LICEO TÉCNICO BICENTENARIO JUANITA FERNANDEZ SOLARPatricio Castro 1051 Teléfono 2324935 – 2320218 Los Ángeles Web: www.liceotecnicolosangeles.cl

GUIA 5 DE CONTENIDOS “Toma de muestras Vegetales”

Módulo Toma de Muestras

NOMBRE: CURSO: 4° año CPJE. TOTAL: 60 Puntos PJE. OBTENIDO:

OBJETIVO: Preparar las muestras de análisis con los materiales de laboratorio adecuados, vigilando el estado de estos para su posterior uso y utilizando las normas de seguridad necesarias.

CONTENIDOS: Preparación y análisis de muestras vegetales Ficha de control o muestreo

HABILIDADES: Analizar-Argumentar-Aplicar.

INSTRUCCIONES GENERALESEn esta guía encontrarás los contenidos que estudiaremos en esta 5 ° etapa de trabajo en casa, donde se desarrollan los

contenidos de TOMA DE MUESTRAS VEGETALES. Ocupa esta guía para estudiar, ya que, esta vez habrá otra guía exclusiva de actividades la que debes desarrollar y enviar en la fecha indicada. Recuerda que profundizaremos los

contenidos y aclararemos dudas en nuestra clases Virtuales, los días JUEVES a las 15 hrs. Éxito

MATERIAL DE APOYO PDF Instructivo técnico para el muestreo/análisis de semillas certificadas y análisis de semillas corrientes

PDF Actualización de criterios en la evaluación de plántulas de soja.Video explicativa de la Guía https://youtu.be/vscpdwptbaQ

Video explicativo actividad práctica https://youtu.be/L-7Npu6izMc

INTRODUCCIÓN

Un muestreo de vegetación se realiza para obtener información sobre a flora de una zona o determinar la calidad de estos en un respetivo cultivo, se puede tomar muestras completas (la planta entera), parte de ella como hojas o raíces o sus semillas. Para que un muestreo sea representativo debe reflejar con fidelidad la vegetación que se encuentra en la zona de estudio. Es decir tener claro qué tipo de vegetación se está muestreando.

Tenemos que poner especial atención a la hora de elegir la metodología del muestreo ya que el éxito de nuestro estudio depende de ello. El diseño del muestreo de vegetación debe realizarse en función de los objetivos del estudio, las características de la vegetación y los métodos de análisis de datos que se utilizarán. La definición del tipo, número, tamaño y distribución de las unidades muéstrales empleadas constituyen el protocolo de muestreo.

Métodos de muestreos de vegetación

Transectos: Este tipo de muestreo es un método rápido y aporta una gran heterogeneidad. Consiste en un rectángulo dentro de la zona de estudio dónde se miden diferentes parámetros. Las dimensiones de los transectos varían en función del tipo de vegetación y de los parámetros que quieran medirse.

Cuadrantes: Este método es el más utilizado y se obtienen muestreos más homogéneos. Consiste en colocar un cuadrado sobre la vegetación para medir la densidad, cobertura y frecuencia de las plantas. El tamaño del cuadrante depende inversamente a la facilidad y velocidad del muestreo y del tipo de planta y su densidad.

Punto centro cuadrado: Se utiliza mayormente para muestrear árboles y es muy utilizado porque es rápido y necesita poca mano de obra y material. Consiste en medir 4 puntos a partir de un centro y se crean 4 cuadrantes y en cada uno se elige el árbol más cercano al centro. Los parámetros que miden son especies, densidad, DAP y frecuencia.

Puntos de intercepción: Este método para el cálculo de la composición y estructura de la cobertura vegetales rápido y preciso. Mayormente se utiliza para la vegetación de gramíneas y arbustiva.

Muestreos fitosociológicos: Con este método podemos obtener las especies dominantes a través de la cobertura. Primero hay que buscar una zona homogénea e identificar las especies existentes. Luego se debe identificar la especie dominante.

Además en cada parcela se debe identificar una característica geomorfológica o climática que permita agrupar las parcelas. Por último se nombra a cada grupo según la especie dominante y la característica de la asociación.

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Para que cualquier tipo de muestreo sea representativo se deben realizar el mayor número de réplicas posibles. Para conocer el número de réplicas necesario se utilizan modelos matemáticos pero en la mayoría de ocasiones esto viene condicionado por el presupuesto del estudio.

TOMA DE MUESTRAS DE PLANTAS Y HOJASPara la obtención de la muestra, se deben definir previamente:

Momento de muestreo (estado fenológico del cultivo) Órgano/s a muestrear (hoja, hoja y pecíolo, pecíolo, etc.) Firma del nutriente en la planta Número de individuos a muestrear

La variación en la concentración de nutrientes con el tiempo y entre órganos de la planta hace necesario definir el momento de muestreo y órgano a ser muestreado, siendo el número de individuos generalmente alto. A continuación se presentan datos para algunos análisis:

Muestreo tejido vegetal para análisis químico

La capacidad de la planta para absorber nutrientes en un medio ambiente se refleja en la concentración de éstos de la planta en cualquier momento de su ciclo vegetativo. Las dos técnicas, ensayo de suelos y análisis de tejido vegetal, pueden evaluar de manera efectiva, el ambiente nutricional suelo – planta. El procedimiento de muestreo, como en los casos anteriores, dependerá también del objetivo del estudio y en lo posible debe consultarse a un técnico para asegurar que la toma de muestras del cultivo en particular corresponda a los requerimientos previstos. Aquí se presentan algunas instrucciones generales para el muestreo de tejido vegetal:

1. Elección de la parte de la planta a muestrear: En realidad, cualquier parte de la planta puede ser tomada y analizada en el laboratorio; sin embargo, son las hojas las que son consideradas como mejores indicadoras, ya que es en ellas donde se concentra la producción de "fotosintatos", o sea la principal actividad fisiológica de la planta, por lo tanto, cualquier problema que tenga la planta, probablemente se reflejará, en primera instancia, en este órgano. Además, es necesario tener en cuenta que la concentración de los elementos en las hojas varía de acuerdo con factores como edad fisiológica de la hoja, posición en la planta, parte de la hoja, etapa del cultivo, efecto de factores ambientales y de suelo, etc.

La cantidad de hojas frescas que se requiere es de 200 gramos, de manera que pueda ofrecer al menos 25 g de materia seca para el análisis. Esta cantidad resultará de mezclar y homogeneizar las submuestras (entre 20 y 50g de cada una) que conforman una muestra representativa.

2. Número de muestras: Los criterios de definición de la "unidad de muestreo" son muy parecidos a los aplicados en el muestreo de suelos; en el caso del muestreo de plantas, el número de muestras obedece generalmente a la extensión del cultivo y la variedad de condiciones ambientales a las cuales se encuentren sometidas las plantas.

3. Almacenamiento y preservación: Las muestras de tejido vegetal no deben ser lavadas. Se aconseja empacar las hojas secas al aire en bolsas de plástico perforadas, debidamente identificadas, y no en bolsas plásticas para evitar que el agua que se produce durante el proceso de respiración del tejido ayude a descomponerlas y dañar la muestra.

Muestreo tejido vegetal para análisis biológicos

1. Tome porciones de las partes afectadas de la planta o de ser posible la planta completa en su sustrato original. La planta o sus partes deben encontrarse vivas aunque estén afectadas por la enfermedad.

2. Si se trata de partes vegetales, introdúzcalas en una bolsa plástica acompañada de una mota de algodón humedecido.

3. Selle la bolsa y márquela.4. Envíela lo más pronto posible al laboratorio.5. Al llegar solicite la presencia del profesional en biología y bríndele información

acerca del cultivo, las condiciones ambientales en que han sido observadas las alteraciones, y los signos que presenta la planta.

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TOMA DE MUESTRAS DE SEMILLASLa extracción de muestras de semillas para el análisis según el nuevo reglamento se hará siguiendo las indicaciones generales de la "Norma Chilena NCH531 Of 85 Granos alimenticios. Extracción de Muestras" con pequeñas modificaciones. La terminología usada en esta norma que también se usa en el nuevo reglamento es la siguiente:

Partida: cantidad de granos de una misma variedad, despachada de una sola vez (por ejemplo: cosecha, que puede dividirse en lotes para la recepción).

Lote: cantidad determinada de granos, que forma parte de la partida (por ejemplo: un camión) y que sirve de base para la recepción

Muestra Primaria: cantidad de granos, extraída de una parte del lote (por ejemplo: muestra obtenida con calador) o durante la carga o descarga y de hasta 1 kg de peso.

Muestra Global: cantidad de granos obtenida reuniendo y mezclando muestras primarias extraídas del lote.

La primera condición para obtener resultados uniformes análisis es tomar cuidadosamente las muestras. Por escrupuloso que sea un ensayo, no puede indicar más que el valor de la muestra analizada. Debemos esforzarnos, por tanto, todo lo posible en tomar muestras que representen con la mayor fidelidad, es decir lo interesante es que dicha muestra represente la composición media del lote de que se trate.

Etapas de muestreo se semillas

1. ° Deben tomarse cantidades iguales de semillas de cada uno de los sacos, contenedores, carros de camión u otros envases que constituyen el lote.

2. ° Después de bien mezcladas estas porciones, se toma de lo reunido una o varias muestras, según técnica de cuarteo o con un Divisor boerner.

3 ° Las cantidades mínimas de semillas que se deben enviar a los Centros, a los fines de análisis varía desde los 50 grs hasta los 1,5 kg según la especie.

4° Muestra para laboratorio: cantidad de granos representativa de la calidad del lote, destinada al análisis en laboratorio y que se obtiene por reducciones sucesivas de la muestra global (Figura 1).

5° Identificación: las etiquetas de las muestras deberán llevar para su identificación como mínimo los siguientes antecedentes:

Nombre del interesado o empresa/productor. Especie Variedad Nº control Lote (número). Numeración folios de sellos o tarjetas de certificación. Nº de envases Peso del lote. Análisis solicitados Región Fecha del muestreo. Muestreador (nombre y código) y Firma Número de malla en el caso de trigo Código de divisor de semillas y del calador empleado.

6° Transporte de la muestra: El despacho de la(s) muestra(s) será de responsabilidad del muestreador, para lo cual se podrá utilizar los servicios de una empresa de transporte de encomiendas traslado particular, que garantice el envío en el tiempo y las condiciones de temperaturas adecuadas.

7° análisis de las muestras pueden ser las siguientes: Análisis Organoléptico y visual Análisis de parámetros de calidad: mediciones de impurezas, grano

partido, granos dañados, granos dañados por calor y granos dañados por hongos,

Análisis de germinación en semillas Análisis de pureza física de semillas Análisis de humedad

DEFINICIONES Y ABREVIATURAS3

ISTA Abreviatura de International Seed Testing Association. Traducción: Asociación Internacional de Pruebas de Semillas.

Análisis de Pureza: Consiste en determinar el porcentaje en peso de los componentes de una muestra de semillas, es decir, semilla pura, materia inerte y otras semillas (incluyendo semillas de malezas y semillas de otras especies cultivadas).

Semilla pura: Corresponde a la especie indicada por el interesado, o aquellas que se encuentren como predominante en el análisis, incluyendo todas las variedades botánicas y cultivares de dicha especie y que cumplen con la definición indicada en las Reglas de la ISTA para cada género.

Materia Inerte: Fragmentos de semillas y otras estructuras y materias no definidas como semilla pura en las Reglas de Análisis de ISTA.

Otras Semillas: Corresponde a las semillas de cualquier otra especie distinta a la semilla pura, siempre que se pueda identificar como semilla verdadera.

Semillas de Malezas Cualquier semilla de género o especie que no sea cultivada con fines agrícola y/o forestal, ornamental o medicinal.

Semillas de otras especies cultivadas: Cualquier semilla de género o especie, que no corresponda a la semilla pura, ni a semilla de maleza y que es cultivada con fines agrícolas, forestales, ornamentales o medicinales.

Análisis de Determinación de otras especies: Consiste en identificar y cuantificar otras semillas diferentes a la semilla pura.

Análisis de Humedad: Es cuantificar la cantidad de agua libre contenida en una muestra de semillas. Análisis de Germinación: Es determinar en una muestra de semillas que porcentaje de ellas pueden originar

plántulas normales, plántulas anormales, semillas duras, semillas latentes y semillas muestras. Semilla Certificada Es aquella que ha sido sometida a un proceso de producción supervisado por un organismo

competente, que garantiza que ella mantiene satisfactoria identidad y pureza varietal y que cumple, además, con los requisitos que establece el reglamento del Decreto ley N° 1764.

Semilla Corriente: Es la que sin ser certificada cumple con los requisitos que establece el reglamento y normas pertinentes.

ESTUDIO DE CASO

Actualización de criterios en la evaluación de plántulas de soja.El Manual de Evaluación de Plántulas de ISTA (2013) y las Reglas ISTA (2018) establecen los criterios de evaluación de las plántulas y semillas al final el período de germinación, para un gran número de especies de interés agronómico, entre ellas la soja. Como primer paso en la evaluación de plántulas es fundamental que el analista pueda identificar claramente cuáles son las plántulas normales y cuáles son aquellas plántulas que presentan anormalidades que no van a comportarse satisfactoriamente en condiciones de campo.

Según ISTA, las plántulas normales son aquellas plántulas que muestran el potencial para continuar desarrollándose en plantas aceptables cuando crecen en suelo de buena calidad y bajo condiciones favorables de humedad, temperatura y luz (Figura1). Se consideran como plántulas normales aquellas plántulas intactas que poseen todas sus estructuras esenciales bien desarrolladas, completas, en proporción y saludables. Sin embargo, muchas plántulas pueden tener defectos menores que no afectan su normal desarrollo y que por lo tanto se pueden considerar como plántulas normales y componer el porcentaje de germinación de un lote de semillas.

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Los lotes de semillas de calidad media y baja habitualmente presentan altos porcentajes de plántulas con defectos graves en alguna de sus estructuras o bien ausencia de alguna estructura. Estas plántulas se denominan plántulas anormales y sus defectos de gran magnitud afectan notablemente su normal desarrollo aun cuando las condiciones ambientales sean favorables. Las plántulas anormales pueden presentar distintos Tipos de daños severos e irreparables o bien presentar un desarrollo débil y/o estructuras esenciales deformadas o desproporcionadas.Existen diferentes daños severos que pueden presentarse sobre distintas estructuras en una plántula anormal:

Anormalidades de la plántula Una plántula anormal puede ser deformada, fracturada, ahilada, vítrea, blanca/amarilla, desbalanceada o puede liberar los cotiledones del tegumento antes que la raíz primaria (Figura 2). Anormalidades de la raíz primaria Se considera que una plántula es anormal cuando la raíz primaria está ausente, retrasada en su crecimiento, podrida como resultado de una infección primaria, hendida desde el extremo, engrosada, profundamente quebrada o rota, presenta constricciones o está atrapada en el tegumento. (Figura 3).

Anormalidades del hipocótilo y/o epicótilo El hipocótilo puede presentar anormalidades tales como fototropismo negativo, constricciones, retorcimientos, pudriciones causadas por una infección primaria o bien ser corto y grueso (Figura 6).Anormalidades de la yema y el tejido circundante Durante la evaluación de las plántulas es importante observar el estado en que se encuentra la yema terminal y el tejido que la rodea ya que será a partir de esta yema que se desarrollarán las futuras ramificaciones de la planta. Si bien la yema es una estructura fuertemente protegida por los cotiledones, cuando éstos presentan daños puede verse afectada también por pudriciones, necrosis o roturas.

Anormalidades de los cotiledones Debido a la importancia de los cotiledones en el crecimiento de la plántula, es necesario que dichas estructuras se encuentren en buen estado. Por lo tanto, una plántula es anormal cuando más de la mitad de su tejido cotiledonar está ausente, deformado, roto, separado, decolorado, necrótico, vítreo, fusionado o podrido como resultado de una infección primaria. (Figura 13).

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Anormalidades de las hojas primarias Al igual que los cotiledones, la superficie foliar de la plántula debe estar en su gran parte en buen estado para poder ser eficiente en la captura de energía solar. Una plántula es anormal cuando más de la mitad de su tejido foliar está ausente, deformado, roto, separado, decolorado, necrótico o podrido como resultado de una infección primaria. (Figura 14).

Semillas No GerminadasAl momento de la evaluación de las plántulas es necesario registrar aquellas semillas que no germinaron durante el período del ensayo de germinación establecido en 8 días para soja. La falla de germinación de estas semillas se puede deber a diversos motivos, siendo las mismas clasificadas como:* Semillas muertas: estas semillas absorben agua, no muestran signos de desarrollo de plántula y generalmente son flácidas o decoloradas o mohosas (Figura 15 a).* Semillas frescas: son capaces de embeber agua bajo las condiciones de germinación establecidas para la especie soja, no desencadenan el proceso de germinación ya que el mismo está bloqueado (Figura 15 b).* Semillas duras: semillas que no son capaces de embeber agua bajo las condiciones establecidas para la germinación y quedan con su forma y tamaño original (Figura 15 c).

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