BIOQUMICA DE ALIMENTOSNombre: .

ENZIMAS

1. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reaccin catalizada por una enzima son:[S] (moles/L)V (umoles/min)

5x10-20.25

5x10-30.25

5x10-40.25

5x10-50.20

5x10-60.071

5x10-70.0096

a) cul es la velocidad mxima de esta reaccin? 0.25moles/ minb) por qu la velocidad inicial permanece constante a una [S] mayor a 5x10-4Porque todas las enzimas est ocupadas transformando un sustratoc) cul es la km de la enzima = 1.25x10-5

Km +

Km = 1.25x10-5

d) calcular la velocidad inicial para [S] = 1x10-6 y [S]= 1x10-1M

2. En el siguiente experimento con la enzima fosfatasa cida de semillas de trigo germinadas se vari la concentracin de enzima en cada tubo de ensayo con dos concentraciones de sustrato y se obtuvieron los resultados siguientes:[enz] (uL)[FP] 0,1 mMV= (nmol/min)[FP] 10 mMV= (nmol/min)

51.9206.307

104.05913.169

155.95619.145

207.76625.694

259.47932.282

3011.84437.882

[enz] (uL)[FP] 0,1 mM

V= (nmol/min)

51.92

104.059

155.956

207.766

259.479

3011.844

[enz] (uL)[FP] 10 mM

V= (nmol/min)

56.307

1013.169

1519.145

2025.694

2532.282

3037.882

a) cmo vara la velocidad de reaccin en funcin de la cantidad de enzima aadida?La segunda velocidad mxima es mayor con 0.8802 con respecto a la velocidad del primer ensayo.b) Qu ocurre al dividir la velocidad registrada por la cantidad de enzima aadida a cada ensayo?[FP] 0,1 mM[enz] (uL)

V= (nmol/min)V/[enz]

1.9250.384

4.059100.4059

5.956150.3971

7.766200.3883

9.479250.3792

11.844300.3948

La relacin de la velocidad con respecto a la cantidad de enzima aumenta y disminuye a medida que aumenta la velocidad durante todo el ensayo.

[FP] 10 mM[enz] (uL)

V= (nmol/min)V/[enz]

6.30751.2614

13.169101.3169

19.145151.2763

25.694201.2847

32.282251.2913

37.882301.2627

3. La enzima aspartato transaminasa cataliza la reaccin: aspartato + oxoglutarato glutamato + oxaloacetatoSe realizaron los siguientes tres experimentos :[Asp]=1mM[OxG]=0.02mM[OxG]=0.5mM

[OxG](mM)Vel (umol/min)[Asp](mM)Vel (umol/min)[Asp](mM)Vel (umol/min)

0.0020.4440.0070.4110.0070.468

0.0182.0310.0481.2680.0482.017

0.0372.7810.1711.7220.1713.317

0.0633.3360.3351.8500.3353.866

0.0943.3760.5471.9830.5474.123

0.4934.3241.0162.0311.0164.324

a) Calcular Km y Vmax para cada sustrato[Asp]=1mM

1/[OxG]1/ Vel (umol/min)

(mM)

500.002.2523

55.560.4924

27.030.3596

15.870.2998

10.640.2962

2.030.2313

SI X=0Y= 0.246Y= Vmax=) = 4.065 umol/min)

Km= ; Km = 0.01

[OxG]=0.02mM

1/[Asp]1/Vel (umol/min)

(mM)

142.85712.4331

20.83330.7886

5.84800.5807

2.98510.5405

1.82820.5043

0.98430.4924

SI X=0Y= 0.4926Y= Vmax=) = 2.030 umol/min)

Km= ; Km = 0.02

[OxG]=0.5mM

1/[Asp]1/Vel (umol/min)

(mM)

142.8571 2.1368

20.8333 0.4958

5.8480 0.3015

2.9851 0.2587

1.8282 0.2425

0.9843 0.2313

SI X=0Y= 0.0134Y= Vmax=) = 74.62 umol/min)

Km= ; Km = 0.06

b) Cambian la Vmax? Por qu?Si cambia la velocidad porque se encuentra a diferentes concentraciones del sustrato , es decir a mayor concentracin de sustrato mayor es la velocidad c) Explicar que pas en el segn experimento respecto al tercerola velocidad mxima en el tercer experimento es mayor que la velocidad mxima del segundo experimento, a pesar de que contiene el mismo sustrato , la diferencia es que se encuentran a diferentes concentraciones.d) Cuntos y cules valores de km se debe considerar para describir la afinidad de la enzima por sus sustratos?2 valores que son :Km =0.01 y Km= 0.02e) Qu conclusin se podra sacar con esos datos?Se concluye que mientras menos se el valor de Km mayor ser la afinidad de la enzima por el sustrato.