ASPECTOS A CONSIDERAR PREVIO A LA ACTIVIDAD PRCTICAa. Recuerde que tiene objetivos de aprendizaje, esto significa, establecer proyectos para alcanzarlos. b. Verifique su comprensin lectora: con ejercicios, actividades y/o asigne el nivel o grado de comprensin del material de lectura estudiado. Recuerde evitar interrupciones, no salte de un asunto a otro, mantenga ordenadas sus cosas. Convierta en un hbito el preguntarse su nivel de comprensin de las lecturas. c. Recuerde, muestre una actitud constructiva y positiva, realice el auto-anlisis, la extrapolacin, la generacin de nuevas ideas, cambios a nivel personal, nuevas perspectivas, paradigmas o posiciones ante planteamientos o ideas que logre aprender en las lecturas realizadas. d. Tome conciencia de lo que ha aprendido; es decir, analice la generacin e identificacin de pensamientos, ideas, sentimientos y experiencias; derivadas de la nueva informacin, aprendizajes y experiencias adquiridas a travs del material estudiado. e. Finalmente Autoevalese, esto es que realice actividades, ejercicios y/o asignaciones dirigidas a proveer de un mecanismo que te permita determinar el nivel de dominio adquirido con relacin al tema estudiado. f. Es muy importante que antes de las actividades explore todas las bibliografas que le recomendamos, para que de esta manera, sea ms productivo el tiempo que dedique a las actividades. g. Realice la lectura de la bibliografa recomendada, utilizando alguna tcnica que le permita establecer su anlisis (subrayado de ideas principales, mapas mentales, cuadros sinpticos). h. Recuerde que es importante estudiar previamente de manera independiente, y este, es un proceso personal voluntario que exige tiempo, esfuerzo y dedicacin. Por tanto: es muy importante organizar su tiempo y dedicacin al estudio. i. Como estudiante que se incorpora a este nuevo proceso tendr muchas dudas, sobre cmo hacerlo, cuando, en qu condiciones; para ello cuenta con su profesor quien le ayudar a solucionarlas, para que desde el principio logre adaptase al sistema y obtenga los mejores resultados en tus estudios.

INFORMACIN GENERAL Y REGLAMENTO Objetivo Conocer las reglas ms importantes para el buen desarrollo del trabajo en el laboratorio REGLAMENTACIN 1. La asistencia a los trabajos prcticos (Laboratorio) es de un 100%. 2. Se exige puntualidad. 3. Toda inasistencia debe ser justificada dentro de los plazos establecidos por la Escuela. 4. Los trabajos prcticos bajo ninguna circunstancia son recuperables, por lo que la inasistencia justificada no implica una nueva oportunidad para su realizacin. 5. Los alumnos debern tener una conducta apropiada durante todo el desarrollo del trabajo prctico y acatar las normas e instrucciones que le entregue el docente. 6. Uso de delantal blanco obligatorio. 7. El cabello debe estar tomado en el caso de las damas y los varones usar cintillo. 8. No se permite el uso de celulares. 9. La modalidad de trabajo corresponde a trabajo colaborativo (grupal). 10. Leer la gua previamente y traerla a la prctica. 11. Esquematice y realice usted sus propias observaciones, no las de sus compaeros. 12. Consulte con su profesor cualquier duda que se le presente. 13. No retirarse del laboratorio sin justificacin. 14. Se deber desarrollar la gua en cada paso prctico. 15. Se debe completar la gua con los resultados, datos obtenidos y desarrollo de cuestionarios. 16. Todas las notas obtenidas en el semestre se promediarn para obtener el porcentaje que corresponde segn reglamento y programa de la asignatura. ASPECTOS DE SEGURIDAD

1. 2. 3. 4.

Lleve a cabo cada experimento con cuidado y respeto. Nunca lleve a cabo un experimento a menos que haya sido indicado por el docente. Siga las instrucciones y precauciones que le indica la gua de trabajos prcticos. Mantenga las condiciones sanitarias del laboratorio, lavando el material y limpiando las superficies de trabajo. 5. No coma ni beba dentro del laboratorio. Los alimentos pueden contaminarse. 6. Trabajar en forma limpia, ordenada, con entusiasmo e inters. De esto depende el xito de las prcticas. 7. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin. 8. No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin consultar con el profesor. 9. No tocar con las manos y menos con la boca los productos qumicos. 10. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos. 11. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de las llamas de los mecheros. 12. Si hay que calentar tubos de ensayo con stos productos, se har a bao Mara, nunca directamente a la llama. 13. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama. 14. Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma que la etiqueta quede en la parte superior para evitar que si escurre lquido se deteriore dicha etiqueta y no se pueda identificar el contenido del frasco. 15. Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo superior para regular la cada de lquido. 16. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse la ebullicin violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de ensayo se

2

acercar a la llama inclinado y procurando que sta acte sobre la mitad superior del contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullicin rpida, se retirar, acercndolo nuevamente unos pocos segundos y retirndolo otra vez al producirse una nueva ebullicin, realizando as un calentamiento intermitente. En cualquier caso, se evitar dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona. 17. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos calentado con el fin de evitar roturas. 18. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se engrasen. 19. Lavarse bien con abundante agua cuando le caiga un reactivo en la piel. 20. No emplee el mismo gotero o pipeta para extraer sustancias diferentes. 21. Al terminar su prctica deje limpio el lugar de trabajo y los implementos que utiliz. ALGUNAS REGLAS A OBSERVAR EN EL TRABAJO Y LABORATORIO DE BIOLOGA a. Orden Al momento de iniciar el trabajo disponer todo en forma ordenada para evitar confusin y prdida de tiempo. Cuando es necesario, se etiqueta el material. Devolverlo a su lugar correspondiente despus de haberlo usado; dejar en orden y limpio la mesa de trabajo. b. Limpieza En todo momento el trabajo del trabajo es necesario mantener la limpieza, al final del trabajo de la jornada debe limpiarse todo lo ensuciado, lavarlo convenientemente cuando sea necesario. Tal vez en ciertas ocasiones sea preciso la esterilizacin. Evite que en el lavadero se depositen desechos slidos que puedan obstruirlos. c. Cuidado con los instrumentos y aparatos La mayora de los instrumentos, aparatos y cualquier tipo de material de laboratorio son muy costosos y por ello es necesario un especial cuidad en su manejo y conservacin. A ningn material de laboratorio debe drsele otro uso que el especfico, en forma especial el profesor establecer las responsabilidades del alumno en cuanto a este material. DIBUJO EN BIOLOGA Es muy importante dar unas pautas generales en relacin a la elaboracin de dibujos en biologa, el estudiante debe esforzarse por representar fielmente cuanto se pueda observar en la naturaleza o en el laboratorio ello no requiere dotes de artista, tan solo esfuerzos por dibujar y esquematizar cada vez mejor, sujetndose a ciertas reglas y consideraciones. a. Normas del dibujo en biologa El dibujo es en primer lugar una constancia del trabajo realizado durante la prctica, los dibujos ayudan al aprendizaje para ellos consignan detalles, sobre todo los que mas interesan. Un dibujo depende de su exactitud y precisin, no de su merito artstico, por ello se califica usando como criterio su valor cientfico. Las principales caractersticas en Biologa son: 1. Antes de empezar a dibujar observe y estudie el material. 2. Dibuje directamente el espcimen o del microscopio. 3. Debe ser objetivo y claro, representar los objetos tal cual son, con claridad y haciendo resaltar detalles importantes aunque estos sean pequeos. 4. Proporcionalidad entre las diferentes partes del dibujo. 5. Trazos ntidos y firmes sin lneas suplementarias ni sombras. Un punteado muy fino puede sustituir a la sombra en caso de que este sea necesario. 6. Use lpices de punta fina, nunca tinta, si desean usar olores deben hacerlo solamente en caso de necesitar incluir los colores conservados en el material. 7. Debajo de cada figura indique el titulo, escala aproximada o aumentos correspondientes. PRCTICO N 1 RECONOCIMIENTO DE MATERIALES

3

Objetivo Familiarizarse con las instalaciones del laboratorio y su equipo de uso corriente para poder realizar las prcticas en forma eficaz y segura. Conocer las reglas ms importantes para el buen desarrollo del trabajo en el laboratorio Identificar los materiales y equipos de laboratorio estableciendo las diferencias que existen entre ellas. La asignatura de Biologa Celular y gentica emplea el mtodo cientfico utilizando como herramienta varios mtodos, entre ellos el experimental. Por lo cual es importante el desarrollo de experimentos sobre los diversos fenmenos que ocurren en los seres vivos, ya que tienen como fin comprobar los enunciados o propuestas tericas que se hacen acerca de dichos fenmenos. MATERIALES DE USO CORRIENTE EN EL LABORATORIO Materiales de Vidrio 1. Tubo de Ensayo: Se utiliza para mezclar sustancias, calentar, y ejecutar reacciones. 2. Beaker: Se usan para preparar, disolver o calentar directamente sobre rejillas o planchas de calentamiento. 3. Matraz Erlenmeyer: Se utiliza para montar sistemas generadores de gases. 4. Kitazato: Es un matraz de pared gruesa con un una conexin lateral, mediante una manguera que conecta a una trompa de vaci y su funcin es filtra sustancias pastosas y slidos de tamao pequeo de partcula. 5. Matraz de fondo plano: Se utiliza para calentar lquido. 6. Matraz de fondo redondo: Se utiliza para poner volmenes exactos de soluciones. 7. Embudo de filtracin: Consiste en hacer pasar una mezcla lquida a travs de un filtro colocado en un embudo, los componentes insolubles quedan retenidos en el papel de filtro como residuos y los solubles pasan a travs de los poros. 8. Embudo de decantacin: Se utiliza para la separacin de lquidos miscible e inmiscible para extraer l lquido menos denso separando del menos denso. 9. Vidrio de Reloj: Se utiliza para cubrir recipientes, pesar, transferir slidos, evaporar lquidos a temperatura ambiente. 10. Agitador: Se usa para agitar mezclas reactivas y como accesorio en el trasvase de lquidos. 11. Condensador: tiene la funcin de condensar los vapores producidos durante el proceso de destilacin y esta compuesto por dos (2) partes: 1. Un tuvo central de forma diversa, que se conecta por un lado al baln de destilacin y por el otro, al frasco receptor de la destilacin 2. Un cilindro de vidrio por donde envuelve al tubo interior y presenta dos (2) tubuladuras laterales por donde penetra y sale el agua de enfriamiento. 12. Matraz Aforado: Sirve para preparar volmenes exactos de concentraciones. 13. Cilindro graduado: Se utiliza para el volumen de liquido en centmetros cbicos (m3) 14. Bureta: Son tubos de vidrios calibrados que suelen terminar en una llave y sirven para medir volmenes de lquidos con mayor preescisin y exactitud. 15. Caja de Petri. En ella se cultivan microorganismos, como hongos o bacterias; tambin puede usarse para seleccionar muestras de animales. 16. Frasco de boca y tapn esmerilados. Se usa para conservar y almacenar sustancias. 17. Portaobjetos. Son laminillas de cristal que pueden ser cncavas, en ellas se depositan sustancias para su observacin. 18. Cubreobjetos. Cubren y protegen las preparaciones u objetos que se observarn al microscopio e impiden que se desprendan o muevan al ser observados. 19. Cristalizador. Recipiente de vidrio empleado en el laboratorio para cristalizar cuerpos que se encuentran en disolucin. 20. Termmetro. Con l se mide la temperatura a diversas sustancias reaccionantes (reactivos). 21. Agitador de vidrio. Estn hechos de varilla de vidrio y se utilizan para agitar o mover sustancias, es decir, facilitan la homogenizacin

4

22. Embudo de Buchner. Son embudos de porcelana o vidrio de diferentes dimetros, en su parte interna se coloca un disco con orificios, en l se colocan los medios filtrantes. Se utiliza para realizar filtraciones al vaco. 23. Vasos de precipitados. Permite calentar sustancias y obtener precipitados de ellas. 24. Pipetas. Este material existe en dos presentaciones: a. Pipetas aforadas. b. Pipetas volumtricas. Las primeras permiten medir diversos volmenes segn la capacidad de esta, las segundas no estn graduadas y slo permiten medir un volumen nico. 25. Probeta. Este material permite medir volmenes las hay de vidrio y de plstico y de diferentes capacidades. Materiales de porcelana 1. Cpsula de porcelana: Sirve para calentar y evaporar lquidos, fundir cristalizar slidos. 2. Crisol: Sirve para calcinar sustancias, fundir slidos. 3. Mortero: Sirve para triturar, pulverizar y mezclar slidos. 4. Esptula: Sirve para trasegar slidos y tomar nuestras de slidos. 1. 2. Materiales de metal Mechero de gas o de Bunsen: Se emplea para el calentamiento rpido de sustancias. Balanza. Con ella se conoce el peso de objetos. 3. Bao Mara. Es un dispositivo que permite calentar sustancias en forma indirecta, es decir, sustancias que no pueden ser expuestos a fuego directo. 4. Soporte universal: Pieza bsica en el montaje de los sistemas y aparatos como pinzas y anillos de metal. 5. Rejilla de Metal con Centro de Asbesto: Sirve para calentar indirectamente ya que la llama del mechero se concentra en el anillo. 6. Trpode: Soporte de vaso de precipitado, matraces, etc. 7. Aro Metlico: Es un componente importante en l para el montaje y construccin de sistemas para calentar y sujetar. 8. Esptula metlica: Sirve para trasegar slidos y tomar nuestras de slidos. 9. Pinza para soporte universal: Sirve para sujetar instrumentos en el montaje de sistemas. 10. Pinza de Morh: Son instrumentos metlicos de dos brazos y de forma variada que se utiliza para sujetar y trasladar objetos; tambin, para impedir el paso de fluidos en tubos flexibles. 11. Pinza para tubo de ensayo: Se utiliza para sujetar tubos de ensayos calientes. 12. Gradilla: Se utiliza para colocar los tubos de ensayo. 13. Soporte para Embudo: Sirve para la fijacin de instrumentos de vidrio Estos son los materiales que usted normalmente utilizar durante el desarrollo de muchas de las actividades en los trabajos prcticos de Biologa. Mediante los esquemas, podr familiarizarse con ellos antes de utilizarlos.

5

6

7

En aquellos recipientes de cuello estrecho (pipeta, bureta, que es la superficie cncava o convexa que separa a la fase Las fuerzas de ADSORCIN entre la superficie del vidrio y menisco. LA LECTURA DEL VOLUMEN HA DE REALIZARSE DE PLANO TANGENTE AL MENISCO

matraz aforado) se forma un MENISCO lquida (disolucin) de la fase gas (aire). la disolucin provocan la curvatura del TAL MODO QUE LOS OJOS ESTN EN UN

8

PRCTICO N 2 USO Y MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO PTICO. Objetivos Reconocer las partes y sus funciones del microscopio ptico. Comprender la funcin de cada parte del microscopio. Aprender a utilizar el microscopio ptico correctamente. El microscopio es una de las herramientas bsicas en el estudio de la biologa. Mediante un conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamao de los objetos bajo estudio, que son demasiado pequeos para ser estudiados a simple vista. Dos principios estn involucrados en el uso del microscopio: MAGNIFICACIN (la capacidad de aumentar el tamao de una imagen) y RESOLUCION (la capacidad de producir una imagen ntida, o bien la capacidad del instrumento para dar imgenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno del otro en el objeto). Los diversos elementos que existen en la naturaleza, presentan tamaos, formas y composiciones distintas, la mayora de ellas pueden verse, algunas a simple vista, y otras mediante instrumentos.

Existen distintos tipos de microscopios, cada uno con un propsito particular.

Microscopio ptico

9

En el microscopio distinguimos un sistema ptico/ampliacin destinado a la iluminacin y obtencin de una imagen muy aumentada del objeto examinado, y un sistema mecnico (o montura), cuya finalidad es la de sustentar convenientemente los elementos pticos y los preparados que se examinan. Componentes:

Base: Corresponde a la parte inferior del instrumento, utilizada como soporte. Pedestal o brazo: pieza que soporta al tubo que contiene el sistema de lentes y que le conecta con la base.

Cabeza: pieza, generalmente mvil, sobre la que se ubican los oculares y el sistema regulador de la distancia focal. Fuente de luz: corresponde a una ampolleta u otra fuente luz activada por corriente o pila. Antiguamente se utilizaba un espejo que concentraba la luz ambiental. Macromtrico: tornillo que permite el ajuste grosero de la muestra a observar. Se complementa con el uso del micromtrico. Micromtrico: tornillo que permite un ajuste fino de la muestra a observar.

Platina: pieza dispuesta horizontalmente y sobre la cual se ubican las pinzas y el foco coaxial. Platina, pinzas y foco coaxial permiten ubicar una muestra para ser observada. La muestra debe estar dispuesta sobre un portaobjeto y protegida por un cubreobjeto). Bajo la platina se encuentran el diafragma y el filtro.

Pinzas: Piezas prensiles que permiten sujetar la muestra, contenida en un portaobjeto, contra la platina.

Foco coaxial: Sistema compuesto por dos ejes de desplazamiento horizontal, los cuales, dispuestos perpendicularmente entre s, permiten ajustar una muestra para ser observada al microscopio. Un eje desplaza la muestra en sentido lateral (izquierda - derecha del observador) y el otro en sentido frontal (alejando - acercando la muestra del observador). Ambos movimientos se realizan en el plano que define la platina.

Diafragma: Sistema que controla la cantidad de luz que llega al objeto. El diafragma permite controlar intensidad de luz y el tamao del cono de luz proyectado sobre la muestra. Condensador: Conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra. Las lentes condensadoras ms tiles poseen poderes superiores a los 400x y ms. El uso de condensador permite mejorar la observacin de la muestra. Cuando est presente en el instrumento, el condensador se ubica generalmente bajo la platina.

Filtro: Algunos microscopios portan filtros o un sistema de stos, los que corresponden a lentes de distinto color que permiten enfatizar la observacin de determinadas partes de la muestra, generalmente destacadas con tinciones.

Revlver: Mecanismo giratorio sobre el cual se disponen los objetivos. El revlver permite cambiar el aumento con que se observa una muestra determinada. Un revlver generalmente porta cuatro objetivos: 4x, 10x, 40x y un objetivo de inmersin (100x).

Objetivos: Conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver (distinguir las distintas partes) de la muestra a observar. Objetivo de inmersin: El objetivo de inmersin permite lograr una mejor resolucin en un microscopio ptico mediante el uso de las propiedades de refraccin de luz del aceite de inmersin. Requiere de la disposicin de una gota de este aceite sobre la muestra, ya sea en el caso de preparaciones frescas o preparaciones fijas; el objetivo de inmersin debe acercarse a la muestra de modo que toque la gota de aceite.

Oculares: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen previamente formada por el objetivo. Puede desmontarse e intercambiarse por otros con distintos aumentos o funciones: agujas para sealar, retculos para recuentos u otros.

10

Sistema regulador de la distancia focal: Sistema que permite ajustar la distancia focal de los oculares con la distancia focal del observador.

A. OCULARES B. REVOLVER C. OBJETIVOS (los aumentos en el ext.) D. PLATINA E. Tornillos para desplazar la preparacin sobre la platina en sentido longitudinal y transversal F. CONDENSAD OR G. Tornillo MACROMTRI CO H. Tornillo MICROMTRI CO I. DIAFRAGMA IRIS J. Tornillo para regular la altura del condensador K. INTERRUPTO R L. Regulador de la Intensidad de Luz M. PINZAS para ajustar la preparacin sobre la platina N. PIE O SOPORTE

11

Lentes Oculares: Sirven para hacer la observacin y son los por los cuales hay que mirar los objetos, normalmente poseen un aumento de 10X. No deben tocarse con los dedos o limpiarse, para esto el encargado del equipo deber hacerlo tomando los cuidados necesarios para no rayarlos o mancharlos.

El tubo ptico tiene como funcin soportar los oculares. El tubo ptico se une a la Caja de Prismas, en la cual hay un prisma quien es el que se encarga de desviar la imagen que se recibe desde el lente objetivo hacia el lente ocular formando un ngulo de 120 grados. El tornillo se debe aflojar suavemente, nunca hay que girarlo demasiado pues se puede soltar, basta girarlo un cuarto de vuelta. Siempre es importante que este tornillo quede ajustado cada vez que se mueve la caja de prismas, pues la misma se puede caer. Igualmente, luego de utilizarlo hay que cerciorarse de que el mismo quede ajustado, para evitar que esta parte del microscopio se mueva y se produzca un accidente.

12

El brazo del microscopio, sirve para transportarlo y soportar algunas piezas como el tornillo macromtrico (para enfoque grueso) y eltornillo micromtrico (para enfoque de precisin). La platina es una placa metlica con una perforacin central sobre ella se coloca la preparacin que se va a observar.

Generalmente posee un par de pinzas para sostener la lmina y un sistema mecnico denominado carro. El Carro a veces posee dos escalas que permiten fijar una determinada estructura en la preparacin observada, como se ve en la fotografa anterior, esto se logra por medio de la utilizacin de coordenadas ( como en un mapa ). El Carro, tambin posee dos Tornillos que se utilizan para mover la preparacin de derecha a izquierda y de adelante hacia atrs (Este, Oeste, Norte, Sur ). (Tornillos del Carro )

13

El revlver se encuentra en la parte inferior del tubo ptico y en el se encuentran los lentes objetivos, en los microscopios pticos puede haber tres o cuatro de estos lentes objetivos. Estos lentes presentan diferente aumento.

Lente Bajo Poder: Generalment e 4X Lente Mediano Poder: Generalmente 10X Lente Alto Poder: Generalment e 40X Lente Inmersin en aceite: 100X

14

El condensador: se encuentra debajo de la platina y su funcin es la de soportar las lentes que recogen los rayos luminosos. La base, sirve para darle estabilidad al instrumento. En ella generalmente se encuentran ubicadas la fuente de Luz ( generalmente un sistema de iluminacin de 6V con una bombilla halgena o de luz de criptn )

Ajustes del enfoque Para enfocar la lmina o la preparacin existen dos perillas o tornillos, (Macromtrico y Micromtrico) las cuales realizan lo mismo bsicamente. su funcin es hacer subir la platina hasta alcanzar la distancia de trabajo o distancia de enfoque, la diferencia es la magnitud en la que ambas funcionan. El macromtrico se utiliza exclusivamente con la lente de bajo poder, pues mueve en forma apreciable la platina, muientras que el Micromtrico se utiliza en cualquier amplificacin. El condensador es la lente que ilumina la lente del objetivo, su abertura numrica debe ser suficientemente alta para suministrar el cono de luz requerido.

15

En la parte inferior del condensador hay una abertura regulable, o diafragma controlado por una palanca lateral.

Hay tambin un anillo para alojar filtros coloreados o de luz natural.

16

NORMAS BSICAS PARA EL CUIDADO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO Al ser el microscopio un aparato de precisin y de precio elevado, es muy conveniente asegurarle un buen rendimiento y una larga duracin mediante toda una serie de normas y cuidados: Para transportar el microscopio se recomienda utilizar siempre las dos manos, sujetndolo por el brazo con una mano y sostenindolo del pie con la palma de la otra mano. Se debe desplazar en posicin vertical para evitar la cada del ocular y/o del espejo o fuente de luz. En la mayora de los microscopios el brazo debe quedar hacia el observador. Debe apoyarse correctamente el aparato hacia el centro de la mesa. Seleccionar al inicio de la observacin, el objetivo de menor aumento. Cambiar en forma gradual los objetivos. Finalizada la observacin, volver a ubicar el objetivo de menor aumento. Al efectuar el primer enfoque, el objetivo debe estar bien cerca de la preparacin sin llegar a tocarla. Se coloca en esta posicin mirando lateralmente el microscopio. El desplazamiento del tubo ptico para enfocar, se efectuar de abajo hacia arriba. Se evitar siempre tocar la preparacin con la lente frontal de los objetivos. En algunos microscopios el desplazamiento del condensador tiene un tope, mientras que en otros no, por lo que al ascenderlo hay que cuidar de no tocar el portaobjetos. Cuando se utiliza un microscopio monocular es recomendable mantener los dos ojos abiertos para evitar el cansancio visual. Mover siempre suave y lentamente cualquier pieza del microscopio Utilice papel de seda fino especial o gamuza para lentes. Evite tocar las lentes con los dedos. La parte inferior del portaobjetos debe estar siempre seca al situarlo sobre la platina. Despus de utilizar el microscopio debe guardarse aislado del polvo y la humedad con una funda de plstico o en su caja correspondiente, con la puerta cerrada.

ALGUNOS CONCEPTOS IMPORTANTES EN MICROSCOPA Aumento: Es la proporcin entre el tamao de la imagen observada al microscopio y el tamao real del objeto. El aumento total puede calcularse como el producto del aumento del ocular por el del objetivo. Distancia frontal: Es la distancia ente el objeto observado y la lente del objetivo cuando el preparado se encuentra enfocado correctamente. Es inversamente proporcional al aumento, es decir, que a medida que se utilizan objetivos de mayor aumento disminuye la distancia frontal y por lo tanto aumenta el riesgo de romper el preparado. Profundidad de campo o de foco o poder de penetracin: Es el espesor del preparado que se observa con nitidez, es decir, profundidad de planos que estn en foco en un momento dado. Con aumentos medianos o grandes, al mover el tornillo micromtrico, podemos observar slo pequeos espesores con nitidez, mientras que por encima y por debajo de esta zona la imagen se desvanece. La profundidad de foco guarda relacin inversa con el aumento: es tanto menor cuanto mayor es el aumento de la lente. Con inmersin en aceite, la profundidad de campo es muy escasa (menor que 1 m). Campo observado: Es la porcin del preparado incluida en la imagen. Se representa por el dimetro de la parte de la preparacin que se est observando (rea del campo). El tamao del campo observado es inversamente proporcional al aumento total del microscopio, y por esta razn las lentes de pequeo aumento son tiles para rastrear la preparacin. Si cambiamos de un objetivo a otro de mayor aumento, observaremos una imagen ms aumentada pero que incluir slo una parte de lo que observbamos con el objetivo menor.

17

Poder de resolucin: Es la capacidad de las lentes de distinguir o resolver (mostrar separados) con nitidez dos puntos situados muy prximos entre s. Se expresa como la distancia mnima que permite dar una imagen bien definida de dos puntos, en vez de verlos como uno solo. Cuanto mayor es el poder de resolucin (PR), menor es la distancia que separa dos puntos entre s sin que estos se confundan. En consecuencia, cuanto mayor sea el poder resolutivo del objetivo, ms finos sern los detalles de la preparacin que puedan distinguirse. Lmite de resolucin: Es la distancia mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que puedan visualizarse separados. En los microscopios pticos, el lmite de resolucin no es, en general, inferior a 0.2 m. Apertura numrica: Es una medida de la capacidad del microscopio de agrupar las refracciones de la luz producidas por los finos detalles del objeto, debido a que determina el tamao del haz de luz que es captado por el objetivo luego de haber pasado a travs del objeto. Es una caracterstica propia de cada objetivo, es por esto que forma parte de las inscripciones grabadas en los objetivos. CON EL MICROSCOPIO PTICO SE PUEDEN OBSERVAR: La forma general de la mayora de las clulas procariontes. La forma general de las clulas eucariontes. Algunas organelas eucariontes: ncleo, nuclolos, cromosomas, mitocondrias, cloroplastos, flagelos, cilias, centrolos, vacuolas, pared celular. Estas estructuras se identifican con claridad utilizando alguna tcnica accesoria con preparacin de la muestra. NO PUEDEN OBSERVARSE CON EL MICROSCOPIO PTICO: Las bacterias ms pequeas. La estructura interna de las clulas procariontes. La estructura de las organelas eucariontes. La membrana plasmtica. Los conjuntos membranosos como los retculos endoplsmico y el aparato de Golgi. Los ribosomas. DIFICULTADES Y ERRORES AL OBSERVAR 1. Si al observar en el microscopio el campo se ve oscuro o con muy poca luz, puede suceder que: a) el revolver no est girado completamente o el resorte no funcione bien. b) el diafragma del condensador est completamente oscuro o descentrado. 2. Si no se puede enfocar el preparado, puede ser que: a) el preparado est puesto sobre la platina con el cubreobjetos hacia abajo. b) el cubreobjetos es demasiado grueso y no permite el enfoque a gran aumento. c) el preparado tenga agua condensada debajo del cubreobjetos. 3. Si la imagen microscpica aparece velada y no se puede enfocar bien, puede ser que: a) la lente frontal del objetivo est mojada o sucia. b) la lente superior del ocular est empaada por la humedad o est sucia. c) el preparado tenga restos de aceite de inmersin. 4. Si aunque est enfocado el preparado no se observan detalles, puede ocurrir que el iris del condensador est completamente abierto, al cerrar el condensador hasta 1/3 de su apertura se conseguir observar estructuras finas. DIFICULTADES Y ERRORES AL ENFOCAR CON EL OBJETIVO DE INMERSIN 1Si no se puede enfocar la preparacin puede ser que:

18

El objetivo tenga en su lente frontal aceite endurecido. El cubreobjetos usado sea muy grueso. El preparado est puesto sobre la platina con el cubreobjetos hacia abajo. 2Si en la imagen aparecen burbujas de aire, se las retira moviendo suavemente la platina con el preparado. ACTIVIDADES: Materiales: Papel de diario, tijeras, agua, portaobjeto y placas histolgicas. 1.- Identificacin de los componentes del microscopio. a) Coloque el microscopio sobre la mesa de trabajo, para ello tmelo siempre del brazo o columna. b) Limpie con el pao las partes pticas y mecnicas del microscopio. c) Proceda a reconocer cada una de sus partes, segn la explicacin dada. 2.- Realizacin de la observacin. a) Tome un portaobjetos limpio y seco por sus bordes. b) Coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos. c) Corte una pequea letra de diario asimtrica e, f u otra - y ubquela encima de la gota de agua. Cubra el preparado con un cubreobjetos. Esta preparacin se conoce como MONTAJE HMEDO. d) Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor. e) Abra la pinza del carro, coloque la preparacin con el cubreobjeto hacia arriba y cierre el carro. f) Ajuste la posicin del carro de modo que la regin a observar quede justo en el orificio de la platina. g) Usando el macromtrico acerque la lente a la preparacin. Cuando logre un foco aproximado utilice el micromtrico (grelo lentamente) para el ajuste de precisin.

h) Si desea cambiar el aumento, gire el revlver y seleccione el nuevo objetivo a utilizar.Debiera bastar un pequeo ajuste del micromtrico para llegar a foco, si fuera necesario reajuste la iluminacin usando el condensador. Si requiere usar el lente de inmersin NUNCA lo use como objetivo seco, puede rayarlo. 3.- Uso del objetivo de inmersin. a) La preparacin debe estar enfocada a 40X (objetivo a seco), gire el revlver de modo que el objetivo de inmersin quede en una posicin intermedia (40X y 100X). b) Coloque una gota de aceite de inmersin sobre el cubre objeto. c) Lleve el objetivo de inmersin al eje ptico. d) Utilizando el tornillo micromtrico lleve el objeto a foco, si lo requiere modifique la cantidad de luz del condensador. e) Cuando finalice la observacin baje la platina, retire la preparacin. Limpie tanto el objetivo como la preparacin con un pao humedecido con Alcohol-ter. f) Al finalizar las observaciones el microscopio y las preparaciones deben quedar limpios. g) Gire el revlver y deje la lupa como lente de observacin. Apague la lmpara y enrolle el cordn en el pie del microscopio. h) Asegrese de colocar el microscopio en una superficie plana (no al borde de la mesa) cubierto por su funda. Descripcin de lo observado a) Debe seguir una estructura, que puede variar segn el observador, pero que debe ser sistemtica y ordenada. Se sugiere que considere en sus observaciones el siguiente esquema:

19

a. b. c.

Objetivo: referido al por qu se realiza la observacin (Ej. observacin de ncleo ) Material: es el rgano o tejido del que se obtuvo la preparacin (Ej. rin de rata) Mtodo: se refiere a la tcnica histolgica usada para elaborar la preparacin Inmediato: fresco sin reactivos modificadores. -------Mediato: fijacin post-mortem. (Ej. Preparacin Inmediata de clulas catafilo de cebolla). d. Aumento: la amplificacin del objeto observado y depende del ocular y del objetivo. Aumento = aumento del objetivo x aumento del ocular. e. Observaciones: considere describir la forma celular; relacin con otros elementos presentes, tamao celular; forma, nmero y posicin del ncleo y algunas caractersticas del citoplasma. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: _________________________ _________________________

1.

Describa lo observado en relacin a la imagen de la letra con respecto a la posicin del preparado? ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Cul es la funcin de los tornillos micro y macro mtrico? ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------En qu sentido se mueve la imagen con respecto al preparado cuando se desplaza este ltimo? ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Por qu se debe centrar lo que nos interesa de la preparacin si queremos observarlo con mayor aumento? ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2.

3.

4.

20

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------PRCTICO N 3 PREPARACION DEL MATERIAL PARA SU OBSERVACIN BAJO EL MICROSCOPIO Objetivos Aprender tcnicas que permiten observar material biolgico con microscopio ptico. Manejar el microscopio utilizando aceite de inmersin. Desarrollar capacidad de observacin. Existen diversas tcnicas de preparacin del material para su observacin bajo el instrumental ptico. Fundamentalmente, se requiere que los portas y cubreobjetos se encuentren perfectamente limpios, preferentemente enjuagados con alcohol fino y secos. La preparacin del material se debe realizar sobre una superficie limpia y plana. En caso de realizar cortes, stos deben ser sumamente delgados como para permitir el paso de la luz a travs del material. Adems del montaje hmedo existen dos tcnicas especiales para realizar el montaje del material: SQUASH o aplastado y FROTIS o extendido. SQUASH: consiste en la disgregacin de la muestra mediante el aplastamiento del material entre el porta y cubreobjetos. Para realizarlo se siguen los siguientes pasos: Se disgrega el material con la ayuda de pinzas y alfileres o agujas. Si se requiere, se lo somete a coloracin durante el tiempo necesario. Se cubre el material con un cubreobjetos. Se apoya el portaobjetos sobre una superficie dura y completamente plana. Se coloca sobre el cubreobjetos un papel secante o un papel de filtro doblado y se aplasta con el dedo pulgar sin deslizar ni rotar el cubreobjetos. Se debe operar con precaucin pero con firmeza para evitar la rotura del material.

FROTIS: consiste en esparcir el material generalmente lquido o semilquido de modo que quede distribuido uniformemente en una delgada capa. Para ello se utiliza otro portaobjetos de borde muy parejo que se desliza sobre el primero desde un extremo al opuesto. Se procede del siguiente modo: Se coloca una gota de material sobre un extremo del portaobjetos limpio y seco . Se apoya sobre la gota un borde del otro portaobjetos formando un ngulo agudo. Cuando la gota se extienda por capilaridad a todo el ancho del portaobjetos, se desliza hacia el otro extremo con un movimiento suave, rpido y uniforme.

21

ACTIVIDADES Materiales Microscopio. Portas y cubre-objetos. Lugol. Pltano, papa. Pauelos desechables. Bistur. Capsula de Petri. DIBUJE LO QUE OBSERVA, UTILICE DOS AUNMENTO Y REGISTRE. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________ ______________________________________

PRCTICO N 4

22

RECONOCIMIENTO GLCIDOS OBJETIVOS Reconocer qumicamente los glcidos. Los GLCIDOS, tambin llamados hidratos de carbono o azcares, son principios inmediatos orgnicos que fabrican las plantas en la fotosntesis y que utilizan como piezas de construccin de sus tejidos. Los incorporamos cuando comemos productos vegetales: en forma de fibra (inalterable), almidn (azcar complejo abundante en las pastas y arroz) o como azcares simples que contienen las frutas y el azcar de caa o la remolacha (sacarosa, fructosa, lactosa). Tambin los hay de origen animal (glucgeno). Alimentos energticos por excelencia, los glcidos son la fuente de energa inmediata del organismo. Algunos poseen funcin estructural, como la celulosa (fibra) de los vegetales. Los monosacridos y la mayora de los disacridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molcula. Este carcter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reaccin redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reaccin con el glcido reductor se forma xido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada reaccin y que, por lo tanto, el glcido presente es reductor. ACTIVIDADES Materiales: Tubos de ensayo Gradilla Pinzas Mechero Pipetas Solucin de Lugol Experimento 1. Identificacin de glcidos reductores. Los monosacridos y algunos disacridos (excepto la sacarosa) son glcidos reductores. Esto puede ponerse de manifiesto por medio de una reaccin redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II). Las soluciones de sulfato de cobre son de color azul. Cuando reaccionan con el glcido reductor se forma xido de cobre (I), de color rojo. El cambio de coloracin evidencia, por tanto, la presencia de glcidos reductores. 1. 2. 3. 4. 5. E n un tubo de ensayo depositar 3 ml de disolucin de glucosa al 1%. Aadir con una pipeta de Pasteur 1 ml de Fehling A, que lleva sulfato de cobre (II). Aadir con otra pipeta de Pasteur 1 ml de Fehling B, que lleva NaOH para alcalinizar el medio. Calentar en bao de mara por 5 minutos y observar el resultado. Repetir el experimento utilizando una disolucin de sacarosa al 1%.

-

-

-

cido clorhdrico. Disolucin de Hidrxido sdico al 20%. Solucin Fehling A, solucin Fehling B. Disolucin al 5% de sacarosa, lactosa, maltosa, fructosa, de glucosa, de almidn.

Experimento 2. Reconocimiento de polisacridos. (Almidn). El almidn es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reaccin qumica sino a la adsorcin o fijacin de yodo en la superficie de la molcula de amilosa, lo cual slo ocurre en fro. Como reactivo se usa una solucin denominada lugol que contiene yodo y yoduro potsico. Como los polisacridos no tienen poder reductor, la reaccin de Fehling da negativa. 1. E n un tubo de ensayo depositar 5 gotas de solucin de almidn. 2. Aadir cuatro gotas de reactivo de Lugol. 3. Observar los resultados.

23

4. Calentarlo suavemente a la llama del mechero y enfriarlo observar lo que ocurre.

con el chorro directo del grifo;

EXPERIMENTOIDENTIFICACIN DE GLCIDOS REDUCTORES RECONOCIMIENTO DE POLISACRIDOSDibujos

PRUEBA REALIZADA

RESULTADOS OBTENIDOS

FUNDAMENTACI N

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1.

Explique qu funcin cumplen los carbohidratos a nivel celular. ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2.

Adems del almidn que otro polisacrido conoce. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------PRCTICO N 5 RECONOCIMIENTO Y PROPIEDADES DE LAS PROTENAS OBJETIVOS

24

Reconocer caractersticas de las protenas y lpidos.

Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria Coagulacin de Protenas

Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms volumen puede prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla an espesa. Experimento 1. 1. 2. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero.

3.

Experimento 2. Reconocimiento de protenas. (Albmina). Las protenas producen una coloracin violeta roscea caracterstica con el sulfato de cobre (II) en medio bsico. Es la reaccin de Biuret y se debe a los enlaces peptdicos que unen los aminocidos, los cuales en presencia de un lcali forman el llamado complejo de Biuret que al reaccionar con el sulfato cprico da la coloracin violeta. 1. Depositar 3 ml de disolucin de albmina en un tubo de ensayo. 2. Aadir 3 ml de solucin de NaOH. 3. Aadir unas gotas de Licor de Fehling A (que es sulfato de cobre).

25

4. Agitar y observa el resultado Experimento 3. Reconocimiento y propiedades de grasas. ( Aceite). Los lpidos son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgnicos como la acetona. Adems tien de rojo con el colorante Sudn III. 1. Depositar 2 ml de aceite en dos tubos de ensayo. 2. Aadir a uno de ellos 2 ml de agua y a otro 2 ml de acetona. 3. Agitar ambos tubos. El aceite junto con al agua formar una emulsin transitoria de pequeas gotitas o micelas. 3. Dejar reposar y observar el resultado 4. A continuacin aadir 5 gotas de Sudan III y observar lo que sucede. EXPERIMENTO RECONOCIMIENTO PROPIEDADES DE GRASAS RECONOCIMIENTO PROTENAS Y DE PRUEBA REALIZADA RESULTADOS OBTENIDOS FUNDAMENTACIN

1. DESCRIBA LA REACCIN QUE TIENE LUGAR ENTRE EL REACTIVO DE BIURET Y LAS PROTENAS -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------2. POR QU RAZN LOS LPIDOS SON INSOLUBLES EN AGUA ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

PRCTICO N 6 MORFOLOGA CELULAR Objetivos Permitir al alumno(a) el desarrollo en habilidades y destrezas en el manejo del microscopio y material de laboratorio.

26

Observar directamente, con el microscopio ptico, clulas procariotas para percatarse de su pequeo tamao y de sus diferentes formas. Identificar y distinguir las diferencias entre clulas eucariotas animal y vegetal. Reconocer y comprender las diferencias entre las clulas PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS (animal y vegetal). Se puede definir a la clula como la menor porcin de materia que cumple con las funciones vitales, es decir, es la unidad bsica de estructura y funcin. Todas las clulas poseen los mismos elementos estructurales y cumplen las mismas funciones, sin embargo, presentan diferencias entre los distintos tipos celulares. La diferencia est dada por el diferente grado de especializacin que alcanza cada una. Si bien todas tienen una composicin qumica y estructuras similares, algunas permanecen indiferenciadas y otras se especializan y desempean funciones especficas. Presentan formas y tamaos muy variados. Algunas clulas bacterianas muy pequeas tienen forma cilndrica de menos de una micra o m (1 m es igual a una millonsima de metro) de longitud, as como se encuentran clulas nerviosas o neuronas, estructuras de forma compleja con numerosas prolongaciones delgadas que pueden alcanzar varios metros de longitud (las del cuello de la jirafa). Casi todas las clulas vegetales tienen entre 20 y 30 m de longitud, forma poligonal y pared celular rgida. Las clulas que constituyen los tejidos animales suelen ser compactas, de 10 a 20 m de dimetro y con una membrana superficial deformable y casi siempre muy plegada. La observacin de las clulas ha llevado a generar criterios de clasificacin de acuerdo a su forma, tamao y presencia o ausencia de elementos. Existen dos tipos generales de clulas; las procariotas y las eucariotas. Estas dos palabras tienen su raz en la palabra griega karyon (ncleo) y se refiere al ncleo de las clulas. El prefijo pro significa antes. Por lo tanto la palabra procariota significa literalmente antes de poseer ncleo. Las bacterias y las algas verdes-azules son ejemplos muy conocidos de organismos procariontes. Se denomina eucariotas a todas las clulas que tienen su material hereditario fundamental (su informacin gentica) encerrado dentro de una doble membrana, la envoltura nuclear, que delimita un ncleo celular.

ACTIVIDADES: Materiales Portaobjetos y cubreobjetos. Cebolla. Azul de metileno al 1%. Lugol.

Observacin de clulas procariontes

Clulas bacterianas:

27

Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaos y formas. La mayora presentan un tamao 10 veces menor que el de las clulas eucariotas. La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfolgicos. De todas formas, podemos distinguir tres tipos fundamentales de bacterias: Coco (del griego kkkos, grano): de forma esfrica. Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de bastoncillo. Formas helicoidales: El yogurt es un producto lcteo producido por la fermentacin natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociacin de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de cido, pero muy aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparacin se podrn, por tanto, observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupacin (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas). Adems, el tamao del lactobacilo (unos 30m de longitud) facilita la observacin aunque no se tenga mucha prctica con el enfoque del microscopio. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: __________________________________ _________________________________ _________________________________ _________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________

Observacin de clulas eucariotas Clula Vegetal 1. Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue membrana que est adherida por su cara inferior cncava. 2. Depositar el fragmento de membrana en un porta con unas gotas de agua escurrir el exceso de agua y deposite sobre l un cubreobjeto, observe al microscopio con aumento de menor a mayor seco. 3. Retire el cubreobjeto con cuidado y agregue una agota de tincin (verde de metilo actico/azul de metileno) sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente. No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporacin del mismo! 4. Colocar sobre la preparacin el cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio. 5. Observar la preparacin a distintos aumentos, empezando por el ms bajo. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________

28

Observaciones:

__________________________________ __________________________________ __________________________________ ________________________________

Observacin de clulas eucariotas Clula Animal 1. Observe una preparacin de mdula espinal de bovino. 2. Ubique y describa las neuronas. 3. Concentre su atencin en su forma y elementos. 4. Dibuje utilizando lpices de color para registrar los detalles que observe. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________ ________________________________ CUESTIONARIO

1. Cul es la importancia biolgica de las bacterias?------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2. Complete el siguiente cuadro sealando los caracteres diferenciales entre una clula 29

procariota y eucariota. PROCARIOTAS Organismos Envoltura Pared celular ADN Orgnelos Otras EUCARIOTAS

3. Realice un cuadro resumen donde identifiquen los principales componentes de una clulaeucariota (animal y vegetal), sus caractersticas y funciones. Componentes celulares Caractersticas Funciones

PRCTICO N 7 ORGANELOS CELULARES E INCLUSIONES CITOPLASMATICAS Objetivos

30

Identificar organelos en diferentes tipos celulares animales y vegetales. Establecer relaciones de estructura-funcin de los distintos organelos observados. Observar al microscopio inclusiones citoplasmticas en diferentes tipos de clulas animales y vegetales. La clula puede ser dividida en 2 compartimentos mayores; el citoplasma y el ncleo. El citoplasma y el ncleo, trabajan ambos en coordinacin permanente, y mantienen la buena viabilidad del organismo como un todo. Muchos de los organelos e inclusiones son estructuras limitadas por membranas. Las membranas tienen formas vesicular, tubular y otros patrones estructurales, inclusive enrolladas (Ej: RE) o formando pliegues (mitocondrias) que buscan aumentar la superficie ala de contacto, y no perder de vista que los espacios que delimitan la membrana son micro-compartimentos, en los cuales sustratos, productos y otras sustancias son secretadas o concentradas. Ej.: lisosomas. Orgnelos membranosos: Membrana celular - Retculo. Endoplasmtico Rugoso - Retculo. Endoplasmtico Liso - Aparato de Golgi Mitocondrias - Lisosomas y sus derivados - Endosomas (vesculas) - Peroxisomas Orgnelos no membranosos: 1- Microtbulo 2- Filamentos 3- Centrolos 4- Ribosomas. Inclusiones celulares Acumulacin de productos en el citosol. Hay diferentes tipos: 1) Pigmentos, 2) Lpidos, 3) Glucgeno 4) Cristales. Los vegetales son seres auttrofos fotosintticos. Gracias a la clorofila son capaces de sintetizar materia orgnica, fundamentalmente glcidos, a partir de compuestos inorgnicos como el CO2. Los plastos son los principales orgnulos implicados en dicho proceso. El almidn, es un producto de reserva, que se acumula en ciertas partes de la planta, sobre todo en las races, tubrculos y semillas y que est destinado a sustentar a la planta. ACTIVIDADES Materiales Microscopio. Portaobjetos. Cubreobjetos. Gotario. Cotonitos. Pinzas. - Bistur.

Formol. Sudn III. Verde Jano / orcena actica al 2%. Lugol. Tocino u otra grasa animal. Puerro, papa, tomates maduros. Aceite de inmersin. -

a)

Estomas y cloroplastos: 1. Retirar una parte pequea de la epidermis de la hoja de puerro y llvela sobre un porta en el que habr colocado dos o tres gotas de agua. Tenga la precaucin de que sea una capa incolora y de que est perfectamente extendida. 2. Ponga el cubre y examine la preparacin al microscopio. 3. Identificar en la preparacin la estructura de las clulas que aparecen en el esquema.

31

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ _______________________________ __________________________________ __________________________________ _________________________________

Cromoplastos: 1. Cortar o raspar con un bistur, finsimas porciones de pulpa de tomate maduro de la zona situada bajo el epicarpio (piel). 2. Depostelo en el centro de un portaobjetos sin poner agua. 3. Coloque encima un cubreobjetos y comprima suavemente con los dedos hasta obtener un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate. 4. Lleve la preparacin a la platina del microscopio y realice una observacin con aumento menor. Selecciona el mejor grupo de clulas y pasa a mayores aumentos. 5. Identifique los distintos orgnulos celulares visibles y dibuje lo que observe. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ _______________________________ _________________________________ ________________________________ ____________________________________ ____________________________________ ____________________________________ ______________________________

Amiloplastos: 1. Partir una papa y raspar con la punta del bistur, depositando el producto obtenido en un portaobjeto. 2. Dejar secar completamente y teir con unas gotas de lugol o yodo. Dejar actuar dos minutos.

32

3. Poner el cubre-objeto y observar al microscopio. Con aumento menor buscar la zona de la preparacin en la que los granos estn menos aglutinados, localizada sta, cambiar a aumentos mayores. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ ________________________________ ________________________________ _______________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________ ________________________________

Inclusin de Lpido: 1. Con ayuda de un bistur, cortar una finsima capa de grasa, colocarla en un porta y cubrirla con unas gotas de formol. Dejar actuar 4 minutos. 2. Lavar la muestra con agua y cubrirla con unas gotas de Sudn III. Dejar actuar unos 5 minutos. 3. Volver a lavar la preparacin con agua, cubrirla con un cubreobjetos y observar al microscopio. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ _______________________________ ________________________________ _______________________________ __________________________________ __________________________________ __________________________________

CUESTIONARIO

1. Describa como se observan los cloroplastos.-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2. Qu funcin tienen los amiloplastos?------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------3. Describa como se observa la gota de grasa en las clulas adiposas. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

33

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------4. Realice un cuadro resumen donde identifiquen los principales componentes de una clula eucariota (animal y vegetal), sus caractersticas y funciones. Componentes celulares Caractersticas Funciones

PRCTICO N 8 PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS Y EFECTO OSMTICO Objetivos Describir los mecanismos de difusin a nivel molecular

34

Comprobar algunas propiedades de las membranas biolgicas como lo es la permeabilidad selectiva. Conocer la importancia del entorno para mantener la integridad de las mismas y evidenciar experimentalmente el efecto osmtico. La estructura de las membranas biolgicas aceptada hoy en da es aquella descrita en el modelo del mosaico fluido. En este modelo se establece que los fosfolpidos forman una bicapa en la cual las regiones no polares de cada capa se encuentran hacia adentro de la misma y las regiones polares de cada capa se encuentran hacia afuera, en interaccin con el medio acuoso. Las protenas se encuentran embebidas en este mar de fosfolpidos con interacciones generalmente de tipo no covalente. Las membranas son impermeables a la mayora de los solutos polares y permeables a los solutos no polares. Para el intercambio de la mayora de los solutos polares existen mecanismos controlados que pueden implicar inversin de energa. La existencia de este tipo de membranas permite evidenciar una propiedad coligativa del solvente universal, el agua, que se conoce como presin osmtica. Las molculas de agua tienden a moverse desde una regin de alta concentracin de agua hacia una de menor concentracin. Cuando dos soluciones acuosas estn separadas por una membrana semipermeable que permite el paso del agua pero no del soluto, el movimiento de las molculas de agua desde una regin ms concentrada de agua hacia una de menor concentracin de agua genera una presin conocida como presin osmtica. La smosis, es decir, el movimiento de agua a travs de una membrana semipermeable debido a diferencias en presin osmtica, es un factor importante para la sobrevivencia de una clula. Las membranas citoplasmticas son ms permeables al agua que a la mayora de otras molculas o iones. Esta permeabilidad es debida en parte a la difusin libre del agua a travs de la bicapa de lpidos y a la presencia de canales proteicos que facilitan su paso.

Efectos del medio en las clulas: Clula Animal (eritrocitos)

Clula Vegetal

35

ACTIVIDADES Materiales: Portaobjetos. Cubreobjetos. Lanceta. Algodn. Alcohol.

Reactivos: - Agua destilada: 150 ml. - Soluciones de NaCl al 0,2%, 09% y 10%.

Osmosis (clula animal) 1. Enumere 4 portaobjetos. 2. Coloque en cada uno de ellos una gota de sangre. 3. El portaobjeto n 1 debe ser observado rpidamente. 4. Agregue a los siguientes portaobjetos solucin de NaCl de acuerdo al esquema. Portaobjeto N 2 Solucin 0,9% Fenmeno observado: ------------------------------------------Portaobjeto N 3 Solucin 0,2% Fenmeno observado: ---------------------------------------------Portaobjeto N 4 Solucin 10% Fenmeno observado: ---------------------------------------------

Osmosis (clula vegetal) 1. Enumere 4 portaobjetos. 2. Coloque en cada uno de ellos un trozo de catafilo de cebolla, extindalo y agregue. 3. El portaobjeto n 1 sin solucin, debe ser observado rpidamente.

36

4. Agregue a los siguientes portaobjetos solucin de NaCl de acuerdo al esquema. Portaobjeto N 2 Solucin 0,9% Fenmeno observado: -------------------------------------------Portaobjeto N 3 Solucin 0,2% Fenmeno observado: -------------------------------------------Portaobjeto N 4 Solucin 10% Fenmeno observado: ----------------------------------------------

CUESTIONARIO

1. En qu tipo de clulas se puede observar el fenmeno de Crenacin?------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2. Describa el fenmeno de Plasmlisis?------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------DEFINA

Movimiento Browniano: Difusin: Osmosis: Plasmlisis: Hemlisis: Crenacin: Turgencia: PRCTICO N 9 ESTUDIO DE LA MITOSIS EN CLULAS DE RAZ DE CEBOLLA

37

Objetivos Adquirir conocimientos sobre una de las metodologas para realizar preparados temporarios de races de cebolla para el estudio de la mitosis. Reconocer y analizar los distintos estadios de la divisin mittica. El ciclo celular es el perodo comprendido entre la formacin de una clula, por divisin de otra precedente, y el momento en que ella misma se divide para originar dos clulas hijas. El ciclo celular se puede dividir en dos grandes perodos: Interfase y mitosis, cada uno de los cuales se subdivide en varias fases o etapas. La interfase se encuentra subdividida en 3 etapas: a) Perodo G1. Comienza la sntesis de RNA y protenas. b) Perodo S donde ocurre la duplicacin del ADN. c) Perodo G2, fase post-sinttica que va desde el final de S hasta el comienzo de la mitosis. Mitosis Es la divisin nuclear asociada con la divisin de las clulas somticas. Cada mitosis nica est asociada con una nica divisin celular que produce dos clulas hijas gentica y cromosmicamente idnticas. El ciclo puede ser dividido en varios perodos: M, S, G1, G2 y G0. Mitosis (M), es generalmente el perodo ms corto del ciclo, que ocupa aproximadamente entre el 5 a 10 % del tiempo total del ciclo. La sntesis del DNA ocurre en S. G1 y G2 son perodos intermedios entre S y M. Juntos G1, S y G2 constituyen la interfase, el perodo entre dos mitosis consecutivas. Los cromosomas no son observables en la interfase. La etapa G0 es una salida del ciclo celular. La ganancia neta de la Mitosis es que se hace una copia de cada cromosoma presente en el ncleo y esta estructura doble luego se rompe para dar origen a dos cromosomas hijos, cada uno destinado a diferentes ncleos hijos. La mitosis se divide:Interfase. El ADN aparece en forma de cromatina, constituida por largas molculas filamentosas de ADN. Al final de la interfase, el ADN se duplica, obtenindose dos molculas iguales. El centrosoma tambin se duplica. 1. Profase. Comprende tres fases:

a. Formacin de cromosomas o diferenciacin de ellos. b. Duplicacin de cromosomas por divisin longitudinal, o que las dos cadenas del resultado de la mencionada duplicacin se separan. c. Formacin del huso acromtico. Los dos centrosomas migran cada uno a cada polo de la clula, y quedan unidos por fibras. 2. Metafase o fase destructora. Comprende dos fases: a. b. Desaparicin de la membrana nuclear. Formacin de la estrella madre o placa ecuatorial. Los cromosomas hermanos se colocan en la zona central de la clula y se fijan por el centrmero a las fibras del huso acromtico.

3.

Anafase o fase constructora. Comprende dos fases: a. Las fibras del huso acromtico se contraen, separando as los cromosomas, y migrando stos a los polos de la clula, separndose as de los cromosomas hermanos. b. Los filamentos centrosoma. desaparecen, y los cromosomas permanecen junto a su respectivo

4.

Telofase o fase final. Comprende dos fases:

38

a. Aparecen dos ncleos, y cuya membrana envuelve a los cromosomas que desaparecen o se desenrollan, dando lugar a masas de cromatina. b. Divisin del citoplasma. Hay dos tipos:

Por tabicacin. Mediante este proceso, propio de las clulas vegetales, se separa el contenido celular,ncleo y citoplasma, entre las clulas hijas.

Por estrangulamiento. Es un proceso similar al anterior, pero que se da en las clulas animales. Laclula se va estrechando por el centro, hasta tal punto que se divide por la mitad.

ACTIVIDADES Materiales necesarios: Raicillas de Allium sp. (Cebolla) fijadas en 3:1 (etanol absoluto: cido actico glacial). Portaobjetos, cubreobjetos, pinza, agujas enmangadas, colorante: carmn actico, papel absorbente. Actividades Obtencin de preparados temporarios de pices de raz de cebolla. a. Poner una cebolla en un frasco con agua durante unos 5 das hasta que tenga abundantes raicillas de 2-3 cm. Cambiar diariamente el agua del frasco para que esta no se pudra. b. Cortar las races de cebolla enteras cuando tienen 2-3 cm de longitud (es decir, mientras las clulas del pice crecen activamente). c. Fijar en Carnoy (alcohol etlico absoluto o metanol: cido actico glacial 3:1) durante 12-24 horas. d. Si los preparados no se hacen enseguida, guardar el material en alcohol 70% en la heladera. En estas condiciones se conserva varios meses. e. Poner las races en una cpsula de Petri con cido clorhdrico 10% a temperatura ambiente durante 10-30 minutos. Posteriormente lavar con agua. f. Colocar una raz sobre un portaobjetos y cortar el pice blanco. g. Agregar sobre cada pice una gota de colorante (carmn actico). h. Dilacerar los pices con una aguja hasta disgregar los tejidos, y colocar el cubreobjetos. Si no hay suficiente colorante, agregarlo por los bordes del cubre. i. Aplastar las clulas ejerciendo presin sobre el cubreobjetos. Para ello, colocar un trocito de papel absorbente sobre el preparado, sostenerlo con dos dedos de una mano y presionar una mitad del cubre con el dedo gordo de la otra. La fuerza aplicada debe ser lo ms vertical posible, de lo contrario el cubre se desliza y el frotamiento arruina el preparado. Tambin hay que cuidar que la superficie sobre la cual se hace el aplastado no tenga irregularidades y sea horizontal. Repetir la operacin en la otra mitad del cubre. La funcin de los dos dedos que sostienen es evitar que el cubre se mueva. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ ________________________________ ________________________________

Objetivo:

39

Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ ________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ ________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ ________________________________

APOYO

40

CUESTIONARIO 1. Qu cantidad de DNA es requerido antes de que inicie el proceso de mitosis? Por qu?

41

___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ 2. En qu etapa del ciclo celular se encuentra la clula antes de iniciar la mitosis? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ Profase 3. Cmo se mantienen juntas las cromtides hermanas? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ Prometafase 4. Qu ocurre con la membrana nuclear durante esta etapa? Para qu ocurre? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ Metafase 5. Describe qu ocurre con las Cromtides hermanas durante la metafase. ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ Anafase 6. Cul es la funcin del huso mittico? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ 7. Qu proceso bioqumico tiene lugar para que los cromosomas se puedan desplazar? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ 8. En qu posicin se localizan los cromosomas al final de esta fase? ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________ Telofase 9. Describe el proceso que tiene lugar durante la telofase para que se formen dos clulas nuevas. ___________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________

PRCTICO N 10 PROCESO DE MEIOSIS Objetivos Identificar las distintas etapas de la meiosis.

42

En algunas especies de protozoarios, algas y hongos existe un nico tipo de divisin celular: la MITOSIS. Pero en muchos otros organismos simples y en casi todos los complejos, existe adems otro proceso de divisin celular: la MEIOSIS. Este tipo de divisin genera clulas esencialmente diferentes de las progenitoras en cuanto a las combinaciones posibles de su material hereditario, su nmero cromosmico y su cantidad de DNA. En resumen se puede visualizar la Meiosis como una sola duplicacin del material gentico y dos divisiones celulares, originando como producto 4 clulas hijas haploides que pueden ser genticamente diferentes. Este proceso de divisin est asociado a las clulas germinales. Al igual que en la Mitosis, est precedida de una fase S, durante la cual ocurre la mayor parte de la sntesis del DNA (Tambin ocurre algo de sntesis de DNA durante la primera fase meitica). Las dos divisiones celulares sucesivas de la Meiosis se denominan Meiosis I y Meiosis II.Meiosis I PROFASE I En esta fase suceden los acontecimientos ms caractersticos de la meiosis. La envoltura nuclear se conserva hasta el final de la fase que es cuando se desintegra, al mismo tiempo desaparece el nuclolo y se forma el huso. Dada su duracin y complejidad se subdivide en cinco etapas: leptoteno, zigoteno, paquiteno, diploteno y diaciesis. Leptoteno: Los cromosomas aparecen como largos filamentos que de trecho en trecho presentan unos grnulos: los crommeros. Cada cromosoma ya est constituido por dos cromtidas, pero an no se observan bien diferenciadas al microscopio ptico, y se encuentran unidos en diversos puntos a la envoltura nuclear. Zigoteno: En esta etapa los cromosomas homlogos se aparean punto por punto en toda su longitud. Este apareamiento puede comenzar bien por el centro o por los extremos y continuar a todo lo largo. Cuando los homlogos se aparean cada gen queda yuxtapuesto con su homlogo. Paquiteno: Los pares de cromosomas homlogos aparecen ntimamente unidos: bivalentes. Se puede ya observar que cada cromosoma tiene sus dos cromtidas. Mientras estn estrechamente unidos tienen lugar roturas entre cromtidas prximas de cromosomas homlogos que intercambian material cromosmico. Este intercambio se llama entrecruzamiento o sobrecruzamiento (crossing-over) y supone una redistribucin cromosmica del material gentico. Aunque los sobrecruzamientos se producen en esta fase no an visibles y se apreciarn ms tarde en forma de quiasmas. Diploteno: Los bivalentes inician su separacin, aunque se mantienen unidos por los puntos donde tuvo lugar el sobrecruzamiento, estas uniones reciben ahora el nombre de quiasmas y permiten ver los puntos en los que hubo sobrecruzamientos. En cada par de cromosomas homlogos pueden persistir uno o varios quiasmas, todo depende de cuntos sobrecruzamientos hayan tenido lugar a lo largo del bivalente. Diacinesis: Las cromtidas aparecen muy condensadas preparndose para la metafase. La separacin entre bivalentes persiste y permanecen los quiasmas. Al final de la profase la envoltura nuclear ha desaparecido totalmente y ya se ha formado el huso acromtico. METAFASE I Los bivalentes se disponen sobre el ecuador del huso, pero lo hacen de tal forma que los dos cinetocoros que tiene cada homlogo se orientan hacia el mismo polo, que es el opuesto hacia el que se orientan los dos cinetocoros del otro homlogo. ANAFASE I Los cromosomas slo presentan un centrmero para las dos cromtidas. Debido a esto, se separan a polos opuestos cromosomas completos con sus dos cromtidas. No se separan 2n cromtidas, sino n cromosomas dobles. Esta disyuncin o separacin de los cromosomas da lugar a una reduccin cromosmica. Como consecuencia, desaparecen los quiasmas. La distribucin al azar de los cromosomas es una de las fuentes de variabilidad, ya que pueden producirse como consecuencia de este proceso una gran cantidad de gametos (2n, siendo n el nmero haploide).

43

TELOFASE I Es una telofase normal pero que da lugar a dos clulas hijas cuyos ncleos tienen cada uno n cromosomas con dos cromtidas. INTERFASE Puede ser variable en su duracin, incluso puede faltar por completo de manera que tras la telofase I se inicia sin interrupcin la segunda divisin. En cualquier caso, nunca hay sntesis de ADN; es decir, es una interfase sin periodo S. B) DIVISIN II La meiosis II es bsicamente una divisin mittica, en que las cromtidas de cada cromosoma son arrastradas hacia los polos opuestos de la clula. Por cada clula original que entra en meiosis I se producen cuatro clulas en la telofase II. La anafase I separa cromosomas maternos de paternos. La anafase II separa centrmeros hermanos. La importancia de la meiosis como proceso biolgico radica en que, en primer lugar, reduce el material gentico a la mitad, de tal manera que cada clula hija recibe un juego cromosmico haploide completo. En segundo lugar, debido al entrecruzamiento existe la posibilidad de aumentar la variabilidad, aumentando las combinaciones allicas de los gametos. Tambin se producen nuevas combinaciones como resultado del proceso de segregacin independiente, por el cual cromosomas maternos y paternos se combinan en forma independiente en cada gameto. El proceso por el que se generan nuevas combinaciones allicas, ya sea por entrecruzamiento o por segregacin independiente, se llama recombinacin, y es de gran importancia para la evolucin de las especies.

ACTIVIDADES Se le entregar una preparacin de placas metafsicas, identifique algunas estructuras. Adems observando una preparacin de clulas en Meiosis, dibuje e identifique las etapas. Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones: ________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ __________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento:

________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________

44

Observaciones:

__________________________________ __________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ __________________________________

Objetivo: Material: Mtodo: Aumento: Observaciones:

________________________________ ________________________________ ________________________________ ________________________________ __________________________________ __________________________________ CUESTIONARIO

1. Comparativamente, Cree usted que existe alguna ventaja de la Meiosis respecto a la Mitosis? -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2.

Cules son las etapas que ms se parecen entre la meiosis y la mitosis? Por qu? -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

45

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------