Bacteriologia Pseudomona Auroginosa (2)

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CARACTERISTICAS GENERALES DE PSEUDOMONA AUROGINOSA

GRAM NEGATIVOS BACILOS ENCAPSULADOS Y MÓVILES AEROBEOS OXIDASA POSITIVOS

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PRODUCEN PIGMENTOS (hidrosolubles) AZULES O VERDES QUE SE DIFUNDEN (PICIONINA, PIOVERDINA , FLOURECEÍNA).

OXIDAN CARBOHIDRATOS COMO LAS GALACTOSA, PERO NO FERMENTAN.

SE CULTIVAN EN AGAR Mac. Conkey. SUS REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES SON MÍNIMOS. LA TEMPERATURA ÓPTIMA DE MULTIPLICACIÓN SE SITÚA

EN 36°C , INCLUSO TAMBIÉN EN 41°C; PERO NO DEBAJO DE 4°C.

UNO DELOS PRINCIPALES CAUSANTES DE MALES NOSOCOMIALES

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DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

SE AÍSLA TATO EN MEDIOS NO SELECTIVOS (AGAR SANGRE) COMO EN MEDIOS MODERADAMENTE SELECTIVOS (AGAR Mc Conkey).

LA TIPIFICACIÓN SERIOLÓGICA SE USA PARA INVESTIGAR BROTES.

UN AROMA AFRUTADO CARACTERISTICO.

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CARACTERÍSTICAS DE ESTAS COLONIAS EN DIVERSOS MEDIOS DE CULTIVO

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CARACTERÍSTICAS DE ESTAS COLONIAS EN DIVERSOS MEDIOS DE CULTIVO

Colonias en agar Cetrimide

Todos los aislamientos clínicos crecieron en agarCetrimide con la producción de un pigmentoverdoso característico de esta especie en estemedio; el cual es específico para esta especie,pues contiene un inhibidor que impide elcrecimiento de otras bacterias

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Después de 24 h de incubación a 37°C en agarMac Conkey, las cepas mostraron un buencrecimiento y desarrollaron colonias de colorblanco debido a que esta especie carece de laenzima para utilizar la lactosa presente en elmedio de cultivo (Foto 2).La prueba para determinar la actividad de lacitocromo oxidasa resultó positiva en el 100% delas cepas, lo que se pudo evidenciar por eldesarrollo de un color azul. Esta enzima oxida alcitocromo C reducido y a su vez es transformadaen su forma reducida e inactiva.

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Prueba positiva a la citocromo oxidasa

En la transferencia de electrones a oxígeno molecular, la citocromooxidasa reducida se convierte de nuevo en laforma oxidada y activa.Esta prueba ayuda a la identificación de muchasespecies de bacilos no fermentativos y permitediferenciarlas de la familia Enterobacteriaceae.

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El medio de agar semisólido

se usó para detectarmotilidad y en todos los casos se observó unazona de crecimiento difuso alrededor del sitio deinoculación, lo que demuestra la presencia deflagelo en todas las cepas de nuestro banco.

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Reacción oxidación-fermentación en medio Hugh-Leifson. Acidificación oxidativa de la glucosaen aerobiosis (5a). Ausencia de crecimiento en anaerobiosis (5b).

Hugh y Leifson diseñaron un medio oxidativo fermentativo (OF) para acomodar las propiedades metabólicas de los bacilos no fermentativos. En este medio, se sembraron todas las cepas en presencia de dos azucares, glucosa y lactosa.

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Con el primero, se observó un color amarillo en lasuperficie del tubo incubado en condiciones deaerobiosis (5a), debido a la acidificación oxidativade la glucosa, que al variar el pH del medio, tornaal indicador de pH (azul de bromotimol) de colorverde a amarillo. En los tubos incubados enanaerobiosis, no hubo crecimiento ya que P.aeruginosa es un germen estrictamente aerobio.En el caso del medio con lactosa, incubado conaereación, la bacteria se ve incapacitada demetabolizar la lactosa por no tener las enzimasnecesarias para ello, por lo que degrada laspeptonas rindiendo aminas fuertemente alcalinaslo que hace que el indicador se vuelva azul másintenso.

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En el medio agar hierro de Kligler (KIA) todos losaislamientos clínicos mostraron una imagen consuperficie y fondo alcalino por la producción deaminas a partir de las peptonas que componen elmedio, característico de organismos nofermentadores, no produjo gas, ni sulfuro dehidrógeno.

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Una de las características de P. aeruginosa es laproducción de hemolisina, enzima que le permitela degradación de la hemoglobina presente en elagar sangre de carnero. En este medio todas lascepas produjeron halos de color verdoso, propiosde una hemolisis parcial (β hemolisis) .La hemolisina de esta bacteria se considera unimportante factor de virulencia Una de las pruebas de mayor validez es elcrecimiento a 42°C, pues a esta temperatura son incapaces de crecer otras especies del género.

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medios King A y King B. El empleo simultáneo de ambos medios de cultivo permite una rápida identificación preliminar de la mayoría de las especies de Pseudomonas, por cuanto, la mayoría de las cepas pueden sintetizar únicamente piocianina, otras únicamente pioverdina y otras cepas pueden sintetizar ambos pigmentos. La producción de pigmentos es una característica diferencial importante en la identificación de bacilos gramnegativos no fermentadores .La mayoría de los medios de cultivoconvencionales diseñados para detectar laproducción de ácido de bacterias fermentativastales como las enterobacterias no resultanadecuados para el estudio de bacilos no fermentadores, ya que generalmente, sonespecies de crecimiento lento y que producenácidos extremadamente débiles

Luego de un período de incubación de 24 h en losmedios King A y King B para la producción depigmentos, se observó para todas las cepas unacoloración verde fluorescente (piocianina) en elmedio King A y solo el 94% de las mismasprodujeron pioverdina en el King B

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P.AUROGINOSA ES NATURALMENTE RESISTENTE AUNA GRAN CANTIDAD DE DIFERENTES FAMILIAS DE ANTIBIOTICOS.