Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes

8/19/2019 Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes

1/56

Aislamiento e

identifcación deListeria

monocytogenes

en muestras clínicas

Lic. TM JUAN C. RIVEROS

QUINTANA

HOSPITAL NACIONAL DOCENTE MADRE NIOSAN !ARTOLOME

LA!ORATORIO DE MICRO!IOLO"IA


2/56

• Durante más de 7 a!"s Listeriamonocytogenes #a sid" rec"n"cid"

C"m" un a$ente %at&$en" #uman" 'causa in(ecci"nes %rinci%a)mente ' enmu*eres em+ara,adas - recinnacid"s' tant" c"m" en %acientes c"n

immun"su%resi&n $ra/e c"m" VI0' endia+etes me))itus ' en )a insu1ciencia#e%ática' %acientes c"n tratamient"de cáncer - en #em"diá)isis.

Listeri"sis y Listeria

monocytogenes


3/56

Listeria monocytogenes

Ais)ada en 2345 %"r Murra-' 6e++ -Sann8 Murra-' R. 9. D.' et a). J. :at# ;atc.'43


4/56

En )"s anima)es< A(ecta a) "/in"'ca%rin"s' +"/in"s' a)%acas. LM

%uede causar mastitis en /acas' rar"en cerd"s' %err"s' c"ne*"s ' c"+a-"s'a/es.

:r"duce Ence(a)itis mas (recuentes

en )"s rumiantes' se%sis másc"rriente en )"s r"ed"res - )as a/es.:uede "currir in(ecci&n uterina en )a/aca antes de) s%tim" mes de:re!e,.



5/56


"R#POS DE RIES"O

Mu*eres em+ara,adas' ne"nat"s' inmun"su%rimid"s

DISTRI!#CI$N DE CASOS @ As"ciad"s a em+ara," 82B4 cas"s2. nacimient"s/i/"s>

Mu*eres em+ara,adas M"rta)idad< :rdida (eta)< 2B4

Ne"nat"s M"rta)idad< #asta 5@

7 Adu)t"s de )"s %acientes s"n ma-"res de 7 a!"s 3 de )"s %acientes tienen en(ermedad su+-acente

M"rta)idad< #asta @

EPIDEMIOLO"%A


6/56


7/56

Listeriosis Perinatal

La in(ecci&n se transmite /Fatrans%)acentaria' /Fa ascendente " durante e)

%art". Listeri"sis ne"nata) de inici" tem%ran" %uedetener secue)as c"m" #idr"ce(a)ia " retras"%sic"m"t"r.

Listeri"sis ne"nata) de inici" tardF" es +a*"82 a 4 >. Se re)aci"na c"n )a as%iraci&n deHuid" in(ectad".


8/56

FISIOPATOGENIA


9/56

VFa de in(ecci&n

Transplacentaria - ascendente


10/56

En e) interi"r )a :r(A %asa a estad" acti/ad" 8:r(A> e induce )a e?%resi&n de )"s $enesnecesari"s %ara )ain/asi&n de )a c)u)a #us%ed 8inter)aninas Ln)A - Ln);>' )isis de) (a$"s"ma 8)isteri")isina

O " LLO>'("s(atidi)in"sit") es%ecF1c" de ("s(")i%asa C 8:IB:LC> - ("s(atidi)c")ina 8:CB:LC>'

Listeria monocytogenesMECANISMOS DE :ATO9ENICIDAD


11/56

L.. Monocytogenes sobreviven y se multiplican dentrodel citoplasma de las células y se extienden a células

adyacentes sin dejar el ambiente de citoplasmático(Tilney and Portnoy, 1989, ! "ell #iol! 1$9%1&9'


12/56


Ad#esi&n e interna)i,aci&n

MECANISMOS DE

:ATO9ENICIDAD


13/56

)a*ocitosis inicial

End"(a$"cit"sis

/acu")ar


14/56

+isolucin de la membrana del )a*osoma

Lisis de) (a$"s"ma:rimari"


15/56

.ubes del material de /ibrilar (la polimeri0acin de actina

:")imeri,aci&n de Actina - mi$raci&n+acteriana


16/56

"ometas de isteria (la polimeri0acin de actina

:")imeri,aci&n de Actina - mi$raci&n+acteriana


17/56

Proyecciones semejante a Pseudopodos


18/56

"rmaci&n de

i)"%"dias


19/56

isteria )a*ocitada dentro de un)a*osoma de doble membrana

Diseminaci"n ce)u)ar - Lisis /acu")arse$undaria


20/56


21/56


22/56


MECANISMOS DE :ATO9ENICIDAD

Cic)" de Vida intrace)u)ar

2> Ad#esi"n einterna)i,aci"n +acteriana.

4> End"(a$"cit"sis/acu")ar

@> Lisis de) (a$"s"ma:rimari"

=> :r")i(eraci"n +acterianacit"%)asmatica

> :")imeri,aci"n deActina - mi$raci"n+acteriana

5> "rmaci"n de i)"%"dias

7> Diseminaci"n ce)u)ar -Lisis /acu")ar se$undaria.

2

4

@

=

5

7

InlA&Inl!

LLO'PLC(PI

Acta


23/56

Listeri"sis durante e) em+ara,"

act"res<• Mu*eres em+ara,adas tiene 4

/eces mas %r"+a+i)idad dedesarr"))ar )isteri"sis Kue "tr"s

adu)t"s san"s 8CDC' 233>• Un terci" de t"d"s cas"s de

)isteri"sis "curren durante e)em+ara," 8CDC' 233>

• Listeri"sis %ueden causar a+"rt"es%"ntáne" muerte (eta)'en(ermedad $ra/e " )a muerte a)recin nacid" 8Sc#)ec#' 42>.

IM:ORTANCIA CLNICA < INECCIONES EN

0UMANOS


24/56


• De )as in(ecci"nes (eta)es Un"en cinc" resu)ta en m"rtinat".

• L"s sFnt"mas %ara )a madre%ueden ser asint"mátic"seme*ante a $ri%e

• Es de im%"rtancia ca%ita)c"nsiderar siem%re e)

dia$n&stic" de )isteri"sis enem+ara,adas c"n e)e/aci&nde )a tem%eratura de "ri$endesc"n"cid" - tra+a*" de%art" %retrmin".


25/56


El em)ara*o& la fsiolo+ía& , listeriosis• Las mu*eres em+ara,adas s"n más susce%ti+)e

%"rKue< L"s ni/e)es de %r"$ester"na se incrementa en

tercer trimestre de Em+ara," +a*an Las(unci"nes inmunes men"s ries$" de rec#a,"de) (et" ma-"r ries$" de ciertasen(ermedades.

• L"s adu)t"s sa)uda+)es destru-en a LM en e)tract" $astr"intestina) 8,"na di$esti/a>.• LM %uede diseminarse mas (áci)mente en e)

t"rrente san$uFne" en )as mu*eres em+ara,adas.


26/56

Impacto sobre feto y NeonatoPerinatal

2n/eccion intrauterina 3 amnionitis, Trabajo pretermino,aborto espontaneo, mortinato, o in/eccion de inicio tempranoen el neonato!

2n/eccion .eonatal

Listeriosis de inicio temprano

- a in/eccin en 4tero- 5asta ' d6a después del parto -

Pretérmino, bajo peso al nacer ,- 7ayor s6ntoma% epsis!- Puede aber problemas respiratorios, cianosis, apnea,

neumon6a , Micr"a+ces"s diseminad"s8$ranu)"mat"sis

in(antise%ticum>. 7ortalidad alrededor de : 1& 3 &$;


27/56

Impacto sobre feto y Neonato .eonato

• 2n/eccin después del parto % canal de parto,contaminacin /ecal , cuidados ospitalarios, ambientede ospital!

2n/eccin del recién nacido!

Listeriosis de inicio tardio

-< & - ' d6a después del parto - 6ntomamuy importante : menin*itis - Puede aber %/iebre ,pobre alimentacin, irritabilidad,

colitis !- =lto ; de ni>os tendrán secuelas )6sico y neurol*ica- 7ortalidad alrededor de : 1$ 3 ?$; ! e relaciona con la aspiracin de /luido in/ectado!


28/56

Listeri"sis en adu)t"sinmun"c"m%r"metid"s

B ;acteremia Kue %uede c"ntinuar c"nmenin$itis.

B A ni/e) de) SNC se %resentamenin$"ence(a)itis'cere+ritis - a+sces"s.

B Otr"s ti%"s de in(ecci&n inc)u-en artritiss%tica'

"ste"mie)itis' a+sces"s #e%átic"s'

c")ecistitis'


29/56

Ser"ti%i1caci&n

Mt"d" c)ásic" +asad" en antF$en"ss"mátic"s O

- Ha$e)ares 0 ' 2@ ser"ti%"s. de) 3 de )"s ais)amient"s #uman"s%ertenecen

a )"s ser"ti%"s 24a' 24+ - =+

Ser"ti%" =+' de cas"s de )isteri"sis en e)mund".

En )"s cas"s es%"rádic"s %red"minan )"smism"s ser"ti%"s' aunKue )a (recuencia de)

ser"ti%" =+ es men"r Kue )a de )"s ser"ti%"s


30/56


IDENTIICACIPN


31/56

"ENERO LISTERIA

• El "enero Listeria inclu,e actualmente seises-ecies.

• L. monocytogenes& L. ivanovii, L.seeligeri,

L. innocua, L. welshimeri, y L. grayi /• Dos de estas es-ecies& L. monocytogenes , L. ivanovii & son -otencialmente -ató+enos/


32/56

Listeria Identi1caci&n


33/56


34/56

Listeria monocytogenesDIA"N$STICO

E0AMEN DIRECTO DE LAS M#ESTRAS

• SEC. CERVICALES.• SEC. VA9INALES• LOQUIOS• SAN9RE DEL CORDON.• MECONIO.• SAN9RE.

• LCR.• SEC. CONJUNTIVAL.• LIQ. AMNIOTICO


35/56


36/56


CULTIVO AISLAMIENTO )uid"s n"rma)mente estri)es 8san$re'

)FKuid" ce(a)"rraKuFde"' )FKuid" amni&tic">


37/56

Incu+aci&n@ C

O+ser/aci"n de crecimient"s en)"s medi"s

Su+cu)ti/" c"n :)acas a uti)i,ar Incu+aci&n @

P R O C E D I M

I E N T O

E N

C A S

O

D E H E M O C #

L T I 1 O S

P O S I T I 1

O S


38/56

Aero)io(Anaero)io2acultati3o

Desarr"))a me*"ren micr"aer&1)ia.Tem-eratura

. B = C. "%tima@7In4uencia de PH O%tim" a 7. n"

desarr"))a .5crece

CONDICIONES DE C#LTI1O


39/56

C")"raci&n 9ram a %artir de) Ca)d"de #em"cu)ti/"


40/56

C#LTI1O EN MEDIO S$LIDO.


41/56

Crecimient" en a$arsan$re

A+ar San+re. Des-u5s de 67 a 78 9oras en estu2a a :;?6 mm de diametro @ des-ues de >?6 dias deincu)ación & rodeados de una *ona de ?9emolisis/


42/56

Listeriamonocytogenes

Streptococcus

agalatiae

Streptococcus pyogenes

Bona de ?9emolisis

• Coco)acilos "ram =@ cortos ue tienen


43/56

Tinci&n de 9ram

• Coco)acilos "ram =@ cortos ue tienentendencia a a-arecer em-ali*ada en cadenascortas de : a ; microor+anismo -resenta unatí-ica dis-osión en di2teroide


44/56

CATALASA8>


45/56

;IOQUIMICA

Cit TSI Urea

M"t 9e) ;i)isBEscu)ina C)Na5.

S6H

= (@

= (@

= (@

= (@

= @

= @

= @

= @


46/56

M"ti)idad 44W C M"ti)idad @7W C

44C

@7C

A d ;


47/56

CAM:

8>

A+ar san+re de carnero ; Ce-a de Staphylococcus

aureus ATCC 6;F6:


48/56

CAM: :"siti/aStreptococcus agalatiae

CAM: :"siti/aListeria monocytogenes


49/56


50/56

Anti+i"$rama %ara Listeriamonocytogenes

• E) Gnic" mt"d" /a)idad"%ara )a rea)i,aci&n deanti+i"$ramas en Listeriaes )a micr"di)uci&n en

ca)d".• N" e?iste estandari,aci&n'%unt"s de c"rte nicate$"rFas inter%retati/as%ara rea)i,ar

anti+i"$ramas %"r disc"di(usi&n' %"r )" cua) n" serec"mienda su %ráctica.

42


51/56

Anti+i"$rama %ara Listeriamonocytogenes

• L"s Gnic"s antimicr"+ian"ssu$erid"s %ara %rue+a in /itr" %"rmicr"di)uci&n en ca)d" s"n<

Am%ici)ina :enici)ina 9 Trimet#"%rimsu)(amet#"?a,")e

L"s ais)amient"s N" susce%ti+)esa :enici)ina 9 - Am%ici)ina de+enser en/iad"s a un )a+"rat"ri" dere(erencia %ara su c"n1rmaci&n.

• AunKue< Ri(am%in' Line,")id'macr&)id"s' AmiXacin'

)u"r"Kuin")"nas' ce(a)"s%"rinas -car+a%enmic"s %udieran a%areceracti/"s Yin Vitr"Z' n" de+en serin("rmadas ante su %"si+i)idad deine1cacia c)Fnica.


52/56


53/56

MIC :enici)ina < .24 u$m).


54/56


55/56


56/56

GRACIAS

Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes

Documents

Transcript of Aislamiento e Identificacion de Listeria monocytogenes