Bacteriologia - Clase 2 y 3

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Género Staphylococcus Familia Micrococaceae No formadores de esporas, pero resistentes a la desecación, al calor y a concentraciones mas elevadas de cloruro de sodio Cocos Gram (+), que se agrupan en racimos, crecen en aerobiosis y en anaerobiosis, 0.5 a 1.7 um diámetro S. aureus grupos irregulares S. hominis, S. haemolyticus, S. capiti tétradas y pares S. saprophyticus, S. cohnii células individuales y pares

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Bacteriologia - Clase 2 y 3

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Género Staphylococcus Familia Micrococaceae

No formadores de esporas, pero resistentes a la desecación, al calor y a concentraciones mas elevadas de cloruro de sodio

Cocos Gram (+), que se agrupan en racimos, crecen en aerobiosis y en anaerobiosis, 0.5 a 1.7 um diámetro

S. aureus

grupos irregulares

S. hominis, S. haemolyticus, S. capiti

tétradas y pares

S. saprophyticus, S. cohnii

células individuales y pares

Tinción de Gram de extendido de exudado purulento

Se observan cocos Gram (+) en diplo y racimos que pueden corresponder al género Micrococcus o Staphylococcus

Cocos Gram positivos, que crecen en aerobiosis y que se disponen en

racimos

(+) StaphylococcusRothia mucilaginosa

(-)

Micrococcus

Alloiococcus

CATALASA

(+) CRECIMIENTO EN ANAEROBIOSIS 1

(-)

Otros1- Otros ensayos diferenciales

Sensibilidad diferencial a lisostafina o furazolidona

Ácido de glicerol en presencia de Eritromicina

Genero Staphylococcus

FACTOR DE AGLUTINACION, COAGULASA, DNAsa,

FERMENTACION DEL MANITOL

(+)

S. aureus

(-)

Grupo Staphylococcus coagulasa negativa

S. epidermidis S. saprophyticus Otros SCN

S. aureus Patógeno del hombre y otros mamíferos

• Coloniza en fosas nasales (persistentes 20%, intermitentes 60%) y piel

• Para que invada es necesario una barrera alterada por traumatismos o cirugía

• Produce lesiones con tejido necrótico, fibrina y PMN (abscesos o exudado)

Adherencia

Acidos teicoicos- Piel y mucosas sanas

Proteinas de pared, adhesinas- Epitelio y endotelio dañado, fibrinógeno (ClfA, ClfB), superficies extrañas adherencia a fibronectina (FnBPA, FnBPB), colágeno (Cna), proteina A (SpA), entre otros, multifuncionales

Invasión

Quimiotaxis La mayor línea de defensa es la ingestión y destrucción por macrófagos y PMN, actuan como atrayentes al sitio de crecimiento del mm.oo. Peptidoglicano, Acidos teicoicos y Proteina A

Etapas en la infección por S. aureus

OpsonizaciónC3b cuyo mayor determinante es el

Peptodoglicano, IgG u otras moléculas

Muerte intracelularLa mayoría son rápidamente muertos dentro de

la vacuola fagocítica, por producción de radicales superóxido y peróxido, lactoferrina, bajo pH y proteinas catiónicas

Etapas en la infección por S. aureus

(continuación)

Factores predisponentes a la infección por S. aureus

Defectos en la quimiotaxisSindromes de Job, Chediák-Higashi, Wiskott Aldrich y

Down

Defectos en la opsonizaciónAgamaglobulinemia y deficiencia de complemento

Defectos en los mecanismos cida de los PMNEnfermedad granulomatosa crónica

Cuerpos extrañosProducción de slime, defecto de los PMN residentes, unión

a fibronecina, fibrinógeno y colágeno que revisten las superficies extrañas

Factores de virulencia en S. aureus

• Microcápsula- dificulta la fagocitosis

• Leucocidina- destruye PMN

• Proteina A- unión al fragmento Fc de las inmunoglobulinas

Daño al huésped

-Toxina - daño de membrana, células blanco plaquetas y monocitos, es dermonecrótica

-Toxina - esfingomielinasa, células blanco eritrocitos

-Toxina - hemolisina y leucotoxina

Leucocidina - lisa células fagocíticas de huesped

Toxinas exfoliativas – descamación de la piel

Superantígenos - activación inespecíficas de muchas células T, TSS, Enterotoxinas, toxinas exfoliativas

Otras enzimas

Catalasa, Coagulasa, Hialunoridasa, Lipasa, ADNasa, Proteasas, Ureasa

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. aureus

A- Portación

B- Infección directa:

Localizadas en piel piogénicas - foliculitis, forúnculos, impétigo, hidradenitis supurativa, mastitis, infección de heridas, abscesos

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. aureus

• B- Infección directa: Localizadas en piel con rash difuso seguidas de

desacamación general - síndrome de la piel escaldada y el síndrome del shock tóxico

Diseminación de piodermas - celulitis, fascitis necrotizante

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. aureus

C- Invasión sanguínea - como consecuencia de una infección localizada: bacteriemia/sepsis, infección metastásica, coagulopatía, fallo multisistémico

D- Localizadas profundas- artritis, osteomelitis, meningitis, endocarditis, neumonia

E- Toxi - infección alimentaria

Genero Staphylococcus

FACTOR DE AGLUTINACION, COAGULASA, DNAsa,

FERMENTACION DEL MANITOL

(+)

S. aureus

(-)

Grupo Staphylococcus coagulasa negativa

S. epidermidis S. saprophyticus Otros SCN

MANITOL SAL AGAR

Especies patógenas mas frecuentes en el género Staphylococcus

S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus S. haemolyticus S. hominis S. lugdunensis S. schleiferi

S. warneri S. capitis

S. simulans

S. intermedius

Factores de virulencia en S. epidermidis

ADN plasmídico- codifica para resistencia a antibioticos: penicilina, macrólidos, lincosamidas, tetraciclina, cloranfenicol, trimetoprim, aminoglicósidos, mupirocina, desinfectantes. Plásmidos conjugativos o movilizables.

Adherencia a cuerpos extraños y formación de biofilm – protección de las células fagocíticas y de los antimicrobianos

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. epidermidis

Portador- es la especie mas prevalente en piel y mucosas

Infecciones adquiridas en la comunidad - Endocarditis de válvula nativa y de catéter de diálisis peritoneal

Infecciones adquiridas en centros asistenciales -bacteriemia nosocomial, endocarditis de válvula protésica, infección de catéteres intravenosos, infecciones de shunt cerebro-espinal, bacteriemia en pacientes neutropénicos, osteometlitis en esternón, prótesis, injertos vasculares, endoftalmitis.

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. saprophyticus

Infección del tracto urinario – tracto urinario bajo y alto en mujeres jóvenes, sexualmente activas

Portador – mucosa genitourinaria

1 Métodos de CIM aceptables para VISA/VRSA incluyen MicroScan “overnight” , Vitek, Vitek 2, Etest, Pasco, Sensititre, método de referencia agar dilución. Los laboratorios que utilizan métodos automatizados deben considerar la posibiidad de incluir el tamizaje . 2Etest (con d inoculo 0.5 McFarlan) 3 Difusión no es suficiente para detectar SAVI4 Si existiera dudas del resultado, por la historia clínica, enviar a un laboratorio de refrencia

SAVI / SAVR SAVI / SAVR Algoritmo de ensayoAlgoritmo de ensayoEnsayos

primarios:Difusión3 mas tamizaje con Va

(BHIA con 6 µg/ml de VA)CIM1,2

CIM VA <=2 µg/ml CIM VA 4-16 µg/ml CIM VA >=32 µg/ml Zona VA <=14 mm y/oCrecimiento en el tamizaje

Zona VA >14 mm ySin crecimieto en el tamizaje

Informar SAVSPosible SAVI Posible SAVI/SA VRInformar SAVS Posible SAVI

Confirmar cultivo puro y reveer resultados.Informar al Comité de control de Infecciones y al Médico como posible SAVI/SAVR en revisión

Métodoconfirmatorio:

CIM1,2Volver a sembrar el tamizaje de VA

(BHIA con 6µg/ml de VA)

CIM VA <=2 µg/ml CIM VA 4-16 µg/ml CIM VA >=32 µg/ml Crece No crece

Informar SAVS4 Posible SAV I Posible SAVR Posible VISA/VRSA Informar SAVS4

Guardar cepa

•Informar al Médico y al Comité de Control de Infecciones•Informar al M.S.P.•Guardar cepa

Cocos Gram positivos, no formadores de esporas, no móviles, que crecen en aerobiosis

y en anaerobiosis, se disponen en diplos o cadenas, catalasa (-), requerimientos

nutricionales complejos

Streptococcus sp.

Enterococcus sp.

Otros

Streptococcus • Primera descripción 1984 en infecciones de heridas• Gran espectro de bacterias que incluye especies benignas

útiles en la industria láctica• Recientemente basado en secuencias del gen del 16S rARN, se

separan varios géneros:

– Lactococcus, industria láctica– Vagococcus, móviles– Enterococcus, entéricos– Peptostreptococcus, anaerobios– Gemella– Abiotophia, variantes deficientes– Granulicatella

Plano de división perpendicular al eje de la cadena

Cadenas

Cápsula de

ác. hialurónico

Pares

Cápsula

polisacárido

Racimos

Género Streptococcus Familia Streptococcaceae

Cocos Gram (+), que se agrupan en pares o cadenas de longitud variable, crecen en aerobiosis y en anaerobiosis (algunos son anaerobios obligados)

No formadores de esporas, catalasa negativa y con requerimientos nutricionales complejos y variables

Varias especies del género Streptococcus son patógenas para el hombre, las principales son:

S. pyogenes

S. agalactiae

S. pneumoniae

Streptococcus grupo Viridans

Tinción de Gram de extendido de exudado purulento

por S. pyogenes

Adherencia

Acido lipoteicoicos y Proteina F- Piel y mucosas sanas

Factores de virulencia

Cápsula de ac. hialurónico- dificulta la fagocitosis

Proteina M- principal factor de virulencia, precipita fibrinógeno sobre la superficie dificultando la fagocitosis

Streptococcus pyogenes

Daño al huésped

Estreptolisina O (inhibición reversible por el oxígeno) - daño de eritrocitos, PMN, plaquetas y otras células, es antigénica

Estreptolisina S (no es inhibida por el oxígeno) - daño de eritrocitos, PMN, plaquetas y otras células, no es antigénica

Toxina eritrogénica- pirógeno, responsable de la erupción a distancia

Superantígenos – activación inespecíficas de muchas células T

Otras enzimas

ADNasa, hialuronidasa, estreptoquinasa, NADasa, proteinasa, amilasa, estearasa.

Streptococcus pyogenes

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. pyogenes

A- Portación

B- Infección directa: faringitis, escarlatina, impétigo, infección de heridas, abscesos (polimicrobianos)

Rash o erupción en piel

de la escarlatina

Complicaciones supuradas y no supuradas: fiebre reumática y glomerulonefritis aguda

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. pyogenes

• C- Infección invasiva:

Erisipela y celulitis- piel y tejidos blandos

Fascitis necrotizante- fascias musculares

Bacteriemia- infrecuente

• D- Enfermedad mediada por toxinas

Síndrome de shock tóxico

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON Streptococcus pneumoniae

• PORTADOR

• INFECCION DIRECTA

• Neumonía

• Otitis media

• Meningitis

• BACTERIEMIA oculta

No produce sustancias tóxicas ni nocivas para los tejidos, no forma abscesos y el daño es por multiplicación en el sitio de infección

Frotis de LCR, infeción por S. pneumoniae

S. pneumoniae, hinchazón de la cápsula por reacción con antisueos específicos

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR S. agalactiae

Meningitis, pneumonia y sepsis neonatal en neonatos

Fiebre puerperal, ITU, de piel y endocarditis en adultos

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CON INFECCION POR Streptococcus grupo Viridans

Endocarditis

CONDICIONES CLÍNICAS ASOCIADAS CONINFECCION CON especies de Enterococcus

ITU e infecciones biliares