Siembra

Que hacemos?

Cómo lo hacemos?

Porque lo hacemos?

Medio De Cultivo

Generales: permiten el crecimiento de cualquier tipo de bacteria

Selectivos: solo permiten el crecimiento de cierto tipo, por ej: solo un genero

Deferenciales: permiten distinguien entre dos o mas bacterias por caracteristicas bioquimicas.

Líquidos y otro materiales

Líquido Cefalorraquídeo

Centrifugar

BHI

ACh

Gram

Otro

Fresco / Tinta China

AS

Meningitis Bacteriana0-2 meses de edad:

• Bacilos Gram negativos.

• Estreptococos grupo B.

• Listeria monocytogenes.

2 meses-6 años de edad:

• Neumococo.

• Haemophilus influenzae.

• Neisseria meningitidis.

> 6 años de edad:

• Neumococo.

• Meningococo.

(80 %).

M.B. post-neurocirugía:

• Bacilos gram negativos (80%)

• Estafilococo aureus

• Estafilococos epidermidis (20 %).

M.B. asociada a "Shunts" :

• Estafilococo epidermidis (60 %)

• Estafilococo aureus (30 %)

• Bacilos gram negativos u otros (10 %).

M.B. recurrente:

• Neumococo

Líquidos de punción normalmente estériles articular, sinovial, extrabdominales, humor vítreo

Centrifugar

BHI

ACh

Gram

T-M Solo Sinovial

L AS

ZN

Giemsa

Fresco

Líquidos de punción abdominales, abscesos, empiemas, secreciones purulentas

Centrifugar

BHI

ACh

Gram

T-M EIP

L AS

ZN

Giemsa

(según la consistencia)

Fresco

Delgado

Líquidos de punción abdominales, abscesos, empiemas, secreciones

purulentas

Liquido ascítico

Fresco:– Celularidad, hongos, leucos, parásitos– KOH ( mucosas o dificil de disgregar)

10 ml(Con orden médica)

Biopsias De Tejido

TejidoObs

ervar

SF

Cortar rasgando en trozos pequeños

BHI

AChAS

Gram ZN

Giemsa

Fresco (KOH con trozo de tejido)

Rasgando!!

Averiguar por BACU u Hongos si no se pide

Muestras respiratorias

Hisopado Fauces

BC

AS OvinaCortes

(2 hemolisinas)

Baci S

Búsqueda: Streptococcus pyogenes

Muestras Respiratorias Bajas

Esputo– Espontaneo o inducido

Aspirado traqueal– Se introduce una sonda por la traquea y se

aspiran las secreciones. Similar al esputo en cuanto a procesamiento

Lavado bronquial– Con sln fisiologica mediante un endoscopio

Lavado bronquioalveolar (BAL)– Con fibroendoscopio se instila 120 ml de sln

fisiologia y se aspira. – Muestra de alveolos y bronquíolos. De

elección.

Tipos de muestras

Muestras Respiratorias Bajas

Mini-BAL– Se introduce un catéter telescopado en el

árbol bronquial y se hace avanzar hasta encontrar resistencia, seguidamente se hace avanzar el catéter interno y se instilan con una jeringa unos 25 ml de suero fisiológico estéril.

– El líquido recuperado y la punta del catéter interno se emplean para los estudios microbiológicos.

– Ventaja de no requerir el empleo de fibrobroncoscopio y se plantea como una alternativa a éste en el diagnóstico de la neumonía asociada a ventilación mecánica

Tipos de muestras

Esputo – Lavado bronquial – Asp. traqueal

3er. estría

1er. estría

2da. estría

Quemar

AS

Levin(Internados)

ACh

Gram

ZN

Giemsa

Fresco

“Frotis”

Importancia del fresco en el esputo

MUESTRA REPRESENTATIVA

>25 PMN/c < 10 Cel/c

<25 PMN/c > 10 Cel/c

MUESTRA NO ES REPRESENTATIVA

De la comunidad Nosocomiales

Streptococcus pneumoniae

Haemophilus influenzae

Moraxella catarrhalis

Staphylococcus aureus,

Streptococcus pyogenes

Bacilos gram-negativos

Bacilos Gram negativos:

P. aeruginosa,

K. pneumoniae,

A. baumanii,

Enterobacter spp.,

S. marcescens.

Cocos Gram positivos como S. Aureus

Agentes mas frecuentes de neumonia

Cocos gram

+C

ocos G-

AS

Levin

ACh

Gram

ZN

Giemsa

Fresco

MS

CLDE + ATB

Esputo -Aspirado traqueal – Lavado bronquialFIBROSIS QUISTICA

•Staphylococcus aureus •Haemophilus influenzae

•Burkholderia cepacia•Pseudomonas aeruginosa

Manitol Salado• Selectivo por su alta concentracion salina.• Stafilococos crecen y pueden o no fermentar el manitol.• SCP fermentan el manitol colonias amarillas • SCN no fermentan el manitol colonias rojas

CLDE + ATB: Selectivo para Burkholderia

Esputo -Aspirado traqueal – Lavado bronquialFIBROSIS QUISTICA

BAL

AS AChL AS50 uL 50 uL

Homog

enei

zar

10 a 20 ml o MAXIMO VOLUMEN posible

CentrifugarHomogeneizar

Gram

ZN

Giemsa

Fresco

4x P. carini

BAL

1 anzada en 1 placa de AS-Levin50 µl en 1 placa de AS50 µl en 1 placa de Ach

Siembra con ansa: Nro. de colonias x 200 (diluc. del ansa)= UFC/ml.

Siembra 50 µl (dilución 1/20): Nro. de colonias x 20 = UFC/ml.

Siembra 10 µl (dilución 1/1000): Nro. de colonias x 1000= UFC/ml.

Cultivo cuantitativo

Coprocultivo

XLDAS + ampi

Mac Conkey sorbitol

Caldo selenito

OtroAM

Observaciónmacroscópica

• Menores de 6 años

• MF sanguinolenta

• 18 hs de

incubacion (no más)

Coprocultivo

Azul de metileno

> 5 leucos/ campo 1000x

INFLAMACIÓN

Coprocultivo

XLD

Colonias rosadas con centro negro

(lactosa negativa, productora de sulfhídrico)

Colonias transparentes del mismo color del

medio (roja) o rosada (lactosa negativa)

Colonias amarillas(lactosa positiva)

Coprocultivo

ProbableShigellaProbable

Salmonella

ProbableE. coli

AS + AmpiAeromonas

spp (BGNNF)

Mac Conkey sorbitol

Colonias rosadas transparentes

(no fermentan sorbitol)

Probable E. coli

O157:H7

Salmonella Typhimurium ATCC

14028 XLD Agar - Klebsiella pneumoniae

Urocultivo

CLDE

CPS

1 anzada = 20 uL

1 colonia = 200 UFC/ml

Fermentadores de lactosa

Colonias amarillas

ROSA

INCOLORA CON FONDO MARRON

VERDE

E. coli

Grupo KES

Proteae

10 ml

1 ml

Urocultivo

Muestras genitales

Orina micción inicial Semen Exudado uretral Exudado endocervical Búsqueda de Streptococcus

agalactiae Exudado vaginal (Flujo)

Hombres

Mujeres

Muestras genitalesENDOCERVICAL o URETRAL FLUJO VAGINAL

Chlamydia trachomatis Candida

Neisseria gonorrhoeae Trichomonas vaginalis

Ureaplasma urealyticum Complego GAMM ( vaginosis bacteriana

Mycoplasma hominis St. agalactae

Actinomyces spp

Exudado vaginal• Agar sangre (G. vaginalis, St.agalactiae, S. aureus)

• Gram: Score de Nouget

• Fresco: levaduras, TRICHOMONAS

Exudado endocervical y uretral

CULTIVO– AS– Ach

Thayer – Martin: – Aislamiento selectivo de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria

meningitidis. – Agregado de hemoglobina, un suplemento de enriquecimiento

(Britalex) y una mezcla antimicrobiana

Gram

Busqueda de St. agalactiae

BHI +colistin+nalidíxico o gentamicina

• Si tiene Flujo, se procesa primero eso• Si son dos hisopos se procesan por separado

AS

18 a 24 hs de incubación