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UNIVERSIDAD DE CALDAS

VICERRECTORÍA DE INVESTIGACIONES Y POSTGRADOS

1. Información general

Título del proyecto: EVALUACIÓN DE LA INCIDENCIA DE POBLACIONES DE Radopholus similis, Pratylenchus coffeae, Helicotylenchus dihystera y Meloidogyne spp., EN LA PRODUCCIÓN DE PLÁTANO DOMINICO HARTÓN (Musa AAB SIMMONDS)

Nombre de los Grupos de Investigación: (registre la información de los grupos que participan)

Nombre del Grupo: Fitotecnia Facultad/Departamento: Facultad de Ciencias Agropecuarias, departamento de Producción Agropecuaria

Clasificación A1

Nombre: Facultad/Departamento:

Clasificación _____

Tipo de proyecto de I&D: Investigación Básica: Investigación Aplicada: Creación: Innovación Tecnológica1:

Tipo de innovación: Innovación tecnológica de producto Innovación tecnológica de proceso Innovación organizacional

Área Estrátegica del Plan de Desarrollo

Biotecnología

Artes, Cultura y Humanidades Problemática Social

Salud

Ambiental

No corresponde a ninguna de las áreas estratégicas

INTEGRANTES DEL EQUIPO DE INVESTIGACIÓN (indicar cuál es el investigador responsable)

NOMBRE/TIPO DE VINCULACIÓN EN LA UNIVERSIDAD DE CALDAS

DEPARTAMENTO o PROGRAMA

ÁREA DE CONOCIMIENTO (según anexo 1)

ÓSCAR ADRIÁN GUZMÁN PIEDRAHITA Estudiante de doctorado en Ciencias Agrarias,

Universidad de Caldas

Producción Agropecuaria

Agronomía, veterinaria y afines

HORACIO LÓPEZ NICORA Director Tesis Doctorado

Ph.D. en Fitopatología Universidad de Ohio


CAROLINA ZAMORANO MONTAÑEZ Co-Director Tesis Doctorado

Ph.D. en Malherbología. Producción Agropecuaria


JAIRO LEGUIZAMÓN CAYCEDO Ph.D. en Fitopatología Agronomía,

1 Se refiere a aquellos proyectos que tienen como objetivo el desarrollo de nuevos productos o procesos, así

como las modificaciones tecnológicas importantes en productos o procesos

X X

X

Integrante Comité Evaluador Tesis Doctorado veterinaria y afines

BERTHA LUCÍA CASTRO CAYCEDO Integrante Comité Evaluador Tesis Doctorado

Ph.D. en Fitopatología


Lugar de Ejecución del Proyecto: (Municipio/Departamento) Ciudad: Palestina…………………Departamento: Caldas

Presupuesto

Valor total del proyecto: $ 52.436.725 Fuentes de financiación: COLCIENCIAS

Valor solicitado en esta convocatoria: $

Duración total (meses): 30 meses

2. Resumen ejecutivo

En el mundo, las plantaciones de plátano (Musa AAB Simmonds) y banano

(Musa AAA Simmonds), han sido tradicionalmente establecidas mediante

propagación vegetativa o asexual como cormos, rizomas o plántulas (Aguas &

Martínez, 2003; Tenkouano et al., 2006; Díaz et al., 2007), la cual ha sido la

principal responsable de la diseminación a gran escala de plagas y

enfermedades en la semilla contaminada, principalmente de nematodos

fitoparásitos como Radopholus similis Cobb (Thorne) y Pratylenchus coffeae

(Zimmermann, 1898) Filipjev & Schuurmans Stekhoven (Sarah et al., 1996;

Gowen et al., 2005; Guzmán, 2011), y Meloidogyne incognita (Kofoid & White)

Chitwood, y M. javanica (Treub) Chitwood(De Waele & Davide, 1998; Gowen

et al., 2005). En Colombia, hay desconocimiento de las pérdidas y daños que

los nematodos fitoparásitos ocasionan en plantas de plátano Dominico Hartón

en condiciones de almácigo y campo.

Por tales motivos, el objetivo general de esta investigación será contribuir al

conocimiento de la incidencia de los nematodos fitoparásitos en la producción

de plátano Dominico Hartón (Musa AAB). La investigación se realizará en la

granja Montelindo de la Universidad de Caldas, ubicada en la vereda

Santágueda, municipio de Palestina, departamento de Caldas. En condiciones

de almácigo se evaluará el efecto de diferentes poblaciones de nematodos

fitoparásitos sobre la producción de materia seca del plátano Dominico Hartón.

Para ello, se tomarán 1.095 plántulas de plátano Dominico Hartón que serán

sembradas en bolsas de plástico color negro de 30 X 40 cm largo y ancho,

respectivamente (6 kg de capacidad), cada una denominada como unidad

experimental. A los 15 días después de sembradas las plántulas, serán

asignadas aleatoriamente a cada uno de los tratamientos, cada uno con 10

unidades experimentales, donde serán inoculadas con cada una de las

poblaciones de R. similis, P. coffeae, H. dihystera y Meloidogyne spp., al 25, 50,

75 y 100% y sus interacciones. A las 16 semanas después de la siembra, se

evaluará la materia seca de raíces y parte aérea (g) en cada unidad experimental

(variable de respuesta) y la población de nematodos en 100 g de suelo y de

raíces (variable complementaria). En condiciones de campo se evaluará el

efecto del nivel de población de nematodos fitoparásitos en la producción del

plátano Dominico Hartón. Para lo cual se tomarán 1.445 plántulas de plátano

Dominico Hartón que serán sembradas en bolsas de plástico de 2 kg de

capacidad, cada una denominada como unidad experimental. A los quince (15)

días después de sembradas las plántulas, 340 de ellas serán inoculadas con R.

similis, en donde 85 plántulas serán inoculadas con cada una de las poblaciones

del nematodo al 25, 50, 75 y 100%, respectivamente. El mismo procedimiento

se realizará con los fitonematodos P. coffeae, H. dihystera y Meloidogyne spp.

Los resultados esperados serán la generación de nuevo conocimiento sobre el

efecto de diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos en producción de

materia seca y la producción del plátano Dominico Hartón.

3. Conformación y trayectoria del equipo de investigadores (máximo 500

palabras)

El grupo Fitotecnia, adscrito al Departamento de Producción Agropecuarias de la

Universidad de Caldas, se conformó en el año 1996 y a partir de 2005 fue registrado

en COLCIENCIAS. Actualmente se encuentra escalafonado en Categoría A1 ante

COLCIENCIAS y conformado por siete investigadores, cinco con título de doctorado

y dos con título de maestría.

Desde su conformación ha venido realizando actividades en cuatro líneas de

investigación: (1) Biología, hábitos y manejo integrado de nematodos fitoparásitos,

(2) Estrategias de manejo integrado de artrópodos-plaga, (3). Manejo integrado de

enfermedades y (4) Tecnología para el cultivo del plátano en la zona cafetera central

colombiana.

Hasta el presente y como resultado de la actividad investigativa los miembros del

grupo han publicado 154 artículos científicos en revistas periódicas nacionales e

internacionales. Asimismo, la actividad de investigación en el grupo ha permitido la

graduación de 60 profesionales del programa Ingeniería Agronómica, 16 del

programa de Maestría en Fitopatología y uno del doctorado en Ciencias Agrarias

de la Universidad de Caldas.

Los principales logros del grupo han sido:

El desarrollo de una técnica de campo y laboratorio para diferenciar los

agentes causantes de las Sigatokas amarilla y negra.

El establecimiento de las etapas de crecimiento de la planta de plátano con

su respectiva identificación y descripción.

La validación de la práctica del desmane para el mejoramiento de la calidad

comercial del plátano.

El establecimiento de una técnica de preaviso bioclimático para el manejo de

las Sigatokas del plátano en la región Santágueda.

El cálculo del balance hídrico para el cultivo del plátano en la región

Santágueda.

La generación de curvas y modelos matemáticos para describir distintos

aspectos del desarrollo de la planta de plátano.

La importancia de la limpieza sanitaria del cormo o material de siembra de

las musáceas para el manejo de nematodos fitoparásitos y evitar su

diseminación a nuevas zonas de cultivo.

La determinación clara de las especies de virus que afectan los cultivos de

musáceas en el eje cafetero.

4. Descripción del proyecto (máximo 15 páginas Letra Arial 12, espacio doble)

4.1 Planteamiento de la pregunta o problema de investigación y su

justificación

Planteamiento del problema:

En Colombia y en los países productores de musáceas, las plantaciones de

plátano (Musa AAB Simmonds) y banano (Musa AAA Simmonds), han sido

tradicionalmente establecidas mediante propagación vegetativa o asexual como

cormos, rizomas o plántulas (Aguas & Martínez, 2003; Coyne et al., 2003;

Tenkouano et al., 2006; Díaz et al., 2007; Hauser, 2007), la cual ha sido la

principal responsable de la diseminación a gran escala de plagas y

enfermedades en la semilla contaminada, principalmente de nematodos

endoparásitos migratorios como Radopholus similis Cobb (Thorne) y

Pratylenchus coffeae (Zimmermann, 1898) Filipjev & Schuurmans Stekhoven

(Sarah et al., 1996; Gowen et al., 2005; Guzmán, 2011), y endoparásitos

sedentarios como Meloidogyne incognita (Kofoid & White) Chitwood, y M.

javanica (Treub) Chitwood(De Waele & Davide, 1998; Gowen et al., 2005),

bacterias como Ralstonia solanacearum raza 2 Smith, causante del Moko o

Maduraviche (Granada, 2003; Gómez et al., 2005), y Dickeya chrysanthemi

(Burkholder et al., 1953) Samson et al. (2005), causante de la pudrición acuosa

del pseudotallo (Van Vaerenbergh et al., 2012), virus como el Rayado del

banano – Banana streak badnavirus (BSV) y el Mosaico del pepino – Cucumber

mosaic cucumovirus (CMV) (Lockhart & Jones, 1999; Daniells et al., 1995;

Roossinck, 1999; Martínez, 2005) y el hongo Fusarium oxysporum f. sp. cubense

(E.F. Smith) Snyder & Hansen, agente causal del Marchitamiento por Fusarium

o Mal de Panamá (Ploetz, 2006).

En los cultivos de plátano y banano, después de las Sigatokas negra,

ocasionada por Mycosphaerella fijiensis Morelet (sin. M. fijiensis var. difformis

Mulder & Stover) [anamorfo Paracercospora fijiensis (Morelet) Deighton, sin.

Cercospora fijiensis Morelet y Pseudocercospora fijiensis (Morelet) Deighton], y

amarilla causada por Mycosphaerella musicola Leach [anamorfo

Pseudocercospora musae (A. Zimmerm) Deighton, sin. Cercospora musae A.

Zimmerm.] causantes de lesiones foliares en musaceas (Mourichon & Fullerton,

1990), el daño en raíces y cormo causado por los nematodos fitoparásitos son

determinantes en reducir su rendimiento (Araya, 2003). En plantaciones con

varios años de establecidas, lo común es encontrar comunidades

poliespecíficas de fitonematodos, compuestas por Radopholus similis,

Pratylenchus coffeae, Helicotylenchus multicinctus o H. dihysteria, y

Meloidogyne incognita o M. javania (De Waele & Davide, 1998; Araya, 2003;

Guzmán & Castaño, 2004; Gowen et al., 2005; Moens et al., 2006).

Según Araya (2004), evaluaciones precisas de los efectos de los nematodos en

la producción de musáceas son escasas, pero algunas estimaciones que se

reportan en la literatura indican que las pérdidas pueden llegar hasta el 100%,

las cuales, dependen del cultivar, el tipo de suelo y las condiciones

agroecológicas. Las pérdidas en la producción se estiman en un 20% (Sasser &

Freckman, 1987). En plantaciones infectadas con control deficiente, las pérdidas

en rendimiento pueden estar entre un 44 y 50% (Loos & Loos, 1960; Araya,

2003). En condiciones extremas, en suelos pobres y erosionados, las pérdidas

acumulativas durante tres ciclos de producción pueden alcanzar hasta 75%,

debido a la reducción del peso del racimo y a la caída de las plantas como ha

ocurrido en Costa de Marfil (Sarah et al., 1996). Así mismo, Guzmán (2011)

reportó pérdidas del 70% ocasionadas por R. similis, principalmente por efecto

del volcamiento, en plátano Dominico Hartón en la Granja Montelindo de la

Universidad de Caldas (Colombia), en el primer ciclo de producción. Fogain

(2000), encontró un mayor número de plantas caídas con 18,3 y 52,5%, en la

primera y segunda cosecha, respectivamente, en áreas infestadas por R. similis

sin tratar con nematicida, y un menor número de plantas caídas con 2,5 y 7,5%,

en la primera y segunda cosecha, respectivamente, en las áreas tratadas con

nematicidas. Lo anterior, disminuyó el rendimiento (t.ha-1) en 60 y 52% en las

plantas enfermas, en la primera y segunda cosecha, respectivamente, en

comparación con las plantas tratadas.

El problema a tratar en esta investigación es el desconocimiento de las pérdidas

y daños que los nematodos fitoparásitos como Radopholus similis, Pratylenchus

coffeae, Helicotylenchus dihystera y Meloidogyne spp., ocasionan en plantas de

plátano Dominico Hartón en condiciones de almácigo y campo, lo cual será una

importante información para la aplicación de tratamientos y para escoger

medidas apropiadas de manejo. Debido a lo antes mencionado, las preguntas a

resolver en esta investigación son:

Pregunta 1: ¿La disminución de la materia seca del plátano Dominico Hartón

depende de las especies de nematodos fitoparásitos y de sus poblaciones?

Pregunta 2: ¿Independientemente de la especie de nematodo fitoparásito, a

partir de qué nivel de población ocurre menor producción de plátano Dominico

Hartón?

Justificación:

En Colombia, hay sembradas 429.642 ha en cultivos de plátano con una

producción de 3.177.784 t y un rendimiento de 8,3 t/ha (Agronet, 2016)

generando 286.000 empleos permanentes anualmente, convirtiéndose en un

producto de gran importancia socioeconómica en el sector tradicional de

economía campesina (Espinal et al., 2006). Así mismo, el plátano es un alimento

básico de la canasta familiar debido a su calidad alimenticia como fuente de

carbohidratos y posibilidad adquisitiva, con un consumo per cápita entre 105 y

160 y entre 50 y 64 kg/persona/año en las zonas rurales y urbanas,

respectivamente, siendo de los mayores del mundo (Grisales & Lescot, 1999;

Agronet, 2016).

En nuestro país, los rendimientos del cultivo de plátano son muy bajos, con

valores entre 7,1 y 8,3 t/ha desde el año 2000 hasta el 2014 (Agronet, 2016),

mientras que en condiciones experimentales de campo se han reportado

mayores rendimientos con valores de 15,7 t/ha (Corpoica, 1996) y 23,9 t/ha

(Guzmán et al., 2012). Mediante investigación, se ha estimado que el potencial

productivo del plátano Dominico Hartón puede alcanzar 30 t/ha, las cuales son

difíciles de alcanzar como consecuencia principalmente de los problemas

fitosanitarios antes mencionados y al desconocimiento de las pérdidas reales

que estos problemas sanitarios ocasionan en los cultivos, en especial los

nematodos fitoparásitos como Radopholus similis, Pratylenchus coffeae,

Helicotylenchus dihystera y Meloidogyne spp.

En esta investigación se pretende generar conocimiento sobre el efecto de

diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos en la materia seca de las

plántulas de plátano Dominico Hartón en condiciones de almácigo y su efecto

en campo sobre la producción, los cuales son elementos fundamentales en la

implementación de medidas apropiadas de manejo. Adicionalmente, una vez

que los agricultores colombianos conozcan las pérdidas y los daños

ocasionados por los nematodos fitoparásitos en el cultivo del plátano Dominico

Hartón, los resultados de esta investigación permitirán mejorar el rendimiento

de los cultivos al sembrar material vegetal sano, obteniendo un mayor

crecimiento de las plantas con mayor peso de los racimos y aumentando la vida

útil de la plantación, optimizando los indicadores productivos del cultivo de

plátano en el país, al igual que los ingresos del agricultor y la calidad de vida de

las familias que sustentan ingresos con éste cultivo.

4.2 Marco Teórico (máximo 2000 palabras)

El cultivo de plátano.

En Colombia, hay sembradas 429.642 ha de cultivo del plátano con una

producción de 3.177.784 t y un rendimiento de 8,3 t/ha (Agronet, 2016)

generando 286.000 empleos permanentes anualmente, convirtiéndose en un

producto de gran importancia socioeconómica en el sector tradicional de

economía campesina (Espinal et al., 2006). Así mismo, el plátano es un alimento

básico de la canasta familiar debido a su calidad alimenticia como fuente de

carbohidratos y posibilidad adquisitiva, con un consumo per cápita entre 105 y

160 y entre 50 y 64 kg/persona/año en las zonas rurales y urbanas,

respectivamente, siendo de los mayores del mundo (Grisales & Lescot, 1999;

Agronet, 2016).

El plátano Dominico Hartón, grupo Musa AAB, perteneciente al tipo “falso

cuerno”: bellota pequeña al florecer que se degenera y se seca antes de la

cosecha, predomina en Colombia, especialmente en los departamentos de

Caldas, Quindío, Risaralda, Tolima y Valle del Cauca por su mejor aceptación

gustativa y su valor comercial, en comparación con los plátanos Dominico,

Hartón Enano y Hartón que son poco cultivados. Desde el punto de vista

ecológico, el plátano Dominico Hartón se cultiva entre 650 y 1700 msnm

(Grisales y Lescot, 1999) y se comporta como susceptible al nematodo

barrenador R. similis y es considerado un material intermedio entre el Dominico

y el Hartón (Belalcázar, 1991; Guzmán y Castaño, 2004; Guzmán et al., 2012).

Nematodos fitoparásitos.

En plantaciones de musáceas con varios años de establecidas, lo común es

encontrar comunidades poliespecíficas, compuestas por los endoparásitos

migratorios Radopholus similis y Pratylenchus coffeae, los ecto-endoparásitos

Helicotylenchus multicinctus y H. dihysteria, los endoparásitos sedentarios

Meloidogyne incognita y M. javanica y el semi-endoparásito Rotylenchulus

reniformis (Araya, 2003; Gowen et al., 2005). Sin embargo, la frecuencia y

abundancia de cada uno de los géneros de nematodos puede cambiar según

sea el cultivo de banano o plátano y con las condiciones agroecológicas (Araya,

2003).

En Colombia, los principales nematodos reportados parasitando plantas de

plátano y banano son: Radopholus similis, Pratylenchus spp., Helicotylenchus

spp., Meloidogyne incognita, M. javanica y M. arenaria (Guzmán & Castaño,

2004; Guzmán, 2011; ICA, 2014). En estudios realizados en el municipio de

Palestina, Caldas, el nematodo barrenador, R. similis es el de mayor prevalencia

en plantas de plátano Dominico Hartón (Musa AAB) (Guzmán & Castaño, 2004;

Alarcón & Castaño, 2006; Guzmán, 2011; Valencia et al., 2014). Así mismo,

Grisales y Lescot (1999) identificaron que, en la zona cafetera central de

Colombia, los principales problemas en el cultivo del plátano son: nutrición,

deficiencia de manejo y necrosis radical en orden jerárquico; poniendo en

evidencia la existencia de problemas nutricionales y puntualmente necrosis

radicales, para los cuales no hay soluciones debido al desconocimiento de los

elementos involucrados.

Radopholus similis (Cobb) Thorne, nematodo barrenador. Este

fitonematodo se encuentra en las regiones tropicales y subtropicales del mundo

parasitando cultivos de banano y plátano (Thorne, 1961; Sher, 1968; Román,

1978; Araya, 2003), y es considerado como el cuarto más importante del mundo

después de los nematodos formadores de nudos (Meloidogyne spp.), quistes

(Heterodera spp. y Globodera spp.) y lesiones (Pratylenchus spp.) (Jones et al.,

2013).

Radopholus similis es un parásito obligado de tejidos de plantas, es decir,

necesita de un hospedante vivo para sobrevivir (Siddiqi, 2000; Sarah et al.,

1996). Su hábitat alimenticio es de endoparásito migratorio y realiza su ciclo de

vida en el sistema radical y el cormo (Blake, 1961; Loos, 1962; Sarah, 2000). El

nematodo perfora la pared celular e ingresa principalmente cerca a la cofia de

las raíces, o lo largo de ellas, mediante su estomatoestilete y luego se alimenta

del citoplasma. Tanto juveniles como adultos viven en el parénquima cortical

donde se mueven activamente causando daño conforme se alimentan del

citoplasma de las células vecinas. Las células son destruidas y el nematodo

migra intra e intercelularmente en el cilindro cortical de las raíces, y los cormos;

en el primero, hace cavidades o lesiones que cuando hay altas infestaciones,

las lesiones en la raíz se unen, anillándola completamente. Estas cavidades,

semejan agujeros barrenados en las células, bajo esta condición se derivó el

nombre de nematodo barrenador.

Síntomas primarios. En las células del cilindro cortical, R. similis produce

lesiones de longitud variable de 5 ó más centímetros con forma de estrías, éstas

inicialmente tienen colores que varían desde amarillo claro hasta oscuro, luego

rosado rojizas y finalmente marrón o negras. En algunos casos produce

depresiones en el tejido que modifican la anatomía cilíndrica original de las

raíces (Blake, 1961; Thorne, 1961; Blake, 1966; Valette et al., 1998; Oramas y

Román, 2006). En infestaciones altas, las lesiones rodean completamente las

raíces, hasta destruirlas totalmente (Sarah et al., 1996; Marín et al., 1998; Araya

y De Waele, 2004; Gowen et al., 2005). Dicha coloración se caracteriza por estar

infestada con todos los estados de desarrollo del nematodo (Sarah et al., 1996;

Marín et al., 1998; Gowen et al., 2005). Blake (1966) y Oramas y Román (2006),

encontraron que R. similis no sólo causa daño físico, sino que también, causa

daño fisiológico al producir hipertrofia del núcleo y nucléolo de las células.

Síntomas secundarios. En las plantas infectadas por R. similis se reduce la

absorción de agua y nutrientes, resultando en varios síntomas como

amarillamiento de hojas y disminución del tamaño y longevidad de las plantas,

los cuales pueden ser fácilmente confundidos con deficiencias nutricionales. Los

colinos infectados por R. similis son de menor tamaño y vigor, con hojas más

pequeñas y en algunos casos, sobresalen del suelo (envalconados) y con el

peciolo de las hojas viejas necrótico, diferente a los colinos de las plantas sanas.

Las diferencias en los síntomas, son también determinadas por las

características químicas y físicas del suelo, disponibilidad de nutrientes, la

especie hospedante y el género de fitonematodo involucrado (Thorne, 1961;

Sarah et al., 1996). Lo anterior, se refleja en un menor número y tamaño de las

hojas y menor peso del racimo, en un incremento del tiempo de siembra a

floración, de floración a cosecha, entre floraciones y entre cosechas (Sarah et

al., 1996; Araya, 2003; Gowen et al., 2005).

Finalmente, las plantas pierden anclaje por el deterioro del sistema radical, por

lo cual tienden a desraizarse o volcarse, esto puede ocurrir en plantas jóvenes,

y adultas, principalmente entre la época de floración y cosecha debido al peso

del racimo, particularmente durante vientos y lluvias fuertes, lo que causa

pérdidas económicas altas (Loos Loos, 1960; Sarah et al., 1996; Montiel et al,

1997; Sarah, 2000; Araya, 2003; Guzmán, 2011).

Las pérdidas en la producción de musáceas se estiman en un 20% (Sasser y

Freckman, 1987). En plantaciones infectadas con control deficiente, las pérdidas

en rendimiento están entre 44 y 50% (Loos Loos, 1960; Araya, 2003). En

condiciones extremas, en suelos pobres y erosionados, las pérdidas

acumulativas durante tres ciclos de producción pueden alcanzar hasta 75%,

debido a la reducción del peso del racimo y a la caída de las plantas como ha

ocurrido en Costa de Marfil (Sarah et al., 1996).

Fogain (2000), encontró un mayor número de plantas caídas (18.3 y 52.5%, en

la primera y segunda cosecha, respectivamente) en áreas infestadas por R.

similis sin tratar con nematicida, y un menor número de plantas caídas (2,5 y

7,5%, en la primera y segunda cosecha, respectivamente) en las áreas tratadas

con nematicidas. Lo anterior, disminuyó el rendimiento (t ha-1) en un 60 y 52%

en las plantas enfermas, en la primera y segunda cosecha, respectivamente, en

comparación con las plantas tratadas.

En plantas de Grande Naine, cultivar de banano Cavendish, R. similis redujo el

peso de las raíces en un 66%, mientras que el daño ocasionado a las raíces fue

más alto y el peso de los racimos más bajo, en plantas inoculadas con R. similis

y P coffeae, en comparación con el testigo (Moens et al., 2004). Moens et al.

(2003), cuando inocularon R. similis con incrementos de densidades desde 0,14

a 2,24 nematodos mL-1 de sustrato, correspondiendo a 254 y 2128 R. similis por

vaso de 1,8 L, respectivamente, encontraron una reducción lineal del peso de

las raíces. En ellas, por cada 1.000 nematodos inoculados se redujo el peso en

3,9 g (16%). Así mismo, Fallas et al. (1995), inocularon 100 R. similis en plantas

de banana variedad Valery en vasos de 0,8 L, encontraron una disminución en

el peso de raíces entre 11 a 53% después de 12 semanas.

Pratylenchus coffeae (Zimmermann) Filipjev & Schuurmans Stekhoven,

nematodo lesionador. Pratylenchus coffeae es un endoparasito migratorio que

coloniza los tejidos del córtex de la raíz y el rizoma de bananos diploides y

triploides, plátano y abacá, en cuyos tejidos se alimenta y multiplica, razón por

la cual, es probable que se haya difundido por el mundo con el material de

siembra contaminado. Tiene distribución mundial, en África del Sur, América

Central y del Sur, P. coffeae esta ampliamente extendido ocasionando daños en

Pisang Awak (Musa ABB) y cultivares Cavendish (Musa AAA) (Bridge et al.,

1997). También parasita raíces de cultivos de café (Coffea spp.) en Brasil,

Honduras, Puerto Rico, Martinica, China, India y Indonesia; al igual que cítricos

en la India, Japón y Estados Unidos (Castillo y Vovlas, 2007).

Todas las fases del ciclo biológico de P. coffeae las realiza al interior de los

tejidos de las raíces y rizomas de musáceas, siendo menor a 30 días a 25-30ºC.

Los síntomas primarios corresponden a lesiones de color rojo en el córtex de la

raíz, las cuales son de color negro cuando están viejas; hay ruptura de la

epidermis de las raíces, y también puede parasitar el rizoma ocasionando

lesiones necróticas. Pratylenchus spp. no penetra en el cilindro vascular de la

raíz, que permanece de color blanco (Bridge et al., 1997). Como consecuencia

de lo anterior, se presentan síntomas secundarios como menor crecimiento de

las plantas, disminución en el peso de los racimos, alargamiento del ciclo de

producción y caída o desraizamiento de las plantas (Gowen & Queneherve,

1990; Castillo & Volvas, 2007; Ravichandra, 2014). Según Pinochet (1978) y

Bridge et al. (1997), en Honduras, África del Sur y Ghana, P. coffeae ocasiona

pérdidas de producción del 62% en cultivos de plátanos (Musa AAB).

Meloidogyne incognita (Kofoid & White) Chitwood, y Meloidogyne javanica

(Treub) Chitwood, nematodo de los nudos radicales. Es un endoparásito

sedentario, que se encuentra en las raíces de bananos y plátanos en todos los

lugares donde crecen estos cultivos, junto con otras especies de nematodos

como Radopholus similis y Pratylenchus spp. Meloidogyne spp., penetra dentro

de la endodermis de las raíces y después en el cilindro vascular donde induce

la formación de células multinucleadas. El síntoma primario característico son

nudos o agallas en las raíces primarias y en menor cantidad en raíces

secundarias y terciarias, produciendo síntomas secundarios como

amarillamiento en la parte aérea de las plantas, hojas más angostas, detención

del crecimiento de la planta y menor producción (De Waele & Davide, 1998; De

Waele, 2000; Perry et al., 2009). Radopholus similis y, en menor grado,

Pratylenchus spp., tienden a superar las poblaciones de Meloidogyne spp. y

finalmente, reemplazarlas. Existen indicaciones de que la importancia de

Meloidogyne spp. en las raíces podría estar descuidada, especialmente en las

áreas donde R. similis no esta presente (De Waele & Davide, 1998).

En Filipinas, un experimento de evaluación del rendimiento de los bananos de

postre de tipo Cavendish gigante bajo condiciones de campo infectados con M.

incognita, mostro que un nivel de inoculó de 1.000 estados juveniles (J2) por

planta causó 26,4% de pérdida de rendimiento, con 10.000 J2 ocasionó 45,4%

de pérdida de rendimiento, y con 20.000 J2, produjo 57,1% de pérdida de

rendimiento en comparación con las plantas no inoculadas (Davide &

Marasigan, 1985).

Helicotylenchus multicinctus (Cobb) Golden y H. dihystera (Cobb) Sher,

nematodo espiral. Después de R. similis, los nematodos espirales, H.

multicinctus y H. dihystera, son los más diseminados y abundantes en los

cultivos de banano y plátano en el trópico, donde las condiciones agro-

ecológicas son óptimas para el cultivo de musáceas (Luc et al., 2005; Gowen et

al., 2005).

Biológicamente y dependiendo del hospedante, el hábito alimenticio de

Helicotylenchus spp., se caracteriza por ser ectoparásito o semi-endoparásito

en las células parenquimatosas del córtex de la raíz de banano. Como síntoma

primario, el nematodo produce lesiones pequeñas longitudinales, entre 3 y 10

cm, que generalmente no profundizan al parénquima cortical; son de color

castaño rojizo a negro (Araya, 2004). Sin embargo, en altas infestaciones, estas

lesiones pueden unirse, causando necrosis extensiva de la raíz en la capa más

externa del córtex, las raíces terciarias aparecen necróticas, con coloración

violeta (Gowen, 2000; Guzmán, 2011).

Como síntoma secundario, Helicotylenchus spp. en banano y plátano ocasiona

reducción en tamaño de la planta, enanismo, alargando el ciclo vegetativo y

reduciendo la vida productiva de la plantación después de 3 años. Los

componentes de las pérdidas incluyen menor peso del racimo, reflejado en

reducido tamaño de los frutos, madurez retardada y pérdidas en el mercadeo

(Quénéhervé et al., 1995). El volcamiento de las plantas puede también ocurrir

con altas infestaciones del nematodo (Gowen et al., 2005).

La mayoría de especies como H. dihystera y otras se reproducen por

partenogénesis mitótica, es decir, reproducción asexual (Hirschmann &

Triantaphyllou, 1968), mientras H. multicinctus, se reproduce por anfimixis, o sea

por unión de gametos masculino y femenino (Siddiqi, 1973; Luc et al., 2005).

Helicotylenchus multicinctus y H. dihystera dañan el sistema radical del banano

y reducen la producción entre 19 (Speijer & Fogain, 1999) y 34% (Reddy, 1994).

Moens et al. (2006), en un experimento realizado en recipientes de 200 L

conteniendo suelo esterilizado y plantas de Musa AAB cv. Grande Naine

inoculadas con 1.000 ± 50 H. multicinctus, encontraron que el sistema radical

disminuyó en 0,40 kg (7,6%) y el peso del racimo en 0,42kg (7,6%) en relación

con las plantas sin inocular; mientras que la presencia de H. multicinctus en

vasos de 1,8 L, disminuyó en 13% el peso de raíces de la misma especie de

Musa en comparación con el testigo, después de 16 semanas de exposición.

4.3 Objetivos

Objetivo general:

Contribuir al conocimiento de la incidencia de los nematodos fitoparásitos

Radopholus similis, Pratylenchus coffeae, Helicotylenchus dihystera y

Meloidogyne spp., en la producción de plátano Dominico Hartón (Musa AAB).

Objetivos específicos:

1. Evaluar el efecto de diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos

en la materia seca del plátano Dominico Hartón.

2. Determinar el efecto de diferentes poblaciones de nematodos

fitoparásitos sobre la producción de plátano Dominico Hartón.

Hipótesis: Las hipótesis de investigación a evaluar son:

Hipótesis 1: La disminución de la materia seca en plátano Dominico

Hartón no depende de la interacción: especie de nematodo fitoparásito X

tamaño de la población.

Hipótesis 2: Independientemente de la especie de nematodo

fitoparásito, a partir del 25% de la población, ocurre menor producción en

las plantas de plátano Dominico Hartón.

4.4 Metodología propuesta (máximo 1000 palabras)

Localización. La investigación se realizará en la granja ‘Montelindo’ de la

Universidad de Caldas, ubicada en la vereda Santágueda, municipio de

Palestina, departamento de Caldas, ubicada en las coordenadas a 5º 05´N y 75º

40´W, altitud de 1050 msnm, temperatura promedio anual de 23ºC, humedad

relativa del 74% y precipitación anual de 2100 mm.

Material vegetal. Se utilizarán plántulas de plátano Dominico Hartón de 20g de

peso, obtenidas a partir de cormos madre (ver procedimiento en actividades

complementarias), las cuales serán sembradas en bolsas de plástico color negro

de dos tamaños: 30 X 40 cm largo y ancho, respectivamente (6 kg de capacidad)

para el experimento en condiciones de almácigo, y 17 X 23 cm, respectivamente

(2 kg de capacidad) para la etapa inicial del experimento en condiciones de

campo.

Sustrato. Las bolsas de plástico se llenarán (serán llenadas) con el sustrato

suelo más arena en relación 3:1, el cual se esterilizará con Dazomet (Basamid®)

en dosis de 50g.m-2. El suelo de la granja Montelindo se clasifica

taxonómicamente como Andisoles, (ando: oscuros) del grupo Humic (alta

presencia de ácidos húmicos) Udivitrands (régimen de humedad údico, o sea,

cuando la sección del suelo se seca menos de 90 días acumulativos durante el

año, vitrans significa presencia de vidrio volcánico), con buen drenaje, textura

gruesa, suelos altamente fijadores de fósforo, altos contenidos de materia

orgánica (Cuartas y Obando, 2010). Los suelos Andisoles, son formados a partir

de cenizas volcánicas, caracterizados por minerales dominantes amorfos como

la alofana y la imogolita; como consecuencia de lo anterior, poseen una alta

capacidad de almacenamiento de humedad y habilidad para fijar grandes

cantidades de fósforo (fósforo no disponible para las plantas) (Baillie, 2001).

Posteriormente, se tomarán muestras del sustrato para verificar la ausencia de

nematodos siguiendo la metodología de Jenkins (1964) y Meredith (1973) (ver

procedimiento en actividades complementarias) y se le realizará un análisis de

fertilidad de suelos que permitirá definir los macro y micro-nutrientes a utilizar.

En el sitio donde se establecerá el experimento en condiciones de campo, se

recolectarán 2 kg de suelo para realizar análisis de fertilidad de suelos que

permitirá definir los macro y micro-nutrientes a utilizar, al igual que conteo e

identificación de nematodos fitoparásitos. Las muestras se colocarán en bolsas

de plástico debidamente identificadas y se trasladarán al laboratorio de

Nematología del departamento de Producción Agropecuaria de la Universidad

de Caldas para su análisis.

Procedimiento para alcanzar el primer objetivo específico y evaluar la

primera hipótesis de investigación:

Se tomarán 1.095 plántulas de plátano Dominico Hartón que serán sembradas

en bolsas de plástico color negro de 30 X 40 cm largo y ancho, respectivamente

(6 kg de capacidad), cada una denominada como unidad de trabajo. A los quince

(15) días después de sembradas las plántulas, serán asignadas aleatoriamente

a cada uno de los tratamientos que incluyen las cuatro especies de nematodos,

descritos en la Tabla 1, donde serán inoculadas con cada una de las poblaciones

del nematodo al 25, 50, 75 y 100% y sus interacciones. La población del 100%

serán 10.000 individuos por planta.

El efecto de los tratamientos será evaluado bajo el diseño experimental bloques

completos al azar (Tabla 2), donde el factor de bloqueo será la condición

ambiental del día a partir del cual se instalan las unidades experimentales. Se

tendrán 15 bloques de tal manera que el primer día se instalará la primera unidad

experimental de todos los tratamientos y así sucesivamente hasta que el décimo

quinto día se instalará el último bloque, con la última unidad de trabajo de todos

los tratamientos.

Todas las plantas del experimento serán ubicadas en mesas de guadua de 4 X

2 X 0.5 m de largo, ancho y alto, respectivamente, a 50 cm de alto desde el

suelo para evitar la contaminación de las unidades experimentales y a una altura

de 1,80 m, en la parte superior del almácigo, se colocará una malla de color

negro que produce 60% de sombra. Cuando sea necesario se aplicará riego a

las plántulas hasta el final del experimento, con un intervalo de 4-5 días, con el

fin de mantenerlas a 60% de capacidad de campo. Con base en el análisis de

suelos y las recomendaciones de Lardizábal y Gutiérrez (2006) y Coto (2009),

las bolsas se fertilizarán semanalmente desde la segunda semana después del

trasplante con una mezcla de urea: Fertilizante rico en nitrógeno (60% N); DAP:

fosfato diamónico rico en fósforo asimilable (48% de P2O5); y KCl: Cloruro de

potasio (60% de K2O).

Información a registrar:

A las 16 semanas después de la inoculación se realizará muestreo destructivo

de las plántulas para evaluar la materia seca de raíces y parte aérea (g) en cada

unidad experimental (variable de respuesta).

Población (#) de cada especie de nematodos en 100 cm3 de suelo y de raíces

para lo cual se tomarán muestras de 1kg de suelo (variable complementaria).

Altura (cm) de plántulas al final del experimento (distancia en centímetros

desde el nivel del suelo hasta la base de hoja bandera) (variable

complementaria).

Evaluación de los daños (severidad) ocasionados por los R. similis, P.

coffeae y H. dihystera en las raíces con base en la escala de severidad de

Carlier et al. (2003), y el índice de nudos radicales o agallas ocasionados por

Meloidogyne spp., con la escala propuesta por Bridge y Page (1980), al final

del experimento (variables complementarias).

Análisis de la información

Para cada tratamiento, estimación del promedio y error estándar, tanto con

la variable de respuesta como con las variables complementarias.

Análisis de varianza al 5%, con la variable de respuesta, de acuerdo con el

modelo de análisis para el diseño bloques completos al azar, con la siguiente

descomposición para la fuente de variación de tratamientos:

1. Con los tratamientos del 1 al 16: Nematodos, poblaciones del nematodo,

y la interacción poblaciones de nematodos por dosis.

2. Con los tratamientos del 17 al 32: Efectos de ellos.





En el caso que las interacciones sean significativas, se identificará la mejor

combinación de la interacción, a través de la prueba de contraste al 5%. Si

la interacción no es significativa, se evaluará el efecto de los factores por

separado. En el caso que haya efecto de la poblaciones de nematodos, se

aplicará la prueba de Tukey al 5%; en el caso que haya efecto de las

poblaciones, se evaluará la tendencia lineal, cuadrática y cúbica, de acuerdo

con el estadístico de prueba f al 5%.

Se compararán los mejores tratamientos de cada una de la descomposición

de la fuente de variación para los tratamientos (numerales 1-6), y con el

testigo absoluto, con la prueba de contraste, al 5%.

Se evaluará la correlación lineal entre la variable de respuesta y cada una

de las variables complementarias.

Tabla 1. Descripción de tratamientos en condiciones de almácigo. Plántulas de

plátano Dominico Hartón inoculadas con Radopholus similis (R.s), Pratylenchus

coffeae (Pra), Meloidogyne spp. (Mel), y Helicotylenchus dihystera (Hel) y sus

combinaciones.

Tratamiento Nematodo fitoparásito Densidad de población (%) individual y sus combinaciones

1

Radopholus similis

25

2 50

3 75

4 100

5

Pratylenchus coffeae

25

6 50

7 75

8 100

9

Helicotylenchus dihystera

25

10 50

11 75

12 100

13

Meloidogyne spp.

25

14 50

15 75

16 100

17

Combinación entre Radopholus similis (R.s) y Pratylenchus coffeae (Pra)

R.s-25%*Pra-25%

18 R.s-25%*Pra-50%

19 R.s-25%*Pra-75%

20 R.s-25%*Pra-100%

21 R.s-50%*Pra-25%

22 R.s-50%*Pra-50%

23 R.s-50%*Pra-75%

24 R.s-50%*Pra-100%

25 R.s-75%*Pra-25%

26 R.s-75%*Pra-50%

27 R.s-75%*Pra-75%

28 R.s-75%*Pra-100%

29 R.s-100%*Pra-25%

30 R.s-100%*Pra-50%

31 R.s-100%*Pra-75%

32 R.s-100%*Pra-100%

33 Combinación entre Radopholus similis

y Meloidogyne spp. (Mel)

R.s-25%*Mel-100%

34 R.s-25%*Mel-75%

35 R.s-25%*Mel-50%

36 R.s-25%*Mel-25%

37 R.s-50%*Mel-100%

38 R.s-50%*Mel-75%

39 R.s-50%*Mel-50%

40 R.s-50%*Mel-25%

41 R.s-75%*Mel-100% 42 R.s-75%*Mel-75% 43 R.s-75%*Mel-50% 44 R.s-75%*Mel-25% 45 R.s-100%*Mel-100% 46 R.s-100%*Mel-75% 47 R.s-100%*Mel-50% 48 R.s-100%*Mel-25% 49

Combinación entre Radopholus similis y

Helicotylenchus dihystera (Hel)

R.s-25%*Hel-100% 50 R.s-25%*Hel-75% 51 R.s-25%*Hel-50% 52 R.s-25%*Hel-25% 53 R.s-50%*Hel-100% 54 R.s-50%*Hel-75% 55 R.s-50%*Hel-50% 56 R.s-50%*Hel-25% 57 R.s-75%*Hel-100% 58 R.s-75%*Hel-75% 59 R.s-75%*Hel-50% 60 R.s-75%*Hel-25% 61 R.s-100%*Hel-100% 62 R.s-100%*Hel-75% 63 R.s-100%*Hel-50% 64 R.s-100%*Hel-25% 65

Combinación entre Radopholus similis,

Pratylenchus coffeae y Meloidogyne spp.

R.s-100%*Pra-100%*Mel-100% 66 R.s-75%*Pra-75%*Mel-75% 67 R.s-50%*Pra-50%*Mel-50% 68 R.s-25%*Pra-25%*Mel-25% 69

Combinación entre Radopholus similis,

Pratylenchus coffeae y Helicotylenchus dihistera

R.s-100%*Pra-100%*Hel-100% 70 R.s-75*Pra-75%*Hel-75% 71 R.s-50%*Pra-50%*Hel-50% 72 R.s-25%*Pra-25%*Hel-25% 73 Testigo absoluto (agua)

Tabla 2. Sorteo de tratamientos para ser asignados bajo el diseño experimental de bloques completos al azar, en condiciones de almácigo. El factor

de bloqueo será la condición ambiental del día a partir del cual se instalan las unidades experimentales.

Bloque TRATAMIENTOS

I 61 21 60 36 55 46 64 37 11 23 72 30 2 42 53 17 26 69 54 56 22 32 45 9 35 38 40 65 50 24 14 62 10 68 13 70 8 66 29 73 41 1 3 49 27 43 25 48 7 52 51 5 67 18 39 6 59 57 28 4 19 12 34 63 44 15 20 58 47 31 71 33 16

II 68 3 5 54 14 34 1 21 62 60 58 39 13 69 46 35 7 57 67 26 50 44 20 48 24 56 30 28 31 9 41 2 70 12 11 32 53 45 73 23 72 18 55 29 19 4 71 16 63 43 66 27 49 61 15 59 37 52 8 38 65 51 40 6 25 10 64 47 36 42 33 22 17

III 66 6 42 21 9 25 54 5 59 32 10 13 11 23 19 56 28 16 70 22 65 67 27 30 43 52 73 18 40 36 60 35 2 17 7 20 45 62 41 15 71 61 69 26 55 37 29 31 12 34 38 47 63 72 8 58 49 33 3 48 64 53 4 44 14 1 24 39 46 51 57 68 50

IV 33 44 34 47 29 16 58 52 69 4 19 53 31 60 28 10 46 49 55 61 32 54 30 64 51 35 37 67 50 48 56 57 15 59 27 43 24 26 40 11 41 2 73 22 21 20 5 9 18 45 70 7 1 23 62 72 65 6 14 12 17 25 63 38 8 68 39 71 3 36 42 13 66

V 18 54 5 20 3 65 38 19 32 27 35 57 42 64 62 6 21 9 72 61 70 43 36 23 24 26 50 69 63 56 16 73 25 7 59 31 34 45 30 28 44 2 53 60 41 37 17 11 40 1 8 22 46 68 33 39 49 47 58 51 13 48 4 29 67 15 52 71 55 14 12 10 66

VI 68 62 57 15 31 36 69 53 24 16 25 21 47 48 52 13 28 54 39 43 5 56 33 73 34 6 11 35 60 8 45 51 12 18 19 22 71 9 37 67 27 46 14 70 55 44 65 58 7 40 23 72 29 61 4 64 1 30 2 32 38 59 26 66 3 42 49 17 63 50 20 10 41

VII 36 2 41 45 55 61 5 13 8 7 21 57 1 17 31 16 64 62 73 30 63 52 25 12 72 33 15 42 40 54 71 9 14 10 4 19 53 49 35 6 11 29 26 50 46 56 3 58 24 48 66 37 20 44 38 34 43 51 18 60 23 28 67 22 68 70 69 39 65 47 59 27 32

VIII 57 5 65 68 42 29 70 43 22 20 16 11 73 26 21 56 4 17 72 71 63 33 47 60 44 61 28 10 50 12 14 1 3 41 7 13 54 37 52 8 67 69 27 2 59 40 35 53 23 49 6 58 45 39 32 31 9 18 62 64 46 48 25 51 24 55 15 38 30 34 19 66 36

IX 56 32 40 25 42 46 3 19 23 48 41 55 24 9 34 8 38 16 65 59 21 50 45 5 2 39 15 35 12 51 7 30 22 44 72 58 17 68 37 31 52 49 43 47 64 54 27 73 71 33 62 11 53 20 70 6 10 18 26 29 28 13 4 67 60 69 61 1 14 63 57 66 36

X 71 55 26 44 59 15 73 31 60 41 54 2 11 72 27 7 14 19 47 62 48 45 32 1 37 50 6 16 21 42 4 46 29 10 25 43 57 34 52 51 33 68 24 17 20 30 63 8 61 3 22 49 58 5 67 23 13 28 18 70 35 38 53 65 69 64 9 39 12 66 40 56 36

XI 70 25 22 58 50 27 48 31 4 37 45 52 72 73 10 69 2 60 64 20 43 65 30 12 53 28 44 13 17 8 16 61 63 1 33 21 11 59 7 15 24 14 49 41 68 35 40 32 57 38 6 29 3 67 5 19 18 46 9 54 62 51 55 34 23 39 47 42 26 36 71 56 66

XII 4 33 15 32 6 5 43 49 2 62 16 73 14 41 63 9 27 1 48 53 25 47 13 46 21 23 3 72 29 20 64 17 40 67 22 35 58 65 59 7 60 31 52 45 55 24 51 61 66 28 10 18 38 39 44 11 8 19 68 54 30 34 37 69 42 50 26 12 70 57 36 56 71

XIII 47 59 62 49 67 52 26 30 68 29 48 20 73 6 61 34 72 54 31 14 37 60 53 1 45 11 25 39 32 35 27 24 58 41 43 10 65 46 51 21 38 19 17 40 63 22 18 42 16 50 2 64 13 28 69 15 9 5 36 8 7 33 70 3 55 12 44 23 57 66 71 56 4

XIV 54 25 73 29 48 59 46 35 68 7 11 65 58 5 19 15 34 32 24 39 61 42 44 12 47 26 13 63 31 8 45 16 1 38 21 3 33 17 2 14 30 40 20 72 71 43 67 69 22 64 62 70 27 66 52 51 60 23 50 57 28 53 10 49 18 9 41 6 55 37 56 36 4

XV 20 1 6 33 22 17 69 50 40 16 24 29 72 14 42 62 30 39 18 37 26 34 9 28 36 58 51 52 48 64 61 53 8 45 13 2 32 43 63 4 44 10 12 55 11 71 25 19 47 21 65 3 60 35 70 67 7 15 23 27 38 41 31 5 59 68 73 46 49 57 66 54 56

Procedimiento para alcanzar el segundo objetivo específico y evaluar la

segunda hipótesis de trabajo:

Los tratamientos a evaluar en campo se describen en la tabla 3. La unidad de

trabajo será la planta de plátano y ellas serán asignadas a los tratamientos bajo el

diseño en bloques completos al azar (Tabla 4) donde el factor de bloqueo es el

gradiente de fertilización. Se tendrán 12 bloques.

Cada unidad de trabajo (plántulas de plátano Dominico Hartón) será sembrada en

bolsas de plástico color negro de 17 X 23 cm con 2 kg de capacidad, en el sustrato

describió anteriormente. A los quince (15) días después de sembradas las

plántulas, 340 de ellas serán inoculadas con diferentes poblaciones de R. similis.

Así 85 plántulas serán inoculadas con el nematodo al 25, 50, 75 y 100%,

respectivamente. A otras 340 plántulas de plátano Dominico Hartón se les

realizarán inoculaciones con las mismas poblaciones al 25, 50, 75 y 100%,

respectivamente, con P. coffeae, y finalmente, también se realizarán inoculaciones

con las mismas poblaciones al 25, 50, 75 y 100%, respectivamente, con

Meloidogyne spp.

Con base en los resultados obtenidos en el primer experimento (Objetivo 1), se

seleccionarán las tres (3) interacciones de los fitonematodos que ocasionen la

mayor disminución de materia seca a partir del 25% de la población de nematodos

inoculados. Estos tratamientos (interacciones) se incluirán en el experimento de

campo, utilizando 85 plántulas para cada uno de ellos. También, se incluirán 85

plántulas para conformar el testigo absoluto, e igual número para el testigo de

referencia con aplicación del nematicida (Cadusafos, Rugby®, aplicado 20 días

antes de la siembra de las plántulas, en dosis recomendada por área (m2) =

15g/m2). Con base en la anterior inoculación de las plántulas en el almácigo se

realizará la asignación de los tratamientos en el campo como se describen en la

Tabla 3.

Antes del establecimiento de las plántulas en condiciones de campo, se recolectará

una muestra de suelo para realizarle un análisis de fertilidad de suelos que permitirá

definir los macro y micro-nutrientes a ser aplicados.

A los 50 días después de la inoculación con los nematodos fitoparásitos, las

plántulas serán sembradas directamente en el campo en hoyos de 30 cm de

diámetro y 40 cm de profundidad. La distancia de siembra será de 3 m entre surcos

y 2 m entre plantas. Los tratamientos se describen en la Tabla 3.

La parcela experimental estará conformada por 5 plantas de Dominico Hartón y la

parcela efectiva estará constituida por las 3 plantas centrales. El efecto de los

tratamientos será evaluado bajo el diseño experimental bloques completos al azar,

donde el factor de bloqueo será las condiciones edáficas.

En principio se proponen 12 bloques, siempre y cuando la varianza asociada a la

variable materia seca de la primera etapa no indique que el número de bloques sea

mayor; en el caso que se requieran más bloques se disminuirá el número de plantas

por parcela.

El control de malezas y la aplicación de fertilizantes en condiciones de almácigo se

hará de la misma manera como se explicó anteriormente en el procedimiento para

alcanzar el primer objetivo específico. En condicines de campo, se realizarán cada

tres meses con base en los análisis de fertilidad de suelo y siguiendo las

recomendaciones de (Aristizábal et al., 2006), el programa de fertilización incluirá

aplicaciones de urea (100 g por planta) y de cloruro de potasio (200 g por planta).

La presencia de las Sigatokas negra y amarilla será controlada únicamente

mediante la eliminación parcial (despunte) o total (deshoja) de hojas agobiadas y

manchadas o necrosadas con el fin de reducir la producción de inóculo, cada 15

días, según recomendaciones de Merchan (2000).

Información a registrar:

Peso (kg) del racimo/planta. La cosecha de las plantas se iniciará con el

tratamiento correspondiente al testigo absoluto, y seguidamente los demás

tratamientos (variable de respuesta).

Altura de plántulas al final del experimento (distancia en centímetros desde

el nivel del suelo hasta la base de hoja bandera) y al momento de floración

(emisión de bellota) (variable complementaria).

Circunferencia del pseudotallo (cm) a 1 m de altura al momento de floración

(emisión de bellota) (variable complementaria).

Cantidad (número) de hojas funcionales a floración (emisión de bellota) y a

cosecha (variable complementaria).

Cantidad (#) de manos por planta (variable complementaria).

Días (#) a floración y días (número) a cosecha (variable complementaria).

Evaluación de los daños (severidad) ocasionados por los R. similis, P.

coffeae y H. dihystera en las raíces con base en la escala de severidad de

Carlier et al. (2003), y el índice de nudos radicales o agallas ocasionados por

Meloidogyne spp., con la escala propuesta por Bridge y Page (1980), al final

del experimento (variables complementarias).

Límite de tolerancia al nematodo (variable complementaria); éste se

calculará con la fórmula siguiente:

𝑇 = 𝐶𝑡

(𝑃 𝑥 𝐶𝑑 𝑥 𝐸)

donde: T: Límite de tolerancia

Ct: Costo del control P: Precio de la cosecha Cd: Coeficiente de daño E: Eficacia del método de control

El coeficiente de daño o de pérdida se calcula con la siguiente fórmula:

𝐶𝑑 = (𝑎 − 𝑏)

𝑎 𝑥 100

Donde: Cd: Coeficiente de daño

a: Rendimiento de las plantas sanas b: Rendimiento de las plantas enfermas

La eficacia (E) de un tratamiento se calcula con la fórmula de Abbott (1925), así:

𝐸 (%) = 𝐺𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑡𝑎𝑞𝑢𝑒 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜 − 𝐺𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑡𝑎𝑞𝑢𝑒 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑡𝑟𝑎𝑡𝑎𝑑𝑜

𝐺𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑡𝑎𝑞𝑢𝑒 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜

Tabla 3. Descripción de tratamientos en condiciones de campo. Plántulas de

plátano Dominico Hartón inoculadas con Radopholus similis (R.s), Pratylenchus

coffeae (Pra) y Meloidogyne spp. (Mel), y las tres (3) interacciones de los

fitonematodos que presenten la mayor disminución en la materia seca a partir del

25% de población de nematodo en almácigo.

Tratamiento Nematodo fitoparásito Densidad de población (%) individual y

sus interacciones

1

Radopholus similis

25

2 50

3 75

4 100

5

Pratylenchus spp.

25

6 50

7 75

8 100

9

Meloidogyne spp.

25

10 50

11 75

12 100

13 Interacción entre nematodos por definir de acuerdo a resultados de almácigo



16 Testigo absoluto (con agua)

17 Testigo con nematicida

El efecto de los tratamientos se evaluará bajo el diseño experimental bloques

completos al azar, donde el factor de bloqueo será las condiciones edáficas. En la

tabla 4, se ilustra la asignación de las parcelas experimentales de cada tratamiento,

en cada bloque. La información recolectada de las variables de respuesta se

registrará en bases de datos en el programa Excel.

Tabla 4. Sorteo de tratamientos para ser asignados bajo el diseño experimental de bloques completos al azar, en condiciones de campo. El factor de

bloqueo será las condiciones edáficas.

Bloques Tratamientos

I 13 5 11 8 7 16 4 10 9 17 3 2 1 15 6 12 14

II 5 13 12 16 9 17 15 13 14 6 8 10 7 4 2 11 1

III 15 11 9 3 4 17 7 2 1 14 16 8 6 5 13 12 10

IV 1 8 2 10 5 13 4 14 6 7 3 17 9 12 15 16 11

V 8 14 7 17 1 16 15 13 12 16 9 3 10 5 4 2 11

VI 15 9 7 10 13 4 12 5 2 17 11 16 14 3 8 1 6

VII 11 1 13 2 17 7 5 6 10 16 12 9 8 3 4 15 14

VII 4 8 15 2 14 6 12 9 3 17 13 1 10 16 11 7 5

VIII 13 12 11 16 17 15 8 7 1 6 2 9 14 10 5 3 4

IX 16 1 2 9 10 11 13 5 12 15 4 7 13 6 8 14 17

X 11 14 17 15 1 13 16 4 2 9 10 7 5 3 6 8 12

XI 3 7 11 9 2 4 1 15 14 8 6 13 12 5 10 17 16

XII 12 15 17 1 5 16 4 7 10 6 9 8 2 13 3 11 14

Análisis de la información en condiciones de campo

- Promedio y error estándar por tratamiento, tanto con la variable de respuesta

como las complementarias.

- Análisis de varianza al 5%, con la variable de respuesta, de acuerdo con el

modelo de análisis para el diseño bloques completos al azar, en arreglo factorial

3*4+5 (tres géneros de nematodos, 4 poblaciones de nematodos y 4 testigos

relativos y 1 testigo absoluto).

- Si el análisis de varianza muestra efecto de tratamientos: se aplicará la prueba

de Dunnett al 5% para establecer la diferencia entre los promedios de los

tratamientos con el testigo absoluto (cero poblaciones de nematodos). Si todos

los tratamientos difieren del testigo absoluto, se procederá a evaluar la

interacción nematodos por población de nematodos, con respecto a cada uno

de los testigos relativos, es decir, los tratamientos del 1 al 14 vs 13, 14, 15 y 17

(tabla 3), según prueba de contraste al 5%.

Evaluación de las hipótesis de investigación.

La primera hipótesis de investigación será corroborada siempre y cuando,

el análisis de varianza, sin contar con el testigo, no muestre efecto de

tratamientos, con la variable de respuesta peso seco de la planta.

La segunda hipótesis de investigación será corroborada siempre y

cuando el análisis de varianza, indique efecto de las poblaciones del

nematodo en la variable de respuesta peso del racimo y el daño en el

sistema radical de las plantas a partir del 25% de población.

ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS

Multiplicación masiva (producción) de semillas de plátano Dominico

Hartón mediante técnica PIF (Plants Issues de Fragments de tige, por sus

siglas en francés) o plantas cultivadas a partir de fragmentos madre. Esta

técnica de multiplicación rápida de plántulas (cormos) de plátano, desarrollada

en Camerún (África) por Moïse (2003), permite producir de entre 1.500 y 5.000

plantas.m-2 dependiendo de la variedad.

La técnica consiste en separar 50 hijuelos (propágulos) tipo espada de menos

de 40 cm de altura de plantas madre sanas y vigorosas; estos se lavan, se les

cortan las raíces y se les eliminan desde la base de tres a seis de las brácteas

presentes. En seguida, se corta el remanente de pseudotallo para dejarlo 1 a 3

cm por encima del nudo de la última bráctea removida. Los propágulos se

colocan sobre una superficie de cemento, seca y limpia, y sin contacto con suelo,

durante 72 h. Luego, en cada propágulo se elimina el pseudotallo remanente

hasta una altura de 2 a 3 mm por encima del nudo de la última bráctea removida.

En seguida y con un sacabocado, a cada propágulo se le extrae el punto de

crecimiento, para eliminar el efecto de la dominancia apical durante el período

de germinador. Los propágulos así preparados son colocados en un germinador

levantado del suelo y ubicado en una cámara térmica con sistema automático

de nebulización; se disponen verticalmente separados 10 cm, se cubren con una

capa de aserrín fino de madera de 2 – 4 cm de espesor y se tapan con plástico,

el cual se levanta cuando se va a suministrar riego y se quita en definitiva cuando

inicie la brotación. El primer riego del germinador se realiza entre las 24 y 30 h

después de la siembra.

A las 4 semanas después de la siembra, se efectúa un primer registro del

número de brotes por propágulo; 4 semanas después se debe dar inicio al

trasplante de los brotes a bolsas plásticas. En este momento se hace un

segundo registro del número de brotes por propágulo y se extraen

cuidadosamente con un cuchillo los que tengan mínimo tres hojas, se siembran

en bolsas plásticas de 2 Kg de capacidad y llenas con suelo esterilizado

mediante tratamiento químico (basamid, 40 g por 200 dm3 de suelo) y se colocan

en una estructura levantada 1 m del suelo y cubierta con polisombra para su

aclimatación, en donde permanecerán hasta que desarrollen entre 6 y 8 hojas

funcionales.

Incremento de las especies de nematodos fitoparásitos. Éste se realizará

en la granja Montelindo de la Universidad de Caldas, previamente descrita su

ubicación, y la extracción e identificación de los nematodos se hará en el

laboratorio de Nematología de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la

misma Universidad. El procedimiento para la recolección de tejidos parasitados,

aislamiento e incremento de los géneros Radopholus y Meloidogyne se describe

a continuación:

Ubicación de focos de plantas de plátano Dominico Hartón donde

tradicionalmente se han tenido cultivos parasitados por los diferentes

géneros de nematodos.

Recolección de muestras de raíces y cormos de las plantas de plátano

Dominico Hartón.

Transporte de las muestras al laboratorio de Nematología de la Facultad

de Ciencias Agropecuarias de la Universidad de Caldas.

Extracción de nematodos con base en el principio de flotación de los

nematodos en azúcar realizado por Jenkins (1964) y Meredith (1973) e

identificación de las especies con las claves taxonómicas de Mai et al.

(1996), Siddiqi (2000), Castillo y Vovlas (2007), Perry et al. (2009) y

Guzmán (2016).

Incremento individual de los nematodos mediante inoculación de los

géneros en raíces de plántulas de plátano Dominico Hartón sanas

sembradas en las bandejas de multiplicación masiva (producción) de

semillas de plátano mediante técnica PIF, descrita anteriormente.

Aproximadamente 12 semanas.

Finalmente, nuevamente se realizará la extracción de nematodos,

procedimiento descrito anteriormente, para calcular las diferentes

densidades de nematodos y realizar las inoculaciones en los

experimentos en condiciones de campo y almácigo.

Para facilitar el incremento de los géneros Helicotylenchus y Pratylenchus, estos

serán asilados de tejidos de raíces de maíz de la misma granja y de raíces y

cormos de plátano Dominico de la finca El retiro I, vereda El Bosque, municipio

de San José, Caldas. Posteriormente, para su multiplicación se realizará el

mismo procedimiento antes descrito.

Extracción e identificación de nematodos fitoparásitos. La extracción de

nematodos se realizará con base en el principio de flotación de los nematodos

en azúcar realizado por Jenkins (1964) y Meredith (1973); para lo cual se

procede de la siguiente manera: las raíces se lavan con agua corriente, después

de dejarlas secar a temperatura ambiente, se pesan 30 g de ellas en una

balanza Analytical Plus, y con la ayuda de tijeras se cortan transversalmente en

trozos de 1 cm, que luego se homogenizan*. Estos trozos se colocan en un vaso

de licuadora Osterizer, modelo 565-15, con 500 mL de agua y luego se licuan,

realizando prendido y apagó 3 veces por un período de 10 segundos y entre

cada lapso de tiempo se deja reposar 5 segundos. El licuado se deposita en un

tamiz de 250 µm colocado sobre un tamiz de 150 µm, y éste sobre otro de 25

µm. La muestra se lava con agua a presión para que ocurra el desprendimiento

de los nematodos; y el material que queda en el tamiz de 25 µm se deposita

todo el contenido en tubos de centrifugación de 50 mL de capacidad y se

centrifuga a 3800g durante 5 minutos. Luego se elimina el sobrenadante.

Seguidamente, los tubos se llenan nuevamente con solución de sacarosa al

50% (solución de azúcar) y de nuevo se someten a centrifugación a 3800g

durante 5 minutos. El sobrenadante se deposita en el tamiz de 25 µm para lavar

la sacarosa con agua corriente a presión baja, evitando que el azúcar los afecte.

Finalmente, se recogen 20 mL en una caja de Petri para realizar los conteos e

identificación.

De acuerdo con el objetivo del trabajo se separan las raíces necróticas de las

funcionales y se realiza la extracción de fitonematodos de éstas según el

propósito.

En cada muestra se contabiliza el número de nematodos fitoparásitos en 100 g

de raíces. La identificación de fitonemátodos se realizará recolectando 30

nematodos de cada caja de Petri, los cuales se colocan en un porta-objetos con

una gota de agua que se cubre con un cubre-objetos; las observaciones se

realizan con un microscopio compuesto de luz marca Nikon a través del objetivo

40X. La identificaron de nematodos fitoparásitos se realizará con claves

taxonómicas antes descritas.

Índices de severidad del daño por R. similis. Cuando se realice el muestreo

destructivo en almácigo y al final del experimento en condiciones de campo, se

evaluará el porcentaje de necrosis en raíces con la escala realizada por Carlier

et al. (2003). Para lo cual se seleccionará al azar cinco raíces funcionales por

plántula, cada raíz deberá tener al menos 10 cm de longitud; se cortará

longitudinalmente cada raíz por la mitad y se descartará una de las mitades, el

daño de la otra mitad de la raíz se estimará de acuerdo con el porcentaje que

muestra necrosis. Cada raíz contribuirá un 20% al total de la muestra, que

sumándolas se obtendrá el 100% para las cinco raíces. Así, si la mitad de la raíz

muestra necrosis, se registrará como 10%, si la raíz no muestra necrosis, se

registrará como 0% (Figura 1). Una vez se realice el registro de cada una de las

cinco raíces, se sumarán los 5 índices para obtener la necrosis radical total de

la muestra n porcentaje.

Figura 1. Escalas para la evaluación del porcentaje de necrosis en raíces según Speijer y De Waele (1997).

Índice de nudos radicales o agallas para Meloidogyne spp. Se tomarán al

azar ocho muestras de raíces por cada tratamiento para evaluar visualmente el

índice de los nudos radicales, para lo cual se utilizará la escala de evaluación

de infección de raíces con nudos causadas por Meloidogyne spp., propuesta por

Bridge y Page (1980) (Figura 2 y Tabla 5).

Figura 2. Diagrama del índice de los nudos radicales o agallas causadas por

Meloidogyne spp., propuesto por Bridge y Page (1980).

Tabla 5. Escala para evaluación de índice de nódulos radicales o agallas

causadas por Meloidogyne spp., propuesto por Bridge y Page (1980).

Escala Observación

0 No se observa agallas en las raíces.

1 Pocas agallas pequeñas difíciles de encontrar.

2 Solo agallas pequeñas, claramente visibles, raíces principales limpias.

3 Algunas agallas visibles y grandes

4 Predominan las agallas grandes, pero las agallas principalmente están limpias

5 50% de las raíces afectadas. Agallas en algunas raíces principales y sistema radical reducido.

6 Agallas en las raíces principales.

7 La mayoría de las raíces principales con agallas

8 Todas las raíces principales con agallas y se observan pocas raíces limpias.

9 Todas las raíces gravemente agalladas.

10 Todas las raíces gravemente agalladas, ya no hay sistema radical, plantas generalmente muertas.

4.5 Resultados esperados2

Los resultados esperados serán la generación de nuevo conocimiento sobre el

efecto de diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos en la materia seca

del plátano Dominico Hartón mediante la realización de un almácigo donde

serán sembradas de 1.445 plántulas de plátano inoculadas con Radopholus

similis (R.s), Pratylenchus coffeae (Pra), Meloidogyne spp. (Mel), y

Helicotylenchus dihystera (Hel) y sus interacciones (los tratamientos están

descritos en la tabla 1), a los ocho (8) días después de sembradas las plántulas.

La investigación también permitirá conocer el efecto de las diferentes

poblaciones de los nematodos fitoparásitos antes mencionados en el

rendimiento del plátano Dominico Hartón. Los resultados obtenidos son un

prerrequisito para la aplicación de tratamientos y para escoger medidas

apropiadas de manejo de estos fitonematodos.

Esta investigación permitirá la formación de un nuevo investigador con título de

doctorado en Ciencias Agrarias, área de la Nematología Vegetal de Colombia,

escasa en Colombia, al involucrar un estudiante de doctorado, permitiendo el

fortalecimiento de la comunidad científica del país. Así mismo, el fortalecimiento

y consolidación de la línea de investigación en biología, hábitos y manejo

integrado de nematodos fitoparásitos, del grupo Fitotecnia, escalafonado en

Categoría A1 ante COLCIENCIAS.

2 Serán reportados en los informes técnicos de avance (anual) o final, de acuerdo al formato para tal fin,

disponible en la página web de la Universidad en el link de investigaciones

4.6 Impactos esperados a partir del uso de los resultados (máximo 1 página)

Los resultados de esta investigación permitirán generar conocimiento sobre el

efecto de diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos en el crecimiento y

desarrollo de las plántulas de plátano Dominico Hartón en condiciones de

almácigo y su efecto en la producción de éste cultivo en condiciones de campo,

los cuales son elementos fundamentales en la aplicación de tratamientos y para

escoger medidas apropiadas de manejo. Adicionalmente, una vez que los

agricultores colombianos conozcan las pérdidas y los daños ocasionados por

los nematodos fitoparásitos en el cultivo del plátano Dominico Hartón, los

resultados de esta investigación permitirán mejorar el rendimiento de los cultivos

al sembrar material vegetal sano, permitiendo un mayor crecimiento de las

plantas con mayor peso de los racimos y aumentando la vida útil de la

plantación, optimizando los indicadores productivos del cultivo de plátano del

país, al igual que los ingresos del agricultor y la calidad de vida de las familias

que sustentan ingresos con éste cultivo. Adicionalmente, la implementación de

la técnica de producción de colinos de plátano sanos a gran escala será otro

logro importante.

Impacto social: Los resultados del proyecto permitirán incrementar el número

de agricultores vinculados al cultivos del plátano o la ampliación de las áreas

sembradas con dicho cultivo; esto en razón del conocimiento generado sobre el

efecto de diferentes poblaciones de nematodos fitoparásitos en el crecimiento y

desarrollo de las plántulas de plátano Dominico Hartón en condiciones de

almácigo y su efecto en la producción de éste cultivo en condiciones de campo,

los cuales son elementos fundamentales en la aplicación de tratamientos y para

escoger medidas apropiadas de manejo. Esto último, tiene un efecto positivo

sobre aquellas comunidades relacionadas con este sector ya que constituye la

principal fuente de empleo en el sector agrícola, después del café en el eje

cafetero debido principalmente al aumento de las exportaciones de plátano del

departamento de Caldas.

Impacto académico: El principal aporte que este proyecto hace a la educación

es a nivel profesional, ya que servirá de base para la formación de un estudiante

de posgrado (Doctorado en Ciencias Agrarias) de la Facultad de Ciencias

Agropecuarias de la Universidad. Adicionalmente, los agricultores, técnicos,

investigadores y profesionales del sector agrícola tendrán acceso al

conocimiento del efecto de los nematodos fitoparásitos en el cultivo de plátano

Dominico Hartón, a través de las publicaciones (artículos científicos) que se

realicen con los resultados del presente proyecto.

Impacto ambiental. Los resultados de esta investigación permitirán que se

incentive la producción en los viveros de material de plátano libre de problemas

fitosanitarios como los nematodos fitoparásitos. Partir de material de

propagación libre de nematodos garantiza que los productores obtengan

mayores rendimientos y tengan que emplear menos productos agroquímicos de

alta toxicidad.

4.7 Cronograma de actividades: Cronograma de actividades de campo y laboratorio para el manejo integrado de nematodos fitoparásitos en plátano Dominico Hartón.

Actividades de campo y/o laboratorio

AÑO

2017 (mes)

2018 (mes)

2019 (mes)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12

Compra de insumos para montaje de experimentos

X X X X X X X

Objetivo 1.

Multiplicación masiva (producción) de semillas de plátano Dominico Hartón mediante técnica PIF e Incremento de nematodos fitoparásitos.

X X X X X X X X X X

Adecuación y montaje de experimento en Granja Montelindo.

X X X X X X X

Seguimiento de experimento y medición de variables

X X X X X X X

Análisis de laboratorio X X X X X

Análisis estadístico X X X X X

Elaboración de artículo científico X X X X X X X

Objetivo 2.

Multiplicación masiva (producción) de semillas de plátano Dominico Hartón mediante técnica PIF e Incremento de nematodos fitoparásitos.

X X X X

Adecuación y montaje de experimento en Granja Montelindo

X X X

Seguimiento de experimento y medición de variables

X X X X X X X X X X X X X X X X X X

Análisis de laboratorio X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

Análisis estadístico X X X X X X X X X

Elaboración de artículo científico y tesis

X X X X X X

5. Compromisos

Graduación de un estudiante de doctorado y dos estudiantes de pregrado

del programa Ingeniería Agronómica.

Publicación de dos artículos científicos en revistas indexadas Categoría

A2.

Informes técnicos semestrales y un informe técnico final.

6. Bibliografía Abbott, W.S. 1925. A method of computing the effectiveness of an insecticide. J. Econ. Entomol, 18: 265-267. Agronet. 2016. Sistema de Estadísticas Agropecuarias – SEA. Disponible en: http://www.agronet.gov.co/Paginas/default.aspx Aguas, A. A. & Martinez, M. 2003. Técnicas rápidas para la multiplicación de semillas de plátano. Boletines Divulgativos Ecorregión Caribe (COL), (69), 7p. Alarcon, J. & Castano-Zapata, J. 2006. Reconocimiento fitosanitario de las principales enfermedades del plátano Dominico Hartón (Musa AAB Simmonds). Agronomia, 14(1): 65-79. Araya, M. 2003. Situación actual del manejo de nematodos en banano (Musa AAA) y plátano (Musa AAB) en el trópico americano. En: Manejo convencional y alternativo de la Sigatoka negra, nematodos y otras plagas asociadas al cultivo de Musáceas en los trópicos Actas del Taller “Manejo convencional y alternativo de la Sigatoka negra, nematodos y otras plagas asociadas al cultivo de Musáceas”, celebrado en Guayaquil, Ecuador. 11- 13 de agosto, 2003. Galileo Rivas y Franklin Rosales, editores. Pag 79-102. Araya, M. 2004. Los fitonemátodos del banano (Musa AAA Subgrupo Cavendish cultivares Grande Naine, Valery y Williams) su parasitismo y combate. XVI Reunión Internacional ACORBAT. pp. 84-105. Araya, M. & De Waele, D. 2004. Spatial distribution of nematodes in three banana (Musa AAA) root parts considering two root thickness in three farm management systems. Acta Oecologica, 26: 137-148. Aristizábal, M., Orozco, M.L. & Ostos, M.A. 2006. Efectos del sistema de manejo de las Sigatokas y la frecuencia de fertilización sobre el crecimiento y producción del plátano Dominico Hartón (Musa AAB). Agronomía, 14(1): 25-35.

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7. Presupuesto

Completar el anexo 2, sólo en los recuadros claros, los sombreados representan

que los rubros no son permitidos.

4. Finalización del proyecto La finalización del proyecto, está determinada por los requisitos de cada convocatoria.

5. Documentación complementaria para inscripción del proyecto

Si el proyecto es aprobado, los proponentes deberán diligenciar la ficha de

inscripción del proyecto, la ficha de inscripción de cada integrante y la carta de

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0035738

compromiso firmada por todos los autores (ver formatos para inscripción de

proyectos, CÓDIGO:

R-1108-P-IN-77, del procedimiento P-IN-77 del SIG).

NOTA IMPORTANTE: los investigadores firmarán con la Universidad de Caldas

un acta de propiedad intelectual, una vez analizada la necesidad, en desarrollo

de la política recientemente aprobada por el Consejo Superior.

6. Anexos Anexo 1

Áreas del conocimiento según Colciencias:


Bellas artes

Ciencias de la educación

Ciencias de la salud

Ciencias sociales y humanas

Economía, Administración, Contaduría y afines

Arquitectura, Urbanismo y afines

Ingeniería Civil

Ingeniería Química

Ingeniería Eléctrica

Ingeniería de Sistemas

Ingeniería de Sistemas y telecomunicaciones

Ingeniería Electrónica

Ingeniería Industrial

Ingeniería Mecánica

Ingeniería Ambiental

Otras ingenierías

Matemáticas

Ciencias Naturales

Humanidades y Ciencias Religiosas

Anexo 2

PRESUPUESTO (RUBROS Y FUENTES)

AÑO 1 (debe hacerse cada año por separado)

PRESUPUESTO *

AÑO 1

RUBROS

FUENTES

TOTAL UNIVERSIDAD DE CALDAS FINANCIACIÓN EXTERNA

RECURRENTE

[1]

Solicitado a

V.I.P RECURRENTE

RECURSOS

FRESCOS

1. SERVICIOS PERSONALES 11.887.523 0 0 11.887.523

1.1. Investigadores 11.887.523 0 11.887.523

1.2. Auxiliares 0 0

1.3. Consultores 0

1.4. Asesores 0 0

2. GASTOS GENERALES 0 0 0 18.897.279 18.897.279

2.1. Servicios técnicos 0 0 0 0

2.1.1. Exámenes 0

2.1.2. Pruebas técnicas 0 0

2.1.3. Servicios de encuestas 0

2.2. Materiales e insumos 0 0 0 11.132.879 11.132.879

2.2.1. De campo 5.575.000 5.575.000

2.2.2. De oficina (papel, tinta, fotocopias) 149.213 149.213

2.2.3. De laboratorio 5.408.666 5.408.666

2.3. Apoyo económico para gastos de viaje 0 0 0 7.764.400 7.764.400

2.3.1. Tiquetes aéreos 0 0

2.3.2. Pasajes terrestres 0 0

2.3.3. Gastos de viaje (gasolina y peajes) 0 0

2.3.4. Auxilio para viaje 0

2.3.5. Apoyo económico para alojamiento y

alimentación [2] 7.764.400 7.764.400

2.4. Gastos para uso de equipos 0 0 0 0 0

2.4.1. Pago de alquiler de equipos 0 0

3. INVERSIÓN 0 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1. En equipos 0 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1.1. Para compra de equipos 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1.2. Equipos propios 0 0 0

3.2. En planta física 0 0 0 0 0

3.2.1. Adecuaciones 0 0 0

3.2.2. Alquiler de planta física 0 0 0

3.3. En material bibliográfico necesario

para esta investigación 0 0 0 0 0

3.3.1. Para comprar 0 0 0 0

3.4. En software necesario para esta

investigación 0 0 0 0 0

3.4.1. Para comprar 0 0 0 0

3.4.2. Propio 0 0

SUB-TOTAL 11.887.523 0 0 20.897.279 32.784.802

ADMINISTRACIÓN, 20% 0 0 0 0 0

TOTAL 11.887.523 0 0 20.897.279 32.784.802

PORCENTAJE DE FUENTES 36,3% 0,0% 63,7% 100,0%

AÑO 2 (debe hacerse cada año por separado)

PRESUPUESTO * AÑO 2

RUBROS

FUENTES


RECURRENTE

[1]

Solicitado a

V.I.P RECURRENTE

RECURSOS

FRESCOS

1. SERVICIOS PERSONALES 11.887.523 0 0 0 11.887.523

1.1. Investigadores 11.887.523 0 0 11.887.523

1.2. Auxiliares 0 0 0

1.3. Consultores 0

1.4. Asesores 0


2.1. Servicios técnicos 0 0 0 0

2.1.1. Exámenes 0

2.1.2. Pruebas técnicas 0

2.1.3. Servicios de encuestas 0

2.2. Materiales e insumos 0 0 0 0 0

2.2.1. De campo 0

2.2.2. De oficina (papel, tinta, fotocopias) 0 0

2.2.3. De laboratorio 0


2.3.1. Tiquetes aéreos 0 0

2.3.2. Pasajes terrestres 0

2.3.3. Gastos de viaje (gasolina y peajes) 0

2.3.4. Auxilio para viaje 0


alimentación [2] 7.764.400 7.764.400


2.4.1. Pago de alquiler de equipos 0 0 0

3. INVERSIÓN 0 0 0 0 0

3.1. En equipos 0 0 0 0 0

3.1.1. Para compra de equipos 0 0 0

3.1.2. Equipos propios 0 0


3.2.1. Adecuaciones 0 0 0

3.2.2. Alquiler de planta física 0 0 0



3.3.1. Para comprar 0 0 0



3.4.1. Para comprar 0 0 0

3.4.2. Propio 0 0

SUB-TOTAL 11.887.523 0 7.764.400 19.651.923

ADMINISTRACIÓN, 20% 0 0 0 0

TOTAL 11.887.523 0 7.764.400 19.651.923

PORCENTAJE DE FUENTES 60,5% 0,0% 39,5% 100,0%

PRESUPUESTO TOTAL *

RUBROS

FUENTES


RECURRENTE

[1]

Solicitado a

V.I.P RECURRENTE

RECURSOS

FRESCOS

1. SERVICIOS PERSONALES 23.775.046 0 0 0 23.775.046

1.1. Investigadores 23.775.046 0 0 0 23.775.046

1.2. Auxiliares 0 0 0 0 0

1.3. Consultores 0 0 0 0 0

1.4. Asesores 0 0 0 0 0


2.1. Servicios técnicos 0 0 0 0 0

2.1.1. Exámenes 0 0 0 0 0

2.1.2. Pruebas técnicas 0 0 0 0 0

2.1.3. Servicios de encuestas 0 0 0 0 0

2.2. Materiales e insumos 0 0 0 11.132.879 11.132.879

2.2.1. De campo 0 0 0 5.575.000 5.575.000

2.2.2. De oficina (papel, tinta, fotocopias) 0 0 0 149.213 149.213

2.2.3. De laboratorio 0 0 0 5.408.666 5.408.666


2.3.1. Tiquetes aéreos 0 0 0 0 0

2.3.2. Pasajes terrestres 0 0 0 0 0

2.3.3. Gastos de viaje (gasolina y peajes) 0 0 0 0 0

2.3.4. Auxilio para viaje 0 0 0 0 0


alimentación [2] 0 0 0 15.528.800 15.528.800


2.4.1. Pago de alquiler de equipos 0 0 0 0 0

3. INVERSIÓN 0 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1. En equipos 0 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1.1. Para compra de equipos 0 0 0 2.000.000 2.000.000

3.1.2. Equipos propios 0 0 0 0 0


3.2.1. Adecuaciones 0 0 0 0 0

3.2.2. Alquiler de planta física 0 0 0 0 0



3.3.1. Para comprar 0 0 0 0 0



3.4.1. Para comprar 0 0 0 0 0

3.4.2. Propio 0 0 0 0 0

SUB-TOTAL 23.775.046 0 0 28.661.679 52.436.725

ADMINISTRACIÓN, 20% 0 0 0 0 0

TOTAL 23.775.046 0 0 28.661.679 52.436.725

PORCENTAJE DE FUENTES 45,3% 0,0% 0,0% 54,7% 100,0%

TABLAS DE ANEXO AL PRESUPUESTO

Descripción de los gastos de personal

Nombre del

Investigador /

Experto/

Auxiliar/estudiante

Formación Académica

Función dentro del

proyecto

Institución

o Empresa

Tipo de

vinculación

DEDICACIÓN Horas/semana

Fuentes

Total

($) COLCIENCIAS Especie

CAROLINA

ZAMORANO

MONTAÑEZ

Ph.D. Investigadora

principal Universidad

de Caldas

Docente de

planta 8

$17.391,625 (hora día) X

1,78 X

8h/semana X

4 semanas X

24 meses

23.775.047 23.775.047

Totales 23.775.047

Descripción de equipos a adquirir

Equipos Justificación

Fuentes Otras fuentes Total

COLCIENCIAS

Balanza analítica

No se dispone de balanza analítica en laboratorio de

Nematología, la cual se requiere para pesar cantidades muy

pequeñas de productos químicos.

2.000.000

2.000.000

Totales 2’.000.000

Descripción de software a adquirir

Software Justificación

Fuentes Otras fuentes Total

COLCIENCIAS

Descripción y justificación de viajes

Lugar /No. de viajes Justificación Pasajes ($) Estadía ($) Total días Total

Totales

Valoración de salidas de campo (complete un cuadro por salida o pondere el total de las salidas)

Lugar de la Salida : Granja Montelindo

Justificación: Montaje de experimentos, recolección de muestras y lecturas semanales durante 22

meses

Concepto $ / día No. de Días TOTAL

Alimentación y transporte investigador principal

$41.300, Inv. principal

$41.300, Est. Doctorado Óscar Adrián Guzmán Piedrahita

88 días (22 meses x 4 veces al mes)

$41.300 (todo el día)

X 3h/semana

X 4 semanas

X

24 meses

3.634.400 11.894.400

TOTAL

15.528.800

Material Bibliográfico (en miles de $)

Ítem Justificación Valor

TOTAL

MATERIALES E INSUMOS DE LABORATORIO

ITEM DESCRIPCIÓN TÉCNICA UNIDAD DE MEDIDA CANTIDAD

PRECIO UNITARIO ESTIMADO INCLUIDO

IVA 16% 2010

TOTAL DINERO

Azúcar Azúcar altamente refinada. Kilo 20 $ 1.500 $ 30.000

Jabón liquido dispensador tipo familia 8008 spray soap 800 ml 2 $ 20.000 $ 40.000

Toalla de mano en rollo precortada x 100 mts hoja doble blanca

Tipo Familia línea clásica Ref. 7360 Rollo x 100 mts 5 $ 10.335 $ 51.675

Alcohol uso doméstico antiséptico Alcohol Etílico al 96% puro Botella x 750 C.C. 10 $ 2.801 $ 28.010

Balde plástico Balde de polipropileno con capacidad de 10 lts Capacidad x 10 Lts 5 $ 2.923 $ 14.615

Bolsa transparente para recolección de muestras Tamaño 40 ancho 80 largo Bolsa para recolectar muestras

Und. 1000 $ 300 $ 300.000

Bolsa color Negro para Desechos Tamaño 100cm x 70 xm

Bolsa color Negro para Desechos Tamaño 100cm x 70 xm Unidades 100 $ 500 $ 50.000

Guante de caucho calibre 35 talla 8 Guante negro Cal 35 Par 3 $ 2.883 $ 8.649

Jabón antibacterial para manos Jabón antibacterial para manos galón 5 $ 10.000 $ 50.000

Papel aluminio ROLO X 40 MTS Rollo 1 $ 7.829 $ 7.829

Overoles 1 pieza negro talla 42 und 2 $ 60.000 $ 120.000

Hipoclorito de Sodio Galón 2 $ 23.500 $ 47.000

Ácido clorhídrico ACIDO CLORHÍDRICO GRADO ANALITICO FRASCO 2.5 L 1 $ 168.084 $ 168.084

Hidróxido de potasio HIDROXIDO DE POTASIO GRADO ANALITICO TARRO 1 Kg 2 $ 100.000 $ 200.000

Azul de Lactofenol Fco x 100 ml 1 $ 30.740 $ 30.740

Lupa 30x de bolsillo Unidad 2 $ 46.200 $ 92.400

Streptomicina Fco 1 $ 200.000 $ 200.000

Frasco Lavador de cuello estrecho de 500 ml Frasco Lavador de cuello extrecho de 500 ml Unidades 3 $ 10.000 $ 30.000

Mango para bisturí en acero inoxidable No. 3 Mango para bisturí en acero inoxidable No. 3 unidad 2 $ 15.000 $ 30.000

Mango para bisturí en acero inoxidable No. 4 Mango para bisturí en acero inoxidable No. 4 unidad 2 $ 15.000 $ 30.000

Cuchillas bisturí para mango No. 3 Caja X 100 und 2 $ 23.200 $ 46.400

Cuchillas bisturí para mango No. 4 Caja X 100 und 2 $ 23.200 $ 46.400

Blusas de laboratorio blancas en dril talla 42 con logo Universidad de Caldas

Blusas de laboratorio blancas en dril talla 40 con logo ICA-LANIA

unidad 3 $ 30.000 $ 90.000

Tamiz tamaño de malla de 25 micrómetros Tamiz tamaño de malla de 25 micrómetros Unidad 2 $ 120.000 $ 240.000

Cubreobjetos Cubreobjetos. cuadrados 2x2 cmº cajita de 100 und 20 $ 2.705 $ 54.100

Lámina portaobjetos Laminas Portaobjetos Caja x 50 unidades 20 $ 5.000 $ 100.000

Materos plásticos de 30 cm Unidad 100 $ 5.000 $ 500.000

Glicerina Frasco unidad 2 $ 100.000 $ 200.000

Lactofenol Frasco unidad 1 $ 100.000 $ 100.000

Esmalte Frasco unidad 10 $ 1.000 $ 10.000

Etanol Frasco unidad 1 $ 100.000 $ 100.000

Formalina Frasco unidad 1 $ 100.000 $ 100.000

Barreno unidad 5 $ 40.000 $ 200.000

Pala unidad 2 $ 12.000 $ 24.000

Palín unidad 2 $ 12.000 $ 24.000

Cámara de conteo Cámara de conteo para nematodos fitoparásitos unidad 3 $ 150.000 $ 450.000

Embudos Infraestructura de madera adecuada con embudos adecuados con mallas

unidad 1 $ 1.000.000 $ 1.000.000

Phloxine B Rojo Congo, utilizado para tinción de raíces con nematodos Fco 1 $ 198.000 $ 198.000

Acid fuchsin Fco $ 200.000 $ 0

Guantes para Cirugia de latex talla S caja x 100 2 $ 8.000 $ 16.000

Tijeras 14.5 cm en acero inoxidable rectas DIMEDA unidad 2 $ 5.382 $ 10.764

Agar nutritivo Fco 1 $ 370.000 $ 370.000

TOTAL

$

5.408.666

MATERIALES E INSUMOS DE CAMPO

FERTILIZANTES Urea, DAP, KCl, MgO, Agrimins bultos 20 80.000 1.600.000

HERBICIDAS Glifosato Galón 5 55.000 275.000

FUMIGANTE Basamid Bolsa (1kg) 10 30.000 300.000

MATERIA ORGÁNICA Gallinaza Bulto de 50 Kg 20 10.000 200.000

NEMATICIDA Rugby Bolsa (1kg) 10 30.000 300.000

HERRAMIENTAS Palín, pala, machete, lima, etc unidades 10 15.000 150.000

BOLSAS DE PLÁSTICO COLOR NEGRO Bolsas para almácigo color negro (16” largo X 14” ancho) de 6 kg de capacidad Unidad (1.000) 4 400.000 1.600.000

BOLSAS DE PLÁSTICO COLOR NEGRO Bolsas para almácigo color negro (17 X 23) de 62 kg de capacidad Unidad (1.000) 2 350.000 700.000

BOLSAS DE PAPEL PARA SECAR MUESTRAS EN ESTUFA

Bolsas de papel para estufa Unidad (100) 30 15 450.000

TOTAL 5.575.000

MATERIALES E INSUMOS DE OFICINA

ELEMENTO Y/O SERVICIO

DESCRIPCIÓN TÉCNICA UNIDAD DE

MEDIDA CANTIDAD

PRECIO UNITARIO ESTIMADO INCLUIDO

IVA 16% 2010 TOTAL DINERO

Memoria USB 4GB Und. 1 $ 45.000 $ 45.000

Cinta transparente Cinta ancha transparente tipo 3m ref:301 o su equivalente

Und. 5 $ 3.134 $ 15.671

Cinta de enmascarar cinta de enmascarar de 1" de ancho 40mm envueltos en tubo de cartón (cinta adhesiva de color beige)

Und. 10 $ 1.850 $ 18.499

Cosedora de escritorio

Cosedora para grapa No. 26/6, con capacidad máxima de 200 grapas, con profundidad de entrada horizontal en el papel de 0-65 mm, con capacidad de cosido para 25 hojas. Parte de cargador metálica niquelado metalico negro

Und. 1 $ 13.394 $ 13.394

Cuaderno argollado Cuaderno Argollado de 100 hojas Cuadriculado grande 20x 27.5 hojas en papel bond, y tapadura plastificada

Und. 5 $ 2.963 $ 14.813

Fólder AZ

Fólder AZ tamaño carta, color azul , pasta de cartón duro, plastificado con sistema de sujeción interno remachado a cuatro partes con dos ganchos de apertura y cierre por medio de palanca.

Und. 5 $5.426 $ 17.129

Guías clasificadoras Guías Clasificadoras Plásticas de la A-Z tamaño carta con pestaña impresa con letra de A a la Z

Und. 1 $ 9.707 $ 9.707

Papel higiénico Doble hoja Rollo 5 $ 1.000 $ 5.000

Papeleras plásticas Para escritorio Und. 1 $ 10.000 $ 10.000

TOTAL $ 149.213

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