CAMBIOS CITOLÓGICOS EN EL CICLO ESTRAL DE LA PERRA

CITOLOGÍA EXFOLIATIVA: IMPORTANCIA

• Diagnóstico funcional: – Grado de proliferación del epitelio vaginal – Inferencias sobre el metabolismo hormonal (ovárico) – Etapa de vida (pubertad, ciclo estral y gestación)

• Diagnóstico patológico:

– Flora bacteriana – Detección de células tumorales neoplásicas (carcinomas) – Parásitos (trichomoniasis, amibiasis, coccidiosis, toxoplasmosis, trichuriasis,

demodicosis, etc) – Virus (enfermedad de Carre, encefalitis viral, viruela aviar, rabia, PHV) – Micosis (candidiasis, aspergilosis, hitoplasmosis)

ASPECTOS IMPORTANTES A CONSIDERAR: • Historia clínica

– Fecha y duración del último estro – Número de gestaciones – Aplicación de fármacos u hormonas – Tipo de alimentación

• Buena toma de muestra:

– Frotis vestibular – Frotis vaginal – Tinción específica (Papanicolaou, Harris,Wright’s, Shorr’s,

Romanowsky, etc)

CITOLOGÍA EXFOLIATIVA: FUNDAMENTOS

La pared vaginal sufre cambios cíclicos que corresponden con los cambios del ciclo del endometrio.

Estos cambios se hallan bajo la influencia de las hormonas

ováricas. Las fases del ciclo estral pueden identificarse a través de

las células descamadas obtenidas de la vagina.

FROTIS VAGINAL: LOS CINCO TIPOS CELULARES DEL EPITELIO VAGINAL

Aunque los cambios inducidos en las células vaginales son continuos, las células en un frotis pueden ser clasificadas en cinco tipos principales:

• Células basales • Células parabasales • Células intermedias pequeñas • Células intermedias grandes • Células superficiales

FROTIS VAGINAL: LOS TIPOS CELULARES ACCESORIOS

El frotis vaginal contiene otras células que no tienen su origen en los epitelios que cubren el aparato genital. Entre ellas están:

• Leucocitos (linfocitos, monocitos, basófilos, acidófilos y neutrófilos)

• Eritrocitos (“huecos”) con bordes crenados

• Células plasmáticas. Núcleo de “rueda”, excéntrico.

• Neutrófilos : hay algunos al comienzo, pero desaparecen al final de esta fase.

• Eritrocitos : son muy numerosos al comienzo y disminuyen, conforme nos vamos acercando al estro.

• Células epiteliales : son grandes y se van queratinizando a lo largo de esta fase, esto es, van perdiendo su forma redondeada. Tienen grandes núcleos que se van haciendo más pequeños al final del proestro.

PROESTRO ESTRO

• Neutrófilos : deben estar ausentes.

• Eritrocitos : en pequeña cantidad o ausentes en condiciones normales, aunque su presencia no tiene significación clínica por sí sola.

• Células epiteliales : están queratinizadas entre un 60 y un 90 %, formando grupos al final del estro. Sus núcleos se van haciendo cada vez más pequeños hasta desaparecer. Estos son los días idóneos para la monta si solo hacemos citología o frotis vaginal.

DIESTRO

• Neutrófilos : abundante cantidad al comienzo de esta fase para luego ir disminuyendo. Si se mantuvieran altos nos indicaría la presencia de una infección.

• Eritrocitos: generalmente ausentes.

• Células epiteliales: numerosas células parabasales al principio, y su número va disminuyendo conforme nos acercamos al anestro.

• Neutrófilos : en número reducido o moderado.

• Eritrocitos : ausentes.

• Células epiteliales : son células redondas parabasales e intermedias de núcleos grandes.

ANESTRO

PROTOCOLO DE LA CITOLOGIA

Es recomendado realizar 2-3 frotis en el entorno de 4 a 7 días. Como rutina se recomienda comenzar a realizar el frotis al cuarto día de que la perra es identificada en celo (presencia de descarga vaginal), y luego continuar cada 48 horas realizando 3 frotis por perra para poder observar la evolución del epitelio vaginal y determinar claramente el momento de comienzo del estro. Para evaluar el cambio citológico se realizaran mas frotis.

SUJETOS EXPERIMENTALES

Canis lupus familiaris - French pudle Canis lupus familiaris - bóxer

Edad 8 años Edad:5 años

Raza: French pudle

Raza: bóxer

Celo inducido Celo natural

PROCEDIMIENTO

SEGUNDO DÍA Canis lupus familiaris - French pudle

Inducido Canis lupus familiaris - bóxer

Natural

Observaciones: • Glóbulos rojos • Células intermedias grandes y pequeñas • Escasas células parabasales

Observaciones: •Abundantes glóbulos rojos • Células intermedias grandes y pequeñas •Células parabasales nulas

CUARTO DÍA Canis lupus familiaris - French pudle

Inducido Canis lupus familiaris - bóxer

Natural

Es

Observaciones: • Eritrocitos nulos •Celulas intermedias grandes y pequeñas

Observaciones: • Escasos eritrocitos •Celulas intermedias grandes y pequeñas

SEXTO DÍA Canis lupus familiaris - French pudle

Inducido Canis lupus familiaris - bóxer

Natural

Observaciones: •Celulas intermedias grandes y pequeñas

Observaciones: •Celulas intermedias grandes y pequeñas •Celulas superficiales

OCTAVO DÍA

Canis lupus familiaris - French pudle Inducido

Canis lupus familiaris - bóxer Natural

Observaciones: •Celulas intermedias grandes y pequeñas •Celulas superficiles escasaz

Observaciones: •Células superficiales anucleadas •Celulas con núcleo picnótico •Celulas escamosas

DECIMO DÍA

Canis lupus familiaris - French pudle Inducido

Observaciones: •células superficiales anucleadas •Celulas con núcleo picnótico •Celulas escamosas

Conclusiones

• Se determinaron los cambios citológicos en las diferentes etapas hasta llegar al estro, tales como la presencia de eritrocitos en el proestro temprano y su disminución con el paso de los días; la evolución de las células que van desde parabasales hasta las superficiales anucleadas en el estro.

• Se concluye qué en términos generales el período de máxima fertilidad en la perra coincide con la presencia de > 80% de células superficiales queratinizadas

• La realización rutinaria de la CV permite al veterinario clínico adquirir la experiencia necesaria para obtener

de ella los mayores beneficios. • Si bien tradicionalmente ha sido usada para el asesoramiento con respecto al momento

de servicio, en la actualidad ha sido reemplazada o complementada con las determinaciones hormonales (progesterona y/o hormona luteinizante),

Recomendaciones

• Se recomienda fijar con alcohol de 96 grados las muestran no menos de 10 minutos para evitar que las células se sequen.

• Llevar las muestras con cuidado al laboratorio para evitar daño de las placas

• No dejar más de un minuto en cada paso de tinturacion

• Aunque sean tranquilas las perras, colocarles bozal para evitar accidentes y que la dueña este presente para que se sientan más tranquilas.

• Ser muy cuidadosos al tomar la muestra para no lastimarlas.