ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD FOSFOLIPASA Y PRODUCCIÓN DE BIOFILM COMO FACTORES DE VIRULENCIA EN CEPAS DE LEVADURAS PROVENIENTES DE MUESTRAS CLÍNICAS

Puigdomenech, Germán L1; Bulacio, Lucia C1-2; García, Mariana E1; Ramadán Silvana S2.1- ISPI 9009 San Juan Bautista de La Salle-Rosario. 2- CEREMIC Centro de Referencia de Micología-Facultad de

Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universidad Nacional de Rosario. Argentina.e-mail: germanpuigdomenech@hotmail.com

La incidencia de infecciones causadas por especies de Candida se ha incrementado en los últimos años. Entre los factores que confieren más virulencia a estos organismos, las enzimas hidrolíticas como fosfolipasas y proteasas juegan un papel importante, ya que actúan en la invasión de los tejidos. Otro factor importante a considerar es la capacidad de formar biopelículas (biofilm).

INTRODUCCIÓN

El objetivo de este trabajo es evaluar la secreción de fosfolipasas y producción de biofilm por parte de levaduras recuperadas de pacientes con candidiasis oral.

OBJETIVO

Se analizaron 93 cepas provenientes de pacientes: 48 de Candida albicans, 16 de C. parapsilosis, 7 de C. krusei, 5 de C. dubliniensis, y 17 de C. tropicalis. La detección de actividad fosfolipasa de evaluó mediante el cultivo en Agar Sabouraud-Glucosa y Agar Extracto de Malta suplementados con yema de huevo, seguido de la cuantificación del halo de precipitación alrededor de las colonias. Se determinó el índice Pz, relación entre el diámetro de la colonia y el diámetro de la colonia más halo de precipitación. La producción de biofilm se evaluó por incubación en caldo Sabouraud-Glucosa utilizando tubos Eppendorf, seguida de coloración con cristal violeta y lectura de absorbancia a 530 nm.

MATERIALES Y METODO

En cuanto a la actividad Fosfolipasa, 35 cepas de C. albicans, 1 de C. dubliniensis, 6 de C. krusei, 14 de C. tropicalis y 4 de C. parapsilosis mostraron índice [Pz] menor a 0,69; por otro lado 5 cepas de C. albicans, 1 de C. dubliniensis, 2 de C. tropicalis, 1 de C. parapsilosis, arrojaron Pz entre 0,7-0,8, mientras que 5 cepas de C. albicans, 1 cepa de C. dubliniensis y 1 de C. parapsilosis, Pz entre 0,81-0,9. El resto de las cepas no presentaron actividad enzimática (Pz =1). Con respecto a la producción de biofilm: Resultaron fuertes productoras de biofilm 7 cepas de C. albicans, 6 de C. parapsilosis, 3 de C. krusei y 11 de C. tropicalis, en tanto que fueron productoras débiles 7 cepas de C. albicans, 8 de C. parapsilosis y 3 cepas de C. tropicalis. El resto de las cepas estudiadas no produjeron biopelícula.

RESULTADOS

La producción de biofilm y la secreción de enzimas hidrolíticas facilitan la adherencia y posterior invasión de los tejidos del hospedero por parte de las levaduras. Es sumamente importante detectar estas características a los efectos de establecer estrategias necesarias para evitar la diseminación, instaurando tratamientos precoces.

 

CONCLUSION

ACTIVIDAD FOSFOLIPASA

PRODUCCION DE BIOFILM

BIBLIOGRAFIA

Zernotti ME, Villegas NA, Revol MR, Baena Cagnani CE, Arce Miranda JE, Paredes ME, Paraje MG: Evidence of Bacterial Biofilms in Nasal Polypsis. J Investig Allergol Clin Immunol 2010; Vol. 20(5): 380-385Ortolan Rörig KC, Colacite J, Abegg MA: Producción de factores de virulencia in vitro especies patógenas del género Candida. Rev. Soc. Bras. Trop. Vol. 42(2) 2009Pardi G: Determinantes de patogenicidad de Candida albicans. Acta Odontológica Venezolana. Vol. 40(2). 2002Panizo MM, Reviákina V, Flores Y, Montes W, Gónzales G: Actividad de fosfolipasas y proteasas en aislados clínicos de Candida sp. Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología. Vol. 25(2) 2005Castrillón Rivera L, Palma Ramos A, Padilla Desgarennes C: Factores de virulencia en Candida sp. Dermatología Rev Mex. Vol. 49: 12-27