DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UNA CÁMARA DE ELECTROFORÉSIS CASERAINTRODUCCIÓN

El término electroforesis significa mover con electricidad y es una técnica muy usada cuando se trabaja

con moléculas que tengan carga eléctrica como las proteínas y el ADN. Debido a que el ADN es una molécula

cargada negativamente puede moverse hacia un polo positivo dentro de un campo eléctrico. Si además el medio

donde se mueve tiene ciertas características que le permiten obstaculizar el paso de las moléculas más grandes

y permitir el paso de las más pequeñas, tenemos una técnica que permite separar el ADN por tamaño. Esta

técnica es muy útil hoy en día y tiene múltiples aplicaciones, por ejemplo test de paternidad.

La electroforesis es una herramienta común en biología molecular, biotecnología, ingeniería genética,

etc., por lo que es útil para analizar y separar macromoléculas de ADN, ARN, proteínas y entre otras de uso

cotidiano (como compuestos coloreados, como los colorantes de los jugos, extractos de frutas) que tengan

cargas eléctricas y por lo tanto pueden moverse a través de un campo eléctrico.

MATERIALES

Recipientes rectangulares de plástico

Probeta de 100 mL

Matraz de 250 mL

Piceta con agua destilada

Agar o colapiz

Colorantes

05 baterías de 9V

Cables y ganchitos de metal

Papel de aluminio

Bicarbonato

Glicerina

Bandejas de plumavit

Jeringas o goteros

Balanza

Cocinilla eléctrica

Regla en cm y mm

PROCEDIMIENTO:

1. Diseñar, construir o adquirir una cámara de plástico (envase pequeño rectangular), en la cual irán en los

extremos dos cables hechos de aluminio a los que posteriormente conectarás las baterías montadas en serie

(figura de abajo), asegurarse de que los alambres queden bien firmes a la cámara, para ello se puede usar

cinta adhesiva. En esta cámara se preparará el gel, que en este caso se usará colapiz.

2. Construir un peine que irá por encima y en el medio de la cámara, y los dientes estarán a 0,5 cm por encima

del fondo. Se hacen los pocillos en este caso en el medio por que vamos a hacer correr muestras positivas y

negativas a la vez.

3. Para preparar el gel, esta se hace con colapiz y como diluyente o buffer de corrida (1 litro de agua con una

cucharada de bicarbonato). La solución debe quedar homogénea. Así como el gel.

4. El gel disuelto agregar en la cámara que contenga el peine. El peine nos permitirá dejar huecos en el gel

donde se cargarán las muestras.

5. Una vez que el agar este sólido quita con cuidado el peine

6. Luego que este sólido el gel, retirar porciones del gel de los extremos donde irán los electrodos. Y luego cubrir

estos espacios con buffer de corrida hasta la altura del gel.

7. Seguidamente cargar las muestras (para este caso con diferentes colorantes que tengan cargas positivas y

negativas. A esta cámara colocar una tapa transparente.

8. Ahora conecta los cables en 5 baterías de 9 V cada una y observar cómo se mueven los colorantes en el gel.

9. Responder que moléculas de colorantes tienen cargas positivas o negativas, y cuales han migrado más.

Peine

Recipiente con el gel

Pocillos

Electrodo negativo

Electrodo positivo

Espacio del gel recortado

Espacio del gel

recortado

Muestras

✓ Freifelder, D. 1981.Técnicas de Bioquímica y Biología Molecular. 2Da. Ed., Publicado por Reverté: 235-240

✓ Fuentes, M. J. 1998. Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Volumen 1. 2da Ed., Publicado por Reverté: 169-171

Baterías en serie

Migración de moléculas