Aislamiento hongos Aislamiento hongos fitopatógenosfitopatógenos

Curso: Diagnóstico de enfermedades

vegetales.Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc.

3 de junio de 2011

Objetivos

• Conocer las principales técnicas que se usan para aislar hongos fitopatógenos.

• ¿de dónde?

• ¿cómo?

¿De qué aislar?

¿De qué aislar?

¿De qué aislar?

¿Cómo aislar hongos?

• Objetivo: – obtener un cultivo

puro del patógeno

• Técnicas de aislamiento:– desde el signo– desde tejido afectado– indirecto

Aislamiento directo a partir del signo.

• Cuando la muestra vegetal presenta signo es posible tomar una pequeña porción del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.

Aislamiento directo a partir del signo.

Aislamiento directo a partir del signo.

Inducción del signo

• Cámara húmeda

Semillas

• Rollo de papel absorbente – desinfección previa ?– 200 ppm 2,4D ?– -18 a -20ºC por 24 h ?

• Medio de cultivo– PDA + antibiótico

Aislamiento a partir de trozos vegetales

• Sembrando trozos de tejido vegetal de la zona de avance del patógeno .

Aislamiento a partir de trozos vegetales

Aislamiento a partir de trozos vegetales

Aislamiento indirecto

• Inocular tejido/órgano sano

• Aislar desde zona de avance

Uso de cebos

• Para capturar Phythophthora spp del suelo o agua:– trozos de manzana verde – trozos de limón

Obtención de colonias puras

• Trozo de hongo - ¿de dónde?

Obtención de colonias puras

• Trozo de hongo - ¿de dónde?

Cultivos monospóricos

Bibliografía - aislamiento

• DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. 1985. Basic plant pathology methods. Boca Raton : CRC, 355 p.

• FOX, F. T. V. 1993. Principles of diagnostic techniques in plant pathology. Wallingford : CAB International, 213p.

• FRENCH, E.R. y HERBERT, T. 1980. Métodos de investigación fitopatológica. Libros y materiales educativos, nº 43. San José, Costa Rica, IICA.  289p.