e Spectro Foto Me Tria
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22/08/2012 1 Aseguramiento de la Calidad Analitca Aseguramiento de la Calidad Analitca Espectrofotometrica Espectrofotometrica Hach Company ING. ERICK REA ELICROM CIA. LTDA Andean Region [email protected]
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22/08/2012
1
Aseguramiento de la Calidad Analitca Aseguramiento de la Calidad Analitca EspectrofotometricaEspectrofotometrica
Hach Company
ING. ERICK REA
ELICROM CIA. LTDA
Andean Region
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Conceptos de Colorimetria
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¿QUÉ ES COLORIMETRÍA??
Esta medida se usa para cuantificar un analito disuelto en una solución.
La sustancia debe ser coloreada (absorber la luz) o convertida en un compuesto coloreado.
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LEY DE BEER-LAMBERTRelación empírica entre la absorción de luz y las propiedades del material atravesado por la luz.
En resumen, la ley explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la misma, así como también entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si se conoce l y α, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz transmitida.
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• Procedimiento de análisis químico
basado en la medida de la intensidad
de color de las soluciones.
¿QUÉ ES COLORIMETRÍA?
• Medición de la concentración de las
muestras con un sistema óptico.
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ESPECTROFOTÓMETRO BÁSICO
Lámpara Monocromador o
filtro
Lente Muestra Detector
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FUNDAMENTOS
Los métodos de espectrofotometría son invariablemente métodos de comparación.
La muestra es comparada con un estándar del mismo tipo bajo condiciones idénticas de química e iluminación.
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Absorbancia
Co
nce
ntr
acio
n (
mg
/L)
0.88
1.60
4.00
0.22 0.40 1.00
Pendiente
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CARACTERÍSTICAS DEL ESPECTROFOTÓMETRO
�Genera energía lumínica.� Selecciona una longitud de onda específica en el
espectro.� Incide un rayo de luz por la muestra.�Mide el cambio en la intensidad de la luz al pasar
por la muestra.�Muestra la señal de la intensidad digitalmente.
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100
15.2
0.00
0.818
79.1 0.19
36.3 0.440
%T ABS CONC mg/L
0.00
0.10
0.83
1.55
(Absorbance = -log T)
Sample Cell Detector
535nm535nm
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¿Dónde se usan?
NH3
Mn
SO4
SiO2
Fe
Cr
PbN2
AlCl2
DQO
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Aplicaciones de colorimetria
• Pruebas de Agua Potable
– arsénico*, cloro*, fluoruro*, plomo*, ozono, TOC, color, hierro, nitrato, chloramina y amoníaco libre.
• Pruebas de Aguas Residuales– DQO*, nutrientes (NH3 *, NO3
-, nitrógeno total, PO4*, fósforo total *), varios metales*
* Denota métodos aprobados por la Agencia de Protección Ambiental de EEUU
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Aplicaciones de colorimetria
• Pruebas de Agua Industriales– Sílice (3 rangos),
– Dureza (1 – 1000 ppb, y 0.07 – 4.00 mg/L)
– DEHA, oxígeno secuestrante
– Hidrazina
– fosfonatos
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HACH OFRECE EL SISTEMA COMPLETO
�El instrumento�Procedimiento
escrito�Reactivos
¡Son probados!
Los tres son diseñados para funcionar juntos.
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¿SÓLO PUEDE UTILIZAR PROGRAMAS DE HACH?
No, pero. . .
es
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¿CÓMO SE UTILIZA EL ESPECTROFOTÓMETRO?1. Llene la celda con la muestra.
2. Añada el reactivo y agite la muestra.
3. Espere el tiempo de reacción.
4. Haga cero en el espectrofotómetro.
5. Lea la muestra.
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Correr de la Prueba
• 1. Llene la celda con la muestra– Enjuague la celda con muestra antes de
llenar a volumen
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Correr de la Prueba
• 2. Añada reactivo a la muestra, como indicado en el procedimiento
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Reactivo + muestra
Complejo coloreado
Correr de la Prueba
3. Espere el tiempo de reacción.
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4. Haga cero en el espectrofotómetro
• Limpia la celda (el blanco), coloquéla en el instrumento y presione la tecla de Zero.
Correr de la Prueba
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• 5. Lea la muestra• Despues del periodo de reaccion, limpia la celda
reaccionada,coloquela en el instrumento y presione la tecla de
Leer.
Correr de la Prueba
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Buenas Practicas de Laboratorio
• Chequeos de instrumento • Chequeos de reactivo
– Correcto, no cauducidos
• Limpieza del cristal – Celdas y otro aparato
• Cristal de exactitud• Buen registro de los datos
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• Sistema optico
• Conjunto de filtros certificados para chequear– la exactitud de absorbancia
– luz desviada
– exactitud de longitud de onda.
• Certificado de los valores acceptables.
• Servicio
Chequeo de Instrumento
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CHEQUEOS DE PRUEBA
Como cualquier instrumento, hay que verificar periódicamente su funcionamiento, utilizando patrones y la adición de estándares.
Soluciones estándar
