TRADUCCION N2Vol Current Microbiology. 52 (2006), pp. 182-185 DOI: 10.1007 / s00284-005-0133-8 Actual Microbiology an International Journal Springer Science + Business Media, Inc. 2006Verificacin de la Degradacin de n-alcanos de Diesel Oil por Pseudomonas aeruginosa cepa WATG en microcosmos de suelo Akio Ueno, 1 Mohammad Hasanuzzaman, 2 Isao Yumoto, 3 Hidetoshi Okuyama1 1Laboratory de Biologa Molecular Ambiental, Facultad de Ciencias de la Tierra del Medio Ambiente, la Universidad de Hokkaido, Kita-ku, Sapporo, Hokkaido 060-0810, Japn 2ROM Co. Ltd., Chuo-ku, Sapporo, Hokkaido 064-0804, Japn 3Genomic Recursos y del Medio Ambiente Adaptacin Grupo de Investigacin, Instituto de Investigaciones de la Biofbrica a base de Genoma, del Instituto Nacional de Ciencia Industrial Avanzada y Tecnologa (AIST), Toyohira-ku, Sapporo, Hokkaido 062-8517, Japn Recibido: 20 May 2005 / Aceptado: 24 de octubre 2005 Resumen. La degradacin de los n-alcanos en aceite diesel por cepa Pseudomonas aeruginosa WATG (WATG) fue verificado en microcosmos de suelo. El nivel total de hidrocarburos de petrleo (TPH) la degradacin en dos bioaumentacin muestras fue de 51% y 46% durante 1 semana en microcosmos de suelo sin esterilizar y esterilizados, respectivamente. La degradacin TPH en la bioestimulacin era de nivel de control (15%). La degradacin de TPH en muestras de aireacin limitada se redujo claramente en comparacin con la de desaireacin ilimitada las condiciones tanto esterilizados y no esterilizados. La adicin de WATG en microcosmos de suelo fue acompaada por la produccin dirhamnolipido slo en la presencia de aceite diesel. Estos hallazgos sugieren que degradacin de los n-alcanos en aceite diesel en microcosmos de suelo se vera facilitada por bioaumentacin de WATG, con produccin de dirhamnolipido, y tambin por la participacin de tierra indgena bioestimulante para las bacterias. A medida que se expandi la industrializacin, hidrocarburos de petrleo son una potencialmente mayor fuente de contaminantes en ambientes de agua y suelo [8]. Una vez que el ambiente del suelo est contaminado con hidrocarburos de petrleo, bacterias intrnsecas se cree que degradar y utilizarlos como fuentes de carbono [7]. Sin embargo, si la contaminacin es tan pesada que las bacterias intrnsecas ya no pueden eliminar que efectivamente, algunos procesos de descontaminacin artificiales son obligatorios. Bioestimulacin es una tcnica en la actividad de las bacterias intrnsecas es estimulada por la adicin nutrientes o por aireacin, mientras que en la bioaumentacin, especies o cepas de microorganismos que pueden degradar Xenobitios efectivamente se aaden artificialmente al suelo contaminados con petrleo. Cepa Pseudomonas aeruginosa WATG se considera para ser un buen candidato para la bioaumentacin de petrolera-suelos contaminados, debido a que de manera muy eficiente degrada productos derivados del petrleo, tales como aceite diesel, pesado aceite y queroseno en un medio que contiene lquido mineral sales de [13]. En este artculo, la capacidad de una nica cepa de P. aeruginosa para degradar el petrleo en el ambiente del suelo ha sido examinada, y se discute la prctica utilidad de esta cepa en la bioaumentacin en el suelo medio ambiente. Materiales y mtodos Cepas bacterianas y medios de cultivo. Petrleo-degradantes Cepa de P. aeruginosa WATG (WATG) y P. aeruginosa cepa de tipo JCM5962T cepa de referencia como se describe anteriormente [13]. WATG se deposit al Instituto Nacional de Tecnologa y Evaluacin (NITE) Microorganismos patentes Depositario, Chiba, Japn (No. NITE AP-97). Las caractersticas del suelo fueron descritas anteriormente [2]. Diseo y elaboracin de microcosmos del suelo. Dos gramos de suelo seco se pusieron en 15 ml tubos de ensayo con tapn de rosca o porosos de silicio de rosca. Cuando sea necesario, el suelo se trat en autoclave dos veces en 121_C durante 30 min a esterilizar por completo. En este estudio, Luria-Bertani (LB) medio fue utilizado como fertilizante para el suelo, ya que los resultados preliminares mostraron que WATG exhibi una actividad de degradacin muy bajo de aceite diesel en el suelo suplementado con sales minerales medianas [13]. Para cambiar el tamao del inculo, 250 y 500 lL del pre-cultivo de WATG se inocul a 2 g de los suelos. El primero y el ltimo fueron designados 12,5% -WatG agregado y el 25% -WatG-ad- se aadi a cada microcosmos terreno est a una concentracin final de 1,0% (w / w). Despus mezclar bien con esptulas esterilizados, cada microcosmos del suelo se dej a 20_C durante 1 semana.

AQU VA LA TABLA PERO MI MAQUINA NO TIENE INSTALADO EL FOTOSHOPHAY FIGURAS QUE SE PUEDEN COPIAR Y OTRAS NO, SI TIENES EN TU MAQUINA ESTE PROGRAMA PEGA LA TABLA AQUILa extraccin y el anlisis de hidrocarburos totales de petrleo desde el suelo microcosmos. El procedimiento para la extraccin de petrleo total de hidrocarburos (TPH) de microcosmos del suelo se bas en la Mtodo Agencia de Proteccin Ambiental 3550B [12] con una ligera modificaciones. En pocas palabras, un patrn interno, n-dodecano (NC12) (Kishida Chemical Co. Ltd., Osaka, Japn), se aadi a cada suelo microcosmos para dar una concentracin final de 0,3% (v / w) antes extraccin. Un volumen igual de disolvente, que consiste en diclorometano (DCM) y etanol (1: 1, v / v), se aadi a la tierra muestras y bien mezclado con un mezclador de vrtice. Las muestras fueron luego sonicado en 30_C durante 1,5 h en un bao ultrasnico, seguido de recproco agitacin a 180 rpm a 20 _C durante 2 das. Todas las muestras se centrifugaron a 1000 g durante 10 min. La fase de DCM-etanol que contiene hidrocarburos se retir cuidadosamente de la fase inferior del suelo y se analizaron por gas cromatografa y cromatografa de gases-espectrometra de masas [13]. Para el clculo de la eficiencia de la extraccin de TPH, una solucin de DCM y etanol (1: 1, v / v) que contena 1% (w / v) de aceite diesel era considerada como la eficacia de la extraccin de la muestra 100%. la extraccin eficiencia de cada muestra se calcul comparando la cantidad de TPH extrajo con la de la muestra eficacia de extraccin del 100%. Extraccin y de capa fina anlisis de cromatografa de biotensioactivos. Veinte gramos de suelo suplementado con 12,5% (v / w) Cultivo LB de WATG o control cepa de P. aeruginosa JCM5962T, 12,5% (v / w) de medio LB fresco, y 1% (w / w) de aceite diesel se pusieron en 100 ml de silicio-capsulado matraces y despus se incub a 20 _C durante 1 semana. Biosurfactantes se extrajeron de la tierra de acuerdo con los mtodos de Hori et al. [6] y Sim et al. [10] con algunas modificaciones. el disolvente sistema utilizado era cloroformo, metanol y cido actico (65: 15: 2, v / v / v) [6]. Manchas de lpidos en la placa fueron detectados bajo UV despus de rociar con purimuline, glicolpidos y luego se visualizaron por la A-naftol mtodo [3]. Datos estadsticos analiza. La media del grupo de eficiencia de la extraccin de TPH se analiz mediante la prueba de Kruskal-Wallis en el P