Post on 18-Jun-2015
Universidad Nacional Autónoma de MéxicoFacultad de Estudios Superiores Zaragoza
Microbiología General II
COPROPARASITOSCOPICO
Integrantes: Alvizuri Fernández Juan de DiosPérez Piedras Guadalupe
Equipo: 5
Grupo: 2752
OBJETIVOS Realizar un examen macroscópico y microscópico de
la materia fecal.
Determinar la presencia de parásitos en la materia fecal.
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE HECES.
Por expulsión natural. Por purgantes solo para casos de amebosis.
intestinal crónica y estrongiloidosis. Por cucharilla rectal solo para recién nacidos.
Recipiente de recolección Frasco de boca ancha con tapa de rosca. Cantidad de muestra requerida 2-5 g.
Examen macroscópico
Permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos, enteros o fraccionados , así como los cambios en las características organolépticas de las heces eliminadas (color, consistencia, olor y elementos).
PRESENCIA DE SANGRE
SANGRE Formes hemorroides sangrantes
blandas
MOCO Y SANGRE ulceración amibiana
liquidas
SANGRE OCULTA hemorragias internas
DETECCION DE PARASITOS
MACROSCOPICOS
Ascaris adultos
Fragmentos de D. latum
Proglotides de T. saginata y
T. solium
Larvas de Strongyloides
Examen directo Este método permite
buscar principalmente en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas móviles de parásitos de tamaño microscópico trofozoitos, quistes de protozoos, así como larvas o huevos de helmintos
Examen microscópicoEn un portaobjetos se
colocan dos gotas, de
solución salina y de
lugol
tomar la muestra
de materia fecal,
se debe escoger la
parte que tenga
elementos
anormales
se homogeniza en
la lámina primero en
la solución salina y
luego en el lugol, se
le colocan los
cubreobjetos
Entamoebahistolytica
Entamoeba coli Entamoebahartmanni
Endolimaxnana
Iodamoebabeutschlii
quiste
Trofozoito
DEFINICIÓN CPS: Es el estudio de la materia fecal para la búsqueda e
identificación de formas parasitarias con fines diagnósticos.
CLASIFICACIÓN DE EXÁMENES
COPROPARASITOSCÓPICOSPOR SU EXPRESIÓN
NUMÉRICA
MÉTODOS ESPECIALES
CUALITATIVOS:
a.En fresco
b.Centrifugación
Flotación (Faust)
c.Flotación (Willis)
d.Sedimentación (Ritchie)
CUANTITATIVOS:
a.Concentración (Ferreira)
b.Dilución (Stoll)
c.Técnica de Beaver
d.Método modificado de Kato-
Miura
e.Técnica de Kato.katz
Tamizado
Graham
Baermann
Harada-Mori
EXAMENES CUALITATIVOS
CPS de flotación con solución de sacarosa Técnica que se utiliza para casos de emergencia cuando
no se tienen otros reactivos a la mano.
Este procedimiento es muy útil para trabajo de campo.
Limitaciones: La solución de sacarosa atrae moscas, provocando las molestias consiguientes.
CPS de concentración por centrifugación flotación (FAUST, 1938) Se basa en que los quistes y/o huevos de los parásitos flotan
en la superficie por ser de menor densidad que el sulfato dezinc a 33,3%, cuya densidad 1.180
Método indicado para el diagnóstico de huevos livianos de helmintos(Necator, tricocéfalos, Ascaris, H. nana).
Hacer una suspensión
homogénea con 1 o 2
gramos de material
fecal y 10 ml de agua
Se filtra a través de
gasa colocada en el
embudo y se
directamente en el
tubo
Se centrifugan a 2000 rpm durante 1 min.
Se decanta el
sobrenadante y se
resuspende el
sedimento con agua.
Se agregan 2 a 3
ml de solución de
sulfato de zinc
tubos y se
homogeneiza.
Se centrifugan
a 2000 rpm
durante 1 min.
Se recoge la con
el asa la muestra
de la película
superficial que se
encuentra en el
menisco, durante 2
o 3 ocasiones
sucesivas y se
deposita en el
portaobjetos
Se colocan 2 gotas de
lugol, se homogeneiza
con el ángulo de un
cubreobjetos y se pone
este sobre la
preparación.
Se observa
con
objetivos de
10x y 40x.
METODOLOGIA
Método de salmuera de Willis Este método basado en la propiedad que tienen las
soluciones de densidad alta, de hacer flotar objetos menos densos, la salmuera de 1.200° Bé, es lo que hace que la mayor parte de huevos de helmintos floten.
CPS de concentración por sedimentación con centrifugación (Ritchie) Es usado para concentrar huevos, quistes y larvas
de helmintos.
No importa la densidad que tenga, los detritusorgánicos se eliminan con el éter.
El motivo por el cual se utiliza el formol es paramantener la integridad de los parásitos.
EXAMENES CUANTITATIVOS
Examen CPS cuantitativo por dilución de Stoll
FUNDAMENTO:
Este método se basa en los principios de saponificación,
homogenización y aclaración. El fundamento es
básicamente aritmético, se basan en diluciones
empleadas.
Es útil para saber la intensidad de la infección por ciertas
uncinarias y helmintos.
FORMA DE REPORTAR
Ejemplo:Si la materia fecal es pastosa y se encontraron en todos
los campos 4 huevos de uncinaria en 0.15ml de lamuestra:
4 x 200 = 800Se reportará así: 800 h. mL. h. de uncinarias
HECES MUESTRA
(mL)
FACTOR
Duras 0.075 50
Pastosas 0.075 100
Líquidas 0.075 200
Duras 0.150 100
Pastosas 0.150 200
Líquidas 0.150 400
CPS cuantitativo de Ferreira Es un método de concentración de una suspensión de
materia fecal 1:10, que tiene la característica de considerarse como cuantitativo.
Forma de reportar
El total de huevos o larvas encontrados se multiplica por 5;de esta manera se obtiene el número de huevo s o larvaspor gramo de heces.
Método de frote grueso (Kato y Miura)
FUNDAMENTO:
Es un método cuantitativo de helmintos. El cual se basa
en la acción que tiene la glicerina como aclarador de los
huevos de helmintos y el verde de malaquita como
colorante de contraste.
FORMA DE REPORTAR
El número de huevos o larvas observados en toda la
preparación se multiplica por un factor constante de 20.
CPS cuantitativo con frote grueso de Kato Y Katz
Es un método que solo sirvepara cuantificar huevos dehelmintos.
FORMA DE REPORTAR.De la misma forma que para latécnica de Kato y Miura
Huevo de Necator tras la
extensión de heces en un
frotis grueso de kato (x 540)
CPS directo cuantitativo
Utilidad: Es un método excelente para grandes volúmenes de muestras y se presenta la necesidad después de hacer un cuantitativo, de hacer recuentos de huevo de helmintos
Limitaciones: La pequeña cantidad de muestra que se utiliza.
Forma de reportar: Según la cantidad de material fecal que se haya tomado, el cálculo se hace con una simple regla de tres para obtener la cuenta de hgh
Exámenes especiales para el diagnostico de parasitosis del aparato
digestivo
Tamizado
Es utilizado en el análisis cualitativo y se considera un método mecánico de separación.
Utilidad: se usa para la recolección de parásitos o segmentos de estos en la materia fecal.
RECOLECCIÓN PERIANAL Y PERINEAL CON CINTA DE CELOFÁN ADHESIVO(GRAHAM 1941)
Esta técnica se basa en que la hembra adulta de
Enterobius vermicularis habitualmente no deposita sus
huevos en el interior del intestino, sino que por lo general
emigra durante la noche, hacia las márgenes del ano,
depositando los huevos en los pliegues perianales.
.
Preparación de
Graham huevo de
Enterobius
vermicularis
EXAMEN DE CONTENIDO DUODENAL
Se usa para demostrar la presencia de parásitos o formas parasitarias que se alojan en el duodeno o bien en las parasitosis que son problemas de diagnostico como giardiosis, fasciolosis y estrongiloidosis; por medio de una capsula de gelatina que tiene en su interior un hilo de algodón absorbente.
MÉTODO DE CONCENTRACIÓN CON EL DISPOSITIVO DE BAERMAN.
Se utiliza para concentrar larvas de S.stercolaris, N.americanus y Ancylostoma spp; también se ha descrito su uso para la recuperación de larvas de T.spiralis después de la digestión de músculo infectado.
Fundamento:
Se basa en los tropismos positivos: geotropismo, termo tropismo e hidrotropismo de los trofozoítos de protozoos y larvas de helmintos..
MÉTODOArmar el dispositivo. Se llena el embudo con
agua que previamente
se calentó a 40°C de
tal manera que la malla
y la gasa se mojen.
Se coloca la
materia fecal
sobre la malla y la
gasa.
Se deja reposar
durante 2 hrs,
para que las
larvas pasen al
agua del embudo.
Pasadas las 2hrs,
se abre la pinza, se
deja salir el agua y
se recibe en el vaso
de precipitados.
Se centrifuga el líquido durante un
minuto a 2000rpm se toma del
sedimento y se coloca entre porta y
cubre y se examina con la lupa del
microscopio
Método de cultivo en papel filtro (Harada-Mori) Es un dispositivo por medio del cual se verifica el
desarrollo de huevos o larvas de N. americanus, Ancylostoma spp. y S. stercoralis, con objeto de obtener las filariformes infectantes, pues en este estadio es donde las características son diferenciables.
Medio de Kupferber y Sprince Es un medio simple de
tripticasa y suero para cultivo de Trichomonas vaginalis.
Medio de N.N.N. (Novy, Nicolle, McNeal) Es un medio eficaz para el aislamiento y cultivo de
Trypanosoma cruzy y Leishmania spp., es un medio sumamente económico.
Constituido por dos fases: una sólida que es un agar sangre con una concentración elevada de sal y la líquida es con solución Ringer.
Amiba en fresco.
Ayuda a determinar la presencia en lasevacuaciones de trofozoítos de Entamoebahistolytica, apoyando este diagnóstico.
Es un método, sencillo de realizar y que nosayudará en la búsqueda de protozoarios, así como susquistes y trofozoitos.
Enterobiusvermicularis
Trichuristrichiura
Ascaris lumbricoidesfértil
Ascarislumbricoidesinfértil
Huevos encontrados en heces humanos de
nematodos
Taenia spp Hymenolepisnana
Hymenolepis diminuta Diphyllobothriumlatum
Dipyllidiumcaninum
Huevos encontrados en heces humanos de
cestodos
Paragonimuswestermani
Nanophyetussalmincola
Fasciolahepatica
Echinostomaspp.
Huevos encontrados en heces
humanas de trematodos
Taenia solium Taenia saginata Diphyllobothrium latum Dipylidium caninum
Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta
BIBLIOGRAFIA
Irene H. A., Paz M.S.S., Margarita C.B. Diagnóstico Morfológico de las Parasitosis. 2ª Ed. México: Méndez Editores, 2002: 181-192,193-214
www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/pr%E1cticas_1-15.pdf .
Markell Edwar. Parasitología medica, 6ª edic., Edit. Mac-Graw-Hill, Madrid, España 1990.
Faust Ernest. Parasitología clínica, 4º edic. Edit. Salvat mexicana, Méx. DF. 1981.
Romero Cabello Raúl, Microbiología y parasitología humana, Editorial Medica Panamericana, México,1993.
Biagi Francisco, Enfermedades Parasitarias, 2da. Ed., Editorial La Prensa Medica Mexicana, México, 1994.
Tay Zavala Jorge, Parasitología Medica, Editorial Méndez Editores, México, 1995.
www.dpd.cdc.gov/