Bio 225 Técnicas de cultivo de tejidos Cuarto de cultivo.

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Cuarto de cultivo

Bio 225Tcnicas de cultivo de tejidosCuarto de cultivoEquipos y materialesEquipo Bsico de un laboratorio de Cultivo CelularCampana de flujo laminarBao termostatizadoIncubador CO2Autoclave5. Nevera y Congelador6. Microscopio Invertido7. Microcentrifuga8. Depsito de Nitrgeno lquido

AutoclaveCualquier recipiente, herramienta... Debe ser esterilizada

AutoclaveEl mtodo ms utilizado para esterilizar materiales es el autoclave (aproximadamente 121C, 1.0 bar, 15min).Cabina de flujo laminar

Flujo laminar vertical, unidireccionalrea segura para trabajar con partculas y aerosoles submicrnAire pasa por filtro HEPA (High Efficiency ParticulateAir)Class II, Type A/B3 Class100 Federal Standard No. 209 partculas de 0.5 micron no exceda un conteo de 100 metros cbicoCabina vertical

Flujo de aire

Cabina y flujo de aire

BBF

Tipos de CabinasProteger al operario de agentes patgenos o contaminantes del interior de la cabina

Proteger el cultivo de patgenos o contaminantes externos o internos de la cabina

Proteger el medioambiente de patgenos o contaminantes del interior de la cabinaCabinasSegn importancia de la proteccin de estos tres elementos se distinguen cabinas de clase I, II y III

Clase I: Protege al operario y al medioambiente (campanas de gases)

Clase II: Protegen al operario, el cultivo y el medioambiente

Clase III: Cabina de seguridad estanca para trabajo con agentes biolgicos de alto riesgoIncubadora CO2

Incubadora de CO2Esto son equipos

que mantienen la temperatura, adems poseen un sistema de inyeccin de CO2 generalmente entre 4-7%, y finalmente controlan la humedad ambiente.

El nivel de CO2 se ajusta para mantener equilibrio carbonato-bicarbonato del medio de cultivo.

Incubador CO2Atmsfera controlada con elevada humedad y tensin de CO2

Incubadora CO2

Incubadora -roller

Roller - incubadora

Microscopio InvertidoMicroscopio InvertidoFuente de luz y condensador estn sobre la platina . Apuntando hacia abajoLos objetivos estn debajo de la platina hacia arribaPermite observar organismos o tejidos sin preparacin previaLas observaciones se hacen a travs de diferentes recipientes con espesores y caractersticas pticas variablesLos objetivos son adaptados para trabajar a largas distancias pero con magnificacin limitada

Microscopio invertido

Microscopio invertido de fase

Seguimiento del cultivo: viabilidad, multiplicacin, contaminacin.Control sobre cambios morfolgicos (efectos de hormonas, de tratamientos con medicamentos, de iones, interacciones, etc.Tanque de nitrgeno lquido

Tanques de criogenia

Tanque de Nitrgeno lquidoCongelacin de lneas estables

Contador de clulas

Contador de clulas

Micro Centrifuga

Suspensiones celulares (lavados, concentrados, subcultivos)Centrifuga

Metro de pH

Pipeteador automtico

Filtro sellado

Filtro para jeringuillas

Botellas y Placas de Cultivo

Botella de cultivo

Laminilla de cultivo

Puntos ImportantesEsterilidadAsepsiaHbito de trabajo