IER202 - PRACTICA 01 - Familiarización con … · Web viewDespués de haber leído el documento de...

DR. IVÁN MORA

Facultad de Ciencias de la Salud

FCS103 - BIOLOGÍA CELULAR

MEDICINA

Facultad de Ciencias de la Salud| Guía para Prácticas de Laboratorio

1

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DR. IVÁN MORA


Presentación

La presente Guía para Prácticas de Laboratorio ha sido desarrollada para que los estudiantes de la asignatura de Biología Celulardispongan de la información necesaria para la realización de las prácticas correspondientes de acuerdo a los temas, objetivos yresultados de aprendizaje definidos. En este documento se incluye el proceso en el laboratorio de experimentación e investigación, con los respectivos recursos y resultados esperados, para que el estudiante pueda desarrollar su práctica-taller y la elaboración de sus respectivos informes o cualquier otra evidencia de aprendizaje, que serán evaluadas con las rúbricas que constan en los anexos.

La Guía presenta una secuencia donde se especifica cada sesión de prácticas en laboratorio con su respectivo proceso didáctico y formativo.


2

DR. IVÁN MORA


ASIGNATURA: BIOLOGÍA CELULAR

SIGLA: FCS103 PARALELO: XXX PERIODO:

Fecha: XXXXX PRÁCTICA No: 1

SESIONES:1 TEMA: Fundamentos del trabajo en el laboratorio: Niveles y Normas de Bioseguridad

1.- OBJETIVO GENERAL

Aplicar las normas de bioseguridad durante la realización de las prácticas de laboratorio con la finalidad de evitar accidentes de trabajo, daños a la infraestructura y minimizar los impactos ambientales de acuerdo a los procesos desarrollados.

2.- RESULTADOS DE APRENDIZAJE ESPERADOS

Adquirirás las siguientes habilidades:

1. Identifica los niveles de bioseguridad en los laboratorios de biomedicina2. Localiza las instalaciones del laboratorio docente de acuerdo a los niveles de

bioseguridad3. Implementa las normas de bioseguridad

4. Aplica las normas de bioseguridad en el laboratorio de Biología lo que se demuestra mediante su cumplimiento, ya que ingresan con mandil, no comen, no destapan productos.

5. Desarrolla la responsabilidad en el cumplimiento de las normas.6. Elabora mapa conceptual y/o mental de niveles y normas de bioseguridad

Los resultados esperados en la práctica es la concienciación de la importancia que tiene la normativa de bioseguridad para evitar accidentes durante las prácticas de laboratorio, cuyos resultados son evaluados durante todo el semestre.


3

DR. IVÁN MORA


Materiales

Contenedores para material corto punzante Basureros para desechos biológicos y comunes Manual de Bioseguridad. Esquemas didácticos con las normas de Bioseguridad. Señalética. Mobiliario en buenas condiciones. Reactivos en frascos adecuados. Instrumentos de laboratorio Vestuario: mandil, guantes, mascarilla. Recursos Video sobre niveles de bioseguridad Artículo sobre niveles de bioseguridad en los laboratorios de Biomedicina Equipos Extintor de incendios Equipo de computación Equipo de video. Microscopios en buenas condiciones. Equipos: centrifugadora, baño María, balanza analítica, congeladora, en

buenas condiciones.

4.- ACTIVIDAD FORMATIVA

Prerrequisitos(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)

El conocimiento de las normas de bioseguridad de los estudiantes al ingresar al primer semestre es bajo razón por la cual es fundamental que conozcan las


4

3.- MATERIALES/RECURSOS Y EQUIPOS

DR. IVÁN MORA


normas básicas para realizar prácticas en un laboratorio de Biología Celular, por lo tanto debe dominar los niveles y normas de bioseguridad en los laboratorios de BiomedicinaConocer las instalaciones de un laboratorio de ciencias en general.Haber observado videos acerca de bioseguridad.Las normas de bioseguridad en el laboratorio de Biología son un conjunto de medidas y normas preventivas, destinadas a mantener el control de riesgos laborales procedentes de agentes biológicos, físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos frente a riesgos propios de su actividad diaria, asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos procedimientos no atente contra la seguridad del trabajador. (Cisneros 1997)La Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguridad, y en particular la seguridad biológica son importantes cuestiones de interés internacional, es así como la OMS público en 1983 el primer Manual de bioseguridad en el laboratorio, en el que se mostraba a todos lo países la importancia de aceptar y aplicar conceptos básicos de seguridad biológica y a elaborar códigos nacionales para la manipulación sin riesgo de microorganismos patógenos en el laboratorio que se encontraban dentro de las barreras nacionales. Desde 1983 muchas países han seguido la orientación presente en el manual para elaborar estos códigos de prácticas. (OMS 2005)

(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)

Conceptualización de seguridad, niveles, función de un laboratorio de Biología Celular

Descripción de la actividad:

Durante la práctica los estudiantes ubicarán las instalaciones del laboratorio docente para determinar el nivel de bioseguridad que se debe aplicar, llenarán las actividades en la guía de laboratorio indicadas por el docente y realizarán un mapa conceptual o mental sobre los niveles de Bioseguridad, detallando el tipo de muestras que se puede analizar en cada uno, la vestimenta más adecuada para trabajar en el laboratorio y las características físicas de los laboratorios según el


5

DR. IVÁN MORA


nivel de bioseguridad

5.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Video: http://www.youtube.com/watch?v=Bv7D_b9_-ng

Nelson A. and FOCUS Workgroup (s.f.). Marzo 2014

http://cphp.sph.unc.edu/focus/vol5/issue1/5-1BiosafetyLevels_espanol.pdf

Laboratorio de Bioseguridad.

http://www.monografias.com/trabajos87/bioseguridad-laboratorio/biosegurid

ad-laboratorio.shtml#ixzz30aGmIwmU

Laboratorio de Bioseguridad

http://www.monografias.com/trabajos87/bioseguridad-laboratorio/biosegurid

ad-laboratorio.shtml#ixzz30aGmIwmU

6.- MECANISMO DE EVALUACIÓN Y ANEXOS

Actividad #1: Lea individualmente las normas de bioseguridad

Normas de Bioseguridad en el Laboratorio Las siguientes normas están establecidas para proteger tu salud y disminuir los

riesgos de contaminación de los materiales y productos del laboratorio, para evitar

accidentes que pongan en riesgo su integridad y la de personas ajenas al trabajo


6


http://www.youtube.com/watch?v=Bv7D_b9_-ng

DR. IVÁN MORA


del laboratorio, así como al funcionamiento de los equipos del laboratorio.

Atuendo Usar mandil y guantes para realizar cualquier actividad dentro del

laboratorio

Llevar zapatos cerrados y evitar el uso de ropa que deje la piel al

descubierto y fuera de la protección del mandil

No abandonar el laboratorio con el mandil puesto y no usarlo de saco o

suéter para salir a la calle y otros espacios públicos

Trabajar siempre con el cabello recogido

Comportamiento No correr dentro del laboratorio No comer, fumar o tomar bebidas, masticar chicles y golosinas No maquillarse, ni cepillar el cabello No emplear ningún equipo de laboratorio (refrigeradores, horno

microondas) para almacenar o preparar alimentos No almacenar material biológico vivo No se permite la entrada de mascotas Cualquier accidente (material roto, derrame de sustancias, cortes,

quemaduras) debe ser informado inmediatamente al docente responsable de los laboratorios

Los usuarios no podrán invitar a otras personas a que desarrollen sus propios proyectos o prácticas sin previa autorización del docente responsable del laboratorio

Materiales, Reactivos y Equipos Dejar todo lo que se use en su sitio No sacar ningún material, reactivo o equipo del laboratorio Verificar que se cuente con todas los materiales y reactivos antes de

comenzar cualquier experimento


7

DR. IVÁN MORA


Los usuarios no podrán tomar temporal o permanentemente los materiales o reactivos de otros usuarios, sin previo aviso

Etiquetar todos los frascos en los que se deposite cualquier sustancia. El etiquetado debe incluir: Nombre de la sustancia, Nombre de quien depositó la sustancia y fecha

Antes de destapar cualquier frasco se debe leer su etiquetado No dejar destapados frascos que contengan sustancias químicas, tubos,

puntas y cualquier otro material estéril, o material potencialmente tóxico Cuando se destape un frasco la tapa debe ser colocada sobre la mesa boca

arriba para evitar contaminación del área de trabajo No oler directamente el contenido de ningún frasco No degustar el contenido de ningún frasco No utilizar recipientes vacíos de sustancias tóxicas, inflamables o irritantes

de mucosas y piel para almacenar otras sustancias químicas o material biológico

No manipular sustancias tóxicas, irritantes, inflamables, cancerígenas o mutagénicas fuera de las áreas destinadas para estos usos

Todo el material y reactivos se almacenarán estrictamente en los espacios destinados para ello

Los tubos eppendorf deben almacenarse en las cajas destinadas para este fin para evitar pérdidas y caídas

El material de vidrio roto debe ser depositado inmediatamente en el contenedor y área destinada para este fin

Todo el equipo y material de vidrio utilizado debe entregarse perfectamente limpio

Desechar los residuos tóxicos (tanto sustancias como materiales) únicamente en las áreas destinadas para ello. Preguntar antes de desechar soluciones por la alcantarilla

No operar equipos cuyo manejo esté autorizado únicamente al docente responsable del laboratorio

Solicitar asesoría para el manejo adecuado de los equipos En caso de que un equipo se haya descompuesto debido al mal uso y

manejo, el usuario deberá informar inmediatamente al responsable del laboratorio


8

DR. IVÁN MORA


Áreas individuales de trabajo Mantener limpias y ordenadas las áreas que ocuparon durante su trabajo Limpiar el espacio personal de trabajo antes y después de haber terminado

los experimentosÁreas comunes

Mantener cerradas las puertas del laboratorio Mantener en funcionamiento óptimo llaves de agua y extintores Mantener libres de obstáculos las salidas normales y de emergencia Permitir el libre paso entre las mesas de trabajo y las salidas del laboratorio Ante una situación de urgencia mantener la calma y abandonar

tranquilamente el laboratorio, sin correr, empujar o gritar

Los usuarios que infrinjan alguna de las normas descritas serán amonestados a criterio del docente responsable del laboratorio.Actividad # 2: Forme grupos de 5 personas. Conversen y relacionen las normas de Bioseguridad en el laboratorio leídas anteriormente que deberían tomar en cuenta dentro de un hospital. Anote 5 normas que serían comunes a ambos lugares y 2 normas que serían aplicables a un hospital y que no estén dentro de la lista de normas de laboratorio.

Normas comunes al laboratorio y a un hospital:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Normas para un hospital que no consten dentro de esta guía:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________


9

DR. IVÁN MORA


Actividad # 3: Lea el documento adjunto y realice un mapa conceptual o mapa mental que incluya las ideas principales respecto a los niveles de bioseguridad:

Nelson A. and FOCUS Workgroup (s.f.).Niveles de bioseguridad en el Laboratorio. Focus on Field Epidemiology. North Carolina Center for Public Health Preparedness—The North Carolina Institute for Public Health, 5(1): 1-6. Recuperado el 7 de marzo de 2014 de http://cphp.sph.unc.edu/focus/vol5/issue1/5-1BiosafetyLevels_espanol.pdf

Actividad #4: RELACIONEDespués de haber leído el documento de la actividad # 3regrese a la Actividad 1 y marque con las siglas CP a las normas de bioseguridad que correspondan a la contención primaria y con las siglas CS a las normas de bioseguridad que correspondan a contención secundaria.

PRACTICA____________________ PARALELO________CATEGORIA 4 Excelente 3 Bueno 2 Regular 1 por mejorar NOTA

Cuestionario

El cuestionario está completo y correctamente contestado.

El cuestionario está incompleto, pero las preguntas contestadas están correctas.

El cuestionario está incompleto, y las respuestas contestadas son incorrectas.

No hay cuestionario.

Referencias Bibliográficas

Varias fuentes de antecedentes de renombre son usados y citados correctamente. El material es traducido en las propias palabras de los estudiantes.

Unas pocas fuentes de antecedentes de renombre son usadas y citadas correctamente. El material es traducido por los estudiantes en sus propias palabras.

Unas pocas fuentes de antecedentes son usadas y citadas correctamente, pero algunas fuentes no son de renombre. El material es traducido por los estudiantes en sus propias palabras.

El material es directamente copiado en lugar de ponerlo en palabras propias y/o las fuentes de antecedentes están citadas incorrectamente.


10

DR. IVÁN MORA




Fecha: XXXXX PRÁCTICA No:2 SESIONES:1 TEMA: Instrumentación en los laboratorios: Uso y manejo de materiales y equipos de laboratorio

1.- OBJETIVO GENERAL

1.- Seleccionar y manipular de manera correcta los materiales y equipos de laboratorio según el procedimiento que se vaya a realizar.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1.- Describir los materiales, reactivos y equipos de laboratorio con la finalidad de aprender su funcionamiento para un mejor aprendizaje.2.- Analizar los equipos y materiales utilizados en el laboratorio de Biología Celular considerando su nombre, presentación, material de construcción, usos, mediante una tabla didáctica.3.- Realizar los esquemas gráficos de las observaciones realizadas.



1. Manipula adecuadamente los materiales y equipos de laboratorio2. Emplea los materiales y equipos de laboratorio según el procedimiento

específico


11

1. Sintetiza los materiales de laboratorio de acuerdo a su material constructivo, resistencia al calor, capacidad (ml).

2. Relaciona el volumen y la capacidad de los materiales.

DR. IVÁN MORA


3. Investiga en otras fuentes los equipos que se utiliza acorde a la carrera o especialización.

6.- Manejo de líquidos con diferentes tipos de pipetas

Materiales

Materiales de vidrio Materiales de vidrio pyrex Materiales de metal Materiales de porcelana Materiales de plástico Materiales de madera

Pipetas Pasteur de vidrio y de plástico Pipetas graduadas Micropipetas con puntas Vaso de precipitación Probetas Matraz Erlenmeyer Matraz aforado Tubos de ensayo Piseta Pera de goma Chupón de goma Pipeteador Agitador magnético Mortero y pistilo Cajas petri Portaobjetos Cubreobjetos Gradillas Pinzas

Varillas de vidrio Espátulas


12


DR. IVÁN MORA


Crisol Embudo Papel para limpieza de lentes Hojas de bisturí Mangos para bisturí

Equipos

Microscopio Centrífuga Balanza de precisión Baño maría Incubadora Plancha térmica (hotplate) Cámara de flujo



Normas de Bioseguridad en el laboratorio Conocer las normas de bioseguridad para la identificación y manipulación

de los materiales, equipos y reactivos del laboratorio de Biología celular. Conocer los materiales constructivos, usos y funciones de los materiales

básicos que utilizaron anteriormente en otros niveles educativos. En el laboratorio en las prácticas es esencial la utilización de instrumentos

para el manejo de los químicos y demás aparatos contenidos en él. Hay una serie de instrumentos desde el termómetro que sirve para medir la temperatura hasta el cilindro graduado el cual lo empleamos para los volúmenes de un químico. Es por eso necesario el reconocimiento de estos, cual y como es su uso, por eso muy importante reconocerlos.

Todos realizan una acción específica de acuerdo a la situación en que nos encontremos. Muchas personas lo haya difíciles de manejar, solo al ver su forma y estado de delicadez. Eso es erróneo son fáciles dependiendo del buen manejo y cuidado con que los toquen. Los tubos de ensayos son los


13

DR. IVÁN MORA


mas utilizados desde servir un líquido bien sea toxico o indefenso para su observación hasta para hervir o calentar una sustancia soluble.

(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)

Clasificación de los materiales de laboratorio Fórmulas matemáticas para el cálculo de volúmenes Porcentajes y otros


El aprendizaje de los materiales que se utiliza en laboratorio es fundamental ya que ello conlleva a evitar accidentes y sobre todo permite que el alumno disfrute de la investigación científica, pues aprende a descubrir su capacidad creativa y valora su interés por la carrera. Cada elemento que se utiliza en el laboratorio debe el estudiante saber su manipulación, precauciones para su manejo.Se explicará el uso y manejo de los materiales y equipos de laboratorio y luego cada estudiante podrá manipular algunos de los materiales como pipetas y micropipetas para la absorción de líquidos.


o Nelson A. and FOCUS Workgroup (s.f.). Niveles de bioseguridad en el Laboratorio. Focus on Field Epidemiology. North Carolina Center for Public Health Preparedness—The North Carolina Institute for Public Health, 5(1): 1-6. Recuperado el 7 de marzo de 2014 de http://cphp.sph.unc.edu/focus/vol5/issue1/5-1BiosafetyLevels_espanol.pdf


14


DR. IVÁN MORA


o


Actividad # 1: IDENTIFIQUE

De forma individual, identifique cada uno de los materiales y equipos de laboratorio que se mencionan en la lista a continuación:

Material de laboratorio

Nombre Presentación Usos

Pipetas Pueden ser graduadas o de simple aforo

Instrumento volumétrico para pequeñas cantidades de líquidos con precisión en el rango de los mililitros (ml). NUNCA PIPETEAR CON LA BOCA

Pera Sirve para succionar líquidos con las pipetas


15

http://images.google.com.ec/imgres?imgurl=http://www.computerhuesca.es/~fvalles/laboratorio/pera.GIF&imgrefurl=http://www.computerhuesca.es/~fvalles/laboratorio/pera.htm&h=377&w=210&sz=122&hl=es&start=1&usg=__kN3BESDuACPWrmqCGzS-hRvOZi0=&tbnid=k8W5ZKhyZqvleM:&tbnh=122&tbnw=68&prev=/images?q=pipeta+pera&gbv=2&hl=es

DR. IVÁN MORA


Micropipeta Instrumento volumétrico para pequeñas cantidades de líquidos con precisión en el rango de microlitros (µl)

Chupón de goma Sirve para succionar líquidos con las pipetas Pasteur

Pipetas Pasteur Plástico o vidrio Sirve para tomar pequeños volúmenes de líquidos que no requieren ser medidos

Probetas De 5ml. a 2L. Instrumento volumétrico para medir volúmenes más grandes de lo que se mediría con las pipetas


16

DR. IVÁN MORA


Vaso de precipitación (o de precipitados)

Diversos volúmenes Su función es la de contener líquidos. SU GRADUACIÓN NO ES EXACTA

ErlenMeyer (o matraz) Diversos volúmenes Se usa en lugar del vaso de precipitación para líquidos que van a ser agitados y/o calentados. Su forma evita pérdidas de la solución por la agitación o evaporación y su cuello permite usar tapones. Ejm: medios de Microbiología. SU GRADUACIÓN NO ES EXACTA


17

DR. IVÁN MORA


Balón (o balón de destilación)

Aforados y no aforados Contiene líquidos que requieren de calentamiento uniforme (contando con soporte universal, aro, nuez y mechero)

Matraz aforado De 10 ml. a 2L. Recipiente volumétrico de mucha exactitud. Se parece a un balón, pero su fondo es plano y su cuello largo está aforado. Sirve para preparar soluciones de concentración conocida

Varilla de vidrio Instrumento que sirve para revolver soluciones

Agitador magnético Vienen en juegos de diversos tamaños Imán especializado para funcionar en conjunto con una planca térmica (hotplate) de agitación. Mezclar sustancias de forma automática


18

http://images.google.com.ec/imgres?imgurl=http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/d6/Volumetric_flask.PNG&imgrefurl=http://www.eaglemedia.nazwa.pl/es/wiki/Aforo.html&h=300&w=160&sz=4&hl=es&start=26&usg=__3T8TF3gqRpFjR0Ia2s2hf63Hais=&tbnid=xiD86WEYrAj22M:&tbnh=116&tbnw=62&prev=/images?q=matraz+aforado&start=20&gbv=2&ndsp=20&hl=es&sa=N

DR. IVÁN MORA


Cajas Petri Pueden ser plásticas o de vidrio y tienen diversas presentaciones

Contiene elementos para observación o medios: Sólidos en el caso de bacterias y líquidos en aplicaciones de cultivos más complejos

Tubos de ensayo Contiene volúmenes pequeños: caldos de cultivo, reacciones de volúmenes pequeños (ml)

Tubos cónicos (o Falcon) Tubos de plástico con el fondo en forma de cono. Contienen volúmenes pequeños (ml.)

Tubos eppendorf Tubos de plástico que contienen volúmenes pequeños en microlitros (µl)


19

DR. IVÁN MORA


Embudo Utensilio cónico que sirve para trasvasar

Gradilla Dependiendo de su tamaño, sirve para colocar tubos (de ensayo, cónicos, Eppendorf)

Pinzas Utensilio de sostén para material peligroso o caliente

Portaobjetos y Cubreobjetos

Placa de vidrio que contiene diferentes tipos de extensiones para ser observadas al microscopio. El cubreobjetos es una placa de vidrio más delgada que el portaobjetos que sirve


20

http://es.geocities.com/fedelcas/imagepr05.jpg

DR. IVÁN MORA


para cubrir o extender el contenido del portaobjetos

Mortero Recipiente en el que se muele o pulveriza material sólido

Pistilo Instrumento que se utiliza para triturar material sólido en el mortero

Crisol Recipiente de porcelana que contiene material destinado a ser calcinado

Espátula Utensilio que sirve para traspasar pequeñas cantidades de sólidos


21

DR. IVÁN MORA


Mechero de alcohol Instrumento con el cual se obtiene una llama de fuego a base de alcohol

Mechero de Bunsen Instrumento con el cual se obtiene una llama de fuego a base de gas

Piseta Recipiente que contiene líquidos, en especial agua destilada destinada a usos comunes en el laboratorio

TOME EN CUENTA QUE:

El material de vidrio graduado es más exacto que el material graduado de plástico

Para aforar una sustancia correctamente, se debe procurar tener la línea de aforo a la altura de los ojos


22

DR. IVÁN MORA


El alcohol con el que funciona el mechero de alcohol es el industrial o el etílico absoluto

Las preparaciones que elabore en el material de vidrio debe ser guardada en frascos aparte. Evite subutilizar el material volumétrico

Equipos de Laboratorio

Nombre Presentación Utilidad

Microscopio Observar estructuras que no se diferencian a simple vista

Baño María Equipo que sirve para calentar lenta y uniformemente a una sustancia líquida o sólida


23

DR. IVÁN MORA


Centrífuga Máquina que acelera procesos de sedimentación en base a la densidad de los componentes de las sustancias y a la fuerza centrífuga conferida por la máquina

Plancha térmica (Hot plate) Máquina en forma de plancha que sirve para calentar y/o agitar

Incubadora Máquina que sirve para simular condiciones (temperatura y gases) en las cuales se desarrollarían células o sus componentes. Pruebas de envejecimiento, secado de material


24

DR. IVÁN MORA


Cámara de flujo Maquinaria que mediante un flujo de aire crea un ambiente estéril

Autoclave Máquina que sirve para esterilizar material del laboratorio a base de temperatura y presión

Balanzas Máquina que sirve para pesar sustancias

TOME EN CUENTA QUE:


25

DR. IVÁN MORA


Exactitud y precisión no es lo mismo. Un equipo puede medir “exactamente” lo mismo siempre sin ser “preciso” por problemas de calibración

Equipos como la balanza analítica y la centrífuga se pueden descalibrar cuando se mueven del sitio en el que se encuentran o cuando se deja abierta la puerta de estos equipos

Los tubos que se coloquen dentro de la centrífuga deben estar balanceados, es decir que deben contener el mismo volumen y deber estar dispuestos uno frente a otro siempre en pares

Actividad # 2: INVESTIGUE

1. ¿De dónde viene el nombre “Baño María”?. Escriba un resumen de su historia.

2. ¿Explique qué representan los siguientes símbolos?

SIMBOLO SIGNIFICADO


26

DR. IVÁN MORA



Cuestionario





Referencias Varias fuentes de Unas pocas Unas pocas El material es


27

DR. IVÁN MORA


Bibliográficas

antecedentes de renombre son usados y citados correctamente. El material es traducido en las propias palabras de los estudiantes.

fuentes de antecedentes de renombre son usadas y citadas correctamente. El material es traducido por los estudiantes en sus propias palabras.

fuentes de antecedentes son usadas y citadas correctamente, pero algunas fuentes no son de renombre. El material es traducido por los estudiantes en sus propias palabras.

directamente copiado en lugar de ponerlo en palabras propias y/o las fuentes de antecedentes están citadas incorrectamente.

ASIGNATU

RA: BIOLOGÍA CELULAR


Fecha: XXXXX PRÁCTICA No:3

SESIONES:1 TEMA: Instrumentación en los laboratorios: Uso y manejo del microscopio óptico compuesto


28

DR. IVÁN MORA


OBJETIVO GENERAL

Identificar las partes principales de un microscopio óptico compuesto y aplicar las reglas para el uso correcto del microscopio .1.- Realizar el manejo del microscopio compuesto, su estructura, funcionamiento, mantenimiento y precauciones.2.- Calcular el tamaño de la muestra y del campo de visión.3.- Elaborar esquemas gráficos.2.- OBOBJETIVOS OOBJETIVOS ESPECIFICOS

1. Identificar las partes del microscopio, su mecanismo óptico, mecánico, ubicación y funcionamiento de los objetivos.2. Calcular el diámetro del campo visual, radio, tamaño aproximado de las células para: 4x,10x,40x3. Realizar el montaje de muestras húmedas utilizando vegetales: cebolla blanca4. Realizar los esquemas gráficos respectivos.



1. Desarrolla técnicas básicas de preparación de muestras para observación microscópica

2. Aplica secuencialmente los pasos para realizar un enfoque correcto en el microscopio óptico.

3. Realiza el montaje de las muestras y observar utilizando las medidas correctas del microscopio.


29

1.- OBJETIVOS

DR. IVÁN MORA


4. Realiza los cálculos matemáticos para diámetro para los diferentes aumentos.

5. Realiza gráficos de células de cebolla observados en diferentes lentes objetivos del microscopio óptico

Materiales

Pipetas Pasteur de vidrio y de plástico Pisetas Chupón de goma Cajas petri Portaobjetos Cubreobjetos Pinzas de metal Papel para limpieza de lentes Hojas de bisturí Mangos para bisturí Microscopio: 4x,10x,40x,100x Papel milimetrado Tijeras Letras del periódico: a, i Cebolla blanca

Reactivos Azul de metileno al 1% 0.05ml/a 0.9ml/g Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/g Agua destilada 5ml/a 90ml/g

Equipos


30


DR. IVÁN MORA


Microscopios ópticos



Leer el documento adjunto sobre el uso y manejo del microscopio ópticoAnexo:

Uso y Manejo del microscopio óptico compuesto

PARTES DE UN MICROSCOPIO ÓPTICO

Sistema óptico


31

DR. IVÁN MORA


OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo

OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la

preparación DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador

Sistema mecánico

SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,

binocular, etc REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,

cambiar los objetivos TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico (aproxima el enfoque) y

micrométrico

(consigue el enfoque correcto)

MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina

completamente. Si el microscopio se guardó correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones

2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x o colocar el de 10 aumentos

(10x) si la preparación es de bacterias4. Para realizar el enfoque:

a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la


32

DR. IVÁN MORA


preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambosb. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el

objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino

5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión

6. Empleo del objetivo de inmersión: a. Bajar totalmente la platinab. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que

nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceitec. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino

entre éste y el de 40xd. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luze. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de

inmersiónf. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la

lente toque la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente

g. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aún menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande

h. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3

i. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el


33

DR. IVÁN MORA


objetivo de inmersión en posición de observaciónj. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial

para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio

MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES

1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda

2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo

3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica

4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio

5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción

6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador)

7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No


34

DR. IVÁN MORA


cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular

8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol

9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos

La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el micrómetro, aunque existen otras medidas que también pueden usarse:

1000 µm = 1mm1000 nm = 1 µm 10000 Å = 1 µm

A medida que el poder de amplificación o la magnificación del microscopio aumentael espacio observado bajo el campo óptico disminuye

Material constructivo, función, Historia de invención del microscopio, investigadores que aportaron en su invención hasta la actualidad, clases de microscopios. Función de los lentes oculares, objetivos.Espectro de luz.

Descripción de la actividad:El microscopio es una herramienta de trabajo en donde el alumno aprende a manipular cada una de sus partes razón por la cual debe conocer su estructura, función , montaje, así como las precauciones y cuidados que debe tener durante y después de las prácticas.


35

DR. IVÁN MORA


Observación de epidermis de cebollaen el microscopio

1. Cortar la cebolla por la mitad y separar una de las capas de la misma2. Marcar con el bisturí o con las tijeras una cuadrícula de pequeño tamaño (1

cm de lado) en la parte interna o cóncava de la capa3. Separar el fragmento de epidermis con las pinzas y colocarlo en el centro

del portaobjetos4. Colocar el porta en una caja de Petri, añadir 3-5 gotas de colorante (azul de

metileno) sobre la muestra y dejarlo actuar durante cinco minutos 5. Lavar con cuidado el exceso de colorante y secarlo con un poco de papel

de filtro6. Añadir una gota de agua a la muestra7. Colocar el cubre apoyándolo por un lado y dejándolo caer para que no

queden burbujas 8. Observar la preparación al microscopio utilizando los lentes objetivos de 4x,

10x, 40x y 100x9. Realizar un dibujo detallado de las células y rotular


MICROSCOPIO. http://www.docstoc.com/docs/119148874/PARTES-DE-UN-MICROSCOPIO-%EF%BF%BDPTICO

http://laboratorioembrio.es.tl/Manejo-del-Microscopio.htm ABEL W. ParicahuaIto


Detalle de las guías para la ejecución de las tareas: Informe, preguntas, video, etc.

Deben Incluir rúbricas donde se especifican los criterios de evaluación y su respectiva ponderación.


36

http://laboratorioembrio.es.tl/Manejo-del-Microscopio.htm

http://www.docstoc.com/docs/119148874/PARTES-DE-UN-MICROSCOPIO-%EF%BF%BDPTICO

http://www.docstoc.com/docs/119148874/PARTES-DE-UN-MICROSCOPIO-%EF%BF%BDPTICO

DR. IVÁN MORA


Formato básico:

PRACTICA__________________

PARALELO________

CATEGORIA 4 Excelente 3 Bueno 2 Regular 1 por mejorar NOTA

Presentación Consta el tema, objetivos, Consta el tema,

objetivos

Consta el tema, objetivos


Fundamento teórico

Constan palabras claves, fundamento teórico, comentario personal.Materiales.


Constan palabras claves, fundamento teórico

Constan palabras claves

Resultados

Metodología o procedimiento.ResultadosAnálisis de resultados

Metodología o procedimiento.

procedimiento

Correlación Conclusiones.Correlación

Conclusiones

Además se incluyen formatos, plantillas, modelos, u otros, necesarios para la realización de la tarea.

CORRELACIÓN

Cuestionario Medicina:

1. Investigar sobre el trasplante de células madre2. Explicar cuál es la función del azul de metileno en el área de la salud

Cuestionario Odontología:

1. Investigar sobre el trasplante de células madre dentales2. Explicar cuál es la función del azul de metileno en el área de la salud


37

DR. IVÁN MORA



Cuestionario












38

DR. IVÁN MORA


Enfoque con los objetivos de 4x, 10x, y 40x

Logra enfocar con los lentes objetivos: 4x, 10x, 40x y 100x.

Logra enfocar solamente con tres de los cuatro lentes objetivos.

Logra enfocar solamente con dos lentes objetivos.

No logra enfocar con ningún lente objetivo.

Limpieza del microscopio al terminar la observación

Limpia el lente de 100x con el papel correcto, baja la intensidad de luz y la platina, y deja el microscopio en el lente de menor aumento.

Limpia el lente de 100x con el papel correcto, baja la intensidad de luz y la platina, pero no deja el microscopio en el lente de menor aumento.

Limpia el lente de 100x con el papel correcto, baja la intensidad de luz pero no baja la platina ni deja el microscopio en el lente de menor aumento.

Limpia el lente de 100x con el papel correcto, pero no baja la intensidad de luz ni la platina, ni deja el microscopio en el lente de menor aumento.

Partes del microscopio

Ubica todas las partes del microscopio, y conoce su función.

Ubica todas las partes del microscopio, pero no conoce la función de todas sus partes.

Ubica algunas partes del microscopio, y no conoce la función de todas.

No ubica todas las partes del microscopio, y no conoce la función de todas.

PRÁCTICA SIGLA: XXXX PARALELO: XXX

PERIODO:


39

DR. IVÁN MORA


PRÁCTICA No: 4 SESIONES: 1 Tema: Observación de microorganismos unicelulares de agua dulce

OBJETIVO GENERAL:

1. Aplicar técnicas de recolección y mantenimiento de microorganismos que habitan diversos tipos de aguas estancadas, determinando las condiciones ecológicas y biológicas de vida.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS1. Reconocimiento de microorganismos de agua dulce estancada mediante aprendizaje por descubrimiento, para desarrollar la habilidad de observación 2. Identificar protozoarios de agua dulce como: paramecios, euglenas, vorticela, amebas etc. Y describir las observaciones de los microorganismos en el informe.

1.- OBJETIVO GENERAL:


Microscopio compuesto . Muestras de agua estancada y preparada Mandil - Agua con lechuga, hojarasca, paja, cerveza. Guantes de látex Portaobjetos Cubreobjetos Contenedor de plástico Pipeta pasteur


40

DR. IVÁN MORA


Papel de limpieza Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/g Giemsa 0.1ml/a 1.8ml/g



Conoce técnicas para recolectar protozaorios.Aprende a realizar un montaje húmedo con microorgasnismos.Identifica protozoarios utilizando el microscopio compuesto.Realiza los esquemas gráficos de las observaciones realizadas con los objetivos secos 4X,10X, 40X, .Calcula el tamaño aproximado de los paramecios utilizando un aumento de 10X, 40X.

Prerrequisitos:PROTOZAORIOSDel griego protos, primero y zoon, animal; son en su mayor parte animales unicelulares de tamaño microscópico. Se conocen 30 000 protozoos diferentes, y el numero de individuos es superior al de todos los demás animales. Es un grupo muy amplio de animales microscópicos unicelulares que se encuentran en los suelos húmedos, el agua dulce o salada y como parásitos comensales de otros seres vivos. Carecen de pigmentos fotosintéticos propios, y sobreviven alimentándose ya sea fagocitando partículas o células más pequeñas o absorbiendo del medio substancias orgánicas disueltas. Los protozoarios presentan diversas estructuras de locomoción; en algunos, las comentes citoplásmicas forman prolongaciones de la célula llamadas seudópodos, otros tienen flagelos y los más complejos presentan cilios. Algunas formas tienen


41

DR. IVÁN MORA


cubiertas de naturaleza calcárea o silicosa que pasan a formar parte de los sedimentos marinos al morir la célula. Algunos protozoarios producen enfermedades graves como la amibiasis, el paludismo, la coccidiosis y la enfermedad del sueño. A pesar de ser unicelulares, algunos protozoarios han alcanzado un alto grado de complejidad estructural presentando elaborados mecanismos de irritabilidad que controlan su locomoción. Como ejemplo citaremos tres protozoarios comunes: la Entamoebahistolytica que produce la disentería amibiana, el Trypanosomacruzi que parásita la sangre humana, y el Parameciumcaudatum que vive libre en el agua dulce estancadaParamecium se alimenta de bacterias, pequeños protozoos, algas y levaduras. El constante batir de los cilios del surco oral produce una corriente de agua hacia el citostoma, en el cual hay partículas de alimento, y los movimientos del pennículo reúnen el alimento en el extremo posterior de la citofaringe, dentro de una vacuola acuosa. La vacuola alcanza un cierto tamaño, se contrae y empieza a desplazarse por el citoplasma, convertida en vacuola digestiva; a continuación se inicia la formación de otra vacuola en su lugar. Debido a corrientes endoplasmáticas (movimientos de ciclosis ), las vacuolas se desplazan según el camino definido, primero hacia atrás, luego hacia delante y en sentido aboral, y de nuevo hacia atrás cerca del surco oral. Al principio el contenido de las vacuolas es acido, pero gradualmente se convierte en alcalino.(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)Material constructivo, función, Características generales y específicas de los protozoarios.Clasificación de los protozoarios.Estructura de un protozoario.Biología de un protozoario.Ecología de un protozoario.



42

DR. IVÁN MORA


JIMÉNEZ, G.L.F. Y MERCHANT, L.H. BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR. Person Educación. México.2003

facultad.bayamon.inter.edu/yserrano/MICROPROtozoarios.htm www.saberdeciencias.com/.../153-protozoarios-caracteristicas-clasificacio




Formato básico:

PRACTICA__________________

PARALELO________


Presentación Consta el tema, objetivos, Consta el tema,

objetivos



Fundamento teórico



Constan palabras claves, fundamento teórico

Constan palabras claves

Resultados

Metodología o procedimiento.ResultadosAnálisis de resultados

Metodología o procedimiento.

procedimiento

Correlación Conclusiones.Correlación

Conclusiones


43

DR. IVÁN MORA



CORRELACIÓN:

Consultar protozoarios parásitos que causan enfermedades humanas como Entamoheba gingibalis, entamoheba Histolílica, Tripanosoma cruci, otros.



Fecha: XXXXX PRÁCTICA No: 5 SESIONES: 1

TEMA: La célula y sus componentes: Carbohidratos

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALDeterminar las propiedades de los carbohidratos y su función celular

OBJETIVO ESPECIFICO1. Obtener almidón de yuca, papa y plátano2. Indentificar la amilosa y la amilopectina3. Observar al microscipio gránulos de almidón




44

DR. IVÁN MORA


1. Infiera las propiedades de carbohidratos mediante varias reacciones con otras sustancias

2. Aplique pruebas químicas para la identificación de carbohidratos

6. Comprueba la solubilidad de carbohidratos en diferentes solventes7. Diferencia los carbohidratos a través del Reactivo de Benedict y de la

solución de Lugol

Materiales Tubos de ensayo Pipetas Pasteur de vidrio y de plástico Cajas Bipetri de plástico Hoja de bisturí con mango Micropipetas 100-1000ul Vasos de precipitación de 250 ml Gradillas Marcadores para vidrio Pipetas graduadas de 5 ml Pipetas graduadas de 10 ml Peras para pipetas graduadas Chupones para pipetas graduadas Espátulas Recipientes para pesar Pinzas para tubos de ensayo Pisetas Puntas para micropetas de 100-1000 ul Guantes desechables Mascarillas

Reactivos Sacarosa 2g/a 36g/p Glucosa 2g/a 36g/p


45


DR. IVÁN MORA


Lactosa 2g/a 36g/p Almidón 2g/a 36g/p Xilol (xileno) 0.16ml/a 2,88ml/p Reactivo de Benedict 0.16ml/a 2,88ml/p Solución de Lugol 0.16ml/a 2,88ml/g Etanol absoluto 5ml/a 90ml/g Agua destilada 5ml/a 90ml/g

Equipos Plancha térmica (hotplate) Balanza de precisión



1. Leer sobre carbohidratos: composición, clasificación y función en la célula


A. Solubilidad1. Preparar en tubos de ensayo 2 ml. de disoluciones de sacarosa, glucosa,

lactosa y almidón al 15 %. Agitar vigorosamente cada disolución y déjarlas reposar por 30 segundos

2. Repetir el procedimiento anterior pero en lugar de agua añadir xilol (usar mascarilla y guantes)

3. Registrar todas sus observaciones4. Comprobar el carácter reductor de los glúcidos frente al reactivo de

BenedictColocar 2 ml. de soluciones de sacarosa, glucosa, lactosa y almidón al 5% en tubos de ensayo. (Preparar disoluciones a partir de las soluciones del PASO 1, con la fórmula C1V1=C2V2, usar solamente los tubos con agua destilada)


46

DR. IVÁN MORA


5. Añadir 2 ml. de Reactivo de Benedict y calentar a Baño María

B. Prueba de Lugol1. Sobre una caja Petri colocar un trozo de cebolla y un trozo de papa2. Añadir dos gotas de solución de lugol sobre la cebolla y dos sobre la papa3. Observar el cambio de coloración:

Un color amarillo o café es NEGATIVO Un color azul o negro es POSITIVO

4. Registre sus observaciones


Campbell, N.A. y Reece, J.B. (2007) Biología. (7ª ed.). Madrid, España: Panamericana.


Se realizará un informe según el siguiente formato:

NOMBRE: FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA:

TITULO DE LA PRÁCTICA

INTRODUCCIÓN TEÓRICA:(Escribir una introducción corta sobre el tema a tratar en la práctica respectiva incluyendo las citas bibliográficas respectivas, de preferencia actualizadas)

OBJETIVOS: (Poner objetivos de la práctica)

METODOLOGÍA:(Describir el procedimiento llevado a cabo durante la práctica enumerando cada


47

DR. IVÁN MORA


paso, no es necesario realizar una lista de materiales ya que estos deberán incluirse en la descripción de la metodología)

RESULTADOS:(Pueden ser presentados en tablas, gráficos, y/o cualquier otro recurso que muestre de manera organizada los datos obtenidos)Nota: en el caso de utilizar tablas o gráficos añadir una explicación de los datos y rotular adecuadamente.

CONCLUSIONES:(En base a los resultados obtenidos teniendo como base los datos teóricos).

CUESTIONARIO:(Preguntas que consten en la guía de laboratorio de cada práctica).

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:Pueden ser de libros y/o publicaciones científicas. Al finalizar el informe se consignarán las referencias completas por orden alfabético. También se les puede asignar un número y hacer referencia a él en el texto, en este caso simplemente se ordenarán numéricamente las referencias completas al final del informe.

En esta página web, aparece la siguiente pantalla, y en el recuadro señalado en rojo entran a las normas APA:http://blogs.udla.edu.ec/honestidad/

Cuestionario Medicina

1.¿Qué tipo de solvente es el agua? 2.¿Qué tipo de solvente es el xilol?3.¿Explique qué es un azúcar reductor y cómo actúa?4.¿Por qué son factores importantes el pH y los azúcares reductores en la diarrea infantil?

Cuestionario Odontología

1.¿Qué tipo de solvente es el agua?


48

https://mail.udla.edu.ec/OWA/redir.aspx?C=b6fac70c50da4fb0b021c7647932aeae&URL=http%3A%2F%2Fblogs.udla.edu.ec%2Fhonestidad%2F

DR. IVÁN MORA


2.¿Qué tipo de solvente es el xilol?3.¿Explique qué es un azúcar reductor y cómo actúa?4.¿Explique qué son los hidratos de carbono metabolizables y cuál es su relación con la presencia de caries


Introducción

El reporte representa un preciso y minucioso entendimiento de los conceptos científicos esenciales en el laboratorio.

El reporte representa un preciso entendimiento de la mayoría de los conceptos científicos esenciales en el laboratorio.

El reporte ilustra un entendimiento limitado de los conceptos científicos esenciales en el laboratorio.

El reporte representa un entendimiento incorrecto de los conceptos científicos esenciales en el laboratorio.

Objetivos

Especifica claramente los objetivos de la práctica

Especifica solamente algunos de los objetivos

Los objetivos no son claros

No especifica los objetivos de la práctica

Metodología

Los procedimientos están enlistados con pasos claros. Cada paso está enumerado y es una oración completa.

Los procedimientos están enlistados en un orden lógico, pero los pasos no están enumerados y/o no son oraciones completas.

Los procedimientos están enlistados, pero no están en un orden lógico o son difíciles de seguir.

Los procedimientos no enlistan en forma precisa todos los pasos del experimento.

Resultados Una representación Una Una Los datos no son


49

DR. IVÁN MORA


profesional y precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y las tablas están etiquetadas y tituladas.

representación precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y tablas están etiquetadas y tituladas.

representación precisa de los datos en forma escrita.

demostrados o no son precisos.

Conclusión

La conclusión incluye los descubrimientos que apoyan la hipótesis, posibles fuentes de error y lo que se aprendió del experimento.

La conclusión incluye los descubrimientos que apoyan la hipótesis y lo que se aprendió del experimento.

La conclusión incluye lo que fue aprendido del experimento.

No hay conclusión incluida en el informe.

Cuestionario





Apariencia/Organización

El reporte de laboratorio está mecanografiado y usa títulos y subtítulos para organizar visualmente el material.

El reporte de laboratorio está escrito a mano con esmero y usa títulos para organizar visualmente el material.

El reporte de laboratorio está escrito o mecanografiado con esmero, pero el formato no ayuda a organizar visualmente el material.

El reporte de laboratorio está escrito a mano y se ve descuidado y con tachones, múltiples borrones y/o desgarres y pliegues.




Unas pocas fuentes de antecedentes son usadas y citadas correctamente, pero algunas fuentes no son de renombre. El material es traducido por los estudiantes en



50

DR. IVÁN MORA


sus propias palabras.



Fecha: XXXXX PRÁCTICA No:6 SESIONES: 1 TEMA: La célula y sus componentes: Lípidos

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALDeterminar las propiedades de los lípidos a través de pruebas físicas y químicas.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS1.- Reconocer la presencia de lípidos mediante coloración con Sudam III.

2.- Comprobar la solubilidad de los lípidos en diversos solventes.

3. Comprobar la saponificación de los lípidos.



1. Relacione las características de los lípidos con la función biológica


51

DR. IVÁN MORA


2. Aplica pruebas químicas para la identificación de la presencia de lípidos: Saponificación Tinción Solubilidad

3. Separa lípidos según la densidad4. Reconoce lípidos por medio del Reactivo Sudán IV

Tubos de ensayo, gradilla, varillas de vidrio, mechero, vasos de precipitados, pipetas de 5 ml, bisturí, goteros, baño María, porta objetos, cubre objetos, frasco lavador, cubeta de tinción, grasa animal. REACTIVOS: Solución de NaOH al 20%, solución de Sudán III, tinta china roja, éter, cloroformo o acetona, aceite de oliva, solución de macerado de papa, jugo de naranja.

Materiales Tubos de ensayo Pipetas graduadas Peras para pipetas graduadas Tubos cónicos Tapones para tubos de ensayo Vasos de precipitación de 250 ml Pipetas de plástico Guantes desechables Mascarillas Marcadores para vidrio

Reactivos Agua destilada 5ml/a 90ml/p Xilol 0.1ml/a 1.8ml/p Etanol 5ml/a 90ml/p Sudán IV 0.16ml/a 2.88ml/p Aceite de comer 0.1ml/g 1.8ml/p


52


DR. IVÁN MORA


Equipos Plancha térmica (hotplate)



Estructura y función biológica de los lípidos FUNDAMENTOSe llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son sólo un tipo de lípidos, aunque el más conocido.

Los lípidos forman un grupo de sustancias de estructura química muy heterogénea, siendo la clasificación más aceptada la siguiente:

Lípidos saponificables: Los lípidos saponificables son los lípidos que contienen ácidos grasos en su molécula y producen reacciones químicas de saponificación. A su vez los lípidos saponificables se dividen en:Lípidos simples: Son aquellos lípidos que sólo contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos lípidos simples se subdividen a su vez en: Acilglicéridos o grasas (cuando los acilglicéridos son sólidos se les llama grasas y cuando son líquidos a temperatura ambiente se llaman aceites) y Céridos o ceras.Lípidos complejos: Son los lípidos que además de contener en su molécula carbono, hidrógeno y oxígeno, también contienen otros elementos como nitrógeno, fósforo, azufre u otra biomolécula como un glúcido. A los lípidos complejos


53

DR. IVÁN MORA


también se les llama lípidos de membrana pues son las principales moléculas que forman las membranas celulares: Fosfolípidos y Glicolípidos.Lípidos insaponificables: Son los lípidos que no poseen ácidos grasos en su estructura y no producen reacciones de saponificación. Entre los lípidos insaponificables encontramos a: Terpenos, Esteroides y Prostaglandinas.Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)Material constructivo, función, Deben constar las temáticas y/o referencias bibliográficas que el estudiante debe dominar antes de realizar la práctica.Descripción de la actividad:Desarrollo de la especificación de la práctica o descripción del problema.Cada elemento que se utiliza en el laboratorio debe el estudiante saber su manipulación, precauciones para su manejo.

1. Solubilidad de los lípidos: Colocar 2 ml de aceite en 3 tubos de ensayo y añadir en el uno 2ml. de agua, en el segundo tubo 2 ml. de xilol y en el tercer tubo 2 ml. de etanol

2. Detección de lípidos:Una vez formadas las dos fases, en los tres tubos del experimento anterior, dejar caer unas gotas de Sudán III y agitar. Dejar reposar los tubos y anotar los resultados. Explicar que sucedió


54

DR. IVÁN MORA



Campbell N.A. y Reece, J.B. (2007) Biología. (7ª ed.). Madrid, España: Panamericana.


Se realizará un informe según el formato adjunto de la práctica No. 4.


1.¿Cuál es la densidad del agua, aceite, etanol y xilol? 2.¿Qué son las grasas saturadas y las insaturadas?3.¿En qué consiste la prueba de perfil lipídico?


1.¿Cuál es la densidad del agua, aceite, etanol y xilol? 2.¿Cuál es la relación entre la placa bacteriana y la presencia de lípidos?3.¿En qué consiste la prueba de perfil lipídico?


Introducción






55

DR. IVÁN MORA


Objetivos





Metodología





Resultados

Una representación profesional y precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y las tablas están etiquetadas y tituladas.

Una representación precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y tablas están etiquetadas y tituladas.

Una representación precisa de los datos en forma escrita.

Los datos no son demostrados o no son precisos.

Conclusión





Cuestionario







El reporte de laboratorio está escrito a mano con esmero y usa títulos para

El reporte de laboratorio está escrito o mecanografiado con esmero, pero

El reporte de laboratorio está escrito a mano y se ve descuidado y con tachones,


56

DR. IVÁN MORA


organizar visualmente el material.

el formato no ayuda a organizar visualmente el material.

múltiples borrones y/o desgarres y pliegues.






ASIGNATU SIGLA: FCS103 PARALELO: PERIODO:


57

DR. IVÁN MORA


RA: BIOLOGÍA CELULAR

XXX

Fecha: XXXXX

PRÁCTICA No:7

SESIONES: 1 TEMA: La célula y sus componentes: Proteínas

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERAL

Identificar el papel de las proteínas en el funcionamiento y estructura celular

OBJETIVOS ESPECÍFICOS1. Obtener proteínas de la leche: caseína y suero2. Obtener proteínas de la albúmina de huevo 3. Comprobar la desnaturalización de las proteínas



Relaciona el funcionamiento celular con la desnaturalización de proteínas Determina la presencia de proteínas mediante pruebas químicas

Realiza la desnaturalización de las proteínas desnaturalizadas Reconoce proteínas por medio del Reactivo de Biuret

Materiales


58


DR. IVÁN MORA


Tubos de ensayo con tapones Pipetas Pasteur Pipetas de plástico Vaso de precipitación de 50 ml Vaso de precipitación de 250 ml Gradillas Pipetas graduadas de 10 ml Pipetas graduadas de 5 ml Peras para pipetas graduadas Chupones para pipetas Pasteur Espátulas Recipientes para pesar Pinzas para tubos de ensayo Pisetas Varilla de vidrio Probeta de 100 ml Guantes desechables Mascarillas

Reactivos Agua destilada 5ml/a 90ml/p Etanol absoluto 5ml/a 90ml/p HCl 1M 1ml/a 18ml/p NaCl 1M 1ml/a 18ml/p NaOH 1 M 1ml/a 18ml/p NaOH 10% 1ml/a 18ml/g Sulfato de cobre 1% 1ml/a 18ml/g

Equipos Plancha térmica Balanza de precisión


59

DR. IVÁN MORA




Estructura y función de las proteínasFUNDAMENTOEntre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

1. COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS FUNDAMENTOLas proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

2. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET) FUNDAMENTOEntre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.


60

DR. IVÁN MORA


El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

(Antes de comenzar este ejercicio, deberás dominar lo siguiente:)Material constructivo, función,

Deben constar las temáticas y/o referencias bibliográficas que el estudiante debe dominar antes de realizar la práctica.

Descripción de la actividad:Desarrollo de la especificación de la práctica o descripción del problema.Cada elemento que se utiliza en el laboratorio debe el estudiante saber su manipulación, precauciones para su manejo.

Desnaturalización:

La desnaturalización hace que los enlaces que mantiene estable la conformación globular de las proteínas se destruyan. Así las proteínas toman una conformación filamentosa que les hace precipitar en forma de coágulos.

Albúmina y leche

1. Realizar un orificio pequeño en la cáscara de un huevo, separar con cuidado la clara en un vaso de precipitación

2. Preparar una solución acuosa de albúmina, mezclando la clara por un tiempo corto y añadir luego con 125 ml de agua destilada y 0,75 gr NaCl

3. En cinco tubos de ensayo realizar el siguiente procedimiento:


61

DR. IVÁN MORA


- 1er tubo: 2ml sol. Albúmina (exponer a altas temperaturas)- 2do. tubo: 2ml sol. albúmina + 1ml HCl 1M- 3er. tubo: 2ml sol. albúmina + 1ml NaCl 1M- 4to. tubo: 2ml sol. albúmina + 1ml NaOH 1M- 5to. tubo: 2ml sol. albúmina + 2ml etanol absoluto

Anotar sus observaciones

Repetir los pasos 1, 2, 3, 4 y 5 reemplazando la solución de albúmina con 2 ml de LECHE en cada tubo

Reacción de BIURET

1. Colocar 3 ml de solución de ALBÚMINA en un tubo de ensayo limpio

2. Agregar 2 ml de una solución de hidróxido de sodio al 10%; mezclar suavemente y luego añadir 1 ó 2 gotas de solución de sulfato de cobre al 1%

3. Observar y anotar los resultados, tomando en cuenta que:- Color violeta: POSITIVO para presencia de proteínas- Color azul: NEGATIVO para presencia de proteínas

Nota: el grupo amino de las proteínas en presencia del reactivo de Biuret, hace que el reactivo cambie de azul a violeta.Repetir los pasos 1 y 2 con 3 ml de LECHE en lugar de solución de albúmina y en otro tubo repetir el procedimiento con AGUA destilada




62

DR. IVÁN MORA




1. En qué porcentaje se encuentran las proteínas en el organismo humano?2. Describa en 5 líneas qué proteínas se encuentran en la sangre y cuál es su

función3. Qué síntomas principales se observan cuando hay un déficit de proteínas

en el organismo?4. ¿Qué factores influyeron para que se produzca la desnaturalización de las

proteínas albúmina y leche?5. ¿Qué tipo de enlaces son los más representativos de las proteínas?

Cuestionario Odontología1. En qué porcentaje se encuentran las proteínas en el organismo humano?2. Qué proteínas principales se encuentran en la saliva y en la dentina.

Explique la función de esas proteínas para el organismo?

3. ¿Qué factores influyeron para que se produzca la desnaturalización de las proteínas albúmina y leche?

4. ¿Qué tipo de enlaces son los más representativos de las proteínas?


IntroducciónEl reporte representa un preciso y minucioso entendimiento de los conceptos científicos esenciales en el laboratorio.

El reporte representa un preciso entendimiento de la mayoría de los conceptos

El reporte ilustra un entendimiento limitado de los conceptos científicos

El reporte representa un entendimiento incorrecto de los conceptos científicos


63

DR. IVÁN MORA


científicos esenciales en el laboratorio.

esenciales en el laboratorio.

esenciales en el laboratorio.

Objetivos





Metodología





Resultados





Conclusión





Cuestionario





Apariencia/ El reporte de laboratorio El reporte de El reporte de El reporte de


64

DR. IVÁN MORA


Organización

está mecanografiado y usa títulos y subtítulos para organizar visualmente el material.

laboratorio está escrito a mano con esmero y usa títulos para organizar visualmente el material.

laboratorio está escrito o mecanografiado con esmero, pero el formato no ayuda a organizar visualmente el material.

laboratorio está escrito a mano y se ve descuidado y con tachones, múltiples borrones y/o desgarres y pliegues.








Fecha: XXXXX PRÁCTICA No8 SESIONES: 1 TEMA: La célula y sus componentes: Ácidos nucleicos

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALExtraer ADN mediante una técnica básica que se puede aplicar a muestras de varios tipos.Identificar a las proteínas y ácidos nucleicos como componentes químicos de la célula, sus propiedades más importantes y cómo éstas influyen en las estructuras


65

DR. IVÁN MORA


celulares.OBJETIVO ESPECÍFICOS

1. Obtener ADN de estructuras celulares, animales y vegetales2. Obtener ADN utilizando enzimas de vegetales.



Aplica secuencialmente los pasos básicos para extraer ADN Extrae ADN a partir de muestras vegetales

Materiales Pipetas Pasteur Mechero Pipetas de plástico Mango para bisturí Hoja de bisturí Vaso de precipitación de 50 ml Pipetas graduadas de 5 ml Pipetas graduadas de 10 ml Peras para pipetas graduadas Chupones para pipetas Pasteur Probetas de 50 ml Gradillas Espátulas Recipientes para pesar Pisetas Tubos cónicos de 15 ml Guantes desechables


66


DR. IVÁN MORA


Morteros de porcelana y pistilo Cuchillos Cernideras

Reactivos Agua destilada 5ml/a 90ml/p NaCl 0.38g/a 6.84g/p Etanol absoluto 5ml/a 90ml/p Bicarbonato sódico 0.25g/a 4.5g/p Solución de HCl concentrado 2ml/a 36ml/p Alcohol etílico 5ml/a 90ml/g Solución de SO4Cu al 1% 2ml/a 36ml/g NaOH al 20% 1ml/a 18ml/p Clara de huevo o leche Solución de albúmina al1-2%

Equipos Balanza Centrífuga para tubos de 15 ml



Estructura y funcionamiento del ADNFUNDAMENTOLos ácidos nucleicos son un tipo de biomoléculas orgánicas que se hallan en la célula (si son organismos unicelulares) o las células (si son pluricelulares) de todos los seres vivos, y en los virus. Los ácidos nucleicos son macromoléculas


67

DR. IVÁN MORA


(moléculas enormes), que se encargan del almacenamiento, la transmisión y el uso de la información; son polímeros cuyos monómeros son los nucleótidos.

ADNEstas macromoléculas están constituidas por carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y fósforo, y sus monómeros, los nucleótidos, se componen de bases nitrogenadas (púricas y pirimídicas), monosacáridos(son la ribosa y la desoxirribosa), y ácido fosfórico.

Los nucleótidos se mantienen ligados por medio de enlaces covalentes, denominados fosfodiéster, entre el monosacárido (también conocido como azúcar) de un nucleótido, y el ácido fosfórico de otro. En el caso del ARN el azúcar es la ribosa, mientras que en el ADN el azúcar es la desoxirribosa.

Podemos clasificar a los ácidos nucleicos en dos tipos fundamentales: el ADN o DNA (ácido desoxirribonucleico) y el ARN o RNA (ácido ribonucleico); el primero se ubica en la cromatina (dentro del núcleo) de las células eucariotas, o en el citoplasma de las células procariotas, y es el portador de los genes, por medio del cual se establecen las características propias y funciones de cada individuo, y se transmite la información genética, de generación en generación. La estructura del ADN es helicoidal, de doble hélice, ya que está formada usualmente por dos cadenas polinucleotídicas (complementarias) que poseen el mismo eje.La desnaturalización hace que los enlaces que mantiene estable la conformación globular de las proteínas se destruyan. Así las proteínas toman una conformación filamentosa que les hace precipitar en forma de coágulos.

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.


68

DR. IVÁN MORA




Lee todo en: Concepto de ácidos nucleicos » Sobre Conceptos PROTEÍNASDesnaturalización:


Extracción de ADN1. Preparar un tampón o buffer de reacción con los siguientes ingredientes:

- 30 ml de agua destilada- 0,38 g de NaCl- 1,25 g de bicarbonato sódico- 1,25 ml de detergente líquido

2. Cortar la muestra (tomate de árbol y cebolla) en pedazos pequeños y macerar con un poco de agua destilada fría en un mortero

3. Colocar en un tubo limpio 4 ml de la muestra triturada y añadir 10 ml del tampón frío y agitar fuertemente durante 2 minutos

4. Centrifugar los tubos durante 5 minutos a baja velocidad5. Retirar 5 ml del sobrenadante y colocar en otro tubo limpio6. Añadir 10 ml de etanol absoluto frío

Nota: Al añadir el etanol hacerlo despacio y por las paredes del tubo que debe estar inclinado

7. Introducir una pipeta pasteur hasta debajo de la separación entre el alcohol y el tampón y agitar suavemente de adelante hacia atrás durante un minuto

8. Observar los fragmentos de ADN



69

DR. IVÁN MORA





1. Describa 5 ejemplos de tejidos del cuerpo humano de los cuales se pueda extraer ADN para su estudio molecular

2. Consulte qué función tiene la proteinasa K en el proceso de extracción de ADN

3. Escriba 2 ejemplos de enfermedades que se puedan diagnosticar con el estudio del ADN

4. Anote 2 instituciones en la ciudad de Quito en las cuales se realicen estudios de ADN y especifique que tipos de análisis se realizan


1. Describa 5 ejemplos de tejidos del cuerpo humano de los cuales se pueda extraer ADN para su estudio molecular

2. Consulte qué función tiene la proteinasa K en el proceso de extracción de ADN

3. Explique detalladamente cómo se extrae ADN de algunas piezas dentales y cuál es su utilidad.

4. Anote 2 instituciones en la ciudad de Quito en las cuales se realicen estudios de ADN y especifique que tipos de análisis se realizan



70

DR. IVÁN MORA




Formato básico:

RACTICA____________________ PARALELO____________________


Cuestionario








Unas pocas fuentes de antecedentes son usadas y citadas correctamente, pero algunas fuentes no son de renombre. El material es traducido por los estudiantes en sus propias pal



71

DR. IVÁN MORA



CORRELACIÓN:

Investigue los avances científicos acerca del ADN según su carrera.

PRÁCTICA SIGLA: XXXX PARALELO: XXX PERIODO:

PRÁCTICA No: 9 SESIONES: 1 Tema.: AISLAMIENTO DE CASEINA Y LACTOSA

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALObtener proteínas de la leche para realizar su aislamiento mediante reacciones químicas


72

DR. IVÁN MORA



Vasos de precipitados Mechero, rejilla y trípode Varilla de vidrio o espátula Trompa de vacío Papel secamanos de laboratorio Erlenmeyer Leche descremada Acético glacial 2ml/a 36ml/p Carbonato cálcico en polvo 1g/a 18g/p Etanol 95% 5ml/a 90ml/p Etanol acuoso 25% 5ml/a 90ml/p Carbón activo 1g/a 18g/p


Prerrequisitos:FUNDAMENTO

Componentes de la leche

Los principales componentes de la leche son:

- Agua- Calcio- Iones de sales y otros minerales- Grasa


73

DR. IVÁN MORA


- Glúcidos- Proteínas

Dentro de las proteínas, casi el 80% de éstas lo forma la caseína.La caseína

La caseína es una proteína, más específicamente es una fosfoproteína, presente en la leche y que está fuertemente asociada al contenido de calcio de la misma. Se le considera como fosfoproteína ya que en su composición hay presencia de ácido fosfórico.

Dentro de la composición total de la leche líquida, la caseína representa alrededor del 2.7%.Obtención de la caseína láctica

A nivel industrial, existen tres tipos de caseína que se pueden obtener: caseína ácida, caseína al cuajo y caseína láctica. En el caso de la última, el proceso de obtención es el siguiente:

- Se le quita la nata a la leche. La nata es una capa espesa que se forma en la superficie de la leche cuando es hervida.- La leche desnatada es sometida a un proceso de acidificación, lo que produce una masa.- Con la ayuda de fermentos lácticos se separa la caseína láctica.Principales aplicaciones de la caseína láctica

Las principales aplicaciones que tiene la caseína incluyen las siguientes:

- Fabricación de pinturas especiales- Fabricación de plásticos- Aclarado de vinos- Preparados farmacéuticos- Preparación de tejidos


74

DR. IVÁN MORA


Las proteínas G son un tipo de proteínas que realiza una importante función en la transmisión de señales de las células eucariotas, es decir, las células que tienen su información genética encerrada dentro de una doble membrana.

proteínas G

Este tipo de proteínas tienen la característica de interaccionar con el guanosíntrifosfato (GTP), lo que provoca la hidrólisis de este nucleótido a guanosíndifosfato (GDP). La G de su nombre (proteínas G) proviene de la letra inicial de guanosina.

Funciones de las proteínas GLa función de las proteínas G es realizar la trasducción de señales en las células actuando como si se tratara de un interruptor. De esta forma, un elemento externo puede acceder a los receptores celulares asociados, estimulándolos para desencadenar reacciones por parte de la célula. Por ejemplo, un ligando puede de esta forma acceder a un receptor celular que esté asociado a una proteína G y esto provocaría que la célula comience una serie de actividades enzimáticas.

Receptores de proteínas GLos receptores relacionados con las proteínas G tienen una estructura con forma de serpentín. Abarcan multitud de proteínas debido a que este término identifica a un grupo de receptores transmembrana cuya misión es detectar señales del exterior de la célula y transmitirlas al interior celular, desencadenando de esta forma, las respuestas correspondientes.

Estos receptores están presentes en células eucariotas, coanoflagelados, levaduras, animales y plantas. Son capaces de reconocer multitud de ligandos como las feromonas, odorivectores, hormonas, neurotransmisores y también muchos tipos de proteínas y péptidos.



75

DR. IVÁN MORA





proteinas.org.es/s/protproteinas.org.es/s/proteina+de+caseinaeina+de+caseína



76

DR. IVÁN MORA


CORRELACIÓN:

Investigar la función de las proteínas, del suero de la leche en el sistema inmunológico



Fecha: XXXXX

PRÁCTICA No:10

SESIONES:1 TEMA: Funcionamiento celular: Acción enzimática

1.- OBJETIVO


77



Formato básico:


DR. IVÁN MORA


OBJETIVO GENERAL

Identificar la acción de las enzimas en el funcionamiento celular.OBJETIVO ESPECÍFICODemostrar algunas propiedades de las enzimas y su importancia en el metabolismo celular utilizando extractos de hígado de res y aguacate.



1. Reconoce la presencia de enzimas en tejidos animales y vegetales

2. Comprueba los efectos de la desnaturalización de enzimas en el funcionamiento celular

3. Reconoce la importancia de los peroxisomas.


78

PROTEÍNASa. Reconocimiento de la catalasa

La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

b. Desnaturalización de la catalasa.c. Hidrólisis del almidón

DR. IVÁN MORA


4. Identifica muestras modificadas por la acción de enzimas: amilasa y catalasa y muestras inalteradas por desnaturalización de enzimas.

Materiales

Mechero, rejilla y trípode Varilla de vidrio o espátula Trompa de vacío Papel secamanos de laboratorio Erlenmeyer Pipetas de plástico con medida Cajas Petri de plástico Mango para bisturí Hojas de bisturí Vaso de precipitación de 50 ml Vaso de precipitación de 150 ml Gradillas Marcador para vidrio Pipetas graduadas de 5 ml Peras para pipetas graduadas Espátulas Recipientes para pesar Pinzas para tubos de ensayo Pisetas Tubos cónicos de plástico Guantes desechables Cuchillos Mechero Rejilla Trípode


79


DR. IVÁN MORA


Reactivos Agua destilada 5ml/a 90ml/p Almidón de papa Solución de Lugol 1ml/a 18ml/p Agua oxigenada 1ml/a 18ml/p Carbón activo 1g/a 18g/p Leche descremada Acético glacial 1ml/a 18ml/p Carbonato cálcico en polvo 1g/a 18g/p Etanol 95% 5ml/a 90ml/p Etanol acuoso 25% 5ml/a 90ml/p

Equipos Balanza de precisión Plancha térmica (hotplate)



Estructura y funcionamiento de las enzimas

FUNDAMENTOMuchas proteínas primitivas evolucionaron gradualmente hasta transformarse en una amplia gama de enzimas capaces de catalizar un amplio rango de reacciones químicas intracelulares y extracelulares.Las enzimas aceleran reacciones químicas para que ocurran más rápido de lo que podrían hacerlo sin la adición de estas proteínas catalíticas y promueven las


80

DR. IVÁN MORA


alteraciones químicas de sus ligandos denominados sustratos. Las enzimas tienen un alto poder catalítico y un alto grado de especificidad.Se han clasificado en la base de datos de las enzimas aproximadamente 3.700 tipos diferentes de enzimas, cada una de las cuales cataliza una reacción química única o un conjunto de reacciones estrechamente relacionadas. Aunque la mayoría de las enzimas están ubicadas dentro de las células, algunas son secretadas y funcionan en sitios extracelulares, como la sangre, la luz del tubo digestivo o incluso fuera del organismo.

Función de la membrana citoplasmática:- Actúa como barrera para la mayor parte de las moléculas solubles en H2O, siendo mucho más selectiva que la pared celular.- Contiene enzimas biosintéticos que actúan en la producción de energía y síntesis de la pared celular.- Las células bacterianas no contienen orgánulos como las mitocondrias y cloroplastos de las células eucariotas; sin embargo, la membrana citoplasmática de muchas bacterias se extiende dentro del citoplasma formando unos túbulos que se llaman mesosomas. Estos mesosomas pueden localizarse cerca de la membrana citoplasmática o más adentro en el citoplasma. A estos últimos, los mesosomas centrales, se une el material nuclear de la célula y se piensa que intervienen en la replicación del DNA y división celular. Los mesosomas periféricos parecen estar implicados en la secreción de ciertos enzimas como son las penicilinasas que destruyen la penicilina. También actúan como centros con actividad respiratoria o fotosintética ya que este sistema de membranas aumenta la superficie disponible para estas actividades.

En bioquímica, se llaman enzimas a las sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas, siempre que sea termodinámicamente posible (si bien no pueden hacer que el proceso sea más termodinámicamente favorable). En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en diferentes moléculas, los productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran en tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones


81

DR. IVÁN MORA


enzimáticas.

Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece sólo con algunas reacciones de entre otras posibilidades, el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el metabolismo que ocurre en cada célula. A su vez, esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no catalizada.

Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas por las reacciones que ellas catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más específicas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.000 reacciones bioquímicas distintas.No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como el fragmento 16S de los ribosomas en el que reside la actividad peptidiltransferasa).

La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los activadores son moléculas que incrementan la actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH (porcentaje de acidez o phfisiològico), la concentración del sustrato y otros factores físico-químicos.

Algunas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la síntesis de antibióticos y productos domésticos de limpieza. Además, ampliamente utilizadas


82

DR. IVÁN MORA


en variados procesos industriales, como son la fabricación de alimentos, destinción de jeans o producción de biocombustibles.

Sus funciones: Facilitan y aceleran: reacciones químicas que realizan los seres vivos, permitiendo así los procesos bioquímicos dentro de los organismos.

Liberan: la energía acumulada en las sustancias para que el organismo la utilice a medida que la necesite.

Descomponen: grandes moléculas en sus constituyentes simples permitiendo así que por difusión puedan entrar o salir de la célula

Conclusión:

La mayor parte de las enzimas catalizan la transferencia de electrones, átomos o grupos funcionales.

Algunas enzimas, como la pepsina y la tripsina, que intervienen en la hidrólisis de muchos tipos de proteínas, controlan muchas reacciones diferentes, mientras que otras como la ureasa, son muy específicas y sólo pueden acelerar una reacción.

El estudio de las enzimas representa lo fundamental de la vida. Ya que estas tienen el poder de catalizar, facilitar y acelerar, determinados procesos orgánicos.

Las enzimas son vitales para el desenvolvimiento del cuerpo humano, al igual que los genes las enzimas, son consideradas como unidades fundamentales del ser vivo.

La vida en si es un conjunto de procesos enzimáticos que unidos entre si representan la unidad fundamental de todo ser vivo.

La relación de la enzima con el gen está debidamente comprobada, es el caso del


83

DR. IVÁN MORA


albinismo, en nosotros los humanos.




a. Reconocimiento de la catalasa

La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

1. Colocar en tres tubos de ensayo distintos: 3 trozos pequeños de hígado de pollo, 3 trozos de corazón de pollo y 3 trozos de papa

2. Añadir 5 mililitros de agua oxigenada en cada tubo3. Observar que reacción se produce

b. Desnaturalización de la catalasa.

1. Colocar en dos tubos de ensayo distintos: 3 trozos pequeños de hígado de pollo y 3 de corazón de pollo

2. Añadir agua para hervir la muestra durante unos 4 minutos3. Retirar el agua sobrante4. Añadir 3 ml de agua oxigenada


84

DR. IVÁN MORA


5. Observar el resultado

Hidrólisis del almidón

La enzima amilasa o ptialina, presente en la saliva, actúa sobre el polisacárido almidón, hidrolizando el enlace O-glicosídico, por lo que el almidón se terminará por transformar en unidades de glucosa

1. Marcar tres tubos de ensayo con el número 1, 2 y 32. Añadir a los tres tubos 3 mililitros de una solución diluida de almidón3. Añadir al tubo 2 y 3 una pequeña cantidad de saliva4. Al tubo 1 y 2 añadir 4 gotas de lugol y observar los resultados5. Al tubo 3 CALENTAR en baño maría durante 4 minutos y LUEGO añadir

4 gotas de lugol6. Observar y anotar los resultados


Campbell, N.A. y Reece, J.B. (2007) Biología. (7ª ed.). Madrid, España: Panamericana.www.monografias.com ›



Cuestionario Medicina1. ¿Qué son los peroxisomas y cuál es su función?2. Explique cuáles son las causas, síntomas y tratamiento del Síndrome

cerebrohepatorrenal de Zellweger


85

DR. IVÁN MORA


3. Explique la causa y los síntomas de la enfermedad genética adrenoleucodistrofia ligada al cromosoma X (ADL) y cómo intervienen los peroxisomas

Cuestionario Odontología1. ¿Qué son los peroxisomas y cuál es su función?2. ¿Qué función cumple la catalasa en el organismo del ser humano y cuál es

la función del agua oxigenada sobre las heridas?3. Explique qué importancia tiene la α-amilasa salival para el organismo

humano


Introducción





Objetivos





Metodología





Resultados Una representación Una Una Los datos no son


86

DR. IVÁN MORA


profesional y precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y las tablas están etiquetadas y tituladas.

representación precisa de los datos en tablas y/o gráficas. Las gráficas y tablas están etiquetadas y tituladas.

representación precisa de los datos en forma escrita.

demostrados o no son precisos.

Conclusión





Cuestionario












Unas pocas fuentes de antecedentes de renombre son usadas y citadas correctamente. El material es traducido por los estudiantes en sus propias

Unas pocas fuentes de antecedentes son usadas y citadas correctamente, pero algunas fuentes no son de renombre. El material es traducido por los



87

DR. IVÁN MORA


palabras. estudiantes en sus propias palabras.



Fecha: XXXXX PRÁCTICA No:11

SESIONES:2 TEMA: Funcionamiento celular: Transporte celular

1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALEntender el funcionamiento y propiedades de la membrana celular OBJETIVO ESPECÍFICODeterminar el transporte celular a través de la membrana en huevos de codorniz



Compruebe la permeabilidad selectiva de las membranas celulares Infiera la estructura y funcionamiento celular Verifique el proceso de difusión a través de las membranas biológicas


88

DR. IVÁN MORA


Glóbulos rojos modificados estructuralmente luego de ser expuestos a diferentes concentraciones de soluto, observados en el microscopio

Experimento: huevos de codorniz expuestos en diferentes medios

Materiales Pipetas de plástico con medida Pipetas Pasteur de vidrio Cajas tripetri Pisetas Lancetas Algodón (o torundas con alcohol) Curitas Chupones para pipetas Pasteur Portaobjetos Cubreobjetos Papel para limpieza de lentes Guantes desechables Marcadores para vidrio

Reactivos Agua destilada 5ml/a 90ml/p NaCl 0,9 % 2ml/a 36ml/p NaCl 10 % 2ml/a 36ml/p Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/p Alcohol antiséptico 5ml/a 90ml/p

Equipos

Microscopios



89


DR. IVÁN MORA



Transporte celular, estructura y funcionamiento de la membrana celular

Uno de los aspectos importantes del metabolismo celular lo constituye la eliminación de sustancias no aprovechadas por la célula, que han sido producidas durante la degradación de sustancias alimenticias. Durante el aprovechamiento de las proteínas (catabolismo), uno de los productos intermedios que suelen formarse lo constituye el peróxido de hidrógeno, sustancia que sirve como antiséptico y destruye la organización celular si su concentración llega a ser alta en las células, por lo cual hay que degradarla hasta agua y oxígeno. Fuera de la célula, la reacción se lleva a cabo muy lentamente, pero estas reacciones pueden modificar su velocidad en presencia de enzimas, proteínas que se activan durante estos procesos y que son reutilizadas continuamente debido a que no son consumidas durante las reacciones.




Procedimiento A:

PROCEDIMIENTO A REALIZAR ANTES DE LA PRÁCTICALos integrantes de cada mesa de trabajo deben dividirse el trabajo de la siguiente manera:


90

DR. IVÁN MORA


1. Colocar seis huevos de codorniz en jugo de limón durante 4 horas aproximadamente, hasta que toda la cáscara se desintegreNota: los huevos deben estar completamente sumergidos en el jugo de limónSi luego de 4 o 5 horas máximo no se ha desintegrado toda la cáscara raspar con mucho cuidado la cáscara sobrante para liberar al huevo de la misma en su totalidad

Una vez que los huevos se han liberado de toda la cáscara, sacar del jugo de limón2. Anotar la forma y tamaño de los huevos3. Luego sumergir a los huevos durante TODA LA NOCHE en los siguientes

líquidos (un huevo por cada líquido diferente): - coca cola- vinagre- agua con sal- miel- gelatina con sabor disuelta en un poco de agua- agua con azúcar

NOTA 1: NO SUMERGIR AL MISMO HUEVO EN TODOS LOS LÍQUIDOS SOLAMENTE EN UNO DE ELLOS.NOTA 2: Este paso lo tienen que realizar la noche anterior a la práctica correspondiente a cada grupo

PROCEDIMIENTO A REALIZAR DURANTE LA PRÁCTICA4. Observar y anotar el tamaño y la forma del huevo5. Abrir el huevo y colocarlo en una caja petri. Anotar sus observaciones6. Realizar un cuadro comparativo explicando que sucedió en cada uno de los

seis huevos

Procedimiento B:1. Obtener sangre de la yema del dedo utilizando una lanceta estéril


91

DR. IVÁN MORA


2. Colocar una gota de sangre en tres cajas petri: la primera con 1 ml de NaCl al 0,9%, la segunda con 1 ml de NaCl al 10% y la tercera con 1 gota de agua destilada

3. Luego de 2 minutos tome una gota de cada medio y coloque en tres portaobjetos

4. Coloque un cubreobjetos5. Observe en el microscopio6. Anotar y graficar los resultados





Cuestionario Medicina1. Explique en qué consiste el transporte activo, la difusión pasiva o simple y

la difusión facilitada en las células2. Qué es diálisis. Explique una aplicación médica de este proceso3. Explique que provoca la disminución de la turgencia cutánea en humanos

Cuestionario Odontología1. Explique en qué consiste el transporte activo, la difusión pasiva o simple y

la difusión facilitada en las células2. Investigue sobre las manifestaciones orales que se observan en pacientes

con Insuficiencia Renal Crónica3. Explique que provoca la disminución de la turgencia cutánea en humanos

PARALELO________


92

DR. IVÁN MORA


PRACTICA____________________CATEGORIA 4 Excelente 3 Bueno 2 Regular 1 por mejorar NOTA

Introducción





Objetivos





Metodología





Resultados





Conclusión






93

DR. IVÁN MORA


Cuestionario
















94

DR. IVÁN MORA




Fecha: XXXXX PRÁCTICA No:12 SESIONES:1 TEMA: Clasificación de los seres vivos:

Organismos Procariontes y Eucariontes

OBJRTIVO GENERALDiferenciar la estructura y características de organismos procariotas y eucariotasOBJETIVO ESPECÍFICO

1. Estableces la diferencias y semejanzas entre estos organismos.


95

1.- OBJETIVO

DR. IVÁN MORA




1. Clasifique organismos procariotas y eucariotas según sus principales características

2. Compare organismos procariotas y eucariotas y obtenga semejanzas y diferencias

Gráficos de organismos procariotas y eucariotas observados en el microscopio

Materiales Portaobjetos Cubreobjetos Pipetas de plástico Palillos de dientes Pipetas Pasteur Cajas Petri Papel para limpieza de lentes Papel absorbente Pisetas

Reactivos Azul de metileno 5ml/a 90ml/p Metanol 5ml/a 90ml/p Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/p


96


DR. IVÁN MORA


Agua destilada 5ml/a 90ml/p

Equipos Plancha térmica (hot plaste) Microscopios



Estructura celular Clasificación de los seres vivos Uso y manejo del microscopio


BACTERIAS DEL YOGUR:El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos cepas bacterianas: el Streptococcustermophilus, poco productor de ácido,y el Lactobacillusbulgaricus, muy acidificante. Por tanto, se observará dos tipos de morfologías bacterianas: cocos y bacilos; y un tipo de agrupación: estreptococos (cocos en cadenas)

1. Realizar un frotis en un portaobjetos disolviendo una mínima porción de yogur en una gota de agua destilada

2. Fijar con dos gotas de metanol para eliminar parte de la grasa. Esperar tres minutos

3. Teñir con 1 gota del colorante azul de metileno al 1% durante 2 minutos4. Colocar con cuidado un cubreobjetos y secar el exceso con un pedazo de

papel absorbente


97

DR. IVÁN MORA


5. Observar en el lente de 10X y luego en el de 100X con aceite de inmersión6. Graficar lo observado

BACTERIAS DEL SARRO DENTAL:El sarro dental es un depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los dientes. Está constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto con sus productos metabólicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es muy variable dependiendo de las condiciones que se den en el momento de hacer la preparación.

1. Con un palillo de dientes tomar una pequeña porción de sarro dental y disolverla en una gota de agua sobre un portaobjetos

2. Dejar secar y fijar con calor3. Teñir con una gota de azul de metileno al 1% durante 2 minutos4. Lavar el exceso de colorante y secar5. Colocar sobre la preparación un cubreobjetos y observar en el lente de 10X

y luego en el de 100X con aceite de inmersión6. Graficar lo observado

MICROORGANISMOS DEL AGUA:1. Colocar una gota de agua estancada sobre un portaobjetos2. Cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio3. Observar en el microscopio con diferentes aumentos4. Dibujar los organismos unicelulares que se observen

NOTA:

Al finalizar la práctica:1. Limpiar bien los lentes del microscopio con el papel adecuado,

especialmente el lente de 100X2. Dejar en el lente de menor aumento, envolver bien el alambre y colocar el

cobertor para proteger al microscopio


98

DR. IVÁN MORA





Cuestionario Medicina y Odontología

1. Escriba la clasificación actual de los seres vivos especificando los reinos y un ejemplo de cada uno.

2. Realice un cuadro comparativo de las principales características de procariotas y eucariotas.


Resultados






99

DR. IVÁN MORA


Cuestionario












Fecha: XXXXX PRÁCTICA No: 13

SESIONES: 2 TEMA: División celular


100

DR. IVÁN MORA


1.- OBJETIVO

OBJETIVO GENERALEstructurar las etapas del ciclo celularOBJETIVO ESPECÍFICOObservar placas preparadas acerca del ciclo celular.



1. Describe las etapas del ciclo celular y los eventos principales que ocurren en cada una de ellas

2. Identifica microscópicamente las fases del proceso mitótico

Gráficos de las etapas de la mitosis

Materiales Portaobjetos Cubreobjetos Pipetas de plástico Cajas Petri Tijeras Vidrio de reloj Pinzas delgadas Guantes desechables Mascarillas Papel para limpieza de lentes


101


DR. IVÁN MORA


Reactivos Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/p Metanol 5ml/g 90ml/p Agua destilada 5ml/a 90ml/p Orceína acética tipo A 2ml/a 36ml/p Orceína acética tipo B 2ml/a 36ml/p

Equipos Plancha térmica (hotplate) Microscopios



a. Estructura celularb. Fases del ciclo celular


Procedimiento:

1. Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. Al cabo de 3-4 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm de longitud

2. Cortar con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y depositarlo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 5 gotas de orceína A

3. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero (pasar por la llama unas 5 o 6 veces), evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues. Mover continuamente en círculo


102

DR. IVÁN MORA


4. Una vez que se enfríe, con las pinzas tomar uno de los ápices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos, añadir una gota de orceína B y dejar actuar durante 1 minuto

5. Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja enmangada (o lápiz con borrador) dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede extendida

6. Sobre la preparación colocar unas tiras de papel de filtro. Poner el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice

7. Observar al microscopio en el lente de 10x y 100x con aceite de inmersión.8. Realizar un gráfico de las fases observadas en el lente de 100x

Tomado y modificado de: http://www.joseacortes.com/practicas/mitosis.htm

Nota:La persona que va a manipular la Orceína A y B debe utilizar guantes y mascarilla




Cuestionario Medicina y Odontología

1. Realice un cuadro comparativo (semejanzas y diferencias) entre los procesos de mitosis y meiosis.


103

http://www.joseacortes.com/practicas/mitosis.htm

DR. IVÁN MORA



Resultados





Cuestionario











104

IER202 - PRACTICA 01 - Familiarización con … · Web viewDespués de haber leído el documento de...

Documents

Transcript of IER202 - PRACTICA 01 - Familiarización con … · Web viewDespués de haber leído el documento de...