ANÁLISIS CUALITATIVO DE SALES BILIARES

Krisly Sánchez 4-771-654 Álvaro Rueda 4-772-1613 Bolívar Chen 4-773-587 Facultad De Medicina, Escuela De Medicina

BIOQUÍMICA OBJETIVOS

Aplicar algunos ensayos para la detección de pigmento y sales biliares

Reconocer las propiedades emulsificantes de las sales biliares.

Determinar la importancia de la bilis en la digestión. MARCO TEÓRICO: La bilis en un líquido amarillento, dorado debido a la presencia de la bilirrubina, esta secreción es producida por el hepatocito, tiene una densidad aproximada de 1,01; un pH comprendido entre 5 a 7-8, y un contenido de solidos que varía del 2-3% según se trate de bilis hepatica o bilis concentrada de la vesícula biliar. El color de la bilis recién producida se torna verdoso al encontrase en la vesícula, debido a la oxidación de la bilirrubina en biliverdina. Al almacenarse la bilis, todos los pigmentos presentes en ella oscurecen a mediada que van sido oxidados, pasando del amarillo verde al azul y finalmente al color café. Los principales componentes de la bilis son: Lecitina PC, como el fosfolípido más abundante; colesterol libre; iones sodio, potasio, calcio y cloro; ácidos biliares conjugados en forma de sales biliares; todo en presencia de pequeñas cantidades de bilirrubina y albumina y algunas enzimas entre otras a la fosfatasa alcalina. La lecitina es el fosfolípido principal de la bilis, posee dos ácidos grasos de cadena largo con carácter hidrofóbico; además de la fosforilcolina, hidrofílico; no posee gran capacidad de solubilización pero si es posible que se reúnan varias moléculas que oponen sus grupos hidrofóbicos e hidrofílicos y dada la capacidad de estos de hidratarse se logra la consistencia de un gel, por la formación de un cristal líquido. El colesterol compuesto con la estructura del ciclopentano pehidrofenantreno, es hidrofóbico en la mayor parte de su molécula, a excepción del carbono 3 que posee un OH y por ende en esa región esta molécula es hidrofílica. Los ácidos biliares derivados del colesterol por modificaciones en la cadena lateral: disminuye su longitud, carboxilacion de esta y saturación del núcleo esteroide, los que para su utilización en la bilis son transformados por el hígado, al conjugarse con taurina y glicina y dan lugar a las sales biliares, los ácidos taurocólico y glicólico, que se encuentran en relación de 3:1 entre ellos y tienen una función antipática, pues poseen una parte de la molécula hidrofílica y otra hidrofóbica, condición que les permite ser hidrosolubles y con capacidad emulsificante. Durante la emulsificación disminuye la tensión superficial de los lípidos, se fragmentan, físicamente en pequeñas partículas, aumentan considerablemente su superficie expuesta y de esta manera se facilita su acción enzimática. Las sales biliares luego de ser sintetizadas, son secretadas por el canalículo biliar, almacenada por la vesícula biliar, pasan al intestino para iniciar la digestión, transitan por el intestino y posteriormente son transportadas de nuevo por la vena porta al hígado y ser secretados de nuevo por la bilis estableciendo esto la circulación enterohepática que permite que las sales biliares sirvan de vehículo de algunos ácidos grasos facilitando su transporte. Las sales biliares constituyen también en balancear junto con las lecitinas, el equilibro de mantener disuelto el colesterol libre y con ello evitar la litiasis. (Herrerías, Díaz y Jiménez; 1996) MATERIALES:

Descripción Cantidad / Capacidad

Bilis vesicular de cerdo o de res

50 Ml

Papel filtro 1

Vidrio reloj 1

Tubos de ensayo 10

REACTIVOS:

Nombre Fórmula Concentración Toxicidad Propiedades físicas y químicas

HNO3 concentrado

HNO3 concentrado Toxicidad aguda Aspecto: Líquido transparente e incoloro. Olor: Característico. Punto de ebullición: 121°C Punto de fusión: -47°C Densidad (20/4): 1,395 Solubilidad: Soluble en agua.

Solución de sacarosa al 5%

C6H11O6 5% No toxico Reacciona con oxidantes fuertes, originando peligro de incendio.

Estado físico: Sólido cristalino Color: Translúcido Olor: Ligero olor Solubilidad: Agua Muy soluble Etanol 96° Poco soluble Etano Absoluto Prácticamente insoluble

Ácido sulfúrico concentrado

H2SO4 concentrado Sub-aguda o crónica

Punto de ebullición (se descompone): 340°C Punto de fusión: 10°C Solubilidad en agua: miscible

Azufre en polvo

S - Es baja la toxicidad pero la exposición al humo es peligrosa.

Apariencia: Sólido de color amarillo a marrón rojizo, con olor característico y consistencia blanda. Punto de Ebullición (ºC): 444.6 Punto de Fusión (ºC): 113 - 122 pH: N.A. Solubilidad: Insoluble en agua. Ligeramente soluble en alcohol y éter. Soluble en disulfuro de carbono, tetracloruro de carbono y benceno.

PROCEDIMIENTOS:

1. PRUEBA DE GMELIN

2. PRUEBA DE PETTENKOFER

Colocar una gota de bilis en un papel filtro.

Y colocar también una gota de HNO3 concentrado.

Observar los círculos concentrados de colores.

2 mL de bilis + 5 gotas de solución de sacarosa al 5%.

Agregar acido sulfúrico concentrado hasta formar dos capas.

La aparición de un anillo rojo, hay presencia de acidos biliares.

3. PRUEBA DE HAY

4. PODER DE EMULSIFICACIÓN DE LA BILIS

RESULTADOS:

Cuadro 1. Pruebas sobre la bilis

Prueba Observación

Gmelin

Presencia de círculos coloreados alrededor del vértice del papel filtro luego de añadirle ácido nítrico, van en el siguiente orden

Pettenkofer

Espolvorear una pequeña cantidad de azufre sobre la bilis diluida.

Si el azufre se precipita.

Hay presencia de ácidos biliares.

Añadir una gota de aceite de oliva a 3 mL de agua.

Contenidos en cada uno de los

tres tubos de ensayo.

Tubo # 1: 5 gotas de bilis;

Tubo # 2: 5 gotas de solución de sales biliares

Tubo # 3: 5 gotas de bilirrubina

Agitar bien cada tubo. Observar

Emulsion En Cada Tubo

Marrón oscuro

Naranja

Amarillo

Formación de un anillo

rojo.

Hay

.

Poder de emulsificación de la bilis

Muestra Observación

Agua + aceite de oliva (4.2) Insoluble

Agua + bilis (4.1) Soluble

Aceite + bilis (4.3) Emulsificación

DISCUSIÓN: En la prueba de Gmelin pudimos observar que la muestra de bilis diluida a la cual se le añadió HNO3

al papel filtro mojada con esta, la formación de anillos concéntricos, los cuales fueron desde el centro hacia el exterior de los colores marrón, naranja y amarillo. La formación de estos anillos nos permite determinar la presencia de sales biliares en la muestra que se analizó. La presencia de pigmentos biliares cerca de la unión de ambos líquidos propiciara la formación de anillos, un anillo verde encima y otros debajo, azul, violeta rojo y rojo amarillo. Si faltan los anillos verdes y violeta rojo, es probable la presencia de luteína. Si el líquido contiene bilis concentrada, se observa una coloración violeta. Esta prueba a su vez es de gran importancia en el campo de la medicina ya que nos permite determinar la presencia de sales biliares en líquidos como la orina, en donde la presencia de estas sales y pigmentos biliares representa la presencia de alguna anormalidad en la reabsorción de los mismos y por lo tanto la mayor excreción de estos compuestos. La Prueba de Pettenkofer se utiliza para probar la presencia de sales biliares. En esta prueba pudimos observar que se formó un anillo rojo entre ambas capas (muestra a analizar arriba y abajo el ácido sulfúrico añadido), la formación de este anillo indica la presencia de sales biliares en la muestra de bilis que se utilizó. Esto se debe a que la sal biliar reacciona con el hidroximetilenofurfural y forma una solución de color rojo. El hidroximetilenofurfural se forma del azúcar que deshidrata con ácido sulfúrico. El Ácido acético, y aquellas sustancias que se convierten en azúcar mediante ácido sulfúrico, cumplen la misma función que el azúcar.

Al agregar el azufre en

polvo éste precipitó.

En la prueba del poder de emulsificante de la bilis, En el tubo 1 se pudo observar que al añadir bilis a un volumen igual de agua, esta primera fue soluble en agua. Esto se debe a que la bilis es una disolución polar; puesto, que en su composición se encuentran ácidos biliares y sus conjugados, sales biliares, que le transmiten cierta polaridad a la bilis; formando estos compuestos enlaces por puentes de hidrógeno con el agua y de esta manera siendo solubles en ella. En el tubo al cual se le añadió al agua un volumen equitativo de aceite de oliva. Se pudo observar que estos formaron una mezcla insoluble, esto se debe a que el agua es un compuesto no polar mientras que el aceite es un compuesto no polar. En el tubo al cual se le añadió a un volumen de bilis, un volumen igual de aceite; se pudo observar la formación de pequeñas gotas dispersas de aceites a esto se le llama emulsión. Una emulsión, científicamente es la dispersión o mezcla de dos líquidos inmiscibles, en la cual la fase interna, en este caso el aceite, se mezcló en forma de gotitas con la fase externa, el agua. La bilis, es una sustancia liberada por el hígado, y participa en la digestión. También tiene una función emulsionante como el detergente en el tubo 2. La bilis emulsiona los ácidos graos o lípidos, convirtiéndolos en gotitas permitiendo su absorción. Entonces, si nuestro experimento fuera una parte del proceso de digestión, el detergente sería la bilis, y emulsionaría las grasas, en este caso, ejemplarizadas por el aceite. (Herrerías, Díaz y Jiménez; 1996) CONCLUSIONES:

La prueba de Gmelin permite identificar sales biliares las cuales al reaccionar con el ácido nítrico forman anillos concéntricos de diversos colores sobre el papel filtro mojado con estas sales.

La prueba de Pettenkofer es similar a la prueba de Molish, el ácido nítrico reacciona con el azúcar y forma hidroximetilenofurfural este producto reacciona con las sales biliares, esto se puede observar mediante la formación de un anillo rojo entre las dos subcapas del ácido nítrico y el líquido que posea sales biliares.

La bilis cuyos componentes principales son las sales biliares y ácidos biliares, cumplen la función de emulsionar grasas durante la digestión, debido a ello al agregar a cierto volumen de bilis un igual volumen de aceite se observó la formación de una emulsión, esto permite ejemplificar las reacciones que media la bilis en la digestión.

Cualquier factor que implique una mala liberación o reabsorción de la bilis va a producir en el cuerpo una mala digestión de lípidos y por lo tanto problemas metabólicos asociados a este.

BIBLIOGRAFÍA:

Tratado De Hepatología, J. M. Herrerías Gutiérrez, A. Díaz. Belmont y M. Jiménez Sáenz, Tomo Ll 1996, Pag 150-151.

(1) TRASTORNOS DEL TRACTO BILIAR, TRASTORNOS DE LA VESÍCULA BILIAR Y PANCREATITIS POR CÁLCULOS BILIARES; escrito por los doctores Young Choi y William B. Silverman de la División de Gastroenterología y Hepatología de los Hospitales y Clínicas de la Universidad de Iowa, Iowa City, recuperado el 26 de junio de 2014 en: s3.gi.org/patients/gihealth/pdf/biliary_sp.pdf

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué otro ensayo o ensayos conocidos por usted es semejante a la prueba de Pettenkofer? A qué se aplica.

Tiene cierta similitud con la prueba de Molish que se utiliza para identificar carbohidratos en general, en esta se observó un anillo de color rojo indicando la presencia de sales biliares.

2. Investigar ¿Cuáles son los efectos que ocasiona en los recién nacidos la acumulación de bilirrubina?

El kernicterus, o encefalopatía bilirrubínica, es una enfermedad neurológica rara en la que se conjugan niveles muy elevados de bilirrubina en la sangre y acúmulos de bilirrubina en los núcleos o ganglios basales del cerebro, que suele aparecer en las primeras semanas de la vida.

Es característica en el Kernicterus la afectación del estado general del neonato con apatía, vómitos, edema por acumulación de líquido en el tejido celular subcutáneo (la presión del dedo deja una huella), dificultades para alimentarlo, globos oculares fijos, alteraciones del tono muscular (en ocasiones arquea el cuerpo que se apoya tan sólo sobre la nuca y los talones), lentitud de los movimientos voluntarios (bradiquinensia), movimientos atetósicos (trastorno neuromuscular caracterizado por movimientos de torsión lentos e involuntarios de las extremidades) y disminución o ausencia de los reflejos primarios. A menudo, el Kernicterus se acompaña de convulsiones, respiración entrecortada e incluso crisis de apnea o ausencia de respiración. Sin el tratamiento precoz y adecuado, la mayoría de los recién nacidos afectados por la enfermedad fallecen en la primera semana y los pocos que sobreviven presentan graves secuelas psíquicas y neurológicas, como son parálisis cerebral, atetosis, retraso mental y sordera. ANEXOS: DISOLVENTES DE CÁLCULOS BILIARES El tratamiento farmacológico de la litiasis biliar se basa en reducir la relación colesterol/sales biliares hasta el punto de que la bilis no esté saturada de colesterol. En esas condiciones el cálculo de colesterol se va disolviendo lentamente hasta que el tamaño permite su expulsión. Esto implica los siguientes condicionantes:

El tratamiento es efectivo únicamente en cálculos de colesterol (un 80% de los casos). No lo es en cálculos de pigmentos biliares. La eficacia disminuye mucho si el cálculo está calcificado.

La vesícula debe ser funcional y las vías biliares no deben estar obstruidas. El tiempo de disolución es proporcional al tamaño del cálculo.

La forma tradicional de tratamiento es la administración de ácidos biliares. Son los medicamentos que figuran en este apartado. La introducción en terapéutica de los inhibidores de la HMG-CoA reductasa (lovastatina, simvastatina, etc., ver grupo B04A1A HIPOLEMIANTES) ha proporcionado otro mecanismo para reducir la concentración biliar de colesterol. La acción es aditiva con los ácidos biliares y se está experimentando con tratamientos combinados. En cualquier caso la aplicación de la litotricia y el perfeccionamiento de las técnicas quirúrgicas han obligado a replantearse el papel de la terapia farmacológica, que se emplea ahora más selectivamente de lo que se solía hace unos años. ÁCIDOS BILIARES Se utilizan dos medicamentos de este tipo: el ácido quenodesoxicólico y el ácido ursodesoxicólico. El mecanismo de acción es diferente pero la eficacia es la misma, ambos disminuyen el diámetro de los cálculos a un ritmo de 1-2 mm por mes. Los efectos secundarios del quenodesoxicólico (diarrea dependiente de dosis, elevación de transaminasas, hipercolesterolemia) son superiores y en consecuencia se prefiere hoy día usar la monoterapia con ácido ursodesoxicólico (10-13 mg/kg/día) o bien un tratamiento combinado de ambos ácidos (5 mg/kg/día de cada uno). El tratamiento debe mantenerse el tiempo necesario para conseguir la disolución completa. Este tiempo depende del tamaño del cálculo: si el diámetro es menor de 5 mm se disuelve en un año el 80-90% de las veces. Si el tamaño es mayor se prefiere actualmente fragmentarlos mediante litotricia. Un cálculo único de hasta 30 mm de diámetro se elimina en 13-18 meses en un 90% de los casos con la combinación de litotricia con ácidos biliares. Si la masa total está inicialmente fragmentada en varias piezas el resultado de esta terapia es menos satisfactorio. Es conveniente mantener el tratamiento un cierto tiempo tras la eliminación de los cálculos, pero hay que contar con un porcentaje de recurrencia alto al suspenderlo. Aproximadamente el 50% de los pacientes vuelven a tener cálculos a los cinco años, pasado ese tiempo el riesgo de recaída es muy inferior. No existe tratamiento preventivo de las recurrencias, pero muchos casos son asintomáticos. La repetición del tratamiento suele tener el mismo éxito que el inicial. OTROS TRATAMIENTOS En los pacientes con cálculos biliares, el grado de sobresaturación de la bilis por el colesterol está directamente relacionado con la proporción de ácido desoxicólico en la bilis. De acuerdo con esto, se ha estudiado el empleo de metronidazol, un antiinfeccioso con marcados efectos frente a bacterias

anaerobias, ya que es capaz de reducir la cantidad de ácido desoxicólico biliar, al suprimir el metabolismo bacteriano del ácido cólico, disminuyendo con ello la litogencidad biliar. La lactulosa y, posiblemente, el lactitol producen un efecto similar al metronidazol, aunque a través de un mecanismo diferente. Este tipo de laxantes provocan una acidificación del colon, lo que reduce la solubilidad del ácido cólico, además de la propia actividad metabólica de la flora bacteriana presente. Por otro lado, estos laxantes también pueden acelerar el tránsito intestinal, reduciendo así el tiempo de absorción pasiva. Algunas observaciones realizadas en pacientes acromegálicos tratados con octreótido, especialmente predispuestos a la formación de cálculos biliares, indican que estos pacientes presentan significativamente más bacterias anaeróbicas Gram-positivas en su colon que el resto de las personas. Estos pacientes también tienen una mayor capacidad enzimática para convertir ácido cólico en desoxicólico. De igual manera, presentan una mayor lentitud en el tránsito colónico, lo cual está relacionado con un aumento del pH y de la solubilidad del ácido desoxicólico. La cisaprida, que incrementa la velocidad del tránsito intestinal, es capaz de revertir muchas de estas alteraciones.

ENSAYO ENZIMÁTICO PARA LA DETERMINACIÓN DEL COLESTEROL SANGUÍNEO Krisly Sánchez 4-771-654 Álvaro Rueda 4-772-1613 Bolívar Chen 4-773-587

Facultad De Medicina, Escuela De Medicina BIOQUIMICA

OBJETIVOS:

Determinar en una muestra de suero la cantidad de colesterol.

Establecer la importancia de conocer los niveles de colesterol en sangre.

Explicar patologías que se asocien a niveles anormales de colesterol sanguíneo. MARCO TEÓRICO: El colesterol es una sustancia grasa (un lípido) presente en todas las células del organismo. El hígado elabora todo el colesterol que el organismo necesita para formar las membranas celulares y producir ciertas hormonas. Cuando comemos alimentos de origen animal, tal como carne, huevos y productos lácteos, introducimos colesterol adicional en el organismo. Aunque a menudo atribuimos la elevación del colesterol en sangre al colesterol que contienen los alimentos que comemos, la causa principal de este aumento es, en realidad, la grasa saturada. La materia grasa de los lácteos, la grasa de la carne roja y los aceites tropicales tales como el aceite de coco son algunos alimentos ricos en grasa saturada. Los niveles de colesterol en sangre, que indican la cantidad de lípidos o grasas presentes en la sangre, se expresan en miligramos por decilitro (mg/dl). En general, se recomienda un nivel de colesterol inferior a los 200 mg/dl. Entre los 200 mg/dl y los 239 mg/dl, el nivel de colesterol se considera elevado o limítrofe y es aconsejable reducirlo. Un nivel de 240 mg/dl o más de colesterol se considera elevado y es necesario tomar medidas para reducirlo. Algunas maneras de reducir el nivel de colesterol son cambiar la alimentación, iniciar un programa de ejercicio físico y tomar medicamentos reductores del colesterol. El colesterol total en sangre es la suma del colesterol transportado en las partículas de LDL, HDL y otras lipoproteínas. Si se miden los niveles de colesterol a partir de una muestra de sangre no tomada en ayunas, es decir, habiendo el paciente comido dentro de las 10 a 12 horas anteriores al análisis, sólo será posible calcular el colesterol total y el HDL. De esta manera, los médicos pueden evaluar los resultados del perfil lipoproteico completo y los otros factores de riesgo cardiovascular del paciente, y usar un instrumento de evaluación de riesgos para predecir mejor las probabilidades de padecer un ataque al corazón dentro de 10 años. (1). La mayoría de estos métodos vienen ya listos para usar, en juegos de reactivos suplidos por casas comerciales y cuya técnica no es presentada en detalle. Estas técnicas han desplazado, en la rutina, a la clásica reacción de Liebermann-Burchard, que es la más usada dentro de las reacciones no enzimáticas para la cuantificación de colesterol. Estos métodos son afectados por muchos factores, entre ellos la concentración de cada uno de los reactivos, el solvente empleado al hacer la extracción de colesterol, la cantidad de agua en la mezcla final de reacción y la temperatura. Por lo tanto las condiciones de reacción deben ser estrictamente controladas. El objetivo de este estudio es evaluar un método enzimático para la cuantificación de colesterol sérico, que sea barato y sencillo de utilizar en los laboratorios nacionales. Tal método puede adoptarse como procedimiento estándar para evaluar reactivos comerciales de fundamento semejante que ingresan al mercado costarricense. Ello favorecerá la estandarización de metodologías y la comparabilidad interlaboratorio de los resultados de colesterol. (2) MATERIALES:

Descripción Cantidad Capacidad

Vasos químicos

2 100 mL

Micro pipetas

2 15 µL

Plancha

1 -

Guantes

1 par -

REACTIVOS:

Descripción Cantidad/concentración Toxicidad

Kit para la determinación de colesterol

15 µL/- No tóxico

PROCEDIMIENTOS:

3 tubos de ensayo: blanco, patrón y muestra

tubo1 adicionar3 mL del reactivo y 30 L de agua.

tubo2 adicione 3 mL del reactivo y 30 L del patrón.

tubo3 adicione 3 mL del reactivo y

30 L de muestra

calentar por 5 minutos a 37C

realizar lectura epectrofotometro

calcule resultados

RESULTADOS: Absorbancia de la muestral

Absorbancia del patrón Concentración del patrón

Colesterol Resultante

0.350 nm 0.376 nm 200 mg/dL 186 mg/dL

𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 =𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 × [𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛] =

0,350

0,376𝑥 200

𝑚𝑔

𝑑𝐿= 186

𝑚𝑔

𝑑𝐿

Reacciones presente en la medición del colesterol en sangre:

𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 + 𝐻2𝑂 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙

𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑒𝑎𝑠𝑎 → 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 + á𝑐𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑔𝑟𝑎𝑠𝑜𝑠

𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙

𝑜𝑥𝑖𝑑𝑎𝑠𝑎 → 4 − 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑛𝑜𝑛𝑎 + 𝐻2𝑂2

2𝐻2𝑂2 + 𝑓𝑒𝑛𝑜𝑙 + 4 − 𝑎𝑚𝑖𝑛𝑜𝑓𝑒𝑛𝑎𝑧𝑜𝑛𝑎 𝑝𝑒𝑟𝑜𝑥𝑖𝑑𝑎𝑠𝑎

𝑃𝑂𝑃→ 𝑄𝑢𝑖𝑛𝑜𝑛𝑖𝑚𝑖𝑛𝑎 + 4𝐻2𝑂

DISCUSION: La determinación de las cifras de colesterol se hizo mediante un análisis de sangre directo; es decir, tomando una muestra de sangre en vena de un compañero y analizándola posteriormente. Luego se procedió a la separación del suero y del plasma; para el cifrado de las fracciones de colesterol que haya en la muestra. Se conoce que los métodos empleados por el laboratorio para la cuantificación del colesterol sanguíneo pueden ser enzimáticos o químicos. En este laboratorio se realizó un análisis enzimático. El método enzimático se basa en el empleo de la enzima colesterol esterasa que hidroliza los esteres de colesterol y de esta manera se solubiliza produciendo moléculas de colesterol libre. Siendo este colesterol libre el sustrato de la enzima colesterol oxidasa que consume el colesterol libre o unido a proteínas distintas de la HDL. Además de esta enzima se requiere la presencia de las enzimas peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)-3-toluidina disódica (TOOS) dando lugar a un producto coloreado (la mayoría de los métodos enzimáticos incorporan todas las enzimas en un solo reactivo, facilitándose su utilización y automatización en el laboratorio). Estas enzimas reaccionan con

Fig1. Se muestran los tubos con el patrón, la

muestra y el blanco

el agua oxigenada liberada luego de la acción de la enzima colesterol oxidasa, formando quinonimina cuya cantidad es proporcional a la cantidad de esteres de colesterol que se analizó. A fin de analizar la cantidad de HDL, se requiere un mecanismo de un detergente que solubiliza específicamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado.El resultado nos dará la cifra de colesterol total, HDL y LDL. Previamente a la prueba no se necesita tener un cuidado especial en cuanto a dieta ni en cuanto a la medicación que tome habitualmente, no obstante, es conveniente no atiborrase de dulces o grasas los días anteriores y avisar de la toma de medicación contra el colesterol. Luego de la acción de las diversas enzimas se procedió a determinar la absorbancia de la muestra y patrón, y luego de realizar los cálculos correspondientes el nivel de colesterol obtenido de la muestra sanguínea de 186 mg/dL, estando este debajo del rango limite normal de colesterol en sangre. Este colesterol que circula por la sangre puede proceder de los alimentos. En este caso, se libera en la digestión, atraviesa la pared intestinal y llega a la sangre. Sesos, huevos de gallina, hígado, mayonesa comercial, patés o foiegras, son alimentos ricos en colesterol. Pero, también puede proceder de nuestro hígado, un órgano muy importante para regular los niveles de colesterol en nuestro organismo ya que sus células son capaces de sintetizarlo. En algunas enfermedades el hígado puede producir más del necesario y se rompe ese equilibrio que hay en las personas sanas, por tanto cuida lo que comes y mima a tu hígado. (3) Los valores de colesterol varían con la edad y el sexo pero en términos generales se puede decir que los valores normales son los siguientes:

Colesterol Total: Por debajo de 200 mg/dl

Colesterol HDL: Varones: Por encima de 35 mg/dl Mujeres: Por encima de 40 mg/dl

Colesterol LDL: Por debajo de 170 mg/dl En caso de enfermedad cardiovascular previa o de factores de riesgo asociados (diabetes, tabaco, hipertensión arterial, obesidad…) los valores se ven reducidos por el aumento de riesgo que conllevan.

Colesterol Total: Por debajo de 150-180 mg/dl

Colesterol HDL: Cuanto mayor sea la cifra mejor

Colesterol LDL: Por debajo de 100-120 mg/dl Si ha padecido un infarto o tiene muchos factores de riesgo le aconsejarán mantener cifras de colesterol total por debajo incluso de 100 mg/dl de colesterol total.

En los niños (2 a 18 años) se consideran cifras normales las siguientes:

Colesterol total: Por debajo de 170 mg/dl

Colesterol HDL: Cuanto más alta mejor

Colesterol LDL: Por debajo de 110-120 mg/dl (4) Para muchas personas, los niveles de colesterol anormales se deben en parte a un estilo de vida malsano, lo cual a menudo incluye el consumo de una alimentación rica en grasa. Otros factores del estilo de vida son:

Tener sobrepeso

Falta de ejercicio Algunos problemas de salud también pueden provocar colesterol anormal, como:

Diabetes

Enfermedad renal

Síndrome ovárico poliquístico

Embarazo y afecciones que incrementen los niveles de hormonas femeninas

Glándula tiroides hipoactiva Los medicamentos, como ciertos anticonceptivos, diuréticos, betabloqueadores y algunos medicamentos usados para tratar la depresión, también pueden elevar los niveles de colesterol. Varios

trastornos que se transmiten de padres a hijos llevan a que se presenten niveles anormales de colesterol y triglicéridos. Ellos abarcan:

Hiperlipidemia familiar combinada

Disbetalipoproteinemia familiar

Hipercolesterolemia familiar

Hipertrigliceridemia familiar (5) En casos de un colesterol alto se aconsejará realizar una dieta adecuada los días anteriores retirando el exceso de dulces y grasas y le retirará los medicamentos que puedan tener interacciones sobre el metabolismo del colesterol, si es que toma alguno. El peso y la dieta no deben sufrir variaciones en las semanas previas al análisis de sangre. Si ha pasado alguna enfermedad previa lo suficientemente importante, que pueden provocar descensos del colesterol, deberá esperar 2-3 meses hasta que los niveles de colesterol se normalicen. En dependencia de los resultados en la primera extracción, sobre todo si están altos, puede ser necesaria otra extracción a los 3 meses para comparar los resultados y ganar en fiabilidad. (6) La prueba de análisis enzimático del colesterol sanguíneo tiene las siguientes limitantes:

No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.

No exponer los reactivos a la luz.

Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones.

En caso de muestras con concentraciones de triglicéridos mayores a 1200 mg/dl, diluir las mismas con solución fisiológica. (2)

CONCLUSIONES:

El análisis enzimático del colesterol sanguíneo se basa en el empleo de enzimas como colesterol esterasa, colesterol oxidasa, peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil) -3-toluidina disódica (TOOS); que se encargan mediante una serie de reacciones llevar el colesterol presente en sangre hasta Quinonimina, donde su presencia se identifica por una coloración rosácea tenue.

Los niveles de quinonimina son directamente proporcional a los niveles de colesterol, por lo cual su cuantificación refleja los niveles de colesterol en sangre. El mismo se hizo determinando el nivel de absorbancia de la muestra y el patrón y luego de cálculos matemáticos se determinó que la cantidad de colesterol en sangre de la compañera de la cual se obtuvo la muestra fue de 184 mg/dL estando este dentro del rango normal.

El análisis enzimático del colesterol sanguíneo se hace practico; ya que, la mayoría de los kit de análisis de colesterol contienen todas las enzimas implicadas en el proceso, siendo esta más especifica que el método de cuantificación por la reacción de Lieberman-Burchard, que ha resultado obsoleto e inespecífico.

En el campo de la medicina el análisis del colesterol sanguíneo representa un buen indicador en el diagnóstico de determinadas patologías (por ejemplo: Hipercolesterolemia e Hipertrigliceridemia familiar) que a su vez permiten dar un mejor tratamiento que mejore de esta manera la calidad de vida del paciente.

BIBLIOGRAFÍA:

(1) (2013, 12) Colesterol, recuperado el 24 de junio de 2014 en: http://www.texasheartinstitute.org/HIC/Topics_Esp/HSmart/cholspan.cfm

(2) Evaluación de un método enzimático colorimétrico para la cuantificación de colesterol sérico Método colorimétrico sin precipitación para la determinación de HDL-colesterol en suero o plasmahttp; recuperado el 26 de junio de 2014 en: www.wienerlab.com/wiener/catalogo/archivos/7699_hdl_colesterol_monofase_aa_plus_sp.pdf

(3) Alicia Chaves-Chavarría*, Marianela Vargas-Umaña*, Karl Schosinsky-Nevermann*, Manuel Jiménez-Díaz: www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-29481997000100003

(4) (2013, 07) Niveles Altos De Colesterol En La Sangre, recuperado el 24 de junio de 2014 en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000403.htm

(5) (2009,06) Enfermedades Cardiovasculares, recuperado el 24 de junio de 2014 en: http://nyp.org/espanol/library/cardiac/fatsbld.html

(6) (2001, 02) ANÁLISIS CLÍNICOS, Colesterol: HDL, LDL recuperado el 24 de junio de 2014 en: http://www.saludalia.com/analisis-clinicos/colesterol-hdl-ldl

(7) (2004, 09) HIPERCOLESTEROLEMIA, Dr. Pablo Herrero Puente. Especialista en Medicina Familiar y Comunitaria. Hospital Central de Asturias. Oviedo. España. Recuperado el 24 de julio de 2014 en http://www.lasalud.com/pacientes/hipercolesterolemia.html

CUESTIONARIO:

1. ¿Cuál es el nivel saludable de colesterol en sangre? El nivel de colesterol alto en la sangre es un factor de riesgo importante para las enfermedades del corazón. Al bajar el colesterol en la sangre mediante el aumento de la actividad física, la pérdida de peso, el dejar de fumar y una dieta adecuada, ese riesgo disminuye. Sin embargo, la cifra de colesterol en la sangre es específica para cada persona, y por esa razón, un perfil lipídico completo es una parte importante de su historia médica y una información importante de la que su médico debe disponer. En general, los niveles saludables son los siguientes: LDL - menos de 130 miligramos por decilitro (mg/dL) HDL - menos de 40 miligramos por decilitro (mg/dL) le pone en un riesgo mayor de enfermedad del corazón. Se considera deseable un nivel de colesterol total por debajo de 200 mg/dL. En algunas personas que ya padecen enfermedad de la arteria coronaria (su sigla en inglés es CAD) y que tienen un mayor número de factores de riesgo para enfermedad coronaria, el médico puede determinar que el nivel de colesterol LDL se debe mantener en menos de 130. Estudios recientes han demostrado que quienes presentan un riesgo elevado de sufrir un ataque cardíaco deben bajar el nivel de colesterol LDL a menos de 100 y que en aquellas personas que presentan el riesgo más elevado de sufrir un ataque cardíaco quizás sea óptimo que el nivel de colesterol LDL sea de 70 o menos. Consulte siempre a su médico para obtener un diagnóstico.

2. ¿En qué consiste la prueba de Liebermann- Burchard para el colesterol? La prueba de Liebermann- Burchard consiste en:

Mezclar 1mL de anhidro acético y 1 mL de CHCl3, se enfrían a 0ºC y se coloca una gota de H2SO4. Una porción de este reactivo se pone en contacto con la sustancia o su solución clorofórmica.

Prueba positiva: aparición de coloración.

El orden de aparición de la coloración tiene cierto valor diagnóstico (0, 1, 5, 20, 60 minutos) de color violeta que cambia a azul si hay dienos nucleares.

3. ¿Qué tratamientos están disponibles para rico en colesterol?

El tratamiento médico puede incluir: Modificación de los factores de riesgo - los factores de riesgo que pueden ser cambiados incluyen la carencia del ejercicio y de hábitos dietéticos pobres. Colesterol que baja medicaciones - las medicaciones bajaban los lípidos (grasas) en la sangre, particularmente colesterol del lípido de la baja densidad (LDL). Statins es un grupo de medicaciones antihyperlipidemic, e incluye el simvastatin (Zocor®), el atorvastatin (Lipitor®), y el pravastatin (Pravachol®), entre otros. Los sequestrants del ácido de bilis - colesevelam, cholestyramine y colestipol

- y ácido nicotínico (niacin) son dos otros tipos de medicaciones que se puedan utilizar para reducir niveles del colesterol.

4. ¿Qué son los triglicéridos? Los triglicéridos son otra clase de grasa que se encuentra en la corriente sanguínea. La mayor parte del tejido graso del cuerpo está formado por triglicéridos. Niveles de triglicéridos y la enfermedad del corazón (cardiopatía): La relación entre los triglicéridos y la enfermedad del corazón está bajo investigación clínica. Sin embargo, muchas personas con triglicéridos altos tienen también otros factores de riesgo como niveles altos de LDL o niveles bajos de HDL.

5. ¿Cuál es la causa del aumento de triglicéridos? Los niveles elevados de triglicéridos se podrían deber a una condición médica como la diabetes, el hipotiroidismo, una enfermedad renal o una enfermedad hepática. Las causas de niveles elevados de triglicéridos relacionadas con la dieta podrían incluir la obesidad y el consumo elevado de grasas, alcohol y dulces concentrados.

6. ¿Cuál es el nivel de triglicéridos saludables? El nivel de triglicéridos saludable es menos de 150 mg/dL. ANEXOS: HIPERCOLESTEROLEMIA ¿QUE ES LA HIPERCOLESTEROLEMIA? La hipercolesterolemia es el aumento en sangre de colesterol por encima de unos valores considerados como normales para la población general. El valor a partir de los cuales se considera patológico y que, además es un importante factor de riesgo para las enfermedades cardiovasculares es de 250 mg/dl. El colesterol es un tipo de grasa que se encuentra en la sangre como resultado de la digestión de los distintos alimentos que consumimos. Este tipo de grasa se transporta por la sangre unida a unas proteínas constituyendo las llamadas lipoproteínas. Esta unión a proteínas hace que dentro del colesterol total podamos distinguir dos tipos, uno conocido popularmente como colesterol malo que es aquel colesterol que es transportado desde el hígado hasta los tejidos y es el que forma parte de las placas de arterioesclerosis y cuyo aumento es el que se considera que tiene una mayor relación con enfermedades cardiovasculares. El otro tipo se conocen como colesterol bueno y que es el que se transporta desde los tejidos periféricos hasta el hígado, este tipo no forma parte de las placas de arterioesclerosis, y su presencia en niveles elevados se considera un factor protector de enfermedades cardiovasculares. Dentro de la sangre hay otro tipo de grasas cuyo papel como factor de riesgo de las enfermedades cardiovasculares está poco clara pero cuyo aumento también se considera patológico que son los triglicéridos. Se consideran anormales valores de triglicéridos en la sangre por encima de 200 mg/dl. En resumen el aumento en sangre de cualquier tipo de grasa de las anteriormente comentadas se denomina hiperlipemia o hiperlipidemia, si lo que está aumentado es solo un tipo de grasa, recibe el nombre de la grasa que aumente, hipercolesterolemia o Hipertrigliceridemia, y si están aumentados los dos recibe el nombre de hiperlipemia mixta. ¿POR QUE SE TIENE AUMENTADO EL COLESTEROL? Dentro de las hipercolesterolemias distinguimos dos tipos: uno las primarias que son aquellas en las que no se aprecia una causa evidente; y otras las secundarias donde la causa del aumento del colesterol se debe a una enfermedad ya conocida. De las primarias hay unas que son debidas a déficits genéticos de proteínas que actúan en el metabolismo del colesterol, y otras, que son las más frecuentes (un 85% del total de las

hipercolesterolemias), que son las conocidas como poligénicas y que afectan a un 5% de la población. El término poligénico quiere decir que a parte de un déficit genético no está situado en un solo gen, sino en varios. En estos casos actúan otros factores, fundamentalmente ambientales y dietéticos, relacionados con la ingesta de alimentos ricos en colesterol. ¿QUE SINTOMAS PUEDO NOTAR Y CUALES SON LOS MAS PRECOCES? La hipercolesterolemia es una enfermedad asintomática hasta que aparece la enfermedad vascular (infarto, angina, etc.), aunque a veces pueden aparecer los llamados xantomas que son el resultado de la infiltración de la piel y tendones por el colesterol, pueden ser cutáneos o tendinoso y aparecen clásicamente en las zonas interdigitales de las manos, glúteos, rodillas y codos, si estos aparecen alrededor de los párpados reciben el nombre de xantelasmas, estos últimos no son patognomónicos de la hipercolesterolemia ya que pueden aparecer también en personas con niveles normales de colesterol. Estos dos tipos de alteraciones cutáneas relacionadas con la hipercolesterolemia aparecen con una mayor frecuencia en aquellas que son debidas a un defecto genético ya conocido, más que en la de carácter poligénico. Dada la importancia de este factor de riesgo, aprovechando cualquier contacto con los servicios sanitarios en el que se realice una analítica conviene realizar una determinación sérica de colesterol total y de triglicéridos. Esta determinación es recomendable realizarla una vez antes de los 35 años en varones y de los 45 años en mujeres, y después con una periodicidad cada 5 o 6 años hasta los 65. ¿QUE COMPLICACIONES TIENE LA HIPERCOLESTEROLEMIA? La hipercolesterolemia es, junto a la hipertensión y al tabaquismo, uno de los principales factores de riesgo de una de las principales causas de muerte en nuestro país que es la Cardiopatía Isquémica (angina en infarto de miocardio), así como también de enfermedades cerebrovasculares y enfermedad vascular periférica. Esto está apoyado por diversos estudios en los que se ha visto una relación estrecha entre las cifras elevadas de colesterol total y la aparición de cardiopatía isquémica y mortalidad cardiovascular, y que actitudes encaminadas a disminuir los niveles de colesterol hacen que también disminuya la probabilidad de presentar esa patología. Sin embargo el riesgo que confiere cualquier nivel sanguíneo de colesterol depende también de la coexistencia de otros factores de riesgo como son, edad, sexo, hipertensión, diabetes, tabaquismo, etc. y que a la hora de realizar una labor preventiva también tienen que ser tenidos en cuenta. ¿COMO SE TRATA LA HIPERCOLESTEROLEMIA? El tratamiento de la hipercolesterolemia consta de dos partes, una que son las medidas higiénico-dietéticas, y otra que es el tratamiento farmacológico. Estas dos partes no son excluyentes sino que se deben complementar para llevar las cifras de colesterol a la normalidad. No obstante el tratamiento debe ser individualizado para cada persona, teniendo en cuenta la presencia o no de otros factores de riesgo así como de patologías asociadas. Medidas higiénico-dietéticas. Hay que intentar realizar una dieta equilibrada que es aquella que aporta un número de calorías de acuerdo con el gasto energético que permite alcanzar y mantener el peso ideal. La dieta tiene que ser rica en aquellos alimentos que contengan hidratos de carbono como son, fundamentalmente los productos vegetales, las pastas, los tubérculos, las legumbres, los cereales, etc. La grasa total no tiene que superar el 30-35% del total de las calorías ingeridas, y de estas las grasas saturadas, que son aquellas presentes en las grasas de origen animal, en mantequillas, margarinas, embutidos, productos lácteos y aceites de coco y palma (son los constituyentes de los productos de bollería, galletas, fritos, precocinados y conservas), no tiene que superar el 10% del total de las grasas, y las que hay que utilizar son las grasas monoinsaturadas que son las derivadas de aceites vegetales, en particular del aceite de oliva. La dieta tiene que tener un contenido bajo en colesterol, no superior a 300 mg/día. El colesterol se encuentra en las carnes rojas, en las vísceras (hígado, riñones, sesos...), yema de huevo (Y sus derivados, flanes, mahonesa), no siendo recomendable un consumo mayor de 2-3 veces a la semana. Las carnes de ave y conejo que contienen menos proporción de grasas saturadas y colesterol, y los pescados blancos o azules deben de ser utilizados para sustituir platos de

carne roja. Cuando se consuma carne roja es recomendable eliminar la grasa visible de la misma antes de cocinarla. No se debe prohibir el consumo de alcohol, sino que se puede permitir su ingesta moderada, 40 gr/día en los hombres y 24 gr/día en las mujeres, que corresponde aproximadamente con dos copas de vino al día. Es recomendable la reducción moderada del consumo de sal, así como del consumo de leche entera y derivados lácteos ya que esta es una de las mayores fuentes de grasas saturadas que son las que debemos evitar. No es recomendable, por lo tanto, el consumo de leche entera, quesos grasos, helados, nata, mantequilla y derivados. A la hora de cocinar también es recomendable usar hervidos, asados, plancha y parrilla antes que las frituras. El consumo total de calorías debe tender a normalizar el peso, para ayudar a las medidas dietéticas se recomienda la realización de un ejercicio físico moderado, que se ha visto que puede aumentar el colesterol bueno, durante por lo menos 30 minutos más de 3 días a la semana. Las recomendaciones dietéticas se resumen en la tabla 1 (Modificado de MANEJO EN ATENCIÓN PRIMARIA DE LAS DISLIPEMIAS. Recomendaciones de la SEMFYC 1997). Tratamiento farmacológico. Para el tratamiento farmacológico de la hipercolesterolemia y de las hiperlipemias en general se utilizan 3 tipos de fármacos: Resinas secuestradoras de ácidos biliares. Estos fármacos disminuyen el colesterol haciendo que el hígado lo utilice para sintetizar los ácidos biliares que son unas sustancias que se forman en el hígado y se utilizan en la digestión de los alimentos. Fibratos. Estos disminuyen sobre todo los triglicéridos ya que hacen que disminuya la formación de las proteínas que los transporta. Estatinas. Estos son los fármacos más modernos, con una mayor potencia para disminuir el colesterol y con menos efectos secundarios. Hacen que aumente la degradación del colesterol y que disminuya su formación actuando como inhibidores de las enzimas que actúan en la formación y degradación del colesterol, fundamentalmente del colesterol malo. Sobre estas sustancias es sobre las que se están realizando investigaciones con lo que están apareciendo nuevas estatinas que controlan el colesterol con menores dosis y por lo tanto con menos efectos secundarios. ¿PUEDE CURARSE LA HIPERCOLESTEROLEMIA? NO. Lo que se hace es mantener las cifras de colesterol en sangre dentro de los valores que se consideran normales con el tratamiento adecuado, haciendo que disminuya su efecto como factor de riesgo para las enfermedades cardiovasculares. ¿COMO SE PUEDE PREVENIR LA HIPERCOLESTEROLEMIA? Si se debe a una enfermedad genética entonces no existe prevención posible, sí existe si es la hipercolesterolemia poligénica ya que podemos intentar controlar los factores medioambientales y sobre todo los dietéticos que influyen en ella. La mejor forma de prevenirla es haciendo una dieta equilibrada rica en alimentos bajos en colesterol como son vegetales, frutas, cereales, etc. y con un bajo contenido en aquellos alimentos que son ricos en grasas saturadas y en colesterol. A esto se le debe sumar la realización de un ejercicio moderado, como ya se indicó en el apartado del tratamiento, para ayudar a mantener un peso adecuado. Estas dos acciones ayudan también a prevenir o controlar otros factores de riesgo para las enfermedades cardiovasculares que, con una cierta frecuencia, se asocian a la hipercolesterolemia, como son la hipertensión, la diabetes o la obesidad. ¿CON QUE ENFERMEDADES SE ASOCIA LA HIPERCOLESTEROLEMIA? El aumento de las cifras de colesterol en sangre tiene una relación directa con la mortalidad por enfermedad coronaria (angina de pecho e infarto de miocardio) y por enfermedad cerebrovascular.

Habitualmente se asocia con otras enfermedades que constituyen también importantes factores de riesgo por sí mismos y que son fundamentalmente la hipertensión arterial, la diabetes, el sedentarismo, la obesidad, el tabaquismo, que es necesario controlar y tratar adecuadamente. ¿QUE DEBE DE HACERSE CUANDO SE TIENE HIPERCOLESTEROLMIA? Es importante que las personas con hipercolesterolemia sigan unos controle médicos periódicos, cuya periodicidad depende no solo de los niveles de colesterol, sino también del riesgo cardiovascular de la persona que viene definido por la presencia o ausencia de otros factores de riesgo ya comentados, o de la existencia de enfermedad coronaria. Una vez que se ha realizado en diagnóstico, si la persona no tiene una enfermedad cardiovascular, hay que comenzar con el tratamiento higiénico-dietético. Si el riesgo es alto (más de dos factores de riesgo o presencia concomitante de diabetes) se deben hacer controles al mes durante los primeros tres meses, incluyendo analítica con determinación de lípidos y glucosa y toma de la tensión arterial. Posteriormente se realizarán controles a los tres meses, y una vez conseguido el objetivo terapéutico, es decir que los niveles de colesterol estén dentro de límites normales, se realizarán controles analíticos cada seis meses. Si con el tratamiento higiénico-dietético no se consiguieran los objetivos terapéuticos habría que comenzar con tratamiento farmacológico y continuar con los controles ya comentados, con la excepción de si el tratamiento instaurado es con estatinas que habría que realizar un control analítico al mes de iniciarlo. Si el riesgo es moderado o bajo (menos de dos factores de riesgo) se realizarán controles cada seis meses al principio y luego de forma anual. ¿QUE NO DEBE DE HACERSE CUANDO SE TIENE HIPERCOLESTEROLEMIA? En ningún momento se debe de abandonar el tratamiento, sobre todo el farmacológico, sin que haya sido bajo prescripción médica ya que nos encontramos frente a una enfermedad cuyo control es de una gran importancia para la disminución del riesgo de enfermedad coronaria. ¿QUE DEBE USTED DE SABER? Hay otros factores de riesgo que es importante tener en cuenta ya que, aunque su modificación no es posible, si van a influir a la hora de abordar el tratamiento de la hipercolesterolemia son: el sexo (los hombres tienen un mayor riesgo cardiovascular que las mujeres premenopausicas, a partir de la menopausia el riesgo se iguala ya que desaparece el papel protector que ejercen las hormonas sexuales femeninas); la edad (el riesgo aumenta con la edad, es mayor en el hombre a partir de los 45 años, y en las mujeres a partir de los 55); los antecedentes familiares de enfermedad coronaria (enfermedad coronaria o muerte súbita antes de los 55 años en el padre o en otros familiares masculinos de primer grado, o antes de los 65 años en la madre o en otros familiares femeninos de primer grado). (7)