LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA ICROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Contenido

TemaDiapositiva1. Definicin de cromatografa32. Coeficiente de particin43. Clasificacin de mtodos cromatogrficos74. Cromatografa en capa fina95. Adsorcin106. Adsorbentes117. Eluyentes128. Orden de elucin149. Metodologa1510. Figuras1711. Polaridad-electronegatividad1812. Factores que influyen en la elucin 2213. Aplicaciones2314. Objetivos2415. Plan de trabajo25

CromatografaLa cromatografa es la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin diferencial entre dos fases, una estacionaria y otra mvil.

Hay varios tipos de cromatografa, segn la naturaleza de las dos fases involucradas, los compuestos son retenidos en la fase estacionaria por adsorcin o particin.

Coeficiente de particinLas separaciones cromatogrficas dependen de la diferencia entre los coeficientes de particin de los componentes entre dos fases inmiscibles.

El coeficiente de particin K de una substancia en un sistema de dos fases est dado por:

K = cs/cm

Donde:

cs = concentracin de la substancia en la fase estacionariacm = concentracin de la substancia en la fase mvil.

Coeficiente de particin

Las dos fases de todo sistema cromatogrfico se denominan:

Fase estacionaria o fase fija: un slido, un gel, un lquido.

Fase mvil: un lquido o un gas, que fluye sobre o a travs de la fase fija.

La fase mvil, progresa en relacin con la otra, la fase estacionaria, y transporta las substancias que se estn separando.

Coeficiente de particin

Se escogen las fases de modo que los coeficientes de particin de los componentes de la mezcla sean lo ms distintos posible.

A mayor coeficiente de particin de una substancia, mayor es su concentracin en la fase estacionaria y ms lento su avance a lo largo del sistema cromatogrfico.

Clasificacin de mtodos cromatogrficos

Fase mvilFase estacionariaTcnica cromatogrficaGasSlidaCromatografa de gases(cromatografa gas-slido)LquidaCromatografa de gases(cromatografa gas-lquido, CGL)lquidoSlidaCromatografa de adsorcin(Particin lquido slido, cromatografa lquido-slido, CLS).Cromatografa en capa fina, cromatografa en papel y cromatografa en columna.LquidaParticin lquido-lquido(cromatografa de particin, cromatografa lquido-lquido, CCL)

Clasificacin de mtodos cromatogrficosAdems, de acuerdo con el mecanismo de retencin, la cromatografa se puede clasificar en los siguientes tipos:

CromatografaDe adsorcin (normal, de fase reversa)De particin lquido-lquidoDe intercambio inicoDe permeacin sobre gelDe afinidad

Cromatografa en capa fina.La cromatografa de capa fina, es un tipo de cromatografa donde la fase estacionaria es una capa delgada de un material depositado sobre un soporte, a este conjunto se le llama placa.

La fase mvil es un disolvente o mezcla de disolventes, llamada eluyente, que se mueve por la fase estacionaria por capilaridad.

AdsorcinGeneralmente, las placas estn formadas por una capa de gel de slice u otro material con propiedades adsorbentes.

Adsorcin es la capacidad de una sustancia slida llamada adsorbente, para detener o concentrar selectivamente sobre su superficie inmvil o estacionaria productos que van en una disolucin en movimiento.

Adsorbentes*Su actividad se puede modificar por agua y se puede hacer cida, neutra o alcalina.

Adsorbentes slidos para cromatografaPapel

Aumenta la fuerza de las interacciones de enlace hacia compuestos polaresCelulosaAlmidnAzcaresSilicato de magnesioSulfato de calciocido saliclicoSlica gelFlorisilxido de magnesioxido de aluminio (Almina*)Carbn activado (Norit)

Eluyentes ms comunes

DisolventeConstante dielctricaDisolventeConstante dielctricaHexano1.9Cloroformo4.8ter de petrleo p. e. 30-602.0Acetato de etilo6.0Ciclohexano2.02-Propanol18.3Benceno2.3Acetona20.7Tolueno2.4Etanol24.3Tricloroetileno3.4Metanol32.6ter dietlico4.3Agua78.0

EluyentesLa serie eluotrpica:

hexano < tolueno < cloroformo < diclorometano O (3,5) > N, Cl (3,0) > C, S, (2,5) ( H (2,2), P (2,1)

El nmero entre parntesis corresponde a la cuantificacin de la electronegatividad segn Pauling.

PolaridadLa polaridad del eluyente es un factor que determina que los componentes se muevan ms rpido o ms lento en una cromatografa.Es decir, para un eluyente con mayor polaridad, ste tendr mayor capacidad para desplazar a los compuestos y se movern mejor.Por lo que, al revelar la placa, los componentes saldrn ms alejados de la lnea base.

Por la misma razn, con un eluyente menos polar, los compuestos tendrn una mayor interaccin con el soporte, por lo que su velocidad ser ms pequea y al terminar la cromatografa, se habrn desplazado muy poco a partir de la lnea base.

Factores que influyen en la elucinPor estos factores, es recomendable la eleccin de un buen eluyente para la separacin de los compuestos que queremos.

Para cada experiencia ser distinto el tipo de eluyente que necesitemos.

Dependiendo de los componentes a separar, lo mejor ser realizar varias pruebas con distintos tipos de eluyentes para as considerar el ptimo para esa separacin.

AplicacionesLa cromatografa de capa fina es un mtodo muy til, rpido y barato que se puede utilizar principalmente para:

Identificar alguna sustancia conocida en una mezcla por comparacin con un patrn de la sustancia pura.

Medir el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en el cromatograma, es seal de que existen varios componentes en la muestra, por lo tanto est impura.

Obtener una medida semicuantitativa de algn componente. Elaborando una curva de calibracin con estndares y un tipo de revelador (UV, F-254 o F-366, I2 (especficos)).

ObjetivosConocer la tcnica de cromatografa en capa fina, sus caractersticas y los factores que en ella intervienen.

Observar la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes-adsorbentes utilizados.

Emplear la tcnica de cromatografa en capa fina como criterio de pureza e identificacin de sustancias.

Establecer las condiciones para determinar la pureza de los productos obtenidos con la tcnica de cristalizacin simple y por par de disolventes.

PLAN DE TRABAJO GENERAL*Tres concentraciones diferentes**Tres compuestos diferentes***Tres cosechas (cristalizacin simple) Tres cosechas (cristalizacin por par de disolventes)

ClaveExp IExp IIExp III.1*Exp III.2Exp IV**Exp V***Exp VIHexano-Acetato de etilo1XXHexano95:5Hexan-Acetato de etilo80:20X

Sedal Merk2XXAcetato de etilo90:10X3XXAcetona85:15Hexano100XTempra4XXMetanol80:20X5XXBenceno75:25Acetato de etilo100XAspirina6XXCloroformo70:30X

ExperimentosPreparacin de las cromatoplaca y de los capilares.Preparacin de la cmara de elucin y marcado de la lnea de aplicacin de las placas. APLICACIN DE LA MUESTRA Y EFECTO DE LA CONCENTRACINPOLARIDAD DE LAS SUSTANCIASPUREZA DE LAS SUSTANCIAS LA CROMATOGRAFA EN CAPA FINA COMO CRITERIO PARCIAL DE IDENTIFICACION. CARACTERIZACIN DE LOS PRODUCTOS PRESENTES EN TRES MEDICAMENTOS

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