7-Diagnostico Serologico

7/24/2019 7-Diagnostico Serologico

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REINALDO ANDRS MORELLI PREZ

Docente.


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INMUNIDAD ESPECFICA:

Mecanismo de defensa que puede adquirirse porcontacto con el agente o sus antgenos a travs de una

infeccin, por inoculacin voluntaria (vacunacin) o poradministracin de anticuerpos preformados en otroorganismo (anticuerpos maternos transferidos a travsde la placenta o por administracin de sueros

hiperinmunes).


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Esta respuesta es especfica y con capacidad dedistinguir entre lo propio y extrao; en las ocasiones en

las que existe conflicto en este reconocimiento aparecela enfermedad autoinmune.


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La respuesta es mas o menos persistente y capaz,adems, de dejar recuerdo de este su primer contacto

con el antgeno (memoria inmunolgica) que lepermitir reaccionar de forma ms eficaz y violenta enlas exposiciones posteriores al mismo antgeno.


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El hecho de que el organismo disponga de unarespuesta inmune especfica no solo capacitarpara defenderse de esos agentes sino que nos

permitir conocer en muchos casos la presenciade una enfermedad infecciosa.

Esta es la base del diagnstico microbiolgicoindirecto.


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La especificidad es la propiedad que permite alsistema inmune responder frente al agente externo quela provoc y que esa respuesta no afecte a otros

antgenos, incluso a aquellos que pudiesen tener unparecido molecular (reaccin cruzada). Cuanto msespecfica y a fin sea esa respuesta ms efectiva ser suunin al agente provocador.


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La memoria inmunolgica permite que el sistemainmune recuerde haber tenido contacto previo con unantgeno y responda frente a l de forma anamnsica.

Esta respuesta ser ms rpida y violenta, unindose alorganismo una gran concentracin de anticuerpos enmuy poco tiempo. Esta propiedad es la basefundamental de la eficacia de las vacunas.


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Mtodos cuantitativos: Concepto de "ttulo de unsuero"

En muchas ocasiones interesa conocer no slo si elpaciente tiene o no anticuerpos frente a un/unospatgenos determinados sino qu concentracin o tasade ellos tiene. Esto es til ya que para muchas

infecciones es posible correlacionar la concentracincon la situacin clnica o decidir si aquella ha sido unarespuesta eficiente como resultado de una vacunacin.


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Mtodos cuantitativos: Concepto de "ttulo de unsuero"

Para ello, realizamos diluciones seriadas del suero queirn sucesivamente disminuyendo la concentracin deanticuerpos; el ttulo del suero ser la ltima dilucindel suero que da una reaccin positiva. Segn esto, un

suero con un ttulo 1/32 tendr menos anticuerpos queun suero con un ttulo 1/256.


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Necesidad del diagnstico indirecto

Existen situaciones en las que el diagnstico indirectose hace indispensable. Estas son:

1) Los cultivos, en ocasiones, pueden ser negativos silas muestras se obtienen despus del tratamiento oporque el virus no es cultivable.

2) El aislamiento del patgeno puede ser imposible sila muestra se tom tarde cuando el agente ya no seelimina.


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Necesidad del diagnstico indirecto.

3) En algunas fases subagudas de la enfermedad losmicroorganismos son difcilmente recuperables.

4) La interpretacin de un aislamiento puede serconflictiva cuando existe el estado de portador sanoque puede eliminarlo durante bastante tiempo despusde la fase aguda.

5) En casos atpicos o asintomticos.

6) En los aislamientos mixtos en los que es difcilpredecir cul es el agente etiolgico causal.


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Utilidad de los estudios serolgicos

1.- Estudios de diagnstico

Aunque el diagnstico directo tiene muchas ventajas,existen situaciones en las cuales ste no es posible o esmuy caro. En general se trata de infecciones vricas de

aislamiento difcil o no vricas pero de patgenodifcilmente cultivable o no cultivable. En estos casos, eldiagnstico indirecto puede darnos a conocer laetiologa de la infeccin.


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Utilidad de los estudios serolgicos

2.- Estudios epidemiolgicos

La demostracin del estado inmunitario de una

poblacin con respecto a uno o varios patgenos puedehacerse fcilmente mediante este tipo de diagnstico.El estudio retrospectivo de los anticuerpos presentesnos indicar la prevalencia de este microorganismo/sen dicha poblacin y dependiendo de su distribucinetaria la conveniencia o no de establecer campaas devacunacin.


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LAS DIFERENTES PRUEBAS SEROLGICAS

En el momento de realizar pruebas diagnsticas de

enfermedades infectocontagiosas hay dos posibles vasprincipales: pruebas directas encaminadas a ladeteccin del agente etiolgico o de parte de su ADNen el animal afectado, o pruebas indirectas que

demuestran que el sistema inmune del individuoafectado ha estado en contacto con el agente encuestin.


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1- Precipitacin.

La adicin de un antgeno soluble a una solucin conanticuerpos homlogos resulta en la formacin de

complejos inmunes que precipitan de la solucin.Cuando se aumenta la cantidad de antgeno que seaade se forman cantidades variables de complejos ycon esto de precipitado, obteniendo la mayor cantidad

de complejos cuando la proporcin de antgeno yanticuerpo en la solucin es equivalente o ptimo.


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2- Inmuno difusin:Cuando esta tcnica se utiliza en un medio semisolidocomo los geles de agar en los cuales los doscomponentes el antgeno y el anticuerpo migran a

travs del agar hasta que se encuentren y precipitan enel lugar donde su proporcin es optima, se trata deinmunodifusin.


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3- Inmunoelectroforesis:

En lquidos que contienen mezclas de antgeno sepuede aplicar primero una electroforsis para separar

los antgenos presentes y luego la inmunodifusin parasu identificacin.


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4- AglutinacinAnticuerpos pueden reaccionar con un antgenodeterminado y luego interconectar entre ellos odiferentes componentes antgenos presentes porejemplo en la superficie de una bacteria. til en laidentificacin de bacterias, hongos e incluso protozoosmedinte antisueros especificos.

Del mismo modo utilizando un antgeno purificadoespecifico se puede demostrar la presencia deanticuerpos frente a este antgeno en una muestra.


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5- Fijacin de complemento (CFT)

El test de fijacin de complemente utiliza el hecho deque complejos de anticuerpo y antgeno activan el

sistema de complemento que, entre otras actuaciones,causa la lisis de eritrocitos que muestran antgeno.


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6- Hemaglutinacin e inhibicin de la misma (HA yHAI)

Algunos virus, especialmente los Paramixovirus aviares

o los virus de influenza, pueden adherirse a lasuperficie de los glbulos rojos y aglutinarlos. Esto, y elhecho que la presencia de anticuerpos inhibe estaaglutinacin es utilizado en una tcnica serolgica que

se aplica con frecuencia.


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7- Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

El descubrimiento de que una serie de encimas comopor ejemplo la fosfatasa alcalina se podan ligar a

anticuerpos sin perder su actividad ni interferir con laaccin de los anticuerpos llevo al desarrollo de un grangrupo creciente de pruebas diagnsticas queaprovechan la posibilidad de detectar los anticuerpos

mediante la actividad de la encima ligada.


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8- Radioimmuno assay (RIA)

Este sistema utiliza una metodologa similar a la delELISA o de la inmunofluorescencia, pero aplicando

moleculas marcados con radioisotopos. Esto hace eltest extremadamente sensitivo y permite detectarcantidades mnimas de antgeno o anticuerpos.


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9- Inmunofluorescencia

En la inmunofluorescencia se utilizan inmunoglobulinasmarcadas con sustancias fluorescentes como

isotiosyanato de fluorescina o rhodamina, parecido alas encimas empleados en los ELISA. Se trata de unmtodo muy sensible pero que requiere el uso de unmicroscopio de fluorescencia con lampara de mercurio

y experiencia en la interpretacin para evitar errores.Tiene un campo muy amplio de aplicacin y se utilizacon frecuencia para la deteccin de antgeno en tejidos.


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