Ejemplo: Un disacaridasa de la levadura pude hidrolizar sacarosa y maltosa, de acuerdo a la siguiente tabla:Sacarosa(Mm)Glucosa liberada(moles/10min)Maltosa(mM)Glucosa liberada(moles/10min)

540548

10601080

208020120

5010050172

100109100200

Utilizar todos los mtodos cintica de Michaelis Menten para calcular Km respectivos y las velocidades mximas, para cada sustrato, en las condiciones del experimento.Las reacciones catalizadas por el enzima sern:Sacarosa+ Agua Glucosa + Fructuosa Maltosa+ Agua 2 Glucosa

La velocidad habr que medirla contabilizando moles de sustrato transformado, en vez de moles de glucosa liberada. En el primer caso ambos valores coincide; en el segundo, no.Se calcula la tabla de inversos (1/ [S]) Y (1/V), en mili moles de sustrato hidrolizado en 10 min. A.- SUSTRATO : SACAROSALa velocidad usamos el sustrato trasformadoGlucosa liberada=sacarosa consumida Sacarosa inicial (mM)glucosa liberada (mmoles/10 min)v = sacarosa consumida (mmoles/10 min)1/S1/vv/ss/v

50,040,040,2025,000,008125,00

100,060,060,1016,670,006166,67

200,080,080,0512,500,004250,00

500,10,100,0210,000,002500,00

1000,1090,1090,019,170,001917,43

A.1.- MICHAELIS MENTEN:

Vmax (aproximado)0,113mmol/min

Km (aproximado)10 mM

A.2.- LINEAWEAVER

A.3.- EODI-HOFTEE

A.4.- LAGMUIR

B.-SUSTRATO: MALTOSAGlucosa/Maltosa = 2/1

Maltosa inicial (mM)Glucosa Liberada (mmoles/10 min)v = Maltosa consumida (mmoles/10 min)1/S1/vv/ss/v

50,0480,0240,2041,670,0048208,33

100,080,040,1025,000,0040250,00

200,120,060,0516,670,0030333,33

500,1720,0860,0211,630,0017581,39

1000,20,10,0110,000,00101000,00

B.1.- MICHAELIS MENTEN:

Vmax (aproximado)0,102 mmol/min

Km (aproximado)15mM

B.2.- LINEAWEAVER

A.3.- EODI-HOFTEE

B.4.- LAGMUIR