2752 Eq 7 to de Hongos de Diferentes Fuentes
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OBJETIVOS.
1. El alumno deberá demostrar la presencia y distribución de
los hongos.
2. Se analizara la morfología de los hongos que se han
obtenido de diversas fuentes.
3. Se realizara la identificación y clasificación de los hongos
aislados de los diferentes especímenes trabajados.
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Son heterótrofos
Pueden ser unicelulares y pluricelulares
Se alientan por
absorción
Reproducción sexual y
asexual
No son fotosintéticas
Tienen pared celular compuesta por quitina,
celulosa, glucanas y mananas
Son macroscópicos y microscópicos
Su unidad funcional es
la hifaSon organismos eucariontes
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CONDICIONES DE
CRECIMIENTO
Acidófilos siendo el pH 5.6 óptimo para la
mayoría
La mayoría crecen entre 0-55 con un
rango de 20-30 oportunistas y
patógenos 35-40
pH
Temperatura
Humedad
aw
Luz
Nutrientes
60%
CO2,glucosa, sacarosa y maltosa, sales de nitrógeno, iones inorgánicos,
agua
No es vital pero es importante en la esporulación
para algunos
Mayor 0.80 hongos
filamentosos y mayor 0.85
para levaduras
De acuerdo a su nutrición pueden dividirse en
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SAPROFITOS Toman sus nutrientes de la materia muerta o en
descomposición
PARASITOS Cuando se nutren de
materia viva
MICORRIZICOS
Viven en simbiosis con alguna especie vegetal (normalmente árboles), obteniendo ambos un beneficio mutuo.
DIMORFISMO FUNGICO:
Un hongo puede pasar de una forma micelial a levaduriforme reversiblemente, pueden ser:
A) Nutriente dependientes.
B) Temperatura y nutriente dependientes
6Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3
HONGOS BIFÁSICOS
Se refiere aquellos hongos que presentan dos formas, una filamentosa y a diferencia de los hongos dimórficos , no presenta fase levaduriforme sino de otro tipo Por ejemplo:
Las esférulas de
Coccidioides immitis
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PLEOMORFISMO FÚNGICO:
Consiste en la transformación irreversible de una cepa por un exceso de carbohidratos, está tiende a cambiar dando un micelio blanco, algodonoso y estéril. Se puede presentar en cualquier hongo filamentoso , pero es propio de los dermatofitos.
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POLIMORFISMO
LESIONAL:Es la capacidad de un agente
etiológico de generar diferentes
cuadros clínicos Por ejemplo:
La tiña del cuerpo o de la
cabeza puede ser producida
por un solo hongo: M. canis.
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Género Suelo Aire Frutas
Rhizopus
Mucor
Alternaria
Botrytis
Fusarium
Pennicillium
Cladosporium
Aspergillus
Candida
Geotrichum
Trichoderma
Cephalosporium
Curvularia
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Rhizopus sp.Trichoderma sp
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Aspergillus sp. Fusarium sp.
Penicillium sp.
Alternaria alternata Geotrichum candidum
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Se deben estudiar las características siguientes: Se observa si una colonia de hongos es filamentosa o levaduriforme. Forma y tamaño Color en la superficie o en el reverso. Difusión del pigmento. Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza, negra. Textura: yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, cérea, cremosa. Superficie: elevada o plana, levantamiento central. Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme. Consistencia: dura, suave, firme, membranosa. Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los oportunistas
crecen en 24 a 48 h, y los dermatofitos en 5 a 10 días.
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Macroscópicamente crecen
entre 3-6 días a temperaturas
de 25º y 37º, C 7-10 días las
colonias están cubiertas con
un micelio aéreo blanco,
velloso. A medida que la
colonia madura se observa
una superficie cubierta de
esporas negras. El reverso
de la colonia presenta un
color claro o verdoso.
Aspecto: plano, polvoso,
aterciopelado seco.
Presenta micelios de crecimiento rápido
Anverso: tamaño ilimitado, ocupa todo el medio de cultivo, color verde con un halo blanquecino en la periferia, plana, polvosa, aterciopelada , rugosidades radiales.
Anverso: tamaño ilimitado, color blanco amarillento, vellosa húmeda
Reverso: no presenta pigmento.
•Micelio aéreo bien desarrollado, denso, algodonoso. Gris-blanco al
comienzo se forma pronto marrón oscuro a rojo púrpura. Bordes
enteros. El reverso es rojo púrpura a negro.
Alternaria spAnverso: tamañoilimitado, color negrocon tonalidades caféobscuro, plana,aterciopelada, seca yen ocasiones lo cubreun velo vellosoblanco.
Reverso: presentapigmento caféobscuro que difundeal medio
Anverso: tamaño
ilimitado, blanco en un
inicio, posteriormente
naranja, violeta-lila.
Aspecto: vellosa-secaReverso: presenta colornaranja o violeta difusibleal medio.
Anverso: tamañoilimitado, en uninicio es blanco (2-3días) después tomauna tonalidadblanco-grisáceo,velloso-algodonososeco.Reverso: nopresenta pigmento.
Mucor sp
Anverso: tamañoilimitado, cubriendo lasuperficie del agar conun crecimiento densocon , tiende a llenar lostubos y cajas petri.Color : en un inicio esblanco yposteriormente grisobscuro.
Reverso: pigmento nopresente, vellosos a-algodonoso seco
•Aspecto inconfundible:
vellosas, algodonosas,
pulverulentas.
•De vistosos y variados
colores
•Crecen radialmente de
modo progresivo
•Colonias de mayor tamaño
Anverso: tamaño ilimitado, crece de dos a cuatro cm, color blanco
amarillento-cremosa, convexa y plegada.
Reverso: no presenta pigmento
Nutrientes básicos en medio de cultivo
Materias nitrogenadas como peptona.
Azucares como glucosa o maltosa.
Un soporte solido como la gelosa.
pH ácido (5 a 6).
Vitaminas (impurezas de la peptona)
AGAR SABOURAUDComposición:*Peptona 10g*Glucosa 20g*Agar-Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH 5.6 ± 0.2
AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)Composición:*Pulpa de papa 250g*Glucosa 20g*Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH final 5.6 +- 0.2.
USO:
Para cultivo, aislamiento y determinación del numero de hongos y levaduras.
USO:
Para cultivo de hongos
patógenos y no
patógenos,
particularmente
dermatofitos, levaduras y
m.o. acidúricos.
AGAR LITTMANComposición:
*Peptona, 10.0g
*Estreptomicina 15.0g
*Dextrosa, 10.0g
*Cristal Violeta 0.01g
*Agar 20.0g
AGAR BIGGY
*Sulfito de bismuto 8,0g
*Dextrosa 10,0g
*Extracto de levadura 1,0g
*Glicina 10,0g
*Agar 16,0g
*Citrato de Amonio y Bismuto 5,0g
pH 6.8 ± 0.2
USO:
Medio selectivo, que
suplementado con
estreptomicina, se
emplea para el
aislamiento primario y
cultivo de hongos,
especialmente
dermatofitos.
USO:
El Agar Biggy (por sus
siglas en inglés Bismuth-
Glucose-Glycine-Yeast) es
utilizado para el
aislamiento y
diferenciación de especies
de Candida. También es
conocido como Agar de
Nickerson.
Micosel agar
- Estreptomicina 0,5%
- Peptona de soya.
- Dextrosa.
- Cloranfenicol
- Agar agar
- Agua destilada
- Cicloheximida.
USOS: Selectivo para el aislamiento de hongos patógenos de muestrasque puedan tener alto contenido de flora bacteriana.
Aislamiento de Hongos del aire Aislamiento de hongos del aire
En una caja petri con agar
Saboraud y otra con agar Litman
Exponerlas abiertas a la
corriente de aire por 15 min.
Incubar a temperatura
ambiente
Realizar lectura, reportar
características macroscópicas
Aislamiento de hongos en suelo
*Diluciones
hasta alcanzar
10 -6
Fundir Saboraud y Littman
Pesar 0.5 g de tierra y agregar a
un tubo 4.5mL de la solución salina estéril
Dil 1:10
Añadir el contenido
25º -30º se añaden 2 gts de la mezcla de
antibióticos. Penicilina-
Streptomicina 1:1
De las diluciones del
paso ( * )
colocar 1 mL de las diluciones
en dos cajas con agar Saboraud y dos con Littman
Incubar a temperatura
ambiente
Realizar lectura, reportar
características macroscópicas
Aislamiento de Hongos del suelo
Diluciones realizadas para el aislamiento micológico del suelo
Aislamiento de hongos de verduras y frutos
Aislamiento de Hongo de verduras y
frutas
Colocar un poco de tejido de la verdura o fruta que contenga el
hongo
Pasarlos unos minutos por hipoclorito
Incubar a temperatura
ambiente
Sembrar en agar Saboraud y
Littman
No realizar si el hongo es de
aspecto polvosoRealizar lectura,
reportar características macroscópicas
En el centro de la caja
BIBLIOGRAFÍA:
Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3 32
Bonifaz A. Micología médica básica. Edit. Méndez. 2a edición. México D.F.
1991.
Arenas, Roberto, Micología médica ilustrada, Edit. Interamericana McGraw-
Hill. 1°edición, 1993