Guia de Practica de Biologia Del Desarrollo

1 FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS / UNA-PUNO

UUNNIIVVEERR

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

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Blgo. DANTE MAMANI SAIRITUPACMagster en Biotecnologa

Magster DANTE MAMANI SAIRITUPAC / M

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FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

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Blgo. DANTE MAMANI SAIRITUPAC n Biotecnologa

M.Sc. DANTE PANCLAS

MAGSTER EN BIOTECNOLOGA

Propio de:

Magster DANTE MAMANI SAIRITUPAC / M.Sc. DANTE CHOQUEHUANCA PANCLAS

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DANTE CHOQUEHUANCA PANCLAS

STER EN BIOTECNOLOGA

2 FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS / UNA-PUNO Magster DANTE MAMANI SAIRITUPAC / M.Sc. DANTE CHOQUEHUANCA PANCLAS

PRESENTACIN

La presente gua de prcticas para el desarrollo de la parte de aplicacin de los conocimientos tericos del Curso de biologa del Desarrollo tiene por objetivos lo

siguiente:

- Introducir al estudiante al manejo de equipos bsicos en el laboratorio de Biologa del Desarrollo.

- Dar al estudiante una visin de tcnicas elementales de laboratorio.

- Convencer al estudiante de la importancia de reconocer e identificar los principales tejidos, teniendo en cuenta su ubicacin de estos en los diferentes rganos.

Las primeras prcticas dan los conceptos bsicos de la tcnica histolgica que servirn para que el estudiante enfoque el resto de las prcticas teniendo en cuenta los

siguientes aspectos fundamentales:

1. Para el estudiante en el desarrollo del presente curso, el microscopio compuesto es el instrumento fundamental, que sin este equipo, no es posible la

observacin de las clulas, ya que estas constituyen los componentes estructurales de los tejidos y rganos en seres evolutivamente desarrollados, y es as que este

instrumento nos permite la observacin directa de los tejido y rganos a nivel microscpico y por ello es importante desarrollar en el laboratorio las prcticas de esta

materia.

2. El propsito fundamental de las prcticas de Embriologa e Histologa es brindar al futuro Bilogo una explicacin concisa de los fenmenos esenciales del

desarrollo embrionario y la formacin de los tejidos, exponiendo claramente los caracteres antomo-macroscpicos sin omitir los ltimos adelantos ni las nociones

cambiantes en las ciencias bsicas. Adems considerando que la embriologa a adquirido gran valor prctico a causa de los progresos de la ciruga y la teratologa, es que

se hizo posible esta gua de prcticas con el objeto de que el estudiante interprete, analice y comprenda la derivacin de la complejidad estructural, funcional y qumica

a partir de las clulas (espermatozoide y vulo), para dar lugar al huevo o cigoto el cual prosigue con su desarrollo primario denominado desarrollo embrionario hasta

antes del nacimiento del nuevo ser.

3. Las prcticas subsiguientes estn orientadas al reconocimiento de lminas histolgicas y familiarizacin con la estructura histolgica de los tejidos, para luego

ubicarlos a estos en el estudio de los diferentes rganos a travs de la organografa.

LOS AUTORES


I N S T R U C C I O N E S G E N E R A L E S

El estudiante que realiza las prcticas del curso de Biologa del Desarrollo debe:

1. Habituarse a trabajos sistemticos implicando: seguridad, orden, cuidado, rapidez, limpieza, pulcritud y precisin.

2. Desarrollar la capacidad de resolver problemas de laboratorio.

3. Familiarizarse con tcnicas de trabajos cientficos.

4. Juzgar el resultado de sus investigaciones en forma lgica, como medio de obtener seguridad en las conclusiones.

5. Formarse conscientemente para percibir el progreso y los descubrimientos de las Ciencias Biolgicas como medio de fortalecer la paz y el

desarrollo de la humanidad.

C O N D U C T A E N E L L A B O R A T O R I O

1. El comportamiento del estudiante en el laboratorio es menos formal que en el saln de clases, sin embargo no se permite jugar, silbar,

cantar, conversar temas ajenos al objetivo de la prctica, etc.

2. No molestar a sus compaeros para resolver alguna inquietud, ms bien solicitar al profesor.

3. La limpieza y el orden son factores fundamentales para acreditar una buena prctica.

4. Antes de abandonar el laboratorio el estudiante debe dejar:

- Los materiales y equipos bien recogidos y en orden.

- Devolver los equipos y materiales.

- Limpiar los desechos.

- Dejar la mesa de trabajo limpia tal como la encontr.

5. Despus de esto comunicar al profesor para la inspeccin respectiva.


BIOLOGA DEL DESARROLLO TCNICAS HISTOLGICAS

PRCTICA N 1: FIJACIN

PROCEDIMIENTO DE FIJACIN DE MUESTRAS:

1. Para la obtencin de muestras, se utiliza un animal clnicamente sano, que subsecuentemente se procede a sacrificarlo.

2. Para seleccionar el rgano o tejido, se debe tomar en cuenta la forma, color, volumen textura; en caso de observarse anormalidades o lesiones, la muestra se desecha.

3. Una vez seleccionada la muestra, se toma trozos pequeos de 0,5 a 2,0 cm. Preferible de 1,0 x 1,0 cm. Dependiendo del tipo de fijador.

4. Para realizar los cortes, se debe tener en cuenta los planos: transversal, longitudinal y oblicuo, la zona a observar y el tipo de fijador para la coleccin de determinadas estructuras; los cortes deben efectuarse con un bistur y/o hoja de afeitar nueva, con movimientos firmes, evitando desgarros del tejido.

5. La muestra obtenida se coloca en el medio de un trozo de gasa simple, se recogen las puntas y se atan con un hilo, quedando embolsada.

6. Se procede a etiquetar la muestra, con un pequeo papel con su clave, en el extremo del hilo.

7. En el depsito que contiene el fijador, se colocan las muestras suspendidas por el hilo, de modo que el fijador penetre por todos los lados, en dicho frasco se colocan de 1 a 10 muestras, de manera que la proporcin del fijador sea de 1 a 20 aproximadamente.

8. El tiempo de fijacin depende del tamao de la muestra, siendo minutos en muestras pequeas y horas en muestras grandes.

9. El fijador tiene la finalidad de preservar la estructura y composicin qumica de los tejidos.

FIJADORES USADOS EN HISTOLOGIA

EL FORMOL

Es una solucin de gas formaldehido saturado, en agua, al 40% de gas en peso, se le considera como puro al 100%. Si el formol se guarda en lugar fri, se forma paraformaldehido, el cual le da una turbidez lechosa y esta se puede precipitar. El formol contiene trazas de cido frmico, que se acenta cuando se preparan soluciones por oxidacin, y perjudican la coloracin. Esto se evita con la adicin de sodio y calcio que eleva el pH, proporcionando una neutralizacin aproximada a un pH, de 6,3 a 6,5.

PREPARACION DE FIJADORES:

FORMOL AL 10%

1. Formol puro 10 ml. 2. Agua destilada 90 ml.

FORMOL NEUTRO AMORTIGUADO AL 10% 1. Formol puro 100 ml. 2. Agua destilada 900 ml. 3. Na2HPO4 (anhidro) 6.5 g. 4. NaH2PO4 (anhidro) 3.5 g

LIQUIDO BOUIN 1. Acido pcrico al 1.2% en H2O/vol. (saturado) 75 ml. 2. Formol puro 25 ml. 3. Acido actico glacial 5 ml.

SOLUCION SALINA FORMOLADA AL 10%

1. Formol puro 100 ml. 2. Agua destilada 900 ml. 3. NaCl 8.5 g.

Existen otros fijadores como el lquido de Helly, el lquido de Zenker, y as como aquellos a base de Acido actico, Acido crmico, Alcohol metlico, Alcohol etlico, Sales indiferentes, Dicromato de potasio, Acido tricloroactico, etc., estos fijadores son usados de acuerdo a las tcnicas para fijar tejidos de naturaleza particular de acuerdo a su textura y consistencia como el conectivo mucoso, el mesenquimatoso, la sangre, el conectivo laxo, el conectivo denso, clulas, embriones, entre otros.

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BIOLOGA DEL DESARROLLO - TCNICAS HISTOLGICAS

PRCTICA N 1: HIDRATACION, DESHIDRATACION Y ACLARAMIENTO

1. Luego de la fijacin, el exceso de los fijadores deben ser eliminados de los tejidos mediante el lavado o hidratacin, para evitar interferencias con el proceso siguiente. Si el tejido ha sido fijado con formol, Zenker o Helly debe lavarse con agua corriente durante 24 hs. Antes de realizar la deshidratacin, si el fijador usado es Bouin, se debe lavar y deshidratar seguidamente en alcoholes ascendentes.

2. Despus del lavado de los tejidos, se procede la deshidratacin por su alto contenido de agua, porque para la inclusin se debe trabajar con el tejido completamente deshidratado.

3. Para la deshidratacin se debe usar una sustancia que sea soluble en agua y que tenga afinidad con ella, utilizndose: alcohol etlico, alcohol isoproplico, alcohol metlico, ter de monoetilenglicol y dioxina, siendo el alcohol etlico, el mejor deshidratante.

4. La finalidad del aclaracin es remover y aclarar la opacidad de los tejidos deshidratados, hacindolos transparentes, cristalinos pero nunca lechosos, este proceso debe efectuarse con xilol, tolueno o benceno, siendo el xilol el reactivo ms usado, si los tejidos contienen mucho cartlago son fibrosos o musculares no se debe utilizar los aclarantes porque tienden a endurecerlos.

5. Cuando se usa xilol, tolueno o benceno en el aclaracin, observe se la solucin se pone turbia, lo cual indica que hay presencia de agua y que el tejido no ha sido completamente deshidratado y puede contraerse, siendo necesario retornar el tejido al alcohol absoluto.

PROCEDIMIENTO

HIDRATACIN

Lavado en agua corriente DESHIDRATACIN

1. Alcohol 50% 1h. 2. Alcohol 60% 1h. 3. Alcohol 70% 1h. 4. Alcohol 80% 1h. 5. Alcohol 85% 1h. 6. Alcohol 90% 1h. 7. Alcohol 95% 1h. 8. Alcohol Absoluto 1h. 9. Alcohol Absoluto 1h. 10. Alcohol Absoluto 1h.

ACLARAMIENTO 1. Xilol 1h.

2. Xilol 1h. 3. Xilol 1h.

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BIOLOGA DEL DESARROLLO - TCNICAS HISTOLGICAS

PRCTICA N 1: INCLUSION EN PARAFINA Y CORTES AL MICROTOMO

La parafina es una sustancia ampliamente utilizada en las tcnicas histolgicas; siendo tambin usadas otras como: el paraplasto, el paraplasto plus o tisueprep entre los ms importantes.

La finalidad de la inclusin es reemplazar los fluidos del tejido, dndole mayor firmeza y consistencia para que sea fcilmente seccionada. El medio (parafina) se introduce al interior de las clulas brindndoles proteccin durante el manipuleo. La parafina puede ser considerada como dura o blanda. La blanda se encuentra en los rangos de 50-52-53-54C, y la dura en los rangos de 56-58-60-65C, si se desea seccionar parafina a 5-7 micras, se usar el de 56-58C.

PROCEDIMIENTO

1. La parafina se coloca en una estufa graduada, a una temperatura igual a la que requiere la parafina para volverse lquida, y debe tratarse que permanezca en ese estado.

2. En la estufa debe colocarse 4 recipientes de vidrio pirex o de acero inoxidable de boca ancha, numerados de 1 al 4:

a. Recipiente 1: se coloca 50% de parafina y 50% de xilol. b. Recipiente 2: Se coloca parafina pura c. Recipiente 3: se coloca parafina pura d. Recipiente 4: se coloca parafina pura 3. En el recipiente 1, el tejido debe estar de a 1 hora. 4. En el recipiente 2, el tejido debe estar de a 1 hora. 5. En el recipiente 3, el tejido debe estar de a 1 hora. 6. La parafina del recipiente 4, se usa para realizar los bloques o tacos del tejido que luego

sern cortados en finas rebanadas. 7. Del recipiente 1 se toma el tejido con una pinza delgada y curva calentada en una llama de

alcohol, para evitar que el tejido se adhiera a la pinza, trasladndolo al 2do. y luego al 3er recipiente en el tiempo determinado.

8. Con la parafina del recipiente 4 se forman los bloques; se espera 15 minutos para que enfre el bloque llevndolo a una vasija de agua fra, y luego se retira fcilmente el molde.

9. El bloque se confecciona llevando el tejido del recipiente 3 a un molde especial de Leuckhar, el cual consiste en dos piezas de bronce o plomo en forma de L que forman un cuadrado, pueden usarse moldes de fierro o papel grueso.

10. Luego que enfri y endureci la parafina del bloque se procede al corte en finas rebanadas de 5 a 10 micras de grosor con el micrtomo.

11. Las rebanadas en forma de tira de cortes, se depositan cuidadosamente en bao mara (50C) a manera de tendido evitando la formacin de pliegues.

12. Con ayuda de una pinza plana se separan individualmente las rebanadas de la tira.

13. En una lmina portaobjetos untada con albmina de Mayer se recoge solo una rebanada.

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BIOLOGA DEL DESARROLLO - GAMETOGNESIS

LAMINA N 1: DIAGNSTICO HISTOLGICO DEL TESTCULO Y ESPERMATOGNESIS

Los cortes longitudinales o transversales del testculo, observados a menor aumento muestran una estructura panormica de los tejidos que conforman ste rgano. En la regin medular podemos observar la presencia de gran cantidad de pequeos conductos, los tbulos seminferos.

La observacin a mayor aumento de estos tbulos muestra las caractersticas estructurales de ncleos y clulas que constituyen el epitelio germinal.

Enfoque su observacin en un tbulo seminfero, y en su interior identifique clulas germinativas en proceso de desarrollo: espermatogonios, espermatocitos primarios, espermatocitos secundarios, espermtides y espermatozoides. Secuencialmente formados desde la membrana del tbulo hacia la parte central. Adems identifique clulas grandes no germinativas: Clulas de Leydig y de Sertoli.

1. Capa albugnea 2. Tejido conectivo intersticial 3. Tbulo seminfero 4. Espermatogonio 5. Espermatocito primario 6. Espermatocito secundario 7. Espermtide 8. Espermatozoide 9. Clula de Sertoli 10. Clula de Leydig

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LAMINA N 2: DIAGNSTICO HISTOLGICO DE OVARIO Y OVOGNESIS

Mediante una observacin a menor aumento observar panormicamente los tejidos que constituyen el ovario, diferenciando una zona cortical, la albugnea; y una parte medular donde apreciar la presencia de folculos primordiales, primarios, secundarios, maduros o de De Graf, y dentro de ellos encontrar respectivamente la presencia de ovogonios, ovocitos primarios, ovocitos primarios en maduracin y ovocitos maduros.

Las caractersticas de los ovocitos son muy diferenciados ya que los primeros son pequeos y paulatinamente de gran tamao. Las estructuras internas del citoplasma y el ncleo con presencia de nuclolos son muy notorios en cada fase.

Se observan tambin las tecas, el antro folicular, las membranas del ovocito maduro como la corona radiada, la zona pelcida y la membrana interna

Folculo primordial

Folculo primario

Folculo primario tardo

Folculo secundario

Folculo maduro (De Graf)

1. Epitelio germinativo 2. Folculo primordial 3. Ovogonio 4. Folculo primario 5. Ovocito primario 6. Folculo secundario 7. Folculo maduro o de De Graf 8. Ovocito maduro 9. Ncleo del ovocito 10. Nuclolos 11. Citoplasma vacuolado 12. Folculo atrsico

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OVARIO


BIOLOGA DEL DESARROLLO - HISTOLOGA

LAMINA N 3: EPITELIO SIMPLE PLANO RGANO: CUERNO UTERINO

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observa la lmina y localice el tejido conectivo, ubique una arteria mediana, arteriola o capilar en corte transversal.

Con el objetivo de 10X, observar que cualquiera de estos vasos sanguneos poseen en su superficie interna una capa delgada de clulas planas con ncleos de forma ovoide, alargados o redondeados, en algunas zonas sobresalen ligeramente a la luz del vaso.

Con el objetivo de 40X, observar con mayor nitidez, la capa de clulas epiteliales, sus ncleos de color azul prpura oscuro, el citoplasma de color rosado, siendo poco difcil diferenciar el lmite celular. Esta capa de clulas constituye el epitelio simple plano.

En la luz del vaso sanguneo se pueden observar eritrocitos de color anaranjado.

LOCALIZACIN DEL EPITELIO SIMPLE PLANO: Se encuentra en el revestimiento de vasos sanguneos, linfticos y corazn (endotelios); revestimiento de cavidades internas que no se abren al exterior tales como: el peritoneo, la pleura y el pericardio (mesotelios).

1. Epitelio simple plano 2. Citoplasma de clula plana 3. Ncleo de clula plana 4. Tejido conectivo subyacente 5. Luz del vaso sanguneo 6. Eritrocitos

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ncleo celular

borde celular

1

5

5

2

4

3



LAMINA N 4: EPITELIO SIMPLE CBICO RGANO: RIN

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe todo el corte y notar que presenta 2 zonas: cortical y medular, enfoque la zona medular, o central ms clara, debido a que en ella se encuentran numerosos conductos de luz ms amplia, en cortes longitudinal, transversal y oblicuo, busque uno de estos tubos, en corte longitudinal en caso de no encontrarlo, puede examinar un tubo en corte transversal y/u oblicuo.

Con el objetivo de 10 40X, examine el epitelio de revestimiento de estos conductos, notar que estn formados por una capa simple de clulas cbicas. En este epitelio simple cbico, aprecie la forma de los ncleos, su ubicacin central, su citoplasma plido, y trate de distinguir los lmites intercelulares.

Este epitelio simple cbico descansa sobre una delgada membrana basal de tejido conectivo.

LOCALIZACIN DEL EPITELIO SIMPLE CUBICO: Se encuentra en: la tiroides, epitelio posterior de la cornea, segmento grueso del asa de Henle del nefrn, conductos biliares, bronquiolos respiratorios, epitelio pigmentado de la retina, tbulos contorneados distales y proximales del rin.

1. Epitelio simple cbico 2. Citoplasma de clula cbica 3. Ncleo de clula cbica 4. Luz del tbulo colector 5. Capilar 6. Membrana basal

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Papila renal

Glomrulo

Corteza

Mdula

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CORTE LONGITUDINAL CORTE TRANSVERSAL

3

4



LAMINA N 5: EPITELIO SIMPLE CILNDRICO RGANO: INTESTINO DELGADO

Con el objetivo DE 3.2, 4 5X, se aprecia la preparacin en forma de un tubo cortado transversalmente, observe el epitelio de revestimiento que delimita la luz, notar que la luz est ocupada en su zona perifrica por las vellosidades intestinales, que se presentan en cortes longitudinales, oblicuos o transversales. Elija una vellosidad bien cortada y examine su revestimiento externo.

Con el objetivo de 10 40X, observar las clulas epiteliales unas al lado de otras a manera de una empalizada, aprecindose claramente la forma rectangular de las clulas, sus ncleos ovoideos de color prpura dispuestos basalmente, y el citoplasma rosado.

En el borde apical de este epitelio se aprecia un fino ribete refringente que se conoce con el nombre de chapa estriada.

Entre las clulas cilndricas podr tambin usted apreciar unas clulas globosas grandes transparentes, se trata de las clulas o glndulas caliciformes que son unicelulares.

Este epitelio simple cilndrico descansa sobre una delgada membrana basal de tejido conectivo.

1. Epitelio simple cilndrico 2. Citoplasma de clula cilndrica 3. Ncleo de clula cilndrica 4. Chapa estriada 5. Clulas caliciformes 6. Membrana basal 7. Vellosidad intestinal (corte longitudinal) 8. Vellosidad intestinal (corte transversal) 9. Capilares

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Vellosidad intestinal

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VELLOSIDAD INTESTINAL (corte longitudinal)

4

7

8

9



LAMINA N 6: EPITELIO PSEUDO ESTRATIFICADO CILNDRICO CILIADO RGANO: TRQUEA

Con el OBJETIVO DE 3.2, 4 5X, observe que se trata de un rgano hueco y tubular en corte transversal, aprecie su luz y el epitelio que delimita esta luz.

Con el OBJETIVO DE 10 40X, observe la capa delgada que forma el epitelio de clulas cilndricas de color prpura o rosa intenso, todas las clulas estn en contacto con la membrana basal, se trata de una sola capa de clulas, aunque de diferentes tamaos, los ncleos se encuentran a diferente altura por el tamao de las clulas.

Los ncleos de clulas prximas a la membrana basal, son de clulas de una forma difusa como piramidales y/o polidricas, que no alcanzan la superficie. Los ncleos de clulas prximas a la superficie, son de clulas cilndricas y presentan cilios en su borde apical.

En este epitelio, entre las clulas cilndricas, se encuentran intercaladas clulas o glndulas caliciformes.

LOCALIZACION DEL EPITELIO PSEUDOESTRATIFICADO CILINDRICO CILIADO: Se encuentra en: las fosas nasales (mucosa respiratoria), la faringe (rinofaringe), trquea, grandes bronquios.

1. Epitelio pseudoestratificado cilndrico ciliado 2. Clulas cilndricas pseudoestratificadas 3. Clulas polidricas 4. Citoplasma de las clulas cilndricas 5. Ncleo de las clulas cilndricas 6. Ncleo de las clulas polidricas 7. Cilios de las clulas cilndricas 8. Clulas caliciformes 9. Membrana basal

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6 2

Mucosa

3

7 4

1

1

9

Msculo traqueal

Trquea

Submucosa

8 5

Cartlago



LAMINA N 7: EPITELIO ESTRATIFICADO PLANO NO QUERATINIZADO RGANO: ESFAGO

Con el OBJETIVO DE 3.2, 4 5X, observe panormicamente el epitelio de revestimiento de color prpura que se diferencia del tejido conectivo por la coloracin verde que adopta este ltimo.

Con el OBJETIVO DE 10 40X, observe que las clulas de este epitelio estn ordenadas en capas segn su forma:

La primera capa o capa basal, esta conformada por clulas cilndricas y/o cbicas cuyo citoplasma es rico en ARN, presentando basofilia.

La segunda capa o capa media, esta formada por clulas polidricas, que van aplanndose a medida que se acercan a la superficie.

La tercera capa o capa superficial, presenta clulas planas.

LOCALIZACION DEL EPITELIO ESTRATIFICADO PLANO NO QUERATINIZADO: se encuentra en la uretra femenina, en la vagina, en la fosa navicular de la uretra masculina, en la laringe (cuerdas bucales inferiores), en la porcin supradiafragmtica del tubo digestivo, en la lengua.

1. Epitelio estratificado plano no queratinizado 2. Capa basal de clulas cilndricas y/o cbicas 3. Capa media de clulas polidricas 4. Capa superficial de clulas planas 5. Clulas planas desprendidas del epitelio 6. Membrana basal 7. Papilas del tejido conectivo subyacente en

corte transversal y longitudinal

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adventicia

3

4 2

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muscular circular

epitelio estratificado plano no queratinizado

submucosa muscularis mucusae

muscular longitudinal

1

4

3

3

2

5



LAMINA N8: EPITELIO ESTRATIFICADO PLANO QUERATINIZADO RGANO: PIEL

Con el objetivo 3.2, 4 5X, este epitelio tiene caractersticas similares que el anterior.

Con el objetivo de 10 40X, observe que las clulas de este epitelio estn ordenadas en capas segn su forma:

La primera capa o capa basal, esta conformada por clulas cilndricas y/o cbicas cuyo citoplasma es rico en ARN, presentando basofilia.

La segunda capa o capa media, esta formada por clulas polidricas, que van aplanndose a medida que se acercan a la superficie.

La tercera capa o capa superficial, presenta clulas planas.

La cuarta capa o capa cornea de la epidermis de la piel, conformada por clulas planas queratinizadas, sus ncleos se han desintegrado y desaparecido, son clulas muertas que se desprenden continuamente de la capa superficial.

Este epitelio nos permite observar tambin los folculos pilosos rodeados por prolongaciones de la epidermis con presencia de glndulas sebceas en la dermis.

1. Epitelio estratificado plano queratinizado 2. Estrato basal de clulas cilndricas y/o cbicas 3. Estrato espinoso de clulas polidricas 4. Estrato granuloso 5. Estrato lcido de clulas planas 6. Estrato crneo, queratina de clulas muertas. 7. Membrana basal 8. Folculo piloso con presencia de glndulas

sebceas en la dermis

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6

folculos pilosos

3

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7

glndulas sebceas

dermis

epidermis dermis papilar

dermis reticular

1

2

5

epidermis

7

8

7



LAMINA N9: EPITELIO ESTRATIFICADO CUBICO RGANO: GLNDULAS SALIVALES

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe que la glndula salival presenta numerosos cuerpecitos redondeados u ovoides de color rosado plido o grisceo que corresponden a los alvolos glandulares.

Con el objetivo de 10X, se observa que los alvolos glandulares estn rodeados por tejido conectivo de color rosado intenso y con muchos ncleos, entre los alvolos se encuentran varios conductos pequeos con clulas cbicas simples que presentan su citoplasma de color anaranjado.

Con el objetivo de 40X, observe un conducto grande, notar que la membrana de revestimiento esta formada por una doble capa de clulas cbicas, el citoplasma de estas clulas es de color rosado y los ncleos son redondeados, sta doble capa de clulas corresponde al epitelio estratificado cbico.

1. Epitelio estratificado cbico 2. Citoplasma rosado de las clulas cbicas 3. Ncleo esfrico de las clulas cbicas 4. Membrana basal del epitelio del conducto

glandular 5. Luz del conducto 6. Alvolo glandular

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4

Glndula submaxilar

1

2

5

1

Glndula sublingual

conducto grande

acini seroso

acini mucoso

3

6



LAMINA N10: EPITELIO ESTRATIFICADO CILINDRICO RGANO: URETRA PENIANA

Con el OBJETIVO DE 3.2, 4 5X, se observa panormicamente el corte transversal del pene en cuya parte central se ubica un conducto revestido por un epitelio fuertemente basfilo, se trata de la uretra peniana.

Con el OBJETIVO DE 10 40X, observe que las clulas de esta membrana son cilndricas formando hasta tres estratos y las ms superficiales pueden o no presentar cilios, los ncleos son grandes, abarcando los o 4/5 de la clula.

LOCALIZACION DEL EPITELIO ESTRATIFICADO CILINDRICO: Este tipo de epitelio es muy limitado en el hombre.

Se presenta en la conjuntiva palpebral, en la uretra cavernosa del pene, en parte de la faringe, en la laringe y epiglotis, en el epitelio olfatorio y transitoriamente en el esfago fetal.

1. Epitelio estratificado cilndrico 2. Clulas cilndricas del poliestrato 3. Citoplasma de las clulas cilndricas 4. Ncleo ovoideo de las clulas cilndricas 5. Membrana basal del epitelio 6. Luz de la uretra 7. Tejido conectivo subyacente

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6

conductos prostticos

tejido conectivo

glndula prosttica

secrecin intraluminar

1

epidermis 7

1

7

uretra

2

3

4

5



LAMINA N11: EPITELIO ESTRATIFICADO DE TRANSICIN RGANO: URTER

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe el corte transversal y panormico del urter, y en la parte central ubique la luz del conducto, que es irregular por las proyecciones de la mucosa, observe una franja de color prpura que bordea la luz, esto corresponde al epitelio estratificado de transicin.

Con el objetivo de 10 40X, se observa que este epitelio esta formado por 4,5 hasta 6 capas de clulas. Las clulas superficiales tienen forma redondeada y globosa, y su citoplasma se tie de color ms oscuro que las otras clulas.

Las clulas de los estratos inferiores tienen diversas formas (polidricas)

LOCALIZACION DEL EPITELIO ESTRATIFICADO DE TRANSICION: Se localiza en la vejiga urinaria, en el cliz y pelvis renal y los urteres.

1. Epitelio estratificado de transicin 2. Clulas superficiales globosas 3. Clulas polimorfas de estratos internos 4. Citoplasma de las clulas globosas 5. Ncleo esfrico de las clulas globosas y

polimorfas 6. Membrana basal del epitelio 7. Luz del urter 8. Tejido conectivo subyacente

COLORACIN:

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8

6

mucosa

sub mucosa

tnica muscular propia

1 2

7

7

1

3

6 5

7

adventicia

4



LAMINA N12: GLNDULA TUBULAR SIMPLE RGANO: CUERNO UTERINO

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe la presencia de un tubo de paredes gruesas y luz estrecha y alargada, desde la luz hacia fuera notar las 3 capas de la pared uterina: el endometrio, el miometrio y la serosa.

El endometrio, es una capa bastante gruesa y comprende 2 partes:

1. El epitelio simple cilndrico

2. El estroma uterino, que es el tejido conectivo con glndulas

El miometrio, de color rosado, presenta musculatura lisa.

La serosa, de color rosado plido, formado por tejido conectivo con vasos sanguneos.

Con el objetivo de 10X, observe el endometrio y el estroma uterino y aprecie las glndulas uterinas en corte transversal, oblicuo y longitudinal rodeadas de tejido conjuntivo, ubique las glndulas que desembocan en la luz uterina.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie estas glndulas en forma tubular, constituido por una capa de clulas cilndricas de citoplasma rosado y ncleos ovoideos y de color prpura y cromatina condensada.

1. Epitelio glandular tubular simple 2. Clulas cilndricas del epitelio glandular 3. Ncleo de las clulas cilndricas del epitelio

glandular 4. Conducto de secrecin de la glndula 5. Adenmero en cortes transversales 6. Luz del conducto de secrecin. 7. Luz del adenmero

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7

lmina circular lumen

glndula endometrial

1

estroma

1

4

3

lmina longitudinal

6 epitelio glandular

glndula endometrial

estroma endometrial

5

2



LAMINA N13: GLNDULA ALVEOLAR SIMPLE RAMIFICADA RGANO: PIEL (GLNDULA SEBCEA)

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe que la piel presenta 2 partes: La epidermis (epitelio estratificado plano queratinizado), de color prpura. La dermis, por debajo del epitelio, de color verde que aloja a los folculos pilosos con glndulas sebceas, nervios y vasos sanguneos.

Con el objetivo de 10X, observe los folculos pilosos en corte transversal, oblicuo y longitudinal, muchos de ellos con lumen de color amarillo y revestidos con clulas epiteliales de color prpura. Junto a los folculos se encuentran las glndulas sebceas, de forma ovoide, redondeada, irregular o a manera de un racimo de uvas, constituida por clulas claramente vistosas, grandes de citoplasma lila y lmites celulares notorios, su ncleo es vesiculoso. Esta glndula es de tipo alveolar simple ramificada.

Con el objetivo de 40X, observe las clulas de forma polidrica, con ncleo bien vesiculoso y bien teido, trate de distinguir la desembocadura de esta glndula que va hacia el folculo piloso y notar que la secrecin esta constituida por las mismas clulas, la parte profunda esta formada por clulas con permanente proceso de divisin celular las mismas que pasan a la parte media y luego a la desembocadura.

1. Folculo piloso 2. Glndula sebcea 3. Clula de la glndula sebcea 4. Citoplasma celular 5. Ncleo vesiculoso 6. Regin profunda de la glndula 7. Desembocadura o zona de secrecin y/o

destruccin de clulas de la glndula transformndose en la sustancia secretada.

COLORACIN:

FIJACION:

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6

7

folculo piloso

epidermis dermis papilar

2

glndulas sebceas

1

3

4

5

epidermis



LAMINA N14: GLNDULA ALVEOLAR COMPUESTA O ACINOSA COMPUESTA RGANO: PNCREAS (REGIN GLANDULAR EXOCRINA)

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe la subdivisin del pncreas en lbulos y lobulillos y los tabiques de separacin (interlobulillares). En el lobulillo se observan los alvolos glandulares o acinis glandulares, en forma redondeada, que dan una coloracin prpura al rgano.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie que cada acini pancretico est constituido por clulas piramidales, de citoplasma rosado plido en la regin apical y ms oscura en la regin basal, los ncleos son de forma redondeada y de color morado y ubicados en la regin basal con uno o dos nuclolos. Adems se puede apreciar la no presencia de luz sino por el contrario se observa una zona coloreada homogneamente de rosado lo que caracteriza al acini pancretico.

1. Acini glandular 2. Clulas del epitelio glandular 3. Citoplasma de las clulas glandulares 4. Ncleo en posicin basal de la clula 5. Tabique interlobulillar 6. Conducto de secrecin 7. Islotes de Langerhans que corresponden a la

regin endocrina de la glndula pancretica.

COLORACIN:

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3

7

acini (pncreas exocrino)

1

7

islote de Langerhans (pncreas endocrino)

islote de Langerhans (pncreas endocrino)

acini (pncreas exocrino)

2 3

5

6

4


LAMINA N15: TEJIDO CONECTIVO MUCOSO

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe el cordn umbilical en cuyo interior hay 2 venas y 2 arterias. En la periferia del cordn se ve un epitelio simple cbico (epitelio del amnios), y entre este epitelio y los vasos sanguneos se observa la Gelatina de Wharton.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie lo siguiente:

1. Las clulas (fibroblastos) son de forma estrellada con prolongaciones citoplasmticas delgadas que se entrelazan formando retculo de mallas anchas.

2. Los espacios intercelulares ocupados por la gelatina de Wharton que se tie muy dbilmente con H.E. A veces puede observarse hendiduras en la gelatina, debido a la retraccin que se produce por la fijacin.

3. El nmero y grosor de las fibras colgenas del cordn umbilical vara segn el tiempo de gestacin.

LOCALIZACIN: cordn umbilical, humor vtreo del ojo, diente adulto (pulpa)

COLORACIN:

FIJACION:

vena

4

vena

estroma endometrial



1. 2. 3. 4. 5.

5

epitelio

tejido conectivo mucoso

arteria

1

4

3

estroma endometrial

4

1

vena

arteria

2


RGANO: CORDN UMBILICAL

Fibras colgenas Fibroblasto Capilar sanguneo Sustancia intercelular (Gelatina de Wharton) Fibrocito

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LAMINA N16: TEJIDO CONECTIVO LAXO RGANO: PIEL (DRMIS)

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe la zona subyacente a la epidermis, esta zona corresponde a la dermis papilar de la piel, esta constituida por tejido conectivo laxo.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie una papila drmica:

1. Las fibras colgenas finas, no abundantes, y en conjunto forman una trama laxa, la sustancia fundamental amorfa es bien notoria.

2. Los fibroblastos o fibrocitos son abundantes, su citoplasma es poco visible, observndose claramente los ncleos.

3. Se observan muchos vasos capilares, revestidos por endotelio, en su luz se observan hemates, tambin se observan folculos pilosos que se proyectan desde la epidermis.

LOCALIZACIN: Dermis papilar, submucosa de diversos rganos (esfago, estomago, etc.).

1. Dermis papilar 2. Fibras colgenas laxas 3. Fibrocito 4. Fibroblasto 5. Vaso capilar 6. Epidermis 7. Folculo piloso 8. Glndula sebcea

COLORACIN:

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epidermis

2

5

TC. laxo

5

1

2

TC. denso

TC. denso

TC. laxo

3

4

4

3

5



LAMINA N17: TEJIDO CONECTIVO DENSO RGANO: PIEL (DRMIS)

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe la zona situada debajo de la dermis papilar. sta zona corresponde a la dermis reticular o profunda de la piel y est conformada por tejido conectivo denso.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie el tejido conectivo denso de la siguiente forma:

1. Las fibras colgenas predominan sobre los dems componentes, y se encuentran dispuestas en gruesos haces compactos que se entrecruzan en diferentes direcciones.

2. Los fibroblastos no son tan numerosos como en el tejido laxo.

3. Existe la presencia de vasos sanguneos y fibras nerviosas.

LOCALIZACIN: Dermis reticular o profunda de la piel, corin de la mucosa de la regin dorsal de la lengua, pericondrio, periostio, cpsula de algunos rganos (bazo, testculo).

1. Fibras colgenas densas 2. Fibroblasto 3. Capilares sanguneos 4. Fibrocito 5. Epidermis 6. Dermis papilar 7. Fibras musculares esquelticas

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1

epidermis

TC. denso

TC. laxo

1

1 3

6

3 2

1

2

6

4



LAMINA N18: TEJIDO CONECTIVO TENDINOSO RGANO: TENDN

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, observe las fibras colgenas agrupadas en gruesos haces en forma de cintas y paralelas entre si, en una sola direccin, teidas de color rosado.

Con el objetivo de 10 40X, aprecie el tejido conectivo tendinoso de la siguiente forma:

1. Entre los haces de fibras colgenas se observan claramente los ncleos de una variedad de fibroblastos denominados clulas tendinosas, que se disponen en series lineales.

2. Perciba la forma ondulante de la disposicin de los haces de fibras tendinosas.

LOCALIZACIN: Todos los tendones que sirven de unin entre huesos y msculos.

1. Fibras colgenas paralelas 2. Endotenonio 3. Ncleo de clula tendinosa 4. Haz de fibras colgenas 5. Capilares sanguneos 6. Peritenonio 7. Fibrocito 8. Fibroblasto

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4

peritenonio

1

1

4

6

5

2

7

8



LAMINA N19: TEJIDO CONECTIVO ELSTICO RGANO: ARTERIA AORTA

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, observe panormicamente una parte de las capas de la arteria Aorta, con fibras predominantes de color caf intercalado con fibras rosadas y amarillas.

Con el objetivo de 10 40X, observe estas capas donde encontrar:

1. Gran cantidad de fibras elsticas de color caf en forma de membranas fenestradas (perforadas) de curso espiral y ondulado.

2. El colorante Van Giesson permite que las fibras elsticas se tian de color caf, las fibras musculares de color amarillo y las fibras colgenas de color rosado, estas ltimas en menor proporcin.

LOCALIZACIN: Ligamentos amarillo de las vrtebras, superior del pene, nucal de los cuadrpedos, en la capa media de la aorta y en las membranas elsticas limitantes de las arteriolas.

1. Fibras elsticas 2. Fibras musculares lisas 3. Fibras colgenas 4. Endotelio de revestimiento de la aorta 5. Capa media de la aorta 6. Luz de la arteria aorta

COLORACIN:

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luz de la aorta

capa media

1

adventicia

1

4

3

endotelio

6

2

5



LAMINA N20: TEJIDO CONECTIVO ADIPOSO RGANO: PERICARDIO

Esta preparacin corresponde a un corte incluido en parafina. Como en sta tcnica se utiliza xilol, que es un disolvente de grasas, la grasa intercelular se disuelve y desaparece dejando espacios vacios, con esta referencia podr observar.

Con el objetivo de 3,2; 4 5X; observe panormicamente el tejido subcutneo y ubique el lente en la regin donde se encuentran las clulas adiposas que forma una estructura en forma de panal.

Con el objetivo de 10X 40X podr observar las clulas adiposas de diversos tamaos, forma polidrica, ovaladas o redondas, unas juntas a otras, con grandes cavidades vacas, y el citoplasma reducido a una fina capa perifrica en la que en algunos casos se observa el corte del ncleo que ha sido desplazado a la periferia por la gran gota de grasa. El tejido conectivo adiposo esta vascularizado.

LOCALIZACIN: Debajo de la piel, excepto en parpados y pene, alrededor del rin y las suprarrenales, pericardio, epipln, mesenterio, mamas, en nalgas, planta del pie, mejillas, cavidad orbitaria.

1. Clulas adiposas 2. Citoplasma reducido 3. Ncleo desplazado a la periferia 4. Espacio graso 5. Vaso sanguneo

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1

pericardio

1

5

4

3

4

5

2


LAMINA N21: CARTILAGO HIALINO

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, observe panormicamente el corte transversal de la trquea donde ubicar el cartlago, el pericondrio, tejidos conectivo y epitelial.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el cartlago y observe lo siguiente:

1. Pequeas cavidades llamadas condroplastos, donde se encuentran alojadas clulas cartilaginosas o condrocitos.

2. Los condrocitos se encuentran formando grupos isognicos de 2; 4 u 8 clulas.

3. La sustancia intercelular es homognea, no se observan fibras colgenas por ser muy finas y no perceptibles al microscopio ptico.

4. Se observa tambin la cpsula, que es una capa de sustancia intercelular muy basfila que rodea a los condrocitos.

5. El rea o zona territorial, es una zona de sustancia intercelular de menor basofilia que la cpsula, y esta rodeando a un condrocito, o a un grupo de condrocitos con sus cpsulas.

6. El pericondrio, (Tejido conectivo denso) esta rodeando al cartlago.

LOCALIZACIN: En el embrin constituye el esqueleto. En el adulto se halla en los conductos respiratorios (fosas nasales, laringe, trquea y bronquios), superficie articular de los huesos.

COLORACIN:

FIJACIN:

1

1



1. 2. 3.

4. 5. 6. 7.

pericondrio

3

7

2

4 5

6


RGANO: TRQUEA

Pericondrio (Tejido conectivo denso) Condroplasto Condrocito (ncleo), el citoplasma esta

retrado Cpsula Zona territorial Grupo isognico coronario Grupo isognico axial

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LAMINA N22: CARTLAGO ELSTICO RGANO: PABELLN DE LA OREJA

Con el objetivo 3,2; 4 5X, observe panormicamente el corte transversal del pabelln de la oreja donde en la parte central ubicara el cartlago elstico rodeado por ambos lados por el pericondrio, adems notar claramente (a ambos lados), tejido conectivo subyacente con presencia de tejido adiposo, al que recubre la piel.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el cartlago y observe lo siguiente:

1. Los condroplastos donde se hallan los condorcitos son ms abundantes y aparecen ms cerca que el cartlago hialino.

2. La sustancia intercelular con abundantes fibras elsticas que forman una red dispuestas en forma transversal a la longitud del cartlago, tambin se puede apreciar fibras colgenas en menor cantidad.

3. Si usted observa la disposicin de los condorcitos en su mayora estn formando grupos isognicos axiales.

4. Muy cerca al pericondrio se ubican a los condroblastos.

LOCALIZACIN: Pabelln de la oreja, conducto auditivo externo, epiglotis, trompa de Eustaquio.

1. Pericondrio 2. Condroblasto 3. Condroplasto 4. Condrocito retrado en su condroplasto. 5. Fibras elsticas abundantes 6. Ncleo del condrocito. 7. Grupo isognico axial

COLORACIN:

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7

pericondrio 1

5

4 6

5

2

4


LAMINA N23: CARTLAGO FIBROSO

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, observe panormicamente el corte longitudinal del cartlago intervertebral donde ubicara el cartlago fibroso, como apreciar este cartlago carece de pericondrio.

Con el OBJETIVO DE 10 40X, enfoque el cartlago y observe lo siguiente:

1. Los condrocitos estn dentro de los condroplastos rodeados por la cpsula.

2. En la mayora de los condrocitos su citoplasma est retrado dejando un espacio (artificio) entre la clula y la pared de la cavidad o condroplasto.

3. La sustancia intercelular se encuentra con presencia de abundantes haces gruesos de fibras colgenas.

LOCALIZACIN: Meniscos interarticulares de las articulaciones, temporo maxilar y de la rodilla, fibrocitos interpbicos, rocete glenoideo del hombro y de la cadera.

COLORACIN:

FIJACIN:

3



1. 2. 3. 4.

5.

1

4

5

4 4

3

2


RGANO: CARTLAGO INTERVERTEBRAL

Condrocito Cpsula del condrocito Condroplasto Haces de fibras colgenas en diferente

direccin Grupo isognico

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LAMINA N24: HUESO COMPACTO RGANO: DIFISIS DEL FMUR

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, observe panormicamente las unidades estructurales del hueso compacto llamado Osten, Osteoma o Sistema de Havers. Adems percibir el periostio, endostio y la cavidad medular.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el hueso compacto y observe lo siguiente:

1. Los conductos de Havers son orificios grandes circulares y oscuros.

2. Los osteoplastos o lagunas seas se observan como orificios pequeos de forma lenticular, dispuestos en forma concntrica alrededor de los conductos de Havers. De cada orificio parten varios conductillos de trayecto ondulado que se anastomosan con los conductillos vecino, son los llamados conductos calcforos o canalculos seos.

3. Las laminillas seas constituyen la sustancia intercelular, segn su ubicacin, se diferencian 4 clases de laminillas: harversianas, intersticiales, circunferenciales internas y circunferenciales externas.

4. Cada sistema de Havers est limitado por una lnea de cemento (estrato no fibrilar).

LOCALIZACIN: Huesos largos.

1. Sistema y conducto de Havers. 2. Cemento. 3. Sistema de laminillas intersticiales. 4. Laminilla circunf. Interna. 5. Laminilla circunf. Externa. 6. Periostio. 7. Endosito. 8. Cavidad medular. 9. Conducto de Volkman. 10. Osteoplastos. 11. Laminillas concntricas. Haversianas 12. Prolongaciones calcforas

COLORACIN:

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LAMINA N25: OSIFICACIN ENDOCONDRAL INDIRECTA

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, observe panormicamente el corte longitudinal del fmur de feto y observara todo el complejo de transformacin del cartlago en hueso.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque la osificacin endocondral. observe lo siguiente:

1. Zona Condrgena o del Cartlago embrionario: Presenta las caractersticas del cartlago hialino, donde los condrocitos son pequeos y dispuestos desordenadamente.

2. Zona de Cartlago Seriado: Los condrocitos se agrupan formando columnas paralelas entre s, con la caracterstica que las clulas van siendo de mayor tamao a medida que se acercan a la siguiente capa.

3. Zona de cartlago Hipertrfico: Aqu las lagunas o condroplastos y sus condrocitos alcanzan su mximo tamao formndose verdaderas vesculas.

4. Zona de Cartlago Calcificado y/o Destruccin de Condrocitos: En esta zona la sustancia amorfa se impregna con haces de calcio, para ello los condrocitos hipertrficos segregan fosfatasa alcalina, presentes en el lquido intersticial. El aumento de iones de fosfato produce la precipitacin de calcio disuelto con la consiguiente calcificacin de la sustancia fundamental del cartlago.

5. Zona de invasin de vasos sanguneos y tejido conectivo embrionario: Se observa la presencia de vasos sanguneos, que provienen del periostio y desintegran la sustancia amorfa.

6. Zona de Neoformacin o trabecular: Est constituido por restos de la sustancia fundamental del cartlago calcificado. Se observa de color azulcaracterstico, las trabculas adoptan la forma de espinas orientadas longitudinalmente. Estas trabculas sirven de apoyo a los osteoblastos que se disponen a manera de un epitelio en los contornos de la trabccomienza a depositar sustancia orgnica sea (sustancia osteoide), constituyendo las trabculas osteoides. La sustancia osteoide se impregna de sales de calcio (calcificacin), formando as las trabculas seas.

7. En algunas preparaciones se observan las lagunas de Harship y osteoclastos.8. Entre las trabculas directrices se distinguen los vasos osificantes y numerosas

clulas jvenes hematopoyticas constituyentes de la mdula sea primitiva

COLORACIN:

FIJACION:



4 5X, observe panormicamente el corte longitudinal del fmur de feto y observara todo el complejo de transformacin del cartlago en

endocondral. observe lo siguiente:

a o del Cartlago embrionario: Presenta las caractersticas del cartlago hialino, donde los condrocitos son pequeos y dispuestos

Zona de Cartlago Seriado: Los condrocitos se agrupan formando columnas racterstica que las clulas van siendo de mayor tamao

Zona de cartlago Hipertrfico: Aqu las lagunas o condroplastos y sus condrocitos alcanzan su mximo tamao formndose verdaderas vesculas.

citos: En esta zona la sustancia amorfa se impregna con haces de calcio, para ello los condrocitos hipertrficos segregan fosfatasa alcalina, presentes en el lquido intersticial. El

to produce la precipitacin de calcio disuelto con la consiguiente calcificacin de la sustancia fundamental del cartlago.

y tejido conectivo embrionario: Se observa la presencia de vasos sanguneos, que provienen del periostio y desintegran la

constituido por restos de la sustancia cado. Se observa de color azul-violeta oscuro

adoptan la forma de espinas orientadas longitudinalmente. Estas trabculas sirven de apoyo a los osteoblastos que se disponen a manera de un epitelio en los contornos de la trabcula directriz y comienza a depositar sustancia orgnica sea (sustancia osteoide), constituyendo las trabculas osteoides. La sustancia osteoide se impregna de sales de calcio

se observan las lagunas de Harship y osteoclastos. Entre las trabculas directrices se distinguen los vasos osificantes y numerosas clulas jvenes hematopoyticas constituyentes de la mdula sea primitiva.

6

3

4

5

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RGANO: FMUR DE FETO HUMANO

1. Zona condrgena. 2. Zona cartlago seriada. 3. Zona de Hipertrofia. 4. Zona de destruccin de condrocitos. 5. Zona de invasin de vasos sanguneos. 6. Zona de neoformacin. 7. Laguna de Harship. 8. Pericondrio. 9. Periostio.

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BIOLOGA DEL DESARROLLO HISTOLOGA

LAMINA N26: SANGRE RGANO: FROTIS SANGUNEO

Para observar los componentes de la sangre se aplica la tcnica del frotis sanguneo que consiste en extender la sangre en una lmina porta objetos, luego fijarla con alcohol metlico, lavar, colorear y secar, para luego observar a un aumento de 100X de objetivo.

Con el objetivo de 100X aplicando aceite de inmersin, enfoque el frotis sanguneo para observar los glbulos rojos, blancos y plaquetas. Para identificarlos considere las siguientes caractersticas:

1. GLOBULOS ROJOS: Su dimetro promedio es de 7,5 . Son clulas anucleadas, acidfilas, se tien de color rosado plido, la zona central es de tono claro.

2. GLOBULOS BLANCOS: Presentan 2 series: granulocitos y agranulocitos.

GRANULOCITOS: Llamados tambin polimorfonucleares. Se caracterizan por que su citoplasma contiene abundantes granulaciones especficas que de acuerdo a su comportamiento con los colorantes, se diferencian en las siguientes formas:

a) NEUTRFILOS: de 9 a 12 de dimetro. Su citoplasma presenta finsimas granulaciones homogneas de color lila o rosa salmn, granulaciones azurfilas, hay 4 formas de neutrfilos: - Mielocitos: Ncleo de forma oval o redondeado

(inusualmente observable en sangre perifrica). - Metamielocitos o juveniles: El ncleo presenta una pequea

escotadura (inusualmente observarse en sangre perifrica). - Abastonados: El ncleo es en banda o en cayado.

- Segmentados: Presentan ncleo segmentado en 2; 3; 4 5 lbulos unidos por delgados puentes de cromatina, teido de color violeta, con colorantes bsicos; es frecuente observar ncleos con 4 5 lbulos. Con la edad el nmero de lbulos aumenta.

7. Glbulo rojo 8. Neutrfilo abastonado. 9. Neutrfilo de 2 lbulos. 10. Neotrfilo de 3 lbulos. 11. Neutrfilo de 4 lbulos. 12. Neutrfilo de 5 lbulos. 13. Puentes de cromatina.

COLORACIN:

FIJACION:

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GLBULOS ROJOS

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GLBULOS BLANCOS

mielocito metamielocito

abastonado segmentado

7



LAMINA N26: SANGRE RGANO: FROTIS SANGUNEO

b) EOSINFILOS: De 10 a 12 de dimetro. En su citoplasma presentan granulaciones grandes de 0,5 a 1 de dimetro, redondeados de tamao uniforme, teidos de color rojo a naranja (acidfilas). El ncleo con 1 2 lbulos unidos por puentes de cromatina, tomando el aspecto de ncleo en alforja.

c) BASFILOS: De 9 de dimetro. El citoplasma presenta granulaciones de diferente tamao de color azul oscuro (basfilos) que incluso estn enmascarando el ncleo. El ncleo es relativamente grande, redondeado o lobulado.

AGRANULOCITOS: Leucocitos mononucleares. No presentan granulaciones especficas en su citoplasma y comprenden a:

a) LINFOCITOS: Pequeos de 7 y grandes de 10 . Se caracterizan por su ncleo redondeado que ocupan casi la totalidad de la clula. Con cromatina condensada de color violeta oscuro, a veces presenta una ligera escotadura lateral. El citoplasma es escaso se observa como una delgada banda de color celeste (cielo claro) alrededor del ncleo, con escasas granulaciones azurfilas, en algunas clulas no llega a observarse el citoplasma.

b) MONOCITOS: De 12 a 15 de dimetro. Presenta ncleo de forma redondeada o arrionada y con escotadura que le da aspecto pseudolobulado; cromatina un tanto laxa y de menor intensidad que el linfocito. Citoplasma basfilo de color azul grisceo, terroso (cielo nublado), pulverulento con regular cantidad de finas granulaciones azurfilas.

3. PLAQUETAS: de 2 de dimetro. Son restos celulares de forma aplanada, ovalada o redondeada, dispersos o en masas irregulares; se diferencian 2 zonas en una plaqueta: Una central crommera de estructura granular, de color violeta y otra zona perifrica hialmera, como un halo transparente de color azul plido

1. Eosinfilo. 2. Granulaciones acidfilas. 3. Basfilo. 4. Granulaciones basfilas. 5. Linfocito. 6. Monocito. 7. Plaquetas. 8. Hialmera. 9. Crommera.

COLORACIN:

FIJACION:

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GLBULOS BLANCOS

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PLAQUETAS

monocito linfocito

eosinfilo basfilo

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LMINA N27: TEJIDO MUSCULAR LISO

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, examine el corte transversal y notar que desde la luz al extremo opuesto encontrar varios tejidos, empezando con una membrana de epitelio simple cilndrico, tejido conectivo, tejido muscular liso, tejido conectivo y epitelio simple plano. Ubique el objetivo en la capa ms rosada casi media que esta formado por tejido muscular liso.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el msculo liso y observe lo siguiente:

1. En la zona interna de la capa muscular se observan fibras musculares lisas en corte longitudinal, clulas fusiformes con ncleos alargados en posicin central.

2. En la zona externa de la capa muscular se observan a las fibras musculares lisas en corte transversal, de forma redondeada o poligonal y de dimetro variable, puede observarse en algunas fibras el ncleo en posicin central, otras no.

LOCALIZACIN: En rganos huecos del sistema digestivo, respiratorio, vera y arterias musculares de mediano y gran calibre, etc.

COLORACIN:

FIJACION:

vellosidad intestinal

criptas

1



8. 9. 10.

11.

12. 13.

muscular interior: capa circular

adventicia

muscular exterior: capa longitudinal

vellosidad intestinal

2

criptas

submucosa

2

3

5

1

6

4


RGANO: INTESTINO DELGADO

Fibra muscular lisa en corte transversal. Fibra muscular lisa en corte longitudinal. Ncleo alargado central .de fibras musculares

en corte longitudinal. Ncleo en corte transversal (circular) en fibra

muscular lisa cortada transversalmente. Tejido Conectivo. Sarcoplasma.

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LMINA N28: TEJIDO MUSCULAR ESTRADO ESQUELTICO RGANO: LENGUA

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, examine el corte longitudinal de la lengua y notara los tejidos que lo forman desde la superficie al fondo detectando al inicio el epitelio de revestimiento estratificado no queratinizado, por debajo esta los tejidos conectivo laxo y denso, ms profundamente se encuentra la presencia del tejido muscular estriado. Ubique el objetivo en esta regin y pase a otro aumento.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el msculo estriado y observe lo siguiente:

1. En la parte central del corte se encuentra tejido muscular estriado en corte longitudinal y transversal. Las fibras en corte longitudinal se observan como cintas angostas, con estriaciones transversales que corresponden a los discos claros (I) y oscuros (A), y con ncleos perifricos.

2. En corte transversal, las fibras musculares estriadas se observan en forma redondeada o poligonal de dimetro uniforme y con ncleos perifricos.

3. Entre las fibras musculares se encuentra escaso tejido conectivo, que constituye el endomisio, y el tejido conectivo que rodea a los haces musculares constituye el perimisio.

LOCALIZACIN: En los msculos de contraccin voluntaria de toda el organismo.

9. Fibra muscular estriada en corte transversal. 10. Fibra muscular estriada en corte longitudinal. 11. Ncleo ovoide perifrico. 12. Estriaciones transversales. 13. Endomisio (T. conectivo entre fibras

musculares). 14. Perimisio (T. conectivo que rodea a los haces

musculares).

COLORACIN:

FIJACION:

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glndulas mucosas

lmina propia epitelio

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3

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glndulas serosas

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fibras musculares esquelticas



LMINA N29: TEJIDO MUSCULAR ESTRADO CARDIACO RGANO: CORAZN (MIOCARDIO)

Con el objetivo de 3,2; 4 5X; examine el corte del corazn y notara que desde la luz al extremo opuesto encontrar varios tejidos, empezando con una membrana de epitelio simple plano, tejido conectivo, tejido muscular estriado cardiaco, tejido conectivo y epitelio simple plano. Ubique el objetivo en la capa muscular para su identificacin.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el msculo cardiaco y observe lo siguiente:

1. Las fibras musculares cardiacas aparecen en cortes longitudinales, transversales y oblicuos debido a que siguen diversas direcciones.

2. Las fibras cortadas longitudinalmente presentan una estriacin transversal bien visible, notndose sus ramificaciones y las anastomosis con las vecinas, y la presencia de las bandas escaleriformes de Eberth, que se distinguen por su coloracin ms intensa.

3. Los ncleos son centrales, grandes y ovalados o rectangulares.

4. En las secciones transversales las fibras se observan en forma redondeada o poligonal con el ncleo en posicin central y abundancia de sarcoplasma perinuclear.

5. En el tejido conectivo interfascicular se halla numerosos vasos sanguneos.

LOCALIZACIN: En el corazn.

8. Fibra muscular cardiaca en corte transversal. 9. Fibra muscular cardiaca en corte longitudinal. 10. Ncleo central. 11. Banda escaleriforme. 12. Tejido conectivo. 13. Sarcoplasma COLORACIN:

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pericardio

miocardio

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4 3



LMINA N30: TEJIDO NERVIOSO / NEURONA MULTIPOLAR ESTRELLADA RGANO: MDULA ESPINAL

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, examine el corte transversal de la medula espinal y ubique el objetivo en la zona de una de las astas anteriores.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el asta anterior y observe lo siguiente:

1. Neuronas grandes de forma poligonal con numerosas prolongaciones citoplasmticas (dendritas), ncleo vesiculoso con escasos grumos cromticos situados cerca de la membrana nuclear y un nuclolo voluminoso, excntrico y bien teido.

2. Entre las neuronas se observan numerosos ncleos de clulas pertenecientes a las neuroglias, cuyo citoplasma no es bien coloreado.

LOCALIZACIN: En la mdula espinal.

8. Neurona multipolar. 9. Ncleo vesiculoso. 10. Prolongaciones citoplasmticas. 11. Ncleos de neuroglias. 12. Fibras nerviosas. COLORACIN:

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canal central

2

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4

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astas anteriores



LMINA N31: TEJIDO NERVIOSO / NEURONA MULTIPOLAR DE FORMA PIRIFORME RGANO: CEREBELO

Con el objetivo de 3.2, 4 5X, examine el corte transversal del cerebelo y notara que se diferencian la zona molecular y la zona granular, en el lmite de estas 2 zonas se distinguen unas clulas grandes llamadas clulas de Purkinje. Ubique el objetivo sobre estas clulas.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque la zona indicada y observe lo siguiente:

1. Se nota claramente la diferencia entre la capa molecular y la capa granular del cerebelo y son muy notorias las clulas de Purkinje en el lmite de estas dos capas.

2. Las clulas de Purkinje son grandes en forma de peras, presentando su polo apical con numerosas prolongaciones citoplasmticas (dendritas), orientadas hacia la capa molecular. Se puede apreciar el inicio del Axn hacia la capa granular. El ncleo es grande con un nuclolo bien teido.

LOCALIZACIN: En el cerebelo.

8. Clula de Purkinje. 9. Ncleo. 10. Nuclolo. 11. Citoplasma. 12. Inicio del Axn. 13. Dendritas. 14. Capa Molecular. 15. Capa Granular.

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capa molecular

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capa granular

capa de clulas de Purkinge

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5

6

2

6

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LMINA N32: TEJIDO NERVIOSO / NEURONAS MULTIPOLARES PIRAMIDALES RGANO: CEREBRO

Con el objetivo de 3,2; 4 5X, examine el corte transversal del cerebro y notara la diferencia entre la capa molecular, capa granular y capa de clulas gigantes de Best en esta capa se observan a estas clulas que tienen forma piramidal no muy notorias y para distinguirlas es necesario elevar el aumento del objetivo.

Con el objetivo de 10 40X, enfoque el cerebro en la regin de las clulas piramidales y observe lo siguiente:

1. En la tercera capa de la corteza cerebral observe las neuronas piramidales de forma triangular, con su base orientada a la zona medular y su vrtice a la superficie, donde se encuentra la prolongacin dendrtica principal (prolongacin dendrtica ascendente).

2. Las prolongaciones dendrticas colaterales, horizontales as como las de la base de estas clulas casi no se observan en la muestra.

3. Los oligodendrocitos, se ven como pequeos corpsculos redondeados con 2,3 4 prolongaciones.

LOCALIZACIN: En el Cerebro.

1. Neurona Piramidal gigante de Best. 2. Prolongacin dendrtica principal. 3. Prolongaciones laterales 4. Ncleo. 5. Citoplasma 6. Neuroglia (ncleo del oligodendrocito). 7. Fibras nerviosas. 8. Capa molecular. 9. Capa granular.

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tercer ventrculo

clulas piramidales

2 8

6

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tlamo

hipotlamo

hipocampus

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Guia de Practica de Biologia Del Desarrollo

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