QUE ES UNA PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

Las pruebas de compatibilidad son un conjunto de procedimientos que deben de llevarse a cabo antes de entregar la sangre para una transfusin. La finalidad es garantizar, dentro de lo posible que la sangre del donante no provocar ninguna reaccin adversa en el px.

REACCIONES POSTRANSFUSIONALES.

Se denomina reaccin postransfusional a los efectos desfavorables que pueden aparecer en un paciente durante o despus de la transfusin de algn hemoderivado a consecuencia del mismo.

PRUEBAS CRUZADAS ..

Detectar las posibles reacciones Ag-Ac entre la sangre del donante y del receptor, antes de la transfusin.

PRUEBA CRUZADA MAYOR: Trata de determinar la incompatibilidad entre las sangres enfrentando el suero del receptor con los hemates del donante.

PRUEBA CRUZADA MENOR: Se enfrenta los sueros del donante con los hemates del receptor y un, autocontrol donde se buscan auto anticuerpos mediante el enfrentamiento entre el suero del receptor y sus propio hemates.

La prueba cruzada menor solo se realiza cuando se transfunde una gran cantidad de plasma , ya que la presencia de Ac. En la sangre del donante puede ser peligrosa . El empleo de concentrados de hemates hace innecesaria la realizacin de esta prueba.

FUNDAMENTO.

Consiste en enfrentar el suero del receptor con los hemates del donante, primero en medio salino, posteriormente en un medio albuminoso, y por ultimo frente al suero antiglobulina de Coombs.

Material.tubos de hemlisis Centrifuga Bao de agua Pipetas pasteur Gradilla reloj

REACTIVOS.Solucin salina fisiolgica Albumina bovina al 30% Suero antiglobulina de coombs.

MUESTRASuero del receptor, obtenido de sangre coagulada y libre de hemolisis. Debe ser fresco (menos de 24 hrs desde la extraccin) y conservado a 4C. Hemates del donante, previamente lavados tres veces en solucin salina fisiolgica y resuspendidos en ella al 2-5%.

TCNICA..En un tubo de hemoolisis depositamos una gota de suspension de hematies del donante y 2 gotas del suero del receptor Mezclamos suavemente, y dejamos a temp. Ambiente durante 2-3 min Centrifugamos a 3.500 r.p.m durante 30 seg. Leemos el resultado obtenido en medio salino Aadimos al tubo 3 gotas de albumina bovina al 30% Mezclamos e incubamos a 37C durante 30 min.

Centrifugamos a 3.500r.p.m durante 30 seg Leer el resultado obtenido en medio albumino Lavamos tres veces los hematies con solucion salina para elimar los Ac. Que no se han fijado a los eritrocitos. Retirar bien todo el sobre nadante del ultimo lavado Aadimos al tubo una gota de suero antiglobulina humana de Coombs. Mezclar bien Centrifugamos a 1000 r.p.m durante 2 min Leemos los resultados.

LECTURA DE LOS RESULTADOS.la ausencia de aglutinacin en todos los pasos indica que las sangres son compatibles, y por, tanto, la transfusin es posible. La aglutinacin en cualquier fase de la prueba indica incompatibilidad Si se observa hemolisis en cualquiera de los pasos, tambin es signo de incompatibilidad

TCNICA DE COOMBS..OBJETIVODemostrar la presencia de anticuerpos hemoagrupadores absorbidos a las clulas rojas en vivo (prueba directa), adems de la presencia de anticuerpos absorbidos invitro.

FUNDAMENTOSe basa en el principio de los ateroanticuerpos contra componentes del suero humano segn la descrita por Mareschi y los principios de la aglutinacin publicados por Landsteiner. Los eritrocitos humanos en presencia de un anticuerpos dirigido contra un antgeno que poseen, pueden ser sensibilizadas para no lograr la aglutinacin por la naturaleza misma del anticuerpo o el antgeno en cuestin. El suero antihumano, reaccionar contra la gamma globulina que han sensibilizado a componentes del complemente humano y propiciar la aglutinacin de los eritrocitos.

MATERIALES.Gradilla metlica 2. Tubos de Khan (13 x 75mm). 3. Tubos de hemlisis 4. Pipeta Pasteur con bulbo 5. Cronmetro 6. Termmetro de 10C a +110C 7. Torundas con alcohol 8. Lanceta deshechable

MUESTRA..Sangre completa Suero

PRUEBA DE COOMBS DIRECTA..La prueba directa de Coombs se usa para demostrar la presencia de los anticuerpos que han fijado en las clulas del paciente in vivo

INTERPRETACIONLa aglutinacin de los eritrocitos del paciente, por el anti-humano, indica que estos se encontraban sensibilizados por anticuerpos.

PROCEDIMIENTO1. 2. 3.

Preparar una suspensin al 2% en solucin salina normal de las clulas probadas. Agregue dos gotas de la suspencin de las clulas preparadas a un tubo de 13 x 75mm. Lavar con solucin salina y centrifuge a 3500 r.p.m. durante 1 minuto. Efecte este lavado tres veces. Despus del ltimo lavado, decante lo ms posible. Agregue dos gotas de suero anti-humano Mezcle bien y centrifugue por 1 minuto a 1500 r.p.m. por 15 segundos. Resuspenda los eritrocitos de los tubos y examine el resultado.

4. 5. 6. 7.

PRUEBA COOMBS INDIRECTA

La prueba indirecta de Coombs es utilizada para demostrar la presencia de los anticuerpos circulares que cubren, pero que no aglutinan, a las clulas suspendidas en salina. Se efecta esta prueba combinando invitro a un anticuerpo con antgeno especfico

PROCEDIMIENTO.1.

2.3. 4. 5. 6.

7. 8. 9. 10.

Prepare una suspensin al 2% en solucin salina normal de las clulas seleccionadas para la prueba. Agregue dos gotas del suero que va a probarse a un tubo de Khan. Agregue dos gotas de la suspensin de las clulas preparadas, al tubo Khan Agregue dos gotas de albmina bovina solucin al 22% al tubo Incube en un bao mara a 37C por 15 minutos. (la incubacin puede prolongarse hasta 60 minutos si se desea). Saque el tubo del bao mara, llnela con solucin salina fresca, centrifugue a 3500 r.p.m. durante 1 minuto y decante. Lvese tres veces. Despus del ltimo lavado, decante lo ms posible. Agregue dos gotas de suero Anti-humano y mezcle bien. Centrifugue por 1 minuto a 1500r.p.m. durante 15 segundos. Resuspenda los eritrocitos con una agitacin moderada y examine el resultado