UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo...

12
CARIOTIPO DEL CAMARÓN DE RÍO Cryphiops caementarius MOLINA 1872 (DECAPODA, PALAEMONIDAE). Dra. Orlinda Villanueva Valverde M.Sc. Walter Eduardo Reyes Avalos M.Sc. Jesús Ruíz Baca Blga. Acuic. Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO ACADEMICO DE BIOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA INFORME DE INVESTIGACION

Transcript of UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo...

Page 1: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

CARIOTIPO DEL CAMARÓN DE RÍO Cryphiops caementariusMOLINA 1872 (DECAPODA, PALAEMONIDAE).

Dra. Orlinda Villanueva ValverdeM.Sc. Walter Eduardo Reyes AvalosM.Sc. Jesús Ruíz BacaBlga. Acuic. Sorayda Mendoza EspinozaEst. Elvis David Pardo Vásquez

AUTORES :

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTAFACULTAD DE CIENCIASDEPARTAMENTO ACADEMICO DE BIOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA

INFORME DE INVESTIGACION

Page 2: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

INTRODUCCIÓN

Murofishi et al. (1984) y Murofushi y Degushi (1990)

fueron observados por unmétodo clásico deaplastamiento seccionalgónada

(Orian, 1957, Bachmann, 1973 y Roberts, 1969)

La mayoría de los cromosomas son pequeñas y son metacéntricos y submetacéntricos, lo que los hace difíciles de diferenciar

Vishnoi, (1972). Por lo tanto, la discrepancia en el número decromosomas de la misma especie ha sido reportada

Page 3: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

Vishnoi, (1972),

mientras que el camarón de agua dulce Macrobrachium siwalikensisy la langosta americana, Homarus americanus, tienen 106 y 138 cromosomas respectivamente

Mittal (1971) y Roberts, (1969)

dos especies de cangrejo de agua dulceAcanthotelpusa martensi y Paratelphusa jacquementitienen 88 cromosomas y 132, respectivamente

Niyama, (1952).(2n = 376) se ha reportado en el cangrejoActacus. Trawbridgii,

Los cromosomas de Penaeus japonicus (Marsupenaeus) estudiados por este método fueron de 86 en el número diploide

El método de usar la regeneración de blastema parece tener varias ventajas sobre los publicados adoptadas para los decápodos

Damrongphol et al. (1991)

han reportado que el cariotipo de Macrobrachium rosenbergiiconsiste de 118 cromosomas constituido por 6 pares de cromosomas grandes, 26 pares medianos, 15 pares pequeños y 12 pares muy pequeños, siendo la mayoría submetacéntricos y metacéntricos

Page 4: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

PROBLEMA

¿Cuál es el cariotipo del camarón de río C. caementarius?

HIPÓTESIS

Implícita

OBJETIVO GENERAL

Determinar el cariotipo del camarón de río C. caementarius Molina 1872 (Decapoda, Palaemonidae).

OBJETIVOS ESPECIFICOS

• Determinar el número de cromosomas del camarón de río C. caementarius.

• Identificar las clases de cromosomas de C. caementarius.

Page 5: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

MATERIAL Y MÉTODOS

Se trabajaron con 10 ejemplares de camaronesadultos de C. caementarius, los que fueroncapturados del Rio Pativilca ubicado a 10°39´52.19”S 7°39´31.04” O, Cuenca Pativilca,Provincia de Barranca, Región Lima, Perú

Luego se trasladaron al Laboratorio de Bioquímicade la Facultad de Ciencias de la UniversidadNacional del Santa, en recipientes plásticos.Fueron acondicionados en acuarios de 60 litros, ymantenidos con aireación constante.

Page 6: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

la técnica de Lacra et al. (1997).

fueron inyectados intramuscularmente con unasolución de colchicina al 0,025% y se dejóreposar a los organismos por un periodo de 24horas, posteriormente se sacrificó a losespecímenes y se extrajeron las muestra delblastema y del hepatopáncreas

se bañaron con una solución de KCl, con una pipeta Pasteur se homogenizó

con una pipeta Pasteur se homogenizó la muestra y se agregó la suspensión a tubos de ensayo y se incubó en baño Maria a 37º C por un periodo de 30 minutos

las muestras fueron centrifugadas a 1000 rpm durante 10 minutos y se eliminó el sobrenadante, posteriormente se agregó el fijador carnoy (Etanol-ácido acético 3:1) y se dejó reposar por un periodo de 15 minutos.

Page 7: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

Las muestras se centrifugaron a 800 rpm y se eliminó el sobrenadante (se repitió el procedimiento 2 veces), se agregó 3 ml de solución carnoy y se homogenizó la muestra.

.Para la observación en el microscopio se realizó la técnica del goteo sobre láminas porta objetos de una altura de 60 cm a 80 cm, se dejó enfriar a temperatura ambiente

se coloreo 60 láminas con orceina acética, de las cuales en siete se observaron cromosomas utilizándose, un microscopios ópticos marca olympus y se fotografió las muestras utilizando una cámara digital

Page 8: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

De 60 muestras analizadas seobservaron diez placas metafasicaen muestras del blastema yhepatopáncreas de camarónprocedente del río pativilca

RESULTADOS

Fig.4: placas metafasica de los cromosomas de C. caementarius (muestra del blastema)

Fig.5: placa metafasica de loscromosomas de C. caementarius (muestrade hepatopancreas)

Page 9: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

DISCUSIONLos análisis cromosómicos son de granimportancia para la identificación deespecies y/o en la diferenciación deespecies muy relacionadas

taxonómicos, sistemáticos y evolutivos, entre otros.

emplear la técnica de Lacra et al. (1997)debemos tener en cuenta que los datoscromosómicos no pueden ser interpretadosaisladamente sino integrados con otroscaracteres, fundamentalmente para establecercaracterísticas cariotípicas Saez et al. (1978)

(Fig. 4 y 5) en esta fase, se observa los cromosomas, donde la mayoría decromosomas son metacéntricos, submetacéntricos, acrocentricos, sinembargo fue difícil diferenciarlos y realizar el conteo debido a su pequeñotamaño. Tal como obtuvieron en sus resultados Roberts, (1969).

Page 10: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

la metodología usada, en este trabajo a sido efectiva, aunque elporcentaje reducido de placas metafásicas indican que se debe ajustarmas el protocolo para Camarón Cryphiops caementarius, esto pudo serdebido a la concentración de Colchicina, ya que estudios realizados porRodríguez (1995), demostraron que a una solución de Colchicina al0.25% en solución de dimetilsulfóxido obtuvo un 85 %.

Page 11: UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA · 2019-02-21 · Sorayda Mendoza Espinoza Est. Elvis David Pardo Vásquez AUTORES : UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

CONCLUSIONES

• El camarón de río C. caementarius presenta cromosomas metacéntricos, submetracéntricos y acrocéntricos.

• No se logró determinar el número de cromosomas debido a su pequeño tamaño.

RECOMENDACIONES

•Desarrollar una mejor técnica de tinción para la cuantificación decromosomas en C. caementarius.•Analizar el cariotipo de C. caementarius en una mayor cantidad deplacas metafasicas.