1Junior Gómez herrera

DEFINICION

Es un prueba diagnostica que por medio del cultivo nos permite la información del origen de la causa de las gastroenteritis y también nos dan una idea de cual es el tratamiento mas optimo e idóneo para el caso.

FASE PRE ANALITICA

MATERIAL DE RECOLECCION Un recipiente limpio de boca ancha Cierre hermético

VOLUMEN DE LA MUESTRA

Heces pastosas: muestras del tamaño de una nuez son muy adecuadas pues permiten realizar la mayoría de los estudios.

Heces líquidas entre 5 y 10 ml.

OBTENCION DE LA MUESTRA Solo se procesan materias líquidas o a lo sumo pastosas.

Si son pastosas se toma una porción del recipiente y se transfieren al sistema elegido para el envío al laboratorio.

Se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre.

En caso de heces líquidas puede utilizarse jeringa para aspirado del material fecal del recipiente

No se procesarán las muestras de materias sólidas ni contaminadas con orina.

MUESTRA

TRANSPORTE

Para bacterias. ( Cary- Blair o solución de glicerol tamponado)

Si la muestra no se envia en forma inmediata se debe refrigerar. 4 ºC

Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión, no necesitan medio de transporte.

Mientras tanto mantener refrigerada las muestras, para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatógenos. El frío puede afectar la viabilidad de Shigella spp.

Para el estudio de toxinas de Clostridium difficile la muestra se puede mantener hasta 48 horas

FASE ANALITIC

A

PROCESAMIENTO DE LA MUESTRAS HECES LIQUIDAS:

No necesitan procesamiento.

HECES SÓLIDAS:

Hay que licuarlas.

Mover con un bajalegua las heces hasta que haya quedado lo suficiente liquida para tomar un inoculo.

Los retos al contenedor de bioriesgo:

PROCEDIMIENTO:

La tinción Gram. de la muestra:

Siembra de los cultivos.

TINCION GRAM

1.- siembra con asa en atmósfera estéril:

2.-La extensión sobre una gota de Agua Destilada en Porta y Fijarla.

Cristal v. 1-2’LavarLugol 1’Alcohol 1-3’’Safranina 1’

TINCION GRAM

IDENTIFICACION

Una ves que identifiquemos a que tipo de Bacteria tenemos, identificaremos a cada una, para ello realizaremos distintas pruebas que nos llevaran a la bacteria.

SIEMBRA

1.- siembra con asa en atmósfera estéril:

2.- siembra por agotamiento en distintos medios

Incubación

37ºC x 24Hrs

AISLAMIENTO

Se realiza un aislamiento de cada colonia para obtener un cultivo puro en un medio general como TSA, Siguiendo en mismo proceso de siembra con asa.

AISLAMIENTO

TSI

TSI

LIA

LIA

CITRATO SIMONS

CITRATO SIMONS

SIM (Sulfuro-Indol-Motilidad)

SIM (Sulfuro-Indol-Motilidad)

ANTIBIOGRAMA

Una vez que realizamos nuestra identificacion de bacterias en nuestros aislamientos se realiza el ANTIBIOGRAMA para la prueba de suseptibilidad de la bacteria frente a antibioticos para un tratamiento adecuado e optimo.

El sembrado se realiza por agotamiento, se deja secar 4-5’ luego se colocan los discos de antibioticos con una pinzas.

MEDIO MUELLER HINTON AGAR Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente

para la prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. Además es útil con el agregado de sangre 0.5%

Para el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.

FUNDAMENTO: presenta buena reproducibilidad lote a lote en las

pruebas de sensibilidad. su contenido en inhibidores de sulfonamidas,

trimetoprima y tetraciclina es bajo. la mayoría de los patógenos crece satisfactoriamente

ANTIBIOGRAMA

Amoxicilina18mm Sensible

Cloranfenicol22mm Sensible

Amikacina 8mm Resistente

Se usan: Amoxicilina, amikacina, cloranfenicol, Ampicilina, Penicilina, Vancomicina.

RESULTADOS Consultar en la sección “prueba de sensibilidad a los

antimicrobianos”, la metodología apropiada.

Chromobacterium violaceum

Pseudomona aeruginosa

Streptococcus pyogenes