MÉTODOS DE MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DIAGNÓSTICO

PARASITOLOGÍA PARASITOLOGÍA VETERINARIAVETERINARIA

Joaquín Rojas FritzJoaquín Rojas Fritz

Enfermedades Parasitarias Enfermedades Parasitarias

20102010

PERMITEN DIAGNÓSTICO CERTEROPERMITEN DIAGNÓSTICO CERTERO CALIDAD DE LAS MUESTRASCALIDAD DE LAS MUESTRAS MÉTODO ADECUADOMÉTODO ADECUADO POSITIVOS ENFERMEDADPOSITIVOS ENFERMEDAD NEGATIVOS ANIMAL SANONEGATIVOS ANIMAL SANO NO CONSTITUYEN DIAGNOSTICONO CONSTITUYEN DIAGNOSTICO

CLASIFICACIÓN DE LOS CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE DIAGNÓSTICOMÉTODOS DE DIAGNÓSTICO

DIRECTOS (Dx DE CERTEZA)DIRECTOS (Dx DE CERTEZA) PERMITEN VER ESTRUCTURAS PERMITEN VER ESTRUCTURAS

PROPIAS DEL PARÁSITO (HUEVOS, PROPIAS DEL PARÁSITO (HUEVOS, LARVAS, OOQUISTES, PORCIONES.LARVAS, OOQUISTES, PORCIONES. CUALITATIVOS Y CUANTITATIVOSCUALITATIVOS Y CUANTITATIVOS FROTIS DE DIF FLUIDOSFROTIS DE DIF FLUIDOS RASPADOS DE PIELRASPADOS DE PIEL NECROPSIASNECROPSIAS BIOPSIASBIOPSIAS TAC, RNM, PCRTAC, RNM, PCR

IMAGENES\sarcoptes.jpg

INDIRECTOS:INDIRECTOS: SEROLOGÍASEROLOGÍA

SON PRESUNTIVOSSON PRESUNTIVOS EN SUERO Y FLUIDOS ORGÁNICOSEN SUERO Y FLUIDOS ORGÁNICOS INMUNODIAGNOSTICOINMUNODIAGNOSTICO

CLASIFICACIÓN DE LOS CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE DIAGNÓSTICOMÉTODOS DE DIAGNÓSTICO

Extraccion de muestrasExtraccion de muestras

@ grandes desde el recto@ grandes desde el recto @ menores desde el suelo, @ menores desde el suelo,

inmediatamente despues de emitidasinmediatamente despues de emitidas Al envio del lab:Al envio del lab:

RefrigerarRefrigerar Conservadas en formallina al 5%Conservadas en formallina al 5%

Identificacion de las Identificacion de las muestrasmuestras

Recipiente con numeroRecipiente con numero Grupos de animalesGrupos de animales NO repetir numerosNO repetir numeros

Estudios cualitativosEstudios cualitativos

Presencia o ausencia de elementos Presencia o ausencia de elementos parasitariosparasitarios

RapidosRapidos SensiblesSensibles Se complementanSe complementan

MacroscopicamenteMacroscopicamente

Proglotidas de cestodosProglotidas de cestodos Nematodos adultosNematodos adultos GasterofilosGasterofilos

MicroscopicamenteMicroscopicamente

Giardia, trichomonas, amebaGiardia, trichomonas, ameba Coccidios en improntasCoccidios en improntas Buena visibilidadBuena visibilidad

Tecnicas de flotaciónTecnicas de flotaciónTécnicas de sedimentacionTécnicas de sedimentacionTecnicas de filtracionTecnicas de filtracion

Tecnicas de flotaciónTecnicas de flotación

Técnica de Fülleborn: Materiales:

- Solución saturada de NaCl, δ 1150: 400 gde sal en 1 litro de agua destilada- Mortero- Embudo- Colador de malla gruesa, 20 hilos por cm- Tubo de 100 ml, de 3 a 4 cm de diámetro- Ansa metálica- Porta y cubreobjetos

Técnica de Fülleborn:

Procedimiento: - Mezclar en un mortero 3-5 g de materia fecal con 50 ml de solución saturada de NaCl. - Filtrar la mezcla con un colador, recogiendo el líquido en el tubo a través del embudo. - Dejar reposar 20 minutos y tomar luego una gota de la superficie utilizando un ansa

metálica. - Colocar la gota entre porta y cubreobjeto. - Observar al microscopio.

TÉCNICAS DE SEDIMENTACIÓN

Técnica de Ritchie: Se utiliza para la búsqueda de huevos,

quistes u ooquistes en materia fecal con alto contenido en grasas.

Técnica de Ritchie:

Materiales: - Centrífuga - Solución de formol-sal - Mortero - Colador común - Tubos de centrífuga - Eter sulfúrico - Pipeta Pasteur

Solución de Formol-sal: Formol comercial........ 50 ml NaCl.......................... 5 g Agua destilada csp..... 1 l

Técnica de Ritchie: Disolver 3 g de materia fecal en solución de formol-sal. - Filtrar con el colador. - Llenar las tres cuartas partes del tubo de centrífuga. - Agregar 2 cm3 de éter y agitar enérgicamente. - Centrifugar a 1500 rpm durante 3 minutos. - Eliminar el sobrenadante volcando con un movimiento rápido. - Homogeneizar el sedimento y tomar una gota con pipeta Pasteur para observar entre porta y cubreobjeto.

Técnica de Teuscher (modificada)

Conveniente para la búsqueda de huevos de cestodes, acantocéfalos en grandes

cantidades de materia fecal. Materiales - Mortero - Colador común - Vaso de decantación - Tubos de centrífuga de 12 y 50 ml - Solución de Sheather

Técnica de Teuscher (modificada)

Procedimiento - Disolver con agua de grifo 2-4 g de materia fecal en un mortero. - Filtrar con un colador en un vaso de decantación. - Decantar durante 30 minutos. - Descartar el sobrenadante y dejar un sedimento de 40 ml. - Colectar el sedimento en un tubo de centrífuga de 50 ml. - Centrifugar 5 minutos a 2000 rpm. - Descartar el sobrenadante y resuspender el

sedimento en solucion de sheather

Pasar a tubos de centrífuga de 12 ml. - Centrifugar 5 minutos a 2000 rpm. - Completar con solución de Sheather, con cuidado, hasta formar un menisco convexo en

el borde superior y cubrir con un cubreobjeto. - Dejar en reposo 5 minutos. - Sacar el cubre con un movimiento vertical y colocar en un portaobjetos. - Observar al microscopio

Técnica de Teuscher (modificada)

TÉCNICA DE FILTRACIÓN

Indicada para la búsqueda huevos de Fasciola hepatica. Materiales: - Centrífuga - Envase de 100 ml con tapa hermética - Solución de detergente, puede usarse DSS - Tamices de 174, 96, 87 y 65 mm - Vaso cilíndrico de 100 ml - Tubos de centrífuga de 50-100 ml - Pipetas - Placa de Petri - Azul de Metileno o Verde de Metilo 0,5%

Homogeneizar con una varilla la muestra fijada en Solución formolsal.

Filtrar una pequeña cantidad con un colador metálico con una gasa y embudo con doble gasa.

Colocar en un tubo de centrífuga 1/3 del filtrado (en formol-sal) y 1-2 cm de éter sulfúrico. Agitar con

papel parafinado o tapón de goma en la boca del tubo. Centrifugar a 1000 - 1500 r.p.m. 3 a 5 min.

Se separaran así las fases: culot o sedimento, fase acuosa o formol salina, interfase con material orgánico

y fase etérea. Eliminar el sobrenadante con golpe seco y observar al microscopio una gota del

culot entre porta y cubre con y sin Lugol para favorecer la pesquiza.

Método de Telemann modificado