Criptococosis
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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELAFACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE BIOANÁLISISCÁTEDRA DE MICOLOGÍA
Criptococosis
Profa. Yotsabeth Saúl G.
Caracas - 2016
Criptococosis: Definición
Blastomicosis europea, torulosis, enfermedad de Busee-Buschke
Micosis oportunista causada por levaduras capsuladas del Complejo Cryptococcus neoformans, actualmente con dos epecies: C. neoformans y C. gattii, de origen exógeno; se adquiere por vía inhalatoria, y es pulmonar en el 90% de los casos; puede afectar vísceras, músculo, hueso, piel y mucosas, pero tiene particular afinidad por el Sistema Nervioso Central (SNC).
Arenas 2014
Criptococosis: Historia
• Sanfelice (1894): informó la presencia de una levadura encapsulada en el jugo fermentado de duraznos a la cual llamó: Saccharomyces neoformans.
• Busee y Buschke (1894): de manera independiente describieron el primer caso en humanos con lesiones cutáneas y óseas. Le llamaron Saccharomyces.
• Vullemin (1901): clasificó la levadura aislada en estos pacientes en el género Cryptococcus al no encontrar en este hongo las ascosporas características propias del género Saccharomyces.
• Stoddard y Cutler (1916): consideraron que la cápsula del Cryptococcus era una cavidad lítica provocada por digestión y llamaron al hongo Torula histolytica.
• Kwon-Chung (1975-1976): caracterizó la forma teleomorfa y la llamó Filobasidiella neoformans.
• Campins (1981): realizó una revisión detallada de los reportes realizados en Venezuela, encontrando un total de 110 casos hasta la fecha.
Criptococosis: TaxonomíaTaxonomía:• División: Basidiomycota• Familia: Filobasidiaceae
Criptococosis: Taxonomía
Taxonomía:• División: Basidiomycota• Familia: Filobasidiaceae• Género: Filobasidiella (estado teleomorfo, sexual o perfecto)oEspecie: F. neoformansoEspecie: F. bacillispora
Criptococosis: Taxonomía
Taxonomía:• División: Basidiomycota• Familia: Filobasidiaceae
• Género: Filobasidiella (estado teleomorfo, sexual o perfecto)o Especie: F. neoformanso Especie: F. bacillispora• Género: Crptococcus (estado anamorfo, sexual o imperfecto)
oEspecie: C. neoformans • C. neoformans variedad grubii (serotipo A) • C. neoformans variedad neoformans (serotipo D)
oEspecie: C. gattii (serotipos B y C)
Criptococosis: Taxonomía
El estado de los diferentes linajes en el Complejo C. gattii / C. neoformans se ha debatido con dos hipótesis emergentes, a saber, (a) el concepto de dos especies frente a (b) el concepto siete especies.
Complejo C. neoformans
F. Hagen et al. / Fungal Genetics and Biology 78 (2015) 16–48
Criptococosis: aspectos epidemiológicos
C. neoformans: Criptococosis oportunista, cosmopolita, asociada a condiciones de inmunosupresión celular.
Hábitat: • Guano de algunas aves (pH alcalino).• Las aves son reservorios o vectores indirectos que mantienen al
microorganismo pero no adquieren la enfermedad.
Rev Soc Bras Med Trop. 2008; (5):524-44
Eucaliptus camadulensis
Criptococosis: epidemiología
• C. gattii: Criptococosis primaria, de hospedero aparentemente inmunocompetente, endémica en áreas tropicales y subtropicales: Australia, Canada, Colombia, Brasil y en algunas áreas de Estados Unidos (San Francisco).
Hábiat:• Árboles, madera.• Animales: ardillas, aves, hurones.• Amibas y nemátodos.
Rev Soc Bras Med Trop. 2008; (5):524-44
Las esporas y células de levadura desecadas inician la infección después de la inhalación. Las esporas son el resultado de ya sea el apareamiento entre las células de tipos de apareamiento opuestos (Mata o MATα) y posterior formación del dicarión (izquierda), o de apareamiento unisexuales de células MATα para establecer un tipo de célula monokariótica (derecha). En ambos casos, el desarrollo sexual dentro del monocarión o dicarión filamentoso resulta en la meiosis y esporulación. Las esporas germinan para producir células haploides, semejantes a las levaduras que se dividen por gemación. B) Las células de levadura pueden desecarse en el medio ambiente de tal manera que su pequeño tamaño permite la inhalación profunda en el tejido pulmonar. La germinación de esporas o el crecimiento vegetativo de las células de levadura en el tejido pulmonar resulta en la proliferación de células en ciernes y la formación de células gigantes en una fracción de la población. Note que las células no están dibujados a escala.
Criptococosis: aspectos epidemiológicos
• Vía de entrada: Inhalatoria (aspiración de propágulos), contactos cutáneos y por ingestión.
• Edad y sexo: Más frecuente en pacientes del sexo femenino 2:1. En pacientes con SIDA se observa predominio del sexo masculino 4:1.
• Raza: Sin distinción de raza.
• Ocupación:C. neoformans: se requiere un severo estado de inmunosupresión.C. gatti: laborar en las regiones donde habita el hongo.
• Factores predisponentes:90% de los casos se asocia a SIDA/100 cels/mm3. Está descrita una taza de mortalidad del 10% en países desarrollados y del 43% en países en vías de desarrollo.
Bonifaz, 2014
Criptococosis: aspectos epidemiológicos
Frecuencia:Las Micosis Oportunistas no son de denuncia obligatoria (subregistro).
CDC:1.000.000 casos nuevos/año.680.000 muertes.10-20% asociadas a SIDA (criptococosis meníngea).
Bonifaz 2014
Criptococosis: aspectos epidemiológicos
Casuística de micosis profundas sistémicas reportadas por los Grupos de Trabajo en Micología de Venezuela, 1984-2010
Rev Iberoam Micol. 2013: 30(1): 39-46
Infección pulmonar
Diseminación hematógena y
linfática
Árboles/Suelo/Excrementos
Sobreviven en macrófagos
Se liberan macrófagos o monocitos, las levaduras cruzan
las células endoteliales microvasculares hasta atravesar
la barrera hematoencefálica.
Blastoconidias encapsuladas, melanizadas
Esporas a través de apareamiento o fructificación monocariótica
Criptococosis: aspectos clínicos
Nemátodos /amibas Mamíferos/aves/reptiles
Se propagan hacia neutrófilos y células del parénquima
Criptococosis: aspectos clínicosCriptococosis del sistema nervioso central
Meningitis/ Meningoencefalitis / Criptococomas
Trehalosa: protección antioxidante que favorece la adaptación del hongo a la temperatura del hospedero.
Componentes de la cápsula: interfieren con la respuesta inmunitaria: fagocitosis, reclutamiento de células inflamatorias; producción de anticuerpos.
Melanina: involucrada en la estructura de la pared celular y de la cápsula. Sirve como un potente antioxidante contra el estrés oxidativo.
Lacasa: enzima responsable de la biosíntesis de melanina en la pared celular y la supervivencia en el SNC.
PLB: participa en la promoción de una respuesta Th2. Junto con Lacasa apoya la supervivencia del hongo dentro del macrófago.
Ureasa: expresada por cepas altamente virulentas. Resulta en la migración de células dendríticas inmaduras a los ganglios linfáticos y la respuesta inmune Th2, asociada al traspaso de la barrera hematoencefálica.
Exportación extracelular de los factores de virulencia por vesículas: la fosfolipasa B está implicada en la integridad de la pared celular, la invasión fúngica y avance en el tejido pulmonar del hospedero; lacasa y ureasa inducen a los macrófagos a producir IL-10 y TGF-β predominantemente.
Criptococosis: aspectos clínicos
The Open Epidemiology Journal, 2013, 6, 9-17
Criptococosis: aspectos clínicos
Criptococosis pulmonar
Asintomática o subclínica
Criptococosis: aspectos clínicosCriptococosis pulmonar
Criptococomas
Criptococosis: aspectos clínicos
Criptococosis del sistema nervioso central
Meningitis/ Meningoencefalitis / Criptococomas
Criptococosis: aspectos clínicos
Criptococosis del sistema nervioso central
Meningitis/ Meningoencefalitis / Criptococomas
Criptococosis: aspectos clínicos
Criptococosis cutánea
Primaria / Secundaria
Criptococosis: aspectos clínicos
Criptococosis cutánea
Primaria / Secundaria
Criptococosis: diagnóstico diferencial
Pulmonar Influenza, tuberculosis, neumonías por gramnegativos, coccidioidomicosis, histoplasmosis, blastomicosis, paracoccidioidomicosis, candidosis y neoplasias.
Del SNC Tuberculosis, neoplasias, toxoplasmosis, meningitis bacterianas crónicas, enfermedad degenerativa del SNC.
Cutánea Moluscos contagiosos, esporotricosis, acné, micobacteriosis no tuberculosa, síndromes purpúricos, tuberculosis, coccidioidomicosis, paracoccidioidomicosis.
Ósea Osteomielitis, osteosarcomas, esporotricosis, coccidioidomicosis, paracoccidioidomicosis.
Ocular Infección herpética, mucormicosis.
Diseminada Tuberculosis, coccidioidomicosis, blastomicosis, paracoccidioidomicosis, histoplasmosis.
Criptococosis: diagnóstico diferencial
Molusco contagioso
1. Recolección de la muestra: LCR, esputo, lavado broncoalveolar, orina, biopsias, sangre, médula ósea, exudado de úlceras, material purulento, secreción prostática.
2. Examen directo al fresco:Observación entre lámina y laminilla con KOH al 10%. Tinta china o nigrosina. Coloraciones directas fijadas: HE, PAS, plata metenamina, mucicarmina de Meyer.
Criptococosis: diagnóstico micológico
Criptococosis: diagnóstico micológico
Examen directo con KOH 20% y tinta Parker® ¿Se puede apreciar la cápsula (1000x)?
Criptococosis: diagnóstico micológico
Exámen directo con Tinta China:
Se observan blastoconidias provistas de una pared bien definida y una cápsula refringente, con o sin gemación, redondas u ovaladas de 4-6 µm de diámetro y hasta de 12-20 µm, dependiendo del tamaño de la cápsula.
Criptococosis: diagnóstico micológico
Exámen directo con Tinta China:
Criptococosis: diagnóstico micológico
3. Cultivo: Características macroscópicas• Crecimiento a 37°C.• Colonias de color blanco - amarillento, con aspecto brillante.• Textura mucoide. • Bordes lisos.
25 ó 37° C/ 48-72 horas. Se realiza en Agar Sabouraud, extracto de levaduras y BHI
(medios de cultivo sin cicloheximida).
Criptococosis: diagnóstico micológico
Examen al fresco (40X) (poca utilidad)Blastoconidias globosas u ovales, de 3 a 8 µm de diámetro
con Brotación simple o múltiple de cuello estrecho.
3. Cultivo: Características microscópicas
Criptococosis: diagnóstico micológicoDiferenciación de género:Staib o de Semilla de Niger (Guizotia abyssinica)
Pigmentos café-marrón(dihidroxifenilalanina: DOPA)
Criptococosis: diagnóstico
Diferenciación de género:Hidrólisis de la urea
Criptococosis: diagnóstico micológico
Crecimiento y viraje a azul corresponde a C. gattii
Diferenciación de especie: pruebas fisiológicas y térmicasCrecimiento en agar canavanina-glicina azul de bromotimol agar (CGB)
Criptococosis: diagnóstico
Diferenciación de especie: pruebas fisiológicas y térmicasAsimilación de Carbohidratos (Auxanograma):
Patrón de asimilación de C. neoformans y C. gattii es asimilación de carbohidratos:glucosa, galactosa, sacarosa, maltosa, trehalosa, ramnosa; en ocasiones la rafinosa
y nunca la lactosa
Criptococosis: diagnóstico
Diferenciación de especie: pruebas fisiológicas y térmicasFermentación de azúcares (Ximograma): No fermenta ningún carbohidrato
Criptococosis: diagnóstico
4. Inmunodiagnóstico: Detección de antígeno capsular, técnica aglutinación de partículas de latex (LCR).
Gracias