PRODUCCION DE HONGOS

ENTOMOPATOGENOS

Ing. Yuri Calle CIP 54390

yurihcalle@hotmail.com 1

QUE SON?

Micosis : Infección

Obtienen su nutrición a partir de insectos.

Entomo = Insecto

Pathos = enfermedad

Se conocen aproximadamente 100

géneros de 700 especies.

HONGOS ENTOMOPATÓGENOS

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ENTOMOPATOGENO:

Son microorganismos que enferman a los insectos plagas.

Pueden ser: Hongos, bacterias, virus, nematodos, etc.

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Existen 3 métodos de aplicación de los insectos benéficos para lograr las reducciones de las plagas:

• Inundativo

• Inoculativo

• Conservación

Aplicación del control biológico:

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HONGOS BENEFICOS

IMPORTANTES EN EL PERU

ENTOMOPATOGENOS Beuveria bassiana

Beauveria brogniartii

Paecilomyces fumosoroseus

Lecanicillium lecanii

Metarhizium anispliae

Entomophthora virulenta

Entomophtora muscae

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ANTAGONISTAS. Trichoderma harziamun

Trichoderma viride

T. virens

T. stromaticum

T. lignorum

Gliocladium sp.

NEMATOPATOGENOS Paecilomyces lilacinus

Hirsutella sp

Pochonia clamidosporium

HONGOS BENEFICOS

IMPORTANTES EN EL PERU

Crecimiento de algunas especies patógenos de insectos . (a) Beauveria bassiana, (b) Metarhizium anisopliae, (c) Lecanicillium lecanii, (d) Entomophthora spp.

(Zygomycota), este ultimo produce únicamente esporangios.

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1. Presentan grados variables de

especificidad, específicos a nivel de familia

o especies muy relacionadas

2. Se reproduce y renueva en forma continua,

es decir, se vuelve persistente.

3. Se pueden aplicar mezclas de hongos

entomopatógenos con dosis sub letales de

insecticidas para lograr efectos sinérgicos.

4. No contaminan el medio ambiente ni

afectan al hombre

VENTAJAS DE ESTOS HONGOS

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1. Sensibilidad a la variación de las

condiciones climáticas

2. Requieren de condiciones de

almacenamiento más exigentes que las

moléculas inorgánicas.

3. En general, los insecticidas biológicos no

matan instantáneamente.

DESVENTAJAS DE ESTOS HONGOS

CLASIFICACION DE LOS ENTOMOPATOGENOS

CLASIFICACION DE LOS ENTOMOPATOGENOS

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CARACTERIZACION DE LOS HONGOS

La descripción y la caracterización de estos hongos

se realiza a través de la morfología de sus distintas

estructuras.

Penicillium sp.

Botrytis cinerea

Conidias

Conidióforo

ESTRUCTURAS DE

REPRODUCCION

ASEXUAL:

-Conidias (Deuteromycetes)

-Esporangios (Zygomycetes)

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Hongo con micelio blanco, a la madurez se torna ligeramente crema a amarilla. Produce abundante esporulación, y también los conidios, fialides y conidióforos son blancos.

Beauveria bassiana

El conidióforo puede ser simple o ramificado, de alli nace las celulas conidiogenas, las conidias se originan en forma simpodial, es decir en zig-zag.

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Beauveria bassiana: origen de las células esporogenas, que se originan en sucesión acropetala.

Su máxima capacidad de penetración e infección se ve favorecida a Tº de 20°C y HR mayor del 92%.

Beauveria bassiana

Parasitismo de Beauveria bassiana

Prueba en campo Beauveria bassiana

Prueba de patogenicidad por el entomopatógeno

sobre Dagbertus sp. - 2009

Fuente: Soluciones agrosostenibles SAC.

Patogenicidad de Beauveria bassiana en Dagbertus sp.

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Colonias de color lila claro a marrón, desarrollo

rápido, con aspecto polvoriento y granular.

Paeciliomyces sp. es un hongo moniliaceo, que se

propaga a través de estructuras de reproducción

asexual como son los conidios.

Paecilomyces fumosoroseus

Es un hongo común

del ambiente que se

encuentra

parasitando e

infectando a ciertos

insectos .

Paecilomyces fumosoroseus:

Parasita eficientemente mosca blanca en cultivos de tomate en invernadero. Controla eficazmente huevos, larvas y adultos de Trialeurodes vaporariorum, Bemisia tabaci y Aleroidicus dispersus

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A: Paecilomyces elegans, B: P. fumosoroseus, C: P. bacilispora, D: P. terricola.

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El micelio tiene una coloración blanca liláceo,

el conidióforo bien desarrollado, simple o

ramificado. En algunos especies la célula

conidiogena nace directamente de la hifa, y da

lugar a las conidias.

La producción de conidias es en cadena, con

crecimiento basipetalo.

Paecilomyces fumosoroseus

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P. fumosoroseus ,es un hongo con alta capacidad

de parasitar mosca blanca, especialmente Bemisia

tabaci , Bemisia argentifolii y Aleurotrixus flocosus.

Paecilomyces fumosoroseus

Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y muerto por el hongo entomopatogeno

Paecilomyces

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Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y muerto por el hongo entomopatógeno Paecilomyces

fumosoroseus

hongo

Alas de Bemisia tabaci

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Mosca díptera, infectado y muerto por el hongo entomopatogeno Entomophthora sp.

Entomophthora sp.

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Metarhizium anisopliae

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Puede infectar estadios como huevos, ninfas, pupas y adultos). Las condiciones que favorecen para la penetración e infección es entre 22 a 30° C y humedad relativa de 75 al 100%

Metarhizium anisopliae

Colonias de color verde olivo a oscuro, que varían desde el oliváceo hasta verde amarillo o verde oscuro.

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Metarhizium anisopliae

Conidioforo ramificado en forma alternada , conidias cilíndricas a ovales que se forman en cadenas originadas en fialides. Las conidias se originan a partir de las fialides con sucesión basipétala, estando la conidia más joven en la base de la cadena. Las conidias son blancos cuando son jóvenes, pero conforme maduran toman el color verde oscuro característico de esta especie.

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Los insectos infectados por este hongo presentan un moho, color verde oscura.

Metarhizium anisopliae

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Adultos de Metamasius hemipterus sericeus, infectados por el hongo Metarhizium anisopliae

Metarhizium anisopliae

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Lecanicillium lecani afectando Pulgón

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Es un hongo con colonias color blanco, micelio sumergido en cultivo in vitro. Al estado de madurez en placa con medio PDA tiene aspecto de polvo.

Pochonia chlamydosporia

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MECANISMO DE INFECCION DE ENTOMOPATOGENOS

1. Adhesión y germinación de la espora en la cutícula del insecto.

2. Penetración dentro del hemocele.

3. Desarrollo del hongo que resulta en la muerte del insecto-

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CICLO BIOLOGICO DEL ENTOMOPATOGENO

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MECANISMO DE INFECCION DE ENTOMOPATOGENOS

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NEMATOPATOGENO

Trichoderma spp.

Trichoderma es un hongo que pertenece a los

ascomicetes su fase perfecta y los Deuteromycetes su

fase asexual.

En La mayoría de las especies, fase asexual se caracteriza

por tener un color verde brillante o blanco amarillento por

el conglomerado de conidios.

Las colonias son al principio blancas y algodonosas.

La estructura de multiplicación asexual son las conidia,

cuyo color le da la tonalidad de colonia verde. La

conidiogenesis en algunas especies son favorecidas con

la luz azul .

Bajo condiciones desfavorables de crecimiento, este

hongo tiene la capacidad de formar clamidosporas a partir

de su hifa.

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HONGO TRICHODERMA VIRIDE

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HONGO TRICHODERMA VIRIDE

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MECANISMOS DE ACCIÓN

Según Harman et al. el micoparasitismo es el principal mecanismo de acción de Trichoderma, sobre su hospedante.

•Competencia

•Antibiosis

•Micoparasitismo y lisis enzimática.

•Inducción de resistencia

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Antibiosis

Trichoderma actúa sobre su antagonista

produciendo ciertos metabolitos como parte

de su metabolismo normal.

Estos pueden ser como viridinas, gliotoxinas,

etc, las cuales actúan directamente sobre

otros organismos, para inhibir el crecimiento

y desarrollo.

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Luego de entrar en contacto la hifa de

Trichoderma, esta ejerce una presión mecánica

sobre la hifa del hospedante (patógeno).

Luego hay una explosión metabólica al

reconocimiento de su hospedante y da lugar a la

producción de enzimas quitinoliticas para

degradar las quitinas del hongo patógeno.

Seguidamente hay mecanismos de absorción de

contenido citoplasmático del patógeno por

Trichoderma.

Micoparasitismo

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Micoparasitismo

T= hifas de Trichoderma, R= hifas de R. solani

T= hifas de Trichoderma, R= hifas de R. solani

T

R

1. Selección cepa adecuada.

2. Selección del medio de cultivo que permita

obtener el máximo potencial patogénico del

microorganismo.

3. Producción tecnológica con bajo costo.

4. Formulación que permita almacenar por

períodos prolongados, facilidad de aplicación y

estabilidad en condiciones de campo.

PRODUCCION DE ENTOMOPATOGENOS

Aspectos a tener en cuenta: (Soberanis, W. - SENASA)

1. Primera etapa: OBTENCION DE LA CEPA DE HONGO

2. Segunda etapa: MULTIPLICACION IN VITRO DE P. fumosoroseus.

-Multiplicación en medio PDA

-Multiplicación en frascos.

3. Tercera etapa: PRODUCCION MASIVA DEL ENTOMOPATOGENO

-Aislamiento del hongo en campo -Pruebas de patogenicidad

-Multiplicación en medio sustrato sólido

Aplicación en campo del entomopatógeno

4. Control de calidad del hongo formulado.

-Viabilidad de conidias o esporas -Pureza

-Concentración de conidias o esporas

ETAPAS DE LA PRODUCCION DE ENTOMOPATOGENOS

ESQUEMA DE LA PRODUCCION DE ENTOMOPATOGENOS

Proceso de producción de Trichoderma

spp. en sustrato sólido. Tesis para M Sc Yuri Calle.

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PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE ANTAGONISTAS

Se puede realizar mediante cultivo o confrontacion dual, sin embargo es mas efectiva el método de las placas precolonizadas

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METODO DE LAS PLACAS PRECOLONIZADAS

Fuente: Tesis MSc. Yuri Calle-UNALM

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Crecimiento de Trichoderma viride A y Trichoderma sp. de Chincha B, sobre un aislamiento de R. solani procedente de Chincha. Tesis para M Sc Yuri Calle- UNALM

PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE Trichoderma spp. IN VITRO

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Crecimiento de Trichoderma spp. : T. viride A, aislamiento Ca1 de Cañete B, Ch1 de Chincha C, y T. harzianum D, sobre un aislamiento de R. solani procedente de Chincha Tesis para M Sc Yuri Calle- UNALM

PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE Trichoderma spp. IN VITRO

Daños en cuello y raíces en

plántulas de algodón causado

por R. solani. Testigo (control)

A, Control químico B,

Inmersión con Trichoderma

sp. Ch1 C, Trichoderma viride

+ estiércol ovino D,

Trichoderma sp. Ch1 +

estiércol ovino E, Trichoderma

sp. Ca1 + estiércol ovino F.

Tesis para M Sc Yuri Calle-

UNALM

PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE Trichoderma spp. EN CAMPO

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Cámara de Neubauer vista al microscopio (40X).

CONCENTRACION DE CONIDIAS

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Buenas Prácticas de Producción

Las Buenas Prácticas de Producción (BPP) son una

herramienta básica para la obtención de productos

seguros que se centralizan en la asepsia y forma de

manipulación.

Microorganismos modificados genéticamente: alto

riesgo

- Microorganismos autóctonos: Menor riesgo

- Microorganismos exóticos: riesgo variable

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La bioseguridad es un conjunto de medidas y

procedimientos destinadas a proteger al operador , a la

comunidad y al ambiente, de los riesgos que entraña el

trabajo con estos agentes.

El riesgo biológico : Es la probabilidad de que ocurra

un daño sobre el personal del laboratorio, los animales

o el ambiente asociado a la producción, uso y

manipulación general de los agentes biológicos.

SEGURIDAD Y CUIDADOS

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