Del núcleo al citoplasma: Transcripción y traducción
• La información contenida en el ADN (núcleo) es expresada en el citoplasma de la célula eucariota
REPLICAR, Implica al ADN exclusivamente
TRANSCRIBIR y TRADUCIR, Implica al ADN y a otros ácidos nucleicos (RNAm, RNAt, RNAr)
Traducción, de bases nitrogenadas a aminoácidos
• Inicio de traducción, el codón AUG o codón de inicio
Enzimas de restricción o endonucleasas
Existen 3 tipos de enzimas de restricción: 1. Tipo I y Tipo III:a. Tienen actividad de restricción (cortan) y modificación (metilan).b. Cortan a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento, las Tipo I cortan lejos de la secuencia de reconocimiento, ya sea río arriba o río abajo. Las Tipo III cortan de 5-8 bases antes o despúes de la secuencia que reconocen.c. Necesitan ATP para moverse a través de la molécula de DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte. 2. Tipo II:a. Sólo tienen actividad de restricción.b. Cortan de manera consistente y predecible dentro de la secuencia que reconocen.c. Sólo requieren Mg++ como cofactor.d. No necesitan ATP.
Aplicaciones de las enzimas de restricción: 1. Hacer mapa de restricción de un plásmido o bacteriófago.2. Fragmentar DNA genómico para separación de electroforesis y “Southern Blot”.3. Generación de fragmentos para ser usados como sondas marcadas en “Southern”y “Northern” blotting.4. Generación de fragmentos para ser subclonados en los vectores apropiados, creación de DNA recombinante.
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