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13. Resultados Universidad de las Américas Puebla 49 13 RESULTADOS 13.1 PREPARACIÓN DE LOS EXTRACTOS DE LA PLANTA 13.1.1 RENDIMIENTOS Y CARACTERÍSTICAS DE LOS EXTRACTOS A partir de 2.186 kilogramos de madera previamente cortada y triturada, se obtuvo un extracto seco con: seis volúmenes de hexano, seis volúmenes de cloroformo, seis volúmenes de acetato de etilo, seis volúmenes de etanol y seis volúmenes de agua, las características del extracto y su peso se muestran en la tabla 9. Tabla 1. Características físicas y pesos de los extractos obtenidos de Bursera linanoe. Disolvente Peso (g) Características físicas Hexano 16.3699 Aceite amarillo Cloroformo 59.3274 Aceite café Acetato de etilo 14.0434 Aceite café Etanol 33.51 Aceite verde Agua ND Aceite café oscuro ND (No determinado) Para la muestra de agua no fue posible obtener el peso seco total. 13.2 PREPARACIÓN DE LAS LEVADURAS La identificación de las tres cepas que se utilizaron en este proyecto se realizó mediante pruebas bioquímicas (ID 32 C mini API® de Biomérieux) (figura 14 y tabla 10) y se confirmó usando las galerías mini API® de Biomérieux (ver figuras 15 y 16), con las cuales también se pudo hacer un antibiograma que se muestra en la tabla 11. Además se realizaron pruebas para la observación de las levaduras como la prueba de Gram para la morfología microscópica, la prueba de catalasa y la morfología macroscópica en agar Dextrosa Sabouraud. La prueba de catalasa dio positivo y la prueba de Gram se muestra en la figura 17 donde se pueden observar células aisladas y otras gemando. Las figuras 18-20
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13 RESULTADOS
13.1 PREPARACIÓN DE LOS EXTRACTOS DE LA PLANTA
13.1.1 RENDIMIENTOS Y CARACTERÍSTICAS DE LOS EXTRACTOS
A partir de 2.186 kilogramos de madera previamente cortada y triturada, se obtuvo un
extracto seco con: seis volúmenes de hexano, seis volúmenes de cloroformo, seis
volúmenes de acetato de etilo, seis volúmenes de etanol y seis volúmenes de agua, las
características del extracto y su peso se muestran en la tabla 9.
Tabla 1. Características físicas y pesos de los extractos obtenidos de Bursera
linanoe.
Disolvente Peso (g) Características físicas
Hexano 16.3699 Aceite amarillo
Cloroformo 59.3274 Aceite café
Acetato de etilo 14.0434 Aceite café
Etanol 33.51 Aceite verde
Agua ND Aceite café oscuro
ND (No determinado) Para la muestra de agua no fue posible obtener el peso seco total.
13.2 PREPARACIÓN DE LAS LEVADURAS
La identificación de las tres cepas que se utilizaron en este proyecto se realizó mediante
pruebas bioquímicas (ID 32 C mini API® de Biomérieux) (figura 14 y tabla 10) y se
confirmó usando las galerías mini API® de Biomérieux (ver figuras 15 y 16), con las
cuales también se pudo hacer un antibiograma que se muestra en la tabla 11. Además se
realizaron pruebas para la observación de las levaduras como la prueba de Gram para la
morfología microscópica, la prueba de catalasa y la morfología macroscópica en agar
Dextrosa Sabouraud. La prueba de catalasa dio positivo y la prueba de Gram se muestra en
la figura 17 donde se pueden observar células aisladas y otras gemando. Las figuras 18-20
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muestran las cepas en el agar Dextrosa Sabouraud incubada a 35°C por 24 hrs con las
colonias de color blanco a crema redondas de consistencia butirosa con borde entero
circular, elevación convexa con una superficie lisa y lo que las hace diferentes es el tamaño
de las colonias, el cual es: 0.5 mm para la cepa 7 de C. albicans, 0.2 mm para la cepa de C.
melibiosica y 0.3 mm para la cepa 4 de C. albicans.
Figura 1: Ejemplo de las pruebas bioquímicas realizadas a las tres distintas cepas
para su identificación.
Figura 2. Antibiograma de la cepa de C. melibiosica con la Galería mini API® de
Biomérieux ATB Fungus.
GAL ACT SAC NAG LAT ARA CEL RAF MAL TRE 2KG MDG SOR XYL RIB
C. albicans + + + + + - - - + + + + + + -
C. melibiosica + - + + - - + + + + + - + + -
Tabla 2: Resultados de las pruebas bioquímicas de las cepas de Candida.
GLY RHA PLE ERY MEL GRT MLZ GNT LVT MAN LAC INO GLU SBE GLN
C. albicans - - + - - - - - - + - - + - +
C. melibiosica - - + - - - + + - + - - + - -
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Figura 3. Antibiograma de las cepas de C. albicans con la Galería mini API® de
Biomérieux ATB Fungus.
Tabla 3. Antibiograma realizado a las tres cepas del estudio.
Nombre del antifúngico Cepa de C.
melibiosica
Cepa 4 de C.
albicans
Cepa 7 de C.
albicans
Anfotericina B S S S
5-Fluorocitosina S S S
Nistatina S R R
Miconazol S S S
Econazol S R S
Ketoconazol S S S
Figura 4. Prueba de Gram para las levaduras.
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Figura 5. Cepa 4 de C. albicans en agar Dextrosa Sabouraud.
Figura 6. Cepa de C. melibiosica en agar Dextrosa Sabouraud.
Figura 7. Cepa 7 de C. albicans en agar Dextrosa Sabouraud.
13.3 PRUEBAS DE ACTIVIDAD ANTIMICÓTICA
13.3.1 EXTRACTOS
Los extractos (antes de ser sometidos a separación por cromatografía en columna) fueron
probados para verificar su actividad antimicótica (ver figuras 54-56 en apéndice A). De
estos los que tuvieron un resultado positivo contra las levaduras son: el extracto hexánico y
el de acetato de etilo.
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El efecto de inhibición contra la levadura se confirma por su halo de inhibición alrededor
del disco con el extracto impregnado, que se representa en la figura 21:
Figura 8. Imagen que representa el halo de inhibición en la prueba contra las
levaduras.
13.3.2 DISOLVENTES
Con la finalidad de establecer que no eran los disolventes empleados los responsables de la
actividad antimicótica en cada extracto y sus fracciones, se procedió a probar a cada uno de
ellos, obteniéndose la figura 22. Se puede observar que ningún disolvente muestra un halo
de inhibición.
Figura 9. Discos con disolvente de hexano, cloroformo, acetato de etilo y etanol.
13.3.3 CONTROL POSITIVO
Como control positivo se utilizó el antifungico ketoconazol con la finalidad de establecer
como es la inhibición del crecimiento de las levaduras por medio de un antimícotico
reconocido; se utilizaron 20 mg/mL. El resultado de la prueba se confirma con los halos de
inhibición que se presentan en la tabla 12 (ver figuras 57-59 en apéndice A).
Hex
CHCl3 AcOEt
EtOH
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Tabla 4. Halos de inhibición de las distintas cepas probadas con el control
positivo que es ketoconazol.
Compuesto
Halo de inhibición cepa 4
de Candida albicans
(mm)
Halo de inhibición
Candida melibiosica
(mm)
Halo de inhibición
cepa 7 de
Candida albicans
(mm)
Ketoconazol 20 50 20
13.3.4 EXTRACTO HEXÁNICO
El extracto hexánico como se explicó en la sección de metodología, fue purificado por
cromatografía en columna, obteniéndose 38 diferentes fracciones las cuales se probaron
contra las distintas levaduras (ver figuras 60-62 apéndice A).
De todas las fracciones probadas solo las mostradas a continuación dieron resultados
positivos, esto se evidenció debido a la formación del halo de inhibición. Los milímetros de
inhibición se muestran en la tabla 13.
Tabla 5. Fracciones del extracto hexánico con efecto positivo y sus halos de
inhibición contra las levaduras.
Muestra Fracción
Halo de inhibición
Candida albicans
de la cepa 4 (mm)
Halo de
inhibición
Candida
melibiosica (mm)
Halo de inhibición
Candida albicans de
la cepa 7 (mm)
7 Hexano-Cloroformo
4:6 - 7 -
8 Hexano-Cloroformo
3:7 - 19 9
11 Cloroformo - 7 -
12 Cloroformo-Acetato
de etilo 9:1 - 7 -
13 Cloroformo-Acetato
de etilo 8:2 - 8 -
15 Cloroformo-Acetato
de etilo 6:4 - 9 -
18 Cloroformo-Acetato
de etilo 3:7 - 9 -
19 Cloroformo-Acetato - 8 -
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de etilo 2:8
20 Cloroformo-Acetato
de etilo 1:9 8 12 -
21 Acetato de Etilo 8 - -
22 Acetato de Etilo-
Etanol 9:1 11 8 -
23 Acetato de Etilo-
Etanol 8:2 10 11 -
El halo de inhibición representado por la falta de crecimiento alrededor del disco
impregnado con el extracto, se indica en la figura 23.
Figura 10. Imagen que representa el halo de inhibición formado en una prueba con
efecto positivo contra las levaduras.
13.3.5 EXTRACTO OBTENIDO CON ACETATO DE ETILO
El extracto obtenido con acetato de etilo, como se explicó previamente en la sección de
metodología, fue purificado por cromatografía en columna, obteniéndose diferentes
fracciones, las cuales se probaron contra las distintas levaduras (ver figuras 63-65 en
apéndice A). De las fracciones probadas las mostradas en la tabla 14 dieron resultados
positivos.
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Tabla 6. Fracciones del extracto de acetato de etilo con efecto positivo y sus
halos de inhibición contra las levaduras.
Se puede comprobar el halo de inhibición alrededor del disco impregnado con el extracto,
que se muestra en la figura 24.
Figura 11. Imagen que representa el halo de inhibición formado en la prueba contra
las levaduras.
Muestra Fracción
Halo de inhibición cepa 4 de Candida albicans
(mm)
Halo de inhibición Candida
melibiosica (mm)
Halo de inhibición cepa 7 de Candida albicans
(mm)
1 Hexano - 7 - 5 Hexano-Cloroformo 6:4 - 10 - 6 Hexano-Cloroformo 5:5 9 8 10 7 Hexano-Cloroformo 4:6 14 - - 8 Hexano-Cloroformo 3:7 15 8 - 9 Hexano-Cloroformo 2:8 8.5 14 11
10 Hexano-Cloroformo 1:9 - 8 - 11 Cloroformo 8 15 8.5
12 Cloroformo-Acetato de Etilo 9:1
12 12 15
13 Cloroformo-Acetato de Etilo 8:2
15 22 20
14 Cloroformo-Acetato de Etilo 7:3
- 24 -
15 Cloroformo-Acetato de Etilo 6:4
- 8 -
16 Cloroformo-Acetato de Etilo 5:5
- 13 -
17 Cloroformo-Acetato de Etilo 4:6
8 - 9
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13.4 SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
13.4.1 EXTRACTO HEXÁNICO Y EXTRACTO OBTENIDO CON ACETATO
DE ETILO
La separación por cromatografía en columna del extracto hexánico y/o de acetato de etilo,
permitió obtener las fracciones correspondientes a los distintos cambios de polaridad desde
hexano, pasando por cloroformo y acetato de etilo, hasta llegar a etanol. En la figura 25 se
muestra la columna empleada para la separación y en la figura 26 se muestra un
acercamiento de la columna con la polaridad CHCl3 donde se aprecia la separación de
compuestos.
Figura 12. Cromatografía en
columna de los extractos de la
planta B. linanoe.
Figura 13. Imagen de la columna al
separarse distintas fracciones de CHCl3.
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13.5 ANÁLISIS POR RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR
El análisis de las muestras se realizó por resonancia magnética nuclear de protón (RMN-
1H) y de carbono 13 (RMN-
13C).
13.5.1 EXTRACTO HEXÁNICO
En el espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógenos, que corresponde al extracto
hexánico, (ver figura 27), se observan diferentes señales. Los picos que se observan
muestran que no tiene un solo compuesto sino que contiene una mezcla de compuestos que
fueron separados por cromatografía en columna.
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Figura 14. Espectro resonancia magnética de hidrógeno del extracto de hexano.
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13.5.1.1 SEPARACIÓN DE COMPUESTOS DEL EXTRACTO HEXÁNICO
Del extracto hexánico se pudieron asilar y purificar dos compuestos de las fracciones 7 y 8
que dieron resultado positivo sobre las levaduras. Los espectros de resonancia magnética
nuclear de hidrógeno (figuras 32 y 33) y muestran las señales correspondientes a linalol y
acetato de linalol.
La presencia de estos compuestos se confirmó al comparar las señales del espectro de la
muestra con los espectros de resonancia magnética nuclear de hidrógeno y de carbono 13
de linalol y acetato de linalool puros (figuras 34-37).
En la RMN-1H de la muestra 7 se observan picos característicos del compuesto linalol. El
RMN-1H del compuesto puro de linalol muestra las señales características de este
compuesto, los cuales se pueden observar en la figura 34. En la figura 28 se puede observar
la estructura química del linalol donde se enumeran sus hidrógenos y se muestran sus
desplazamientos químicos. Estos hidrógenos se marcan en el espectro del compuesto de
linalol puro enumerando cada hidrógeno con su señal correspondiente.
Figura 15. Estructura química del
linalol con numeración de
hidrógenos.
1. 1.59 ppm
2. 1.67 ppm
3. 5.12 ppm
4. 1.96 ppm
5. 1.56 ppm
6. 1.54 ppm
7. 1.26 ppm
8. 5.91 ppm
9. 5.04 ppm
10. 5.24 ppm
11. 2.38 ppm
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Las señales de los hidrógenos se observaron en los espectros por lo que se procedió a
obtener el espectro de resonancia magnética nuclear de carbono 13, en la cual se observan
claramente todas las señales de los carbonos del linalol, los cuales se muestran en la figura
29 donde se enumeran los carbonos de la estructura química y se muestran sus
desplazamientos químicos. Estos carbonos se muestran en el espectro del compuesto de
linalol puro enumerando cada carbono con su señal correspondiente, se pueden observar en
la figura 35.
Figura 16. Estructura química del
linalol con numeración de
carbonos.
1. 25.59 ppm
2. 17.56 ppm
3. 131.48 ppm
4. 124.38 ppm
5. 22.72 ppm
6. 42.05 ppm
7. 73.26 ppm
8. 27.58 ppm
9. 145.00 ppm
10. 111.57 ppm
Las señales de los carbonos fueron confirmados en el espectro de RMN-13
C donde se
observan cada uno de los carbonos por su desplazamiento químico.
En el espectro de RMN-1H de la muestra 8 se observan señales características del
compuesto de acetato de linalol. El espectro de RMN-1H del compuesto puro de acetato de
linalol muestra todos los picos característicos del esqueleto terpénico y además la señal del
acetato (ver figura 36). En la figura 30 se puede observar la estructura química del acetato
de linalol donde se enumeran sus hidrógenos y se muestran sus desplazamientos químicos.
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Figura 17. Estructura química del
acetato de linalol con numeración
de hidrógenos.
1. 1.58 ppm
2. 1.67 ppm
3. 5.10 ppm
4. 1.96 ppm
5. 1.56 ppm
6. 1.53 ppm
7. 1.26 ppm
8. 5.95 ppm
9. 5.08 ppm
10. 5.19 ppm
11. 2.05 ppm
Las señales de los hidrógenos fueron observadas en el espectro de RMN-1H. El espectro de
resonancia magnética nuclear de carbono 13, muestra las señales de todos los carbonos del
acetato de linalol (ver figura 37). La figura 31 muestra la estructura química del acetato de
linalol con la numeración de los carbonos y sus desplazamientos químicos.
Figura 18. Estructura química del
acetato de linalol con numeración
de carbonos.
1. 25.62 ppm
2. 17.51 ppm
3. 131.70 ppm
4. 123.75 ppm
5. 22.28 ppm
6. 42.21 ppm
7. 82.87 ppm
8. 29.64 ppm
9. 141.75 ppm
10. 113.05 ppm
11. 170.01 ppm
12. 22.12 ppm
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Figura 19. Espectro de resonancia magnética de hidrógeno de la fracción 7 obtenida por
cromatografía en columna del extracto hexánico.
13. Resultados
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13. Resultados
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Figura 20. Espectro de resonancia magnética de hidrógeno de la fracción 8
obtenida por cromatografía en columna del extracto hexánico.
13. Resultados
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13. Resultados
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Figura 21. Espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del linalol.
8
10 9
3
11
4
2
1
5
6
7
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9
10 4
1
5 6
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Figura 22. Espectro de resonancia magnética nuclear de carbono 13 del linalool.
4 2
1 5
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Figura 23. Espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del Acetato de linalol.
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12 Disolvente
(CHCl3)
deuterado 9
3
10
4
7
8
1
5
2
6
11
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Figura 24. Espectro de resonancia magnética nuclear de carbono 13 del Acetato de linalol.
13. Resultados
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Del extracto hexánico, se pudo asilar y purificar otro compuesto que se obtuvo de las
fracciones héxanicas cristalizadas. Su espectro de resonancia magnética nuclear de
hidrógeno y de carbono (ver figura 39 y 40) se muestran a continuación y estos revelan
señales correspondientes a un terpeno que fue comparado con los datos de la literatura y
corresponde al acetato de β-amirina.
La estructura del acetato de β-amirina se muestra en la figura 38 así como la numeración
correspondiente (Ballestrin, 2006). La tabla 15 muestra la comparación de los datos de
RMN-13
C experimentales con los obtenidos de la literatura (Seo, et al, 1957).
Figura 25. Estructura del acetato de β-Amirina.
Tabla 7. Desplazamientos químicos experimentales de la estructura de β-
Amirina comparada con los datos obtenidos de la literatura.
Carbonos
Muestra 408,
415 y 417
(ppm)
α-Amirina
(ppm)
Acetato de α-
Amirina
(ppm)
β-Amirina
(ppm)
Acetato de β-
Amirina
(ppm)
1 38.223 38.7 38.5 38.4 38.2
2 23.578 27.2 27.0 23.6 23.6
3 80.935 78.8 78.9 80.7 80.7
4 37.670 38.7 38.7 37.6 37.6
5 55.258 55.2 55.1 55.3 55.3
6 18.143 18.3 18.3 18.3 18.3
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Universidad de las Américas Puebla 77
7 32.802 32.9 32.6 32.8 32.6
8 39.462 40.0 39.7 40.1 39.7
9 47.418 47.7 47.6 47.6 47.6
10 36.883 36.9 37.0 36.8 36.8
11 23.272 17.4 23.4 17.5 23.4
12 125.701 124.3 121.7 124.1 121.5
13 137.942 139.3 145.0 139.4 144.9
14 41.866 42.0 41.7 42.1 41.7
15 28.052 28.7 28.3 28.7 28.3
16 27.950 26.6 26.2 26.7 26.2
17 32.802 33.7 32.5 33.8 32.5
18 47.418 58.9 47.2 59.0 47.2
19 39.462 39.6 46.8 39.7 46.8
20 30.587 39.6 31.1 39.7 31.1
21 30.587 31.2 34.8 31.3 34.8
22 37.670 41.5 37.2 41.5 37.1
23 28.052 28.1 28.1 28.1 28.1
24 16.700 15.6 15.5 16.8 16.8
25 15.534 15.6 15.5 15.7 15.7
26 16.700 16.8 16.8 16.8 16.8
27 23.272 23.3 26.0 23.2 26.0
28 28.052 28.1 27.3 28.1 27.0
29 23.272 23.3 33.2 23.2 33.4
30 23.578 21.3 23.6 21.4 23.6
OCOMe 21.188 - - 21.2 21.2
OCOMe 171.095 - - 170.4 170.4
Gracias a esta comparación de desplazamientos químicos se pudo confirmar que el
compuesto en cuestión se trataba del acetato de β-Amirina.
13. Resultados
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13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 79
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 80
Figura 26. Espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del acetato de β-amirina.
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 81
13. Resultados
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Figura 27. Espectro de resonancia magnética nuclear de carbono 13 del acetato de β-amirina.
13. Resultados
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13.5.2 EXTRACTO OBTENIDO CON ACETATO DE ETILO
El espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del extracto obtenido con acetato
de etilo (ver figura 42), presenta diferentes señales que indican que es una mezcla de
compuestos, por lo que fueron separados por cromatografía en columna obteniéndose
diversas fracciones.
13.5.2.1 SEPARACIÓN DE COMPUESTOS DEL EXTRACTO DE ACETATO
DE ETILO
La fracción aislada de la muestra de acetato de etilo con la polaridad Hex-CHCl3 3:7
mostró actividad sobre las levaduras. Su espectro de resonancia magnética nuclear de
hidrógeno (ver figura 43) muestra señales características de la estructura de un esterol.
La estructura del esterol se confirmó por comparación de los datos de RMN de 1H y
13C
con los datos descritos en la literatura para el β-Sitosterol (Martins, et al, 2004).
Figura 28. Estructura del β-Sitosterol.
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 84
El espectro de RMN-1H del β-sitosterol aislado muestra señales características que se
pueden observar en la figura 43, el desplazamiento químico de 5.3 ppm corresponde a los
hidrógenos del doble enlace de los carbonos 5 y 6. Además se muestra el protón del CH
base de OH en 2.2 ppm.
La figura 41 muestra la estructura química del compuesto donde se enumeran los carbonos.
La figura 44 muestra el espectro de RMN-13
C de β-sitosterol obtenido donde se observan
las señales de los carbonos del esterol.
Estos desplazamientos químicos fueron comparados con un estudio que realizó Kamboj, et
al., en el 2011, donde por métodos espectrométricos identificó el compuesto β-sitosterol
pero de extractos con éter de petróleo de partes aéreas de la planta Ageratum conyzoides
(asteraceae).
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 85
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 86
Figura 29. Espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del extracto de acetato de etilo.
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 87
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 88
Figura 30. Espectro de resonancia magnética nuclear de hidrógeno del β-sitosterol.
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 89
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 90
Figura 31. Espectro de resonancia magnética nuclear de carbono 13 del β-sitosterol.
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 91
13.6 PRUEBAS DE ACTIVIDAD ANTIMICÓTICA DE
COMPUESTOS PUROS
Los compuestos puros se probaron contra las levaduras. Los compuestos de linalol y
acetato de linalol mostraron un efecto positivo contra las levaduras (figuras 45-47), los
halos de inhibición se muestran en la tabla 16.
Figura 32. Cepa 4 Candida albicans con las pruebas de linalol (a la izquierda) y
acetato de linalol (a la derecha).
Figura 33. Candida melibiosica con las pruebas de linalol (a la derecha) y acetato de
linalol (a la izquierda).
Figura 34. Cepa 7 Candida albicans con las pruebas de linalol (a la derecha) y acetato
de linalol (a la izquierda).
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 92
Tabla 8. Halos de inhibición para los compuestos puros.
Compuesto
Halo de inhibición
cepa 4 de
Candida albicans (mm)
Halo de inhibición
Candida melibiosica (mm)
Halo de inhibición cepa
7 de
Candida albicans (mm)
Linalol 9 12 9
Acetato de
Linalol 9 12 9
Los compuestos de β-sitosterol y acetato de β-Amirina también fueron probados contra las
levaduras. El acetato de β-Amirina presentó un resultado negativo; y el β-sitosterol tuvo un
efecto ligeramente positivo solo en la cepa más sensible que es la cepa de C. melibiosica
con un halo de inhibición de 7 mm, en las demás cepas tuvo un efecto negativo (figuras 48-
52).
Figura 35. Cepa 4 C. albicans con las pruebas de β-sitosterol (a la izquierda).
Figura 36. Cepa 4 C. albicans con las pruebas de β-Amirina (a la derecha).
Figura 37. C. melibiosica con las pruebas de β-sitosterol (a la izquierda)
Figura 38. C. melibiosica con las pruebas de β-Amirina (a la derecha).
Figura 39. Cepa 7 C. albicans con las pruebas de β-sitosterol (a la derecha) y β-
Amirina (a la izquierda).
13. Resultados
Universidad de las Américas Puebla 93
13.7 PRUEBA DE CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA DE
COMPUESTOS PUROS
A los compuestos puros linalol y acetato de linalol se les realizó la prueba de CMI y sus
resultados se muestran en la tabla 17. La figura 53 muestra la micro-placa donde fue
realizada la prueba y en la figura 54 se puede observar si hay crecimiento o no en las
distintas concentraciones a las que fueron evaluados los compuestos.
Tabla 9. Concentración mínima inhibitoria (CMI) para cepas de Candida.
Compuesto puro
Cepa de C. melibiosica (mg/mL)
Cepa 4 de C. albicans (mg/mL)
Cepa 7 de C. albicans (mg/mL)
Linalol 2 3 3
Acetato de linalol
2 3 5
Figura 40: Micro-placa de Elisa.
Figura 41. Efecto fungicida de los compuestos de linalol y acetato de linalol sobre las cepas de
Candida. A; El círculo indica la CMI en las levaduras. B; Control negativo y control positivo
(Ketoconazol).
A
B
