REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD DEL ZULIAFACULTAD DE MEDICINACENTRO DE INVESTIGACION ENDOCRINO-METABOLICASDR. FELIX GOMEZ

REPLICACION

Prof. Estevan. A. Marin. G.

Maracaibo, Marzo 2016

REPLICACION

Es semiconservativa, ordenada y secuencial.

Utiliza sustratos activados (Desoxiribonuneotidos 5 –

trifosfato dNTP).

La replicación del ADN es discontinua.

Bioquímica de Christopher. Mathews

La Replicación es Semiconservativa.

Enzimas de la Replicación

Primasa.

Síntesis de las secuencias

cebadoras de ARN.

DNA Polimerasa

DNA Polimerasa I

DNA Polimerasa II

DNA Polimerasa III

DNA Ligasa

Elongación de la cadena de Polinucleótidos.

Replicación discontinua del ADN.

SSB

Mantenimiento de la

conformación optima del

molde

Helicasa

Desenrollamiento del ADN, encima de la horquilla.

Topoisomerasa

Alivio de las tensiones de

torsión. Bioquímica de Christopher. Mathews

DNA Polimerasa

Cataliza la reacción química de la síntesis de ADN.

Permite la creación de los enlaces fosfodiéster.

Cataliza el crecimiento de la cadena de ADN en la dirección 5 → 3.

Es dimérica, debido a que ambas cadenas están en un

posición antiparalela.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Generalidades.

DNA Polimerasa

Mecanismo de Acción.

Ataque Nucleofílico

Apareamiento de las Bases.

1

2

DNA Polimerasa

Procariotas. Polimerasa I Completa los fragmentos de

Okazaki, reparación.

Polimerasa II Reparación del ADN dañado.

Polimerasa III Principal polimerasa replicativa.

Polimerasa IV

Polimerasa VPasar por alto las lesiones.

Bioquímica de Thomas. Devlin

DNA Polimerasa

Eucariotas. Polimerasa α Cebado de la Replicación.

Polimerasa β Reparación por escisión de base.

Polimerasa γ Replicación de ADN mitocondrial.

Polimerasa δ Principal polimerasa replicativa.

Bioquímica de Thomas. Devlin

Helicasa

Helicasa

Son proteínas multiméricas.

Catalizan el Desenrollamiento

dependiente de ATP de la doble hélice del ADN.

La principal Helicasa de la replicación es DnaB.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Helicasa

Mecanismo de Acción.

Bioquímica de Christopher. Mathews

TopoisomerasaTopoisomeras

a Grupo de enzimas que pueden intercomvertil diferentes

isómeros tipológicos del ADN.

Mecanismo giratorio para aliviar la tensión de torsión

del ADN.

Existen dos tipos de Topoisomerasa I y II.

Topoisomerasa

Mecanismo de Acción.

Topoisomerasa I

Mecanismo de Acción.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Rompe una sola cadena

Forma un enlace

fosfodiéster entre el P 5 y

OH de tirosina.

El extremo 3 gira

1 2

3

El extremo 3 ataca al

extremo 5 cerrando la

mella

4

Topoisomerasa II

Mecanismo de Acción.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Rompe ambas

cadenas

Proteína de Unión al ADN (SSB).

Son proteínas desestabilizante de la

hélice.

Mantienen el molde en la conformación de una sola cadena extendida con las

base4s expuestas.

Esencial para la replicación, reparación del ADN y recombinación

genética.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Procariotas.

Proteína A de Replicación (RPA).

Son proteínas de unión a cadena de ADN sencilla.

Mantienen el molde en la conformación de una sola cadena extendida con las

base4s expuestas.

RPA

Bioquímica de Thomas Devlin

Eucariotas.

Primasa.

Actúa en la cadena Retardada.

Sintetiza el RNA cebador para la síntesis de los

Fragmentos de Okasaki. Permite que la síntesis de la cadena retardada se de en

dirección 5→3.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Primasa.

3´

Bioquímica de Christopher. Mathews-

DNA Ligasa.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Cierra de manera covalente las mellas de

ADN.

La mella debe contener extremos 3 OH, 5 P.

La DNA Ligasa se activa por adenilación del residuo de lisina

del sitio activo.

DNA Ligasa.

Bioquímica de Christopher. Mathews

Mecanismo de Acción.

Etapas de la Replicacion.

INICIACION

ELONGACION

TERMINACION

Iniciación de la Replicación.

Ciclo Celular.

G1

Células que cesan la división. Fase

S

Replicación del ADN.

G2

MMitosis

CA

Iniciación de la Replicación.

Ciclina D

Activa

CDK4 CDK

6

Fosforilan

Rb E2F

RbP

E2F

Transcripción de genes

↑ Enzimas de Replicación.

CE CDK2

CEXCDK2

CA

CDK2

Síntesis de ADN.

Origen de la Replicación en Procariotas.

DnaA

DnaCDnaBÚnico Sitio de Origen.

Origen de la Replicación en Eucariotas.

ORC

ORC

T - A

ORC

MCM ORC

Origen de la Replicación en Eucariotas.

Horquilla de Replicación.

Horquilla de Replicación.

Componentes.

ADN Helicasa

Primasa

DNA Polimerasa

SSB – RPA.

Horquilla de Replicación.

Cadena Retardada.

Replicación del ADN (Procariotas).

Replicación del ADN (Eucariotas).

Pol δ

RPA

Primasa + Pol α

Pol δ

RNAsa H

Terminación de Replicación (Eucariotas).

Punto de terminació

n 180˚.

Defectos en la Replicación del ADN.

Lesiones en el ADN.

Despurinación

Metilación

Mutaciones en el ADN.

Mutaciones Puntuales

Mutación sin sentido

Inserción y Deleción

Reparación por Escisión de Bases.

Ap Endonucleasa

Ap Liasa

Reparación por Escisión de Nucleótido.

Gracias!!!.