% tubo una media en sus mediciones de
12.58mm, y
El extracto al 90% su media fue de 12.91mm, demostrando mejores
resultados que se compararon con el paramonoclorofenol alcanforado.
35
PROPÓLEO 70% PROPÓLEO 90%PARAMONOCLOROF
ENOL
Series1 12,58 12,91 13,08
12,3
12,4
12,5
12,6
12,7
12,8
12,9
13
13,1
13,2
PR
OM
EDIO
DE
LOS
MED
ICA
MEN
TOS
EMP
LEA
DO
S
Grafico 5. Representación de los promedios para establecer una comparación.
Fuente: Investigador.
Se realiza una comparación entre las sustancias utilizando el promedio de las
medidas obtenidas siendo para el paramonoclorofenol alcanforado 13.08mm, para el
propóleo al 70% de 12.58mm y propóleo al 90% de 12.91mm.
Al realizar la comparación se puede observar que hay una diferencia de 0.5mm
entre el extracto de propóleo al 70% y el paramonoclorofenol alcanforado y una
diferencia de 0.17mm entre el propóleo al 90% y el paramonoclorofenol alcanforado
demostrando variación no significativa lo que nos indica que fueron igualmente
efectivas sobre el enterococcus faecalis.
Estos resultados fueron observados a 24horas, 48 horas y 168 horas (7días)
tomando en cuenta que es el tiempo que se puede demorar entre cita y cita en el
tratamiento endodóncico, a las 24 horas los halos se formaron, a las 48 horas no se
presentaron cambios aparentes y a los 7 días se observó crecimiento de la bacteria en
los bordes de los halos en el extracto de propóleo al 5%,
36
En las otras tres sustancias hubo crecimiento de bacterias sin invadir los halos
de inhibición lo que nos indica que las sustancias si son efectivas para eliminar al
enterococcus faecalis.
37
10.2.DISCUSIÓN
Gómez (2014) realizó un estudio sobre Actividad Antimicrobiana de
Propóleos Frente a Algunos Microorganismos de Interés Alimentario para lo cual
utilizó extracto etanólico de propóleos en los porcentajes de 20%, 40%, 60%, 80%,
100% frente a microorganismos obteniendo resultados favorables para gram
positivos entre ellos Staphylococcus aureus, de acuerdo a Gómez la CMI fue del
propóleo al 20%. Sin embargo los mejores resultados fueron obtenidos de las
concentraciones al 80%y 100%. Demostrando una coincidencia con este estudio al
utilizar el propóleo al 70% para enterococcus faecalis un anaerobio gram positivo.
Reyes (2011) en su estudio sobre concentración mínima inhibitoria del efecto
antibacteriano del extracto etanólico de propóleo sobre enterococcus faecalis estudió
el extracto de propóleo al 30%, 40%, 50%,60%, 70%, 80% y 90% obteniendo como
resultados que al 30% y 40% no se obtiene una buena reacción antibacterial al
contrario con los porcentajes del 50% al 90% en donde sí se evidencia reacción sobre
el E. faecalis estableciendo como la cantidad mínima inhibitoria al propóleo al 50%
debido a que también se menciona que los resultados obtenidos en estos mismos
porcentajes del 50% al 90% fueron similares lo que nos indica que el propóleo en
cualquiera de estas concentraciones es efectivo. Estos resultados concuerdan con el
obtenido en este estudio debido a que los resultados del propóleo al 5% no son
efectivos mostrando un halo inhibitorio en promedio de 9.38mm, en comparación a
los resultados obtenidos con el propóleo al 70% y 90% en donde su halo inhibitorio
en promedio es de 12.58mm y 12.91mm respectivamente demostrando una eficacia
sobre el E. faecalis.
38
García (2007) en un estudio sobre Actividad in vitro del Propóleo frente a
Patógenos Bacterianos aislados de Infecciones Humanas utilizó extractos de
propóleo al 70%, de la zona costera de Villa Clara y otro a Ciego de Ávila, frente a
aislamientos clínicos de Staphylococcus aureus, S. epidermidis, con la intención de
comparar las zonas de las cuales procede el propóleo por lo que fue utilizado al
mismo porcentaje, el extracto de propóleo más efectivo fue procedente de la Cayería
Norte de Caibarién. Pero los resultados no fueron significativos. La especie
bacteriana más sensible resultó ser Staphylococcus aureus y S. epidermidis. Se
demuestra una concordancia con este estudio en la eliminación de gram positivos, lo
que nos indica que la región de procedencia del propóleo es importante pero no
influye en los resultados obtenidos.
Para comprobar la actividad antibacteriana del propóleo al 5 % Rodríguez
(2007) lo compara con paramonoclorofenol alcanforado y lo enfrenta a cuatro
bacterias frecuentes en necrosis pulpar, los resultados indican que las dos sustancias
fueron efectivas para eliminar el Enterococcus faecalis. Difiere con este estudio
debido a que el propóleo al 5% no demostró su eficacia mientras que al aumentar su
porcentaje al 70% y 90% los resultados fueron mejores.
En los estudios antes mencionados se ha podido verificar la eficacia del
propóleo en porcentajes por encima del 50% sobre los diferentes microorganismos y
coincidiendo con este estudio en el cual los resultados nos demuestran la eficacia del
extracto de propóleo pudiendo ser utilizado como una alternativa que sustituya al
Paramonoclorofenol alcanforado.
39
XI CONCLUSIONES
Del análisis realizado se puede concluir:
El paramonoclorofenol demostró ser efectivo sobre el enterococcus
faecaliscon un promedio en mediciones de sus halos de 13.08
milímetros a 370C y por 24 horas, a las 48 y 168 horas no se observó
cambios aparentes.
Con el extracto de propóleo al 70% se obtuvo una media de 12.58mm
y el propóleo al 90% se obtuvo una media de 12.91mm a 370C y por
24 horas, a las 48 y 168 horas no se observó cambios aparentes, con lo
que se concluye que el propóleo es efectivo sobre el enterococcus
faecalis.
Haciendo una comparación entre estas sustancias se puede decir que
son igualmente efectivas sobre el enterococcus faecalis tomando en
cuenta que la diferencia entre los promedios de los halos de inhibición
no es significativa. El propóleo siendo un extracto natural se le
atribuye propiedades antibacterianas, antivíricas, antiinflamatoria,
analgésicas, presenta menos reacciones, su costo es menor.
40
XII RECOMENDACIONES
Se recomienda el uso alternativo de propóleo en concentraciones altas,
como medicación intraconducto y en diferentes especialidades en
Odontología ya que los resultados fueron eficaces.
Es recomendable el estudio de la actividad antimicrobiana del extracto de
propóleo sobre las biopelículas que el enterococcus faecalis llega a formar
para sobre vivir en los conductos radiculares.
Se recomienda impulsar investigaciones de productos naturales que se
puedan aplicar en Odontología y proporcionen menos efectos adversos,
para solucionar afectaciones causadas por diversos microorganismos
patógenos.
41
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ANEXOS
Anexos 1. Preparación de los materiales y sustancias utilizadas en el estudio
Anexo 2. Preparación de las placas y siembra del enterococcus faecalis
Anexo 3. Colocación de los discos de papel impregnados de las sustancias y colocación
de las placas en la jarra Gas Pack
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Anexo 4. Colocación de la jarra en la estufa.
