3/15/2018
1
COCI GRAM POZITIVI
Genul Staphylococcus
3/15/2018
2
Caractere generale
• staphilos (gr.)= ciorchine • aerobi• clorura de sodiu 7,5% (halotoleranţi)• catalazo – pozitivi• imobili• in vivo majoritatea produc capsula
Reprezentati
• Staphylococcus aureus• responsabil de majoritatea infectiilor umane stafilococice• Bacterie patogena, NU face parte din flora normala• Stafilococ coagulazo-pozitiv
• Staphylococcus epidermidis• Face parte din microbiocenoza nazala, cutanata…..
=> infectii oportuniste la pacienti imunodeprimati: cistite, septicemii, endocardite, meningite, infectii nosocomiale
– Stafilococ coagulazo-negativ
• Staphylococcus saprophyticus• Bacterie oportunista• infectii de tract urinar• Stafilococ coagulazo-negativ
3/15/2018
3
Factorii de patogenitate ai S. aureus
Enzimele extracelulare formarea leziunilor tisulare si diseminarea bacteriilor
1. Coagulaza = cel mai important factor de patogenitate • transformarea fibrinogenului in fibrina
a) liberacoagularea plasmei, formarea de coaguli mici endovenosi, incarcati cu stafilococ diseminare
b) legata manta de fibrina in jurul stafilococilor => rol antifagocitar
Diagnosticul de laborator in infectiile stafilococice
I. Recoltarea produselor patologice- In functie de localizarea infectiei- Sange pentru realizarea de hemoculturi- Inaintea tratamentului cu antibiotice- ! Respectarea regulilor generale de asepsieII. Examenul microscopic direct din produsul patologic recoltat de la pacient
(preparat nativ, frotiu colorat Gram)III. Inocularea produselor patologice pe medii de cultura: geloza sange, mediul
Chapman; incubarea mediilor inoculate in termostat, la 37°C pentru 18-24hIV. Identificarea stafilococilor in functie de:- Caracterele morfo-tinctoriale- Caracterele de cultura- Caracterele biochimice- Prezenta coagulazeiV. Testarea sensibilitatii la antibiotice a tulpinii de stafilococ izolate de la pacient=
realizarea antibiogramei
3/15/2018
4
Caractere microscopice
- coci Gram pozitivi- asezati in gramezi
Genus Staphylococcus
frotiu din cultura frotiu din produs patologic
3/15/2018
5
Caractere de cultura
Mediul geloza simpla (bacterienepretentioasa nutritiv)
Pigment galben auriu (S. aureus)
Caractere de cultura – pigmentpigment galben auriu- S. aureus pigment alb - S.epidermidis
3/15/2018
6
Caractere de cultura- geloza sange (hemoliza)hemoliza completa=hemoliza α
Caractere de cultura-hemolizahemoliza cald-rece =hemoliza β
3/15/2018
7
Mediul Chapman
Mediu selectiv si diferential(evidentiaza o proprietatebiochimica a tulpinii)Componente: geloza simpla + NaCl 7,5% + manitol + rosu fenol Utilizare: selectiv pentru stafilococ
Cultura de S.aureus pe mediu solid hiperclorurat
cu manitol
Cultura de S. saprophyticus pe mediu solid hiperclorurat cu manitol
3/15/2018
8
TESTE DE PATOGENITATE IN VITRO Coagulaza libera
Test negativ Test pozitiv
TESTE DE PATOGENITATE IN VITROCoagulaza legata
3/15/2018
9
TESTE DE PATOGENITATE IN VIVO
Test Dolman- enterotoxina
Antibiograma
• β- lactamine !!!! (Oxacilina, Meticilina)
• Aminoglicozide• Macrolide• Vancomicina• Linezolid• Co-trimoxazol• Fluorochinolone
3/15/2018
10
Genul Streptococcus
Genul Streptoccocus
• grup heterogen• numar mare de specii de streptococi
- prezente in lapte si branzeturi (Streptococcus lactis),
– Comensale• microbiocenoze : cavitatea nazala, orofaringe, intestin,
tegument.
– Patogene: Streptococcus pyogens, cel mai frecvent patogen izolat din infectiile umane.
3/15/2018
11
Caractere generale
• Coci Gram pozitiv• dispusi in lanturi de dimensiuni variabile• capsula:
– acid hialuronic : Streptococii -hemolitici grup A– polizaharide: Streptococcus pneumoniae
• catalazo - negativi• aerob-anaerob facultativi; • Streptococii anaerobi - genul Peptostreptococcus (5
specii)
Clasificarea streptococilor – hemoliza pe geloza sange• hemoliza β: clara, hematiile sunt lizate total
= streptococi β -hemolitici• hemoliza - incompleta, verzuie • streptococi γ - nehemolitici,
- nepatogeni
3/15/2018
12
Clasificare Rebecca Lancefield
• Polizaharidul (carbohidratul) “C” (din structura peretelui celular)
• Pe baza specificitatii antigenice a polizaharidului C,• grupe de streptococi (Lancefield) A-T, alcatuite din
una sau mai multe specii. • grupul A - cel mai important in patologia umana• grupul D, B, C si G
CLASIFICAREA STREPTOCOCILOR
3/15/2018
13
Streptococi -hemolitici
• hemoliza incompleta, de culoare verde • Streptococcus viridans:
- comensali– endocardita– Streptococcus mutans, salivarius - placa dentara
• Streptococcus pneumoniae (pneumococ) - pneumonia bacteriana,
• Enterococcus (faecalis, faecium) - infectii intraspitalicesti, in special infectii urinare.
Hemoliza α (partiala)
3/15/2018
14
Streptococi -hemolitici
• hemoliza completa, clara pe geloza sange• Streptococcus pyogenes - streptococ -
hemolitic grup A Lancefield, – responsabil pentru majoritatea bolilor
streptococcice
• Streptococcus agalactiae - streptococ -hemolitic grup B Lancefield, – patogen pentru nou nascuti
Diagnosticul de laborator in infectiile streptococice
I. Recoltarea produselor patologice- In functie de localizarea infectiei- Sange pentru realizarea de hemoculturi- Inaintea tratamentului cu antibiotice- ! Respectarea regulilor generale de asepsieII. Examenul microscopic direct din produsul patologic recoltat de la pacient
(preparat nativ, frotiu colorat Gram); NU cand produsul patologic este secretie faringiana
III. Inocularea produselor patologice pe medii de cultura: geloza sange, geloza socolatie; incubarea mediilor inoculate in termostat, la 37°C pentru 18-24h
IV. Identificarea streptocilor in functie de:- Caracterele morfo-tinctoriale- Caracterele de cultura- Caracterele biochimice- Caracterele antigenice – identificarea grupului din care fac parteV. Testarea sensibilitatii la antibiotice a tulpinii de streptococ izolate de la pacient=
realizarea antibiogramei (NU e necesara pentru streptococul de grup A)
3/15/2018
15
Genul Streptococcus- Caractere microscopice
Frotiu din cultura Frotiu din produs patologic
Streptococcus spp.Frotiu din produs patologic
3/15/2018
16
Hemoliza β (totala)
Identificarea streptococilor
• Catalaza – negativ
– Bacitracina – diferentiaza strept. grup A de alti streptococi: streptococul de grup A = Streptococcus pyogenes este intordeauna sensibil la Bacitracina
– Latex aglutinarea (Ag capsular)– pentru determinarea grupului de streptococ
3/15/2018
17
Identificarea streptococilorIdentificarea streptococilor
Diagnostic serologic :Detectarea anticorpilor anti-streptolizină O (ASLO). Valori normale: 200- 250 U/ml. ASLO > 250 U/ml indică o infecţie streptococică recentăDiagnostic biologic :
Testul Dick → scarla nă
Diagnostic de laborator
3/15/2018
18
Antibiograma
• !!!!– Streptococul beta-hemolitic de grup A
(Streptococcus pyogenes) este sensibil la Penicilina
– Eritromicina/efectuarea antibiogramei pt. pacientii alergici la P
– Antibiograma pe Muller-Hinton cu sange
Streptococcus pneumoniaeProprietati generale
• coci ovalari Gram pozitivi, • aspect de varf de lance sau flacara de lumanare,• dispusi in diplo (diplococi), • Capsula polozaharidica: 90 tipuri capsulare• Pe geloza sange - hemoliza de tip α, incompleta
3/15/2018
19
Streptococcus pneumoniaeFrotiu colorat Gram din produs patologic
Geloza socolatie-- mediu complex pentru bacterii pretentioase nutritiv
Geloza sange- mediu complex, pentru bacteriipretentioase nutritiv
3/15/2018
20
Streptococcus pneumoniaeaspectul coloniilor pe geloza sange
Identificarea pneumococilor
• Sensibilitatea la Optochin– diferentiaza S. pneumoniae(Sensibili) de streptococii viridans (Rezistenti)
3/15/2018
21
Streptococcus pneumoniaeAntibiograma
• Penicilina G de electie, dar a aparut rezistenta=> testarea sensibilitatii la antibiotice prin realizarea antibiogramei
• Cefalosporine de generaţia III – Ceftriaxona• Chinolone• Linezolid• Vancomicina• Aminoglicozide
Strepococi viridans
• frecvent comensali: in faringe, cavitatea bucala, • Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis,
Streptococcus mitis
• S. mutans intervine in producerea cariei dentare
• endocardite subacute streptococice– patrunderea streptococilor viridans in circulatie (ex. după extractii dentare)
• bacteriemie
3/15/2018
22
Streptococcus agalactiae
= Streptococ de Grup B • flora normala genito-intestinala si a tractului genital
feminin, – 5-35% dintre femeile gravide colonizate (vagin/rect)– cauzặ majora de boala (pneumonii, meningite, septicemii)
la n.n. – infectii post partum la femei
Streptococul de grup B
3/15/2018
23
Identificarea streptococilor
– CAMP – diferentiaza strept. grup B de alti streptococi
• Marirea hemolizei cu S. aureus = streptococ de grup B
– Latex aglutinarea (Ag capsular)
3/15/2018
24
Streptococii de grup D
– Streptococcus bovis– Streptococcus suis
• S. bovis– Bacteremie– Endocardita (pacienti cu leziuni ale colonului)Caracterristici:- Testul bila-esculina +- Au antigen de grup D in peretele celular
Genul Enterococcus
• au antigen de grup D in peretele celular (au apartinut streptococilor grupului D pana in 1984- genomic DNA analysis )
• Enterococcus faecalis• Enterococcus facium• flora normala din tractul gastro-intestinal, biliar, vagin, uretra• a 2-a cauza de infectii nosocomiale in U.S.A.
3/15/2018
25
Enterococcus – boli produse
– Infectii de tract urinar– Bacteriemie– endocardite
– Diverticulite– Meningita – infectii abdominale/pelviene
Enterococcus
– Antibiograma !!!– Au rezistenta naturala la Cefalosporine– Tulpinile sensibile: Ampicilina,
Vancomicina, Aminoglicozide
– Standard al calitatii apei
3/15/2018
26
Identificarea streptococilor
• Testul la bila-esculina
– diferentiaza streptococii de Grup D / Enterococcus (+) de alti streptococi (-)
Identificarea streptococilor
Cresterea pe medii cu sare – diferentiaza Enterococcus (+) de streptococii de Grup D (-)
3/15/2018
27
Top Related