ESPECTOFOTOMETRO

PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE CRECIMIENTO

BACTERIANO

PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE

CRECIMIENTO BACTERIANO

1. Se determina el crecimiento bacteriano de células viables y no viables

2. Se usa el espectrofotómetro ó colorímetro

3. El espectrofotómetro debe encederse 15 minutos antes del uso y se ajusta la longitud de onda a 600 nm.

4. Se mide una muestra blanco que es el medio de cultivo líquido en un tubo de ensayo adaptado al equipo.

5. Cómo el cultivo crece al estar en el medio líquido como agua de peptona, va a generar un incremento en la turbidez y por tanto, va a aumentar la absorbancia leída a 600 nm.

6. Antes de leer los datos de absorbancia, es necesario homogenizar para distribuir las células en el medio del cultivo líquido.

7. Emplee un tubo con agua de peptona

8. El segundo tubo de agua de peptona se adiciona 0,1 ml de un cultivo microbiano incubado días antes.

9. El tercer tubo se adiciona con 0,2 ml de un cultivo microbiano incubado previamente

10. El cuarto tubo se agrega 0,5 ml de un cultivo microbiano incubado días antes.

11. Se registran los valores correspondientes cada 20 minutos durante 3 horas. En los tiempos de espera, se incuban los tubos a 37°C.

PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE

CRECIMIENTO BACTERIANO

Tiempo (min) Abs (nm) Tubo 2

Abs (nm) Tubo 3

Abs (nm) Tubo 4

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

Graficar la absorbancia para cada tubo. Absorbancia (eje y) y tiempo (eje x)

PROCEDIMIENTO PARA DEMOSTRAR LA CURVA DE

CRECIMIENTO BACTERIANO

VIDEOS

http://www.youtube.com/watch?v=ILeKva55dWY

http://www.youtube.com/watch?v=uxRexW975nw