UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓNFACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

UDIRECCIÓN DE POSGRADO

Título:Grupos trabajando en inmunología

Dr. Peter Mundel

presenta: Felipe de Jesús Torres del Muro

Clase:Tópicos en

Inmunología II

02 de Marzo del 2016, San Nicolás De los garza, Nuevo

León.

INTRODUCION:Departamento se encarga en la búsqueda de nuevos blancos de estudio en nefrología, tratamientos personalizados para proteinuria de daño renal, con los detalles mecánicos y bajo que vías de señalamiento se regulan las funciones de podocitos sanos y en enfermedad.

PRINCIPALES:

Dr. Peter MundelLaboratorio de

nefrología

OBJETIVOS DE GRUPO DE TRABAJO: Se encarga del estudio del citoesqueleto de actina, mecanismo de vida y regulación metabólica en estados sanos y enfermedades, con específicos focos en sinaptopodina y señalización de Rho GTPase, así como el rol de B7-1/CD80 en señalización en podocitos.

Fisiología Renal

Autoasociación

Regulación transcripcional Dominio de unión a DNA/RNA

408-410

KTS

71

17 aa

449250-26618092 1011

SD

R A ZN ZN ZN ZN

Su principal función es la de activar o inhibir la transcripción de mas de 20 genes diferentes mediante su unión a los promotores.

activación

represión

Jamie A. Davis, 2003.Sangeeta y cols.

Diferenciación proliferación celularOrganogenesisapoptosis

WT1

Trabajo del Dr Mundel:El trabajo con una cultivo primario de podocitos inmortales de raton (immunomorten).EL Dr Sallem , transformo e inmortalizo un cultivo primario de podocitos humanos (SV-40).

Trabajo del Dr Mundel: Propuesta

Expresión de WT1 en podocitos de SU. A-C) Muestras de SS. D-F) Pacientes con SIN. A y D) WT1 marcado con Rojo Texas. B y E) DAPI núcleos(azul). C y F) Traslape de la marca de WT1 y DAPI. C) Localización núcleo/citoplasma de la expresión de WT1 en podocito en SS (mayor correlación). F) Localización de la expresión de WT1 en el citoplasma (menor correlación) en SNI.

SSSN

I

WT1/Rx DAPI Traslape

A

FED

CB

Determinación del número de podocitos en SU en SS y con SNI.

Diseño experimental

Línea celular de podocitosCultivo primario de podocitos

•Viabilidad•Adherencia •Movilidad

RT-PCRmicroarreglosRNA

Tratamiento con RNAi y WT1 exógeno

1

DNAc

sacrificio

Diseño experimental2

RNAi y WT1 exógeno en cultivo de tejido (24 y 48 horas)

Nefrotecmización

Morfología glomerular por H&E y microscopia

PCR punto final para determinar que Isoformas de WT1 prevalecen en el tejido renal

Modulación por wt1 en la expresión de genes involucrados en apoptosis, adhesión de podocitos y mantenimiento del glomérulo por IFI

Sedimento Urinario y tejido

renal

Inmunofluorescencia indirecta

Determinar la colocalización y el número de podocitos en el SU que expresan WT1Observación, análisis y fotografía (20 y 40X) por microscopia de fluorescencia.

3

Diseño experimentalPCR punto final para determinar que Isoformas de WT1 prevalecen en el sedimento y en tejido renal

Coeficiente de correlación de Pearson (r2)•Valores < 0.57 = expresión de WT-1 en citoplasma•Valores ≥ 0.58 = expresión de WT-1 en núcleo y citoplasma•Valores > 0.80 = expresión de WT-1 en núcleo