Componentes de la sangreComponentes de la sangre

DeterminaciDeterminacióón del Hematocriton del Hematocrito

CCáámara de recuento globular (mara de recuento globular (NeubauerNeubauer))

AutomatizaciAutomatizacióón en Hematologn en Hematologííaa

ExactitudExactitud PrecisiPrecisióónn RapidezRapidez StandarizaciStandarizacióónn ScreeningScreening

Toma de muestraToma de muestraProcesamientoProcesamiento

Sangre Sangre entera(EDTAentera(EDTA)) Procesamiento dentro de las 4 Procesamiento dentro de las 4 hshs Conservar refrigeradaConservar refrigerada Temperatura ambienteTemperatura ambiente

Principios de MediciPrincipios de Medicióónn Impedancia ElImpedancia Elééctricactrica

CitometriaCitometria de Flujode Flujo DispersiDispersióón n óópticaptica FluorescenciaFluorescencia PeroxidasaPeroxidasa

EspectrometriaEspectrometria de Absorcide Absorcióónn

Impedancia VolumImpedancia Voluméétricatrica NN°° Pulsos :proporcional al Pulsos :proporcional al NN°° de cde céélulaslulas Amplitud del pulso :proporcional al tamaAmplitud del pulso :proporcional al tamañño de o de

la cla céélulalula

Recuento por impedanciaRecuento por impedancia

Los impulsos Los impulsos electricoselectricos generados por generados por RBC y Plaquetas son contabilizadas y RBC y Plaquetas son contabilizadas y clasificadasclasificadas

CLASIFICACION DE LOS IMPULSOS ELECTRICOS GENERADOS POR RBC Y PLT.

Los impulsos Los impulsos electricoselectricos provenientes del provenientes del RBCRBC’’ss son agrupados en un histograma son agrupados en un histograma con 256 canales de 1 con 256 canales de 1 flfl de anchode ancho

Histogramas Tres Diff

Conteo por impedancia de GR y Plaq

Indices Indices HematimHematiméétricostricos

VCM VCM HCMHCM CHCMCHCM RDWRDW--CVCV RDWRDW--SDSD

DefiniciDefinicióón Del CHCM y HCMn Del CHCM y HCM CHCMCHCM:Refleja:Refleja la proporcila proporcióón entre la n entre la

hemoglobina y el hematocrito de una muestra hemoglobina y el hematocrito de una muestra de sangrede sangre

Se refiere a la Se refiere a la concentraciònconcentraciòn de de HbHb en el GR en el GR promedio,espromedio,es decir la decir la relacionrelacion entre el peso y entre el peso y el volumen que lo contieneel volumen que lo contiene

HCMHCM: Se refiere al peso de la : Se refiere al peso de la HbHb del GR del GR promediopromedio

¿¿QQuuéé significa RDW?significa RDW?““RDW RDW –– Ancho de la distribuciAncho de la distribucióón de la curva de los eritrocitos n de la curva de los eritrocitos ””

Dos fDos fóórmulas matemrmulas matemááticas usadas para describir la ticas usadas para describir la variacivariacióón de taman de tamañño de los eritrocitos o de los eritrocitos ((AnisocAnisociitosistosis).).

RDWRDW--CVCV

DefiniciDefinicióón:n: Es el coeficiente de Es el coeficiente de variacivariacióón alrededor de la media (X) n alrededor de la media (X) correspondiente a la curva de correspondiente a la curva de distribucidistribucióón del volumen de los n del volumen de los glglóóbulos rojosbulos rojos

RDWRDW--SDSD DefiniciDefinicióón:n: Medida directa (en fl.) del Medida directa (en fl.) del

ancho de la curva de los glancho de la curva de los glóóbulos rojos bulos rojos (RBC) Tomada 20% arriba de la l(RBC) Tomada 20% arriba de la líínea basenea base

El ancho es medido al 20% de la altura El ancho es medido al 20% de la altura relativa. A esta altura es donde se relativa. A esta altura es donde se encuentra la mayor variaciencuentra la mayor variacióón de taman de tamañños de os de las clas céélulaslulas

RDWRDW--SDSD

TamaTamañño de los Eritrocitos en o de los Eritrocitos en flfl

20%20%

AlturaAlturarelativarelativa

Histograma de Eritrocitos Histograma de Eritrocitos

La curva más anchaRepresenta a la poblaciónCon mayor anisocitosis

Histogramas de plaquetasHistogramas de plaquetas

FACTORES QUE PRODUCEN FACTORES QUE PRODUCEN INTERFERENCIAINTERFERENCIA

La turbidez afecta la La turbidez afecta la lectura lectura espectrofotomespectrofotomèètricatrica

HbHb HbCMHbCMLipemia ,ictericia Lipemia ,ictericia ,,quilomicronesquilomicrones

AglutinaciònAglutinaciòn de GRde GRGR ,VCM ,CHCM GR ,VCM ,CHCM CrioaglutininaCrioaglutinina

PARPARÀÀMETROMETROAFECTADOAFECTADO

FACTORESFACTORES

Se cuentan como GBGB GR nucleados,fragmento de Megacariocitos

El tamaño eritrocitario < que el umbral

GR Microcitosis o esquistocitos

Gr (Hb : S,C,F) no pueden lisarse y se cuentan como GB

GB , HbGR resistentes a la lisis con Hbanormales

Gr lisados y no contados

GR , HtoHemòlisis

……OTRAS CAUSAS DE ERROR EN LOS PAROTRAS CAUSAS DE ERROR EN LOS PARÀÀMETROS METROS ERITROCITARIOS :ERITROCITARIOS :

Crioglobulinas,criofibrinogenoCrioglobulinas,criofibrinogeno: GR Y : GR Y HtoHto HiperbilirrubinemiaHiperbilirrubinemia y Hiperlipemia : y Hiperlipemia : HbHb ProteinasProteinas plasmplasmààticasticas anormales y anormales y

crioglobulinascrioglobulinas : : HbHb Muestras coaguladas : GR Y Muestras coaguladas : GR Y HtoHto MicroagregadosMicroagregados : : HbHb

Conteo por impedancia :WBCConteo por impedancia :WBC3 3 diffdiff

Los impulsos elLos impulsos elééctricos son ctricos son detectados,clasificadosdetectados,clasificados y almacenados y almacenados en un histograma con canales de 1 en un histograma con canales de 1 flfl

Alerta Alerta LIM R0.LIM R0.Presencia de NRBCPresencia de NRBCEritrocitos con lisado Eritrocitos con lisado

incompleto.incompleto.Crioglobulinas.Crioglobulinas.CoagulaciCoagulacióón parcialn parcial..

Alerta LIM R1.Linfoblastos.Linfocitos atípicos.Crioglobulinas.Coagulación parcial.Linfopenia.Granulocitosis.

Alerta Alerta LIM R2.LIM R2.LinfoblastosLinfoblastos..BlastosBlastos..BasofiliaBasofilia..EosinofiliaEosinofilia..GranulocitosisGranulocitosis..LinfopeniaLinfopenia

Alerta MID R2.

Monocitosis.Basofilia.Eosinofilia.Granulocitosis.

Alerta Alerta MID R3.MID R3.

MonocitosisMonocitosis..EosinofiliaEosinofilia..GranulocitosisGranulocitosis..NeutrofilosNeutrofilos en banda.en banda.

.

Alerta GRAN R3

Granulocitosis.Neutropenia.Linfocitosis.Granulocitosinmaduros/Banda

Alerta GRAN R4

Granulocitosis.Neutropenia.Linfocitosis.Granulocitosinmaduros/Banda

Reporte por impedancia de un caso Reporte por impedancia de un caso clinicoclinico

Informe MIYTIC 18Informe MIYTIC 18

DeterminaciDeterminacióón de n de HbHb

Se realiza la lectura en la celda de Se realiza la lectura en la celda de HbHb a a 540nm540nm

El valor de El valor de absorvanciaabsorvancia se interpola en la se interpola en la curva de calibracicurva de calibracióón almacenada en el n almacenada en el instrumentoinstrumento

DescripciDescripcióón del n del CellCell DynDyn 32003200

TecnologTecnologíía a óóptica :ptica :PLT,WBC;RBCPLT,WBC;RBC TecnologTecnologíía diferencial MAPSSa diferencial MAPSS 3D MCV3D MCV Conteo NOCConteo NOC ReticulocitosReticulocitos

Software y Software y terminalterminal de datosde datos

Reactivos :Reactivos :CellCell DynDyn Reactivo para la Reactivo para la HbHb libre de libre de cianuro(NOCcianuro(NOC)) Reduce los riesgosReduce los riesgos Reduce la interferencia en las muestras con leucocitos marcadosReduce la interferencia en las muestras con leucocitos marcados Se usa para destruir las membranas de los GB a fin de permitir Se usa para destruir las membranas de los GB a fin de permitir

el conteo el conteo WBC(NOCWBC(NOC))

Reactivo Reactivo WBC(WOCWBC(WOC)) EfectEfectúúa ra ráápidamente la lisis de los GR y mejora la discriminacipidamente la lisis de los GR y mejora la discriminacióón n

de los leucocitos en las poblacionesde los leucocitos en las poblaciones

Diluyente RBC/PLQ DILDiluyente RBC/PLQ DIL Minimiza los efectos de los efectos abrasivosMinimiza los efectos de los efectos abrasivos Facilita el enfoque hidrodinFacilita el enfoque hidrodináámicomico

ReticulocitosReticulocitos Nuevo procedimiento con azul de metilenoNuevo procedimiento con azul de metileno Tubos ya preparadoTubos ya preparado Muestra de 20ulMuestra de 20ul TinciTincióón de ARN de 15n de ARN de 15´́ Aspirado de la muestra a modo abiertoAspirado de la muestra a modo abierto Modo reticular por separadoModo reticular por separado El valor RBC se incorpora automEl valor RBC se incorpora automááticamente en el ticamente en el

ccáálculolculo

ReticulocitosReticulocitos

ARN ARN polirribosomalpolirribosomal Absorbe el nuevo Absorbe el nuevo

tinte de azul de tinte de azul de metileno dentro del metileno dentro del reticulocitoreticulocito

Estas cEstas céélulas se lulas se identifican por medio identifican por medio de la disperside la dispersióón n laserlasera 90a 90°° se contabilizan se contabilizan y su tamay su tamañño se o se determina por medio determina por medio de la tecnologde la tecnologíía a MAPSS(deMAPSS(de dispersidispersióón n mmúúltiple con ltiple con separaciseparacióón de n de áángulo ngulo polarizadopolarizado

TecnologTecnologíía a óóptica ptica CellCell DynDyn 32003200

Conteo de WBC y diferencialConteo de WBC y diferencial Conteo Conteo óóptico(0,10,90,90D)ptico(0,10,90,90D) MAPSSMAPSS AnAnáálisis en el modo de listalisis en el modo de lista

Conteo de RBCConteo de RBC Conteo Conteo óóptico(0,90)ptico(0,90) FormaciFormacióón de esferoidesn de esferoides

Conteo de PlaquetasConteo de Plaquetas Conteo Conteo óóptico(0,10)ptico(0,10)

Enfoque analEnfoque analííticotico Iluminado por medio Iluminado por medio

de un de un laserlaser helio nehelio neóónn Enfocado Enfocado

hidrodinhidrodináámicamente a micamente a travestraves de una celda de de una celda de flujo de diseflujo de diseñño o especialespecial

MediciMedicióón de las n de las carcaráácteristicascteristicas de de dispersidispersióón n óóptica de la ptica de la luz para las celdas luz para las celdas individualesindividuales

Enfoque hidrodinEnfoque hidrodináámicomico Minimiza la Minimiza la

acumulaciacumulacióón de n de proteinasproteinas

Elimina la Elimina la circulacicirculacióón n retrogradaretrograda

Reduce la Reduce la irregularidad de la irregularidad de la altura de pulsoaltura de pulso

Reduce la perdida Reduce la perdida por pasaje por pasaje coincidentecoincidente

CitometriaCitometria de Flujo de Flujo MAPSSMAPSS

SeparaciSeparacióón en dispersin en dispersióón n polarizada en polarizada en angulosangulos mmúúltiplesltiples

El El citogramacitograma MAPSS MAPSS final muestra los final muestra los eventos de celdas eventos de celdas individuales los cuales individuales los cuales se definen por medio se definen por medio del uso del colordel uso del color

El anEl anáálisis un proceso lisis un proceso de celda a celda en 4 de celda a celda en 4 dimensionesdimensiones

FormaciFormacióón de esferoides n de esferoides isovolumisovoluméétricostricos

IndiceIndice de Refraccide Refraccióón n multivariantemultivarianteMCVMCV--3D3D

DetecciDeteccióón de los RBC resistentes a la n de los RBC resistentes a la hemhemóólisislisis

Conteo Conteo óóptico ptico nucleadonucleado NOCNOC

AnAnáálisis lisis óóptico de las plaquetasptico de las plaquetas

Por medio del uso Por medio del uso de un enfoque de de un enfoque de dispersidispersióón n óóptica ptica de la luz con de la luz con áángulo ngulo dual se logra una dual se logra una buena separacibuena separacióón n de los GR y las de los GR y las plqplq

AdemasAdemas , la , la presencia de los presencia de los ccúúmulos de mulos de plqplq se se puede detectar en puede detectar en forma confiableforma confiable

CellCell DynDyn serie 3000serie 3000