7/25/2019 Exposicn Grupo 2 Generacin de Molculas de ADN Recombinante/ SEGUNDO PARCIAL
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Facultad Ciencias De La SaludEscuela de Laboratorio Clnico
UNIVERSIDAD TECNICA DE MAN
EX!SICI!N BI!L!"IA M!LECULAR TEMA: GENERACION DE UNA MOLECULA DE ADN RECOMBINANTE
Integrantes: STEFANY PICO NAPA VANESSA MEZA ANDRADE MARIA GARCIA VILLAFUERTE GISEL BRAVO POLANCO ALDRITH MOLINA CHAVEZ ROCIO IZA CEDEO ARLA ALCIVAR CEDEO
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PALABRAS CLAVES
DIDEO!INUCLE"TIDOS RECOMBINANTE CLONACI"N ESCALONADA
BACTERIOFAGO PLASMIDOS
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GLOSARIODideoxinucletidos.- Nucletido modificado que en posicin 3' ha perdido
simboliza como ddNTP. Se incorpora en sntesis de !N" # $N" pero se in
sntesis posterior.
Escalonada: Seme%ante en la superficie a una serie de escalones.
Bacteriofago.- &s un irus que infecta e(clusiamente bacterias. Tal # como s
otros irus que infectan a c)lulas
l#s$idos%&Son molculas de ADN extracromosmico ci
replican y transmiten independientes del ADN cromosmicoRecominante.- *)lula u organismo que resulta de la recombinacin de genes
"!N+ independientemente de si se ha producido de forma natural o por medios
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"eneraci'n deuna $ol(cula de
ADNReco$binante%La estrategia bsica en la
clonacin molecular esinsertar un fragmento de
ADN de inters en unamolcula que es capas de
replicarse de formaindependiente en una clula
husped
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Los fragmentos de AD! utili"ados
#ara crear mol$culas de AD!
recominante son generados #or
digestin con endonucleasas de
restriccin.
Estas en"imas cortan sus secuenci
reconocimiento de forma escalo
generando extremos com#lement
o co&esi'os de una sola &era
#uede asociarse entre si
a#areamiento de ases
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EL AD! #roducido se liga al
'ector de AD! de modo antes
descrito% los genes eucariticos
est)n interrum#idos #or
secuencias no codificantes ointrones
*ue se eliminan de AR!m
em#lamado o s#licing% la #clonar AD!c adem)s del A
#ara el entendimiento de l
funcin de los genes
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Vectores )ara adn reco$binaD!"!ND#!ND$ D!L %A&A'$ D!L ADN ()!
#NS!*%A + D!L "*$",S#%$ D!L !-"!*#&!N!S "$S#.L! )%#L#/A* D#S%#N%$S 0!1%$*!1L$NA1#,N "A*A 2!N!*A* &$L31)LAS*!1$&.#NADAS
$%*$S %#"$S D! 0!1%$*!S D!SA**$LLAD"A*A !-"*!SA* ADN 1L$NAD$ ! #N%*$D)&$L31)LAS *!1$&.#NADAS !N 13L)LAS!)1A*#$%AS S! D#S1)%!N !N S!11#$N!S"$S%!*#$*!S
L$S "L4SD$S 2!N!*AL&!N%! S! )SAN 1L$NA* #NS!*%$S D! ADN 2!N,$ $ A
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L!S VELASM"ENERC!NSI
A , -BINCLU/!RI"ERELICUN "RFRA"M
ADNC LI"ADL1SMADNREVIADI"ER
MEDIA
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,as bacterias que contengan elpl-smido de inter)s pueden crecerseen grandes cantidades # e(traerse su"!N. ,as pequeas mol)culascirculares del "!N plasmdico a
menudo e(isten cientos de copia porc)lula+ pueden separarse del "!Ncromosmico bacteriano.
,os ectores del bacterifago
tambi)n son empleados por elaislamiento tanto del "!N gencomo clones de "!Nc a partir dc)lulas eucariotas # puedenacomodar fragmentos ma#ores a"!N inserto que los pl-smidos.
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&n los ectores de clonacin+ lassecuencias del genoma delbacterifago que son dispensablespara la replicacin iral han sido
eliminadas # sustituidas por sitios/nicos de restriccin para la insercidel "!N clonado.
&l "!N de estos fagos puedeentonces aislarse+ dando lugagrandes mol)culasrecombinantes que contiene usolo fragmento de "!N clona
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En #eter$%na#&s est'#%&s #ean()%s%s #e ADN gen*$%+& es
,re+%s& +)&nar -rag$ent&s #e ADN$a.&res #e )& /'e 'n -ag& !,'e#e ,&rtar0
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cuenciaci'n de ADNLA 1L$NA1#$N &$L!1)LA* D!)N 6*A2&!N%$ #ND#0#D)AL D!
ADN "!*%! !L A#SLA!N%$D! LAS 2*AND!S 1AN%#DAD!SD! &A%!*#AL 2!N!%#1$7
#N1L)+!ND$ LAD!%!*NA1#$N D! S)
S!1)!N1#A D! N)1L!$%#D$S
LAS S!11$D#6#1A
2!N!S*!LA16*!1)!N1$N LAS
"*!0#A!S%)
!L &!%$D$ .AS#1$!&"L!AD$ "A*A S!1)!N1#A*!L ADN89:;; D! LA
D!S$-#**#.$SA
LA S#N%!S#S D! ADN S!#N#1#A !N )N ")N%$
)N#1$ D!L ADN1L$NAD$
A "A*%#* D! )N1!.AD$* S#N%3%#1$
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LA *!1*!A11#$N D!S#N%!S#S D! ADN
#N1L)+! ?D#D!$-#N)1L!,%#D$S
8 A7172 y %
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