Post on 02-Apr-2015
Química Biológica
Seminario Enzimas
Definición
Son catalizadores biológicos
Principalmente de naturaleza proteíca
Difieren de la actividad de otros catalizadores
Mecanismo de acción
Modelos de acción
Modelo llave-cerradura Modelo de ajuste inducido
Características de la AE
• Son termolábiles
• Alta eficiencia
• Gran especificidad
• Están sujetas a una gran variedad de controles celulares, genéticos y alostéricos.
Clasificación
Según la reacción en la que participan:
• Hidrolasas
• Oxidoreductasas
• Transferasas
• Liasas
• Isomerasas
• Ligasas
Holoenzimas
Cofactor
Proteína +
Coenzima
Efecto de la temperatura
Efecto del pH
Inhibidores
Sustancia que hace disminuir la actividad enzimática,
Esta definición excluye todos aquellos agentes desnaturalizantes
Dos tipos de inhibidores:
I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activoII. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la molécula.
Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:
1. Inhibidor reversible:
E + I EI
2. Inhibidor irreversible:
E + I E’
ES + I ESI
Inhibición competitiva
Inhibición no competitiva
Parte experimental
Objetivo:
Identificar enzimas a partir de su actividad especifica.
Lipasa
Cataliza la hidrólisis de los TAG
Es secretada por el páncreas
Lipasa
Sacarasa
Cataliza la hidrólisis de sacarosa
La extraemos de levaduras
1 g Levadura
20 ml de Acetona
Centrifugar
Filtrar y
secar
Resuspender en buffer
Agregar 5 ml de agua
Sacarasa
Ensayo de Fehling
Catalasa
Enzima oxidoreductasa hepática
1 g de higado
+
5 ml de Peroxido de hidrogeno
O2
Inhibición enzimática
Inhibición de la GOD por azida de sodio
1 gr. de levadura
50 ml de buffer fosfato de sodio 0.01 M NaCl 0.1.
5 ml de glucosa 10 mM
Inhibición
Rvo de trabajo: GOD, POD, Fenol y 4 aminofenazona
Reacción de identificacion