7/23/2019 Introduccion a La Microscopia Optica
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ING. JUAN JOS GONZLEZ GUILLN
INGENIERA EN MATERIALES
UNIDAD 1:
MICROSCOPAPTICA
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1 MICROSCOPA PTICA
OBJETIVO: El estudiante conocer los principios de formacin de imgenes en el
microscopio ptico, sus principales componentes y sus aplicaciones para ladeterminacin de la microestructura.
1.1 Principios de formacin de imgenes.
1.2 Partes y funcionamiento del microscopio ptico.
1.3 Mtodos de iluminacin.
1.4 Preparacin de muestras.
1.5 Interpretacin de microestructuras.
1. 6 Analsis de imgenes.
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1.1 PRINCIPIOS BSICOS DE FORMACIN DE IMGENES
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Tipos demicroscopios
Microscopioptico
Microscopioelectrnico
Microscopioptico Simple
Microscopio
pticoCompuesto
M.O. Normal
Campo oscuroContraste de fasesFluorescencia
TransmisinBarridoDigitalEfecto tnel o cuntico
Lupa
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Anillo de ajustede los oculares
Tornillo quepermite mover
el cabezal
Tornillosreguladores de
la platina
Tornillos del
condensador
Palanca decierre deldiafragma
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Tornillomicromtrico
Tornillomacromtrico
Freno
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Beam
splitter
camera
Reflected light
Transmitted light
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.html7/23/2019 Introduccion a La Microscopia Optica
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Lamparay Condensador: projectan un haz deluz paralelo hacia la probeta para iluminacin
Platina portamuestrascon movimiento X-Y:
la muestra es colocada sobre la platina y asdiferentes partes de la probeta puedenobservarse debido a la capacidad de movimientoen direcciones X-Y.
Botones de enfoque: desde que la distanciaentre el objetivo y el ocular es fijada, el enfoquese logra mediante el movimiento relativo de laprobeta hacia los lentes objetivos.
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Estn colocados enel revolver
Tienen un sistema
de amortiguacin Un anillo coloreado
indica los aumentos Son de 4, 10, 40 y
100 (inmersin)aumentos
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Azul40x
Amarillo10x
Rojo
4x
Blanco100x
Amortiguacin
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Objective specifications
Objectives are the most important components of alight microscope: image formation, magnification, thequality of imagesand the resolutionof the microscope
Anatomy of an objective
ricalture
dmin= 0.61 /NA
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Ajuste de la distanciainterpupilar
Oculares
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(Diaphragm)
Eyepieces (Oculars) work in combination with microscopeobjectives to further magnifythe intermediate image
M=(L/fo)(25/fe)
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Aumento Poder de
resolucin N de campo Profundidad de
foco Contraste
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Se calculamultiplicando
el aumentodel objetivo
por elaumento delocular
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Distancia si dospuntos sedistinguen
Mayor, cuandomenor es lalongitud de onda
Mayor, cuanto mas
grande es laapertura numrica
Mayor, con aceitede cedro
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Es eldimetro de
la imagenobservada atravs del
ocular,expresado enmilmetros
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Microscopa de campo oscuroLa luz se hace incidir muy oblicuamente sobre la preparacin.Los rayos que la atraviesan , pero que siguen ms o menos la trayectoria inicial,
no son recogidos por el objetivo.Slo la luz que es difractada por el objeto, o que el objeto refleja casualmente,llega al objetivo.De esta manera la imagen del objeto aparece como puntos luminosos sobre unfondo oscuro.
MTODOS DE ILUMINACIN
Microscopa de polarizacin
La finalidad es conseguir contrastar las diferentes estructuras observadasaprovechando que entre ellas pueda haber alguna que sea capaz de cambiar elplano de polarizacin de la luz, es decir, que haya alguna sustancia birrefringente.
Microscopa de contraste de fases
El contraste de fases bsicamente es un mtodo de iluminacin que trata unadeterminada porcin de la luz (la que ha sufrido difraccin al atravesar el objeto) deforma diferente al resto (la que no ha sufrido ninguna alteracin) para, acontinuacin, provocar que la primera porcin de la luz interfiera con el resto, demanera que resulte una imagen visible de una muestra transparente.
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Condenser annulus allows only ring of light to reach thecondenser.
Light rays illuminating the sample but not interacting with it willgo straight through and be imaged along a ring at the back focalplane of the objective
Light rays diffracted by the sample are phase shifted by aapproximately a quarter wavelength and will be scattered over arange of angles and will generally not propagate in the exactforward direction
A phase plate at the back focal plane of the objective altersselectively the phase and magnitude of the non-diffracted wave.
http://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htm (reference)l
Phase
plate
http://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.html (ex)
http://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htmhttp://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htmhttp://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htm7/23/2019 Introduccion a La Microscopia Optica
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AplicacionesSegn el tipo de iluminacin:De campo oscuro:Est especialmente indicada para muestras con poco contraste , y observar losrelieves superficiales en una probeta.
Luz polarizada:Aplicaciones geolgicas, principalmente para el estudio de minerales ensecciones rocosas delgadas.Minerales naturales e industriales, materiales compuestos tales como
cementos, cermicas, fibras minerales y polmeros.Identificacin de fibras de asbestos, estudio de la formacin rocosa, polmerosnaturales y sintticos, fibras de nylon, etc
De Contraste de fases
Aplicaciones qumicas e industriales: mineraloga, cristalografa y morfologa depolmeros.Microcristales sin color, polvo, partculas slidas y polmeros cristalinos que tienenun ndice de refraccin que difiere slo ligeramente del medio de Inmersin.