Distribución del contenido de manual por semanas.

SEMANA ACTIVIDAD

28 Enero-1 Febrero 1. Introducción al lab de bioquímica: Método científico

4-8 Febrero 1. Introducción al lab de bioquímica: Lowry

11-15 Febrero 1. Purificación de proteínas: Precipitación por salado

18-22 Febrero 1. Purificación de proteínas: Cromatografías

25 Febrero-1 Marzo 1. Purificación de proteínas: Determinación de proteínas por Bradford y PAGE-SDS

4-8 Marzo 1. Enzimas: Curvas temporales

11-15 Marzo 1. Enzimas. Efecto de concentración de sustrato e inhibidor

18-22 Marzo 1. Conjugación

SEMANA SANTA (25 al 29 marzo)

1-5 Abril 1. Transformación

8-12 Abril 1. Obtención de plásmido y restricción

15-19 Abril 1. Gel de Agarosa e inducción de proteína recombinante

22-26 Abril 1. PAGE-SDS proteína recombinante

29 Abril-3 Mayo 1. Operón lac

6-10 Mayo 1. Represión catabólica en plantas

13-17 Mayo Entrega de último reporte, repaso para examen departamentalEXAMEN DEPARTAMENTAL EL 17 DE MAYO

20-24 Mayo Entrega de calificaciones

Método científico

Dra. Sobeida Sánchez Nietosobeida@unam.mxLab 114, Conjunto E, Facultad de Química, UNAM

Método científico

Método de estudio sistemático de la naturaleza que incluye:

las técnicas de observación, reglas para el razonamiento y la predicción, ideas sobre la experimentación planificada y los modos de comunicar los resultados experimentales y teóricos.

Pasos del método científico

Observación Planteamiento de

preguntas Hipótesis Desarrollo

experimental Resultados Discusión Conclusiones Publicar

Pelagra

Una enfermedad que se produce por la deficiencia de niacina (vitamina del complejo B).

La Pelagra es la enfermedad que los de habla inglesa denominan de las cuatro “Ds”.

Diarrhea, Dermatitis, Dementia and Death.

"pelle", PIEL + "agra", RUGOSA = PIEL RUGOSA

Un problema grave de salud

3,000, 000 millones de norteamericanos contrajeron pelagra y 100, 000 murieron entre 1906- 1940.

La mayor parte de ellos vivían en el sur de EU

En Europa también había brotes de pelagra. Considerado un problema de toxicidad de

los alimentos o bien infeccioso

Dr. Joseph Goldberger

Médico, excelente epidemiólogo clínico

La US Public Health Service le solicito en 1914, resolver el problema de la pelagra.

Observaciones de Goldberger:

¿Quiénes se enferman?Los que se encuentran en: Orfanatos Hospitales y Prisiones.

Pero solo los que se encuentran en custodia, no así las enfermeras, doctores o custodios

Encuesta disponible

R. M. Grimm, MD 25 comunidades del sureste de EU: 3

minas de carbón en Kentucky, 7 villas de plantaciones de algodón y 15 comunidades en latifundios en Georgia.

Familia de aparceros

Qué tienen en común los afectados por la Pelagra?

Pobreza Malas condiciones de higiene y trabajos

con jornada alta. Sus parientes, visitantes o guardas que

tienen contacto con ellos no tenían pelagra ni antes ni después de convivir con ellos

Dietas que incluyen cantidad mínimas de proteína animal, cereales refinados (sin cascarilla).

Goldberger dedujo:

La pelagra no es una infección, no proviene de gérmenes, pero si proviene de una deficiencia nutricional.

Como probarlo?

EXPERIMENTOS EN HUMANO Tanto sus asistentes como él y su

esposa realizaron experimentos a los que les llamaron "filth parties." (fiestas de mugre). Se inyectaron así mismos:

a) Sangre o costras o residuos de fluidos de pacientes e incluso heces.

También lo hicieron los reclusos de la prisión de Mississippi (quiénes se voluntariaron con tal de que les otorgarán el perdón).

¡No son gérmenes!

Ninguno desarrollo pelagra.

Realmente es nutricional?o Para probarlo se propuso realizar lo

siguiente:o Producir la pelagra en un hombre

sano a través de alimentarlo con una comida que incluyera principalmente cereales, como los que se consumían las comunidades con alta incidencia de pelagra

Protocolo experimental Sujetos de estudio:

A. Sujetos a prueba: Convictos granja Rankin, Missisipi y el Dr. Goldberger

B. Controles: Guardias y convictos Dieta:

A. Cuadros nutrimentales, B. Registros de dietas en la cárcel, C. Tiempo de administración, D. cuadro de calorías

Control de jornadas de trabajo de los reclusos

Inspección por médicos certificados

Los efectos de la dieta

a) Al 2do mes se presentaron los síntomas de pelagra, comenzando por dermatitis. Posteriormente baja de peso, cansancio..

b) A los 6 meses todos estaban enfermos con síntomas graves de la enfermedad

Si es la dieta, entonces…

Tanto en los hospitales como con los prisioneros y él mismo Goldenberg cambiaron de dieta:

con carne, vegetales y leche, la enfermedad desapareció a los

pocos meses.

Conclusiones de Goldenberg

La dieta es el agente etiológico primario de la pelagra

La dieta que produce pelagra presenta deficiencia en aminoácidos, constituyentes minerales, vitaminas solubles en grasas y vitaminas antineuríticas (como las del complejo B)

Niacina puede prevenir pelagra

El Dr. Goldberger murió sin identificar el principio que curaba la pelagra. Pero en 1937 Elvehjem aisló la P-P (pellagra preventive) la niacina.

La niaciana es abundante en la carne roja, en las hojas verdes de los vegetales, en el pescado.

Previene y cura totalmente la pelagra.

Goldberger reporto sus resultados

                                                   

         

¿Porqué publicar?

INFORMAR A LA COMUNIDAD ESTABLECER TRATAMIENTO: Mejorar dieta ABRE NUEVAS LÍNEAS DE

INVESTIGACIÓNA. Debido a la pobreza implementaron una

cura, suplemento alimenticio con levadura de cerveza

B. Aunque, lo que definitivamente redujo de manera importante la enfermedad fue que cambiaron las prácticas en la agricultura, diversificaron los cultivos. El maíz escaso en triptófano el cual es precursor de la niacina

Conocimiento que es difundido es tomado en cuenta

En la actualidad aún hay brotes de pelagra debido a:

Mala alimentación (países en África y con pobreza extrema)

Alcoholismo Diarreas crónicas Síndrome de mala absorción (enfermedad

de Crohn) Tumor carcinoide Algunos medicamentos

Pasos del método científico

Observación Planteamiento de

preguntas Hipótesis Desarrollo

experimental Resultados Discusión Conclusiones Publicar

La hipótesis el punto clave para proponer una investigación

A partir de la observación surge el planteamiento del problema que se va a estudiar, lo que lleva a emitir alguna hipótesis o suposición provisional de la que se intenta extraer una consecuencia.

Una hipótesis es una pregunta de lo que planeas investigar y debe ser probada.

¿Pero como planteamos una hipótesis?

Trabajando en la hipótesis

Si sentimos que la garganta nos duele, nos planteamos:“Si tengo dolor de garganta entonces podría deberse a que tengo una infección en la garganta debida a bacterias o virus, o bien porque gritamos mucho el día anterior”.

Sin embargo, la anterior hipótesis no toma en cuenta lo que tenemos como conocimiento previo. Al replantearla podemos decir:

“Si sé que el resfriado es contagioso y no estuve en contacto con alguien que estuviera enfermo, y además fui a un juego de fútbol en donde grité mucho, entonces es probable que esto último me causara el dolor de garganta”.

Mejoró pero hay que proponer el experimento

“Si no tengo fiebre o síntomas de una infección en la garganta, pero sí una inflamación en la garganta, entonces el cultivo de exudado faríngeo y otros estudios clínicos darán negativo para una infección bacteriana o viral, por lo que la inflamación se deberá a un uso excesivo de las cuerdas vocales.

PERO CORTA… Si solo tengo inflamación en la garganta y grite

durante un juego de futbol entonces el análisis de infección por virus y bacteria será negativo.

Desarrollo experimental

La experimentación condiciones particulares de estudio, eliminando o introduciendo aquellas variables que puedan influir en él.

Se entiende por variable todo aquello que pueda causar cambios en los resultados de un experimento y se distingue entre variable independiente, dependiente y controlada.

Tipos de variables Variable independiente es

aquélla que el experimentador modifica a voluntad para averiguar si sus modificaciones provocan o no cambios en las otras variables.

Variable dependiente es la que toma valores diferentes en función de las modificaciones que sufre la variable independiente.

Variable controlada es la que se mantiene constante durante todo el experimento.

0

50

100

150

200

250

300

350

0 20 40 60Imbibition time (h)

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Siempre hay que incluir controles

En un experimento siempre existe un control o un testigo, que es una parte del mismo no sometida a modificaciones y que se utiliza para comprobar los cambios que se producen.

Reproducibilidad Todo experimento debe ser

reproducible, es decir, debe estar planteado y descrito de forma que pueda repetirlo cualquier experimentador que disponga del material adecuado.

Resultados

Los resultados de un experimento pueden describirse mediante tablas, gráficos y ecuaciones de manera que

Recuerda que aquí siempre hay que explicar que paso, que nos dice el experimento.

Análisis de resultados o también llamada discusión

Aquí ya no solo se dice si un valor se incremento o está normal o si algo está fuera de lo normal.

En está sección nos permite encontrar relaciones entre los resultados que confirmen o no las hipótesis emitidas

CONCLUSIONES:

Contrastar la hipótesis con los resultados. Una hipótesis confirmada se puede

transformar en una ley científica que establezca una relación entre dos o más variables, y al estudiar un conjunto de leyes se pueden hallar algunas regularidades entre ellas que den lugar a unos principios generales con los cuales se constituya una teoría.