Incidencia de Mycoplasma meleagridis en pavos de engorda del rancho “El

trece”, así como su respuesta ante tratamientos con Tilosina y

Enrofloxacina.

Estrada Barrientos Ana Belen1, Jiménez Pacheco María Daniela 1, Pérez Ramírez Mariana1,

Navarro Hernández Nathalie1, Vara Ayala Saúl Alejandro1.

(1) Estudiante del módulo de Equilibrio de Nutrientes y Selección del Pie de Cría para Aves

comerciales correspondiente a la licenciatura de Medicina Veterinaria y Zootecnia en la

Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Xochimilco.

Resumen

La infección por Mycoplasma tiene un gran impacto económico en la industria

avícola de todo el mundo ya que afecta de un 5 a un 20% la producción, este es el

patógeno más común y de gran importancia dentro de toda la industria avícola en

general (Quiroz, 2007). La micoplasmosis puede ser producida por diversas

especies de Mycoplasma, incluidas las especies Mycoplasma gallisepticum, M.

synoviae , M. iowae, M. meleagridis; esta última es el agente patógeno más

importante, desde el punto de vista económico, en la producción de pavos

( Bradbury y Morrow, 2008). Las infecciones por este agente pueden causar

pérdidas económicas importantes por una enfermedad respiratoria crónica, que

afecta la conversión alimentaria, produce una disminución del crecimiento y

descenso de la producción de huevos, así como un aumento en el índice de

mortalidad. Las infecciones producidas por las diferentes especies de micoplasma

se conocen como micoplasmosis aviar, enfermedad respiratoria crónica (ERC) de

los pollos, sinusitis infecciosa de los pavos y conjuntivitis del pinzón mexicano

(The center for food security and public health, 2007), (Torres, et al.2010).

Los Mycoplasma causan enfermedad en los pollos, pavos, aves de caza como, los

faisanes, perdices de Chukar, codorniz común, codorniz japonesa y pavo real;

también se ha aislado de patos, gansos, loros de cuello amarillo del Amazonas,

palomas, flamencos rosados y halcones peregrinos salvajes en España. Su

distribución en hospederos es diversa y se encuentran en peces, reptiles, aves,

mamíferos y en el humano, por lo que es una zoonosis (Rivera, et al. 2001)

1

El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de Mycoplasma

meleagridis en pavos de engorda presentes en Huitzilac estado de Morelos; así

como conocer la eficacia de diferentes tratamientos sobre la bacteria de

Micoplasma, utilizando un tratamiento con Tilosina (T1) y otro con Enrofloxacina

(T2).

Palabras clave: Micoplasmosis, Micoplasma meleagridis, tilosina, enrofloxacina, pavos.

Abstract

Mycoplasma infection has a great economic impact on the poultry industry

worldwide as it affects 5 to 20% of production, this is the most common pathogen

of great importance within the entire poultry industry in general (Quiroz , 2007).

The mycoplasma can be produced by various Mycoplasma species, including

Mycoplasma gallisepticum species, M. synoviae, M. iowae, M. meleagridis, the

latter is the pathogen most important from the economic standpoint in the

production of turkeys (Bradbury and Morrow, 2008). This agent infections can

cause major economic losses for chronic respiratory disease, affecting feed

conversion, a decrease of growth and decline in egg production and increased

mortality rates. Infections caused by different species of mycoplasma are known as

avian mycoplasmosis, chronic respiratory disease (CRD) of chickens, infectious

sinusitis of turkeys and finch conjunctivitis (The center for food security and public

health, 2007), (Torres, et al.2010).

The Mycoplasma cause disease in chickens, turkeys, and game birds, pheasants,

chukar partridge, bobwhite quail, Japanese quail and peacock has also been

isolated from ducks, geese, parrots yellow neck Amazon, doves, flamingos pink

and wild peregrine falcons in Spain. Distribution in diverse hosts is found in fish,

reptiles, birds, mammals and in humans, so it is a zoonosis (Rivera, et al. 2001)

The objective of this study was to determine the presence of Mycoplasma

meleagridis in fattening turkeys Huitzilac present state of Morelos, as well as

2

determine the effectiveness of different treatments on the bacterium Mycoplasma

using tylosin treatment (T1) and the other with Enrofloxacin (T2 ).

Keywords: mycoplasmosis, Mycoplasma meleagridis, tylosin, enrofloxacin, turkeys.

Introducción

La micoplasmosis aviar es una

enfermedad ampliamente difundida

en el mundo (Cerdá, 1999);

convirtiéndose en uno de los más

importantes problemas sanitarios que

afectan la industria avícola. Los

Micoplasmas son bacterias primitivas

que, de acuerdo con la especie

pueden afectar los sistemas

respiratorio, reproductivo y/o

locomotor, colonizan principalmente

el epitelio de la tráquea, las

membranas de los sacos aéreos y la

mucosa interna del oviducto (Torres,

2010).

Mycoplasma gallisepticum y

Mycoplasma sinoviae son las

predominantes en las explotaciones

avícolas comerciales de pollos y

gallinas; mientras que el Mycoplasma

meleagridis es considerado como el

más importante para la industria de

pavos (Pulido, 2012). Pueden

encontrarse en humanos, en aves

comerciales y silvestres, plantas e

insectos. Por lo general colonizan

superficies mucosas y la mayoría de

especies no son invasivas (Bradbury,

2008).

Los mycoplasmas son procariotes

muy pequeños, son bacterias muy

exigentes de 0.3-0.8 μm diámetro que

carecen de pared celular y que

solamente están rodeados por una

membrana plasmática, esta

característica los hace resistentes a

los antibióticos cuyo mecanismo se

basa en la eliminación de la pared

celular (Nieves, et al. 2010).

Necesitan un medio de crecimiento

rico en CO2 y que contenga suero.

Estas no sobreviven durante más de

unas horas fuera del hospedador y

son vulnerables a los desinfectantes

comunes (Manual Merck de

Veterinaria, 2007), se destaca la

acción de los fenoles y el formol.

3

La transmisión de este

microorganismo se puede presentar

en forma vertical y horizontal. Los

mycoplasmas son transmitidos

horizontalmente vía aerógena, por

contacto directo con otras aves o por

contacto indirecto a través de

personas, animales, alimento, agua,

fómites, etc. Verticalmente se

transmiten a través del huevo, con un

periodo de incubación que varía de 6

a 21 días. El huevo se contamina

después del desprendimiento de la

yema del ovario en la

fase migratoria por el oviducto

(Yamato y Ortmayer, 2005).

El principal problema con estas

infecciones de Mycoplasmosis es que

reduce la producción de huevo en un

10-25%, ocasiona una depresión en

la ganancia de peso de 10-20%, baja

el consumo de un 10-20%, aumenta

la mortalidad embrionaria de un 5-

10% y tiene una mortalidad del 5-10%

(SENASA, 2010), lo cual se traduce

en una pérdida económica por la

compra y uso de antibióticos, una

baja conversión alimenticia y en un

retraso en la economía del productor.

Una de las enfermedades más

frecuentes es la Enfermedad Crónica

Respiratoria Complicada (ECRC),

desencadenada por la presencia de

Mycoplasmas (Torres, 2010) y otros

agentes como Escherichia coli y

Estreptoccocus spp, presentes en las

excretas contenidas en las camas de

las instalaciones donde se crían los

animales, en el medio que los rodea y

a ello se suma el factor estresante

por manejo inadecuado (Villamar,

2006). Las aves infectadas son

portadoras de Micoplasma durante

toda la vida y pueden no presentar

síntomas hasta que sufren algún

estrés (Pulido, 2012).

Usualmente estas infecciones por

Mycoplasma varían desde subclínicas

hasta muy graves. Las infecciones

más graves se observan cuando las

aves se infectan simultáneamente de

el virus de la enfermedad de

Newcastle, él de la bronquitis

infecciosa, Escherichia coli (Torres,

2010).

Los animales infectados desarrollan

síntomas respiratorios como

estertores, estornudos, secreciones

nasales y disnea. Es ocasional la

presencia de conjuntivitis en aves

jóvenes. La producción se reduce por

4

disminución de peso, de la

conversión alimentaria y de la

producción de huevos (Acuña, 2012).

En los pavos generalmente se

presenta una forma grave de la

enfermedad, con frecuencia

acompañada de inflamación de los

senos paranasales (infraorbitales). Es

frecuente la presencia de conjuntivitis

con exudado ocular espumoso en los

pavos y ocasionalmente en los pollos

(Pulido, 2012), (Torres, 2010).

Los síntomas de la micoplasmosis se

desarrollan lentamente y el curso de

la enfermedad puede ser prolongado.

Las lesiones post mortem

generalmente en los pavos son

sinusitis mucopurulenta grave, con

traqueítis y aerosaculitis (Pulido,

2012).

Actualmente el principal exportador

de carne de pavo son los Estados

Unidos (EUA) con 319,000 toneladas

en el 2011, y que llegaron a 336,000

toneladas en 2012, aunque para 2013

se prevé una reducción a alrededor

de 313,000 toneladas. Las ventas a

México subieron 5% a casi 90,000

toneladas. Del total exportado, 78% o

129,000 toneladas fueron adquiridas

por solo cinco países: México, China,

Hong Kong, Canadá y Filipinas.

México por sí solo representó el 54%

(FAO, 2012).

Mundialmente México es el principal

importador de carne de pavo con

recibos de productos

frescos/congelados que alcanzaron

casi 195,000 toneladas en 2008.

Después de una fuerte caída en las

compras en 2009, las importaciones

han aumentado cada año y llegaron a

unas 164,000 toneladas a principios

de 2012 (FAO, 2012). Hasta el 2012

la producción de pavo en México fue

de más de 21 mil toneladas, según

estadísticas de Servicio de

Información Agroalimentaria y

Pesquera (SIAP), organismo de la

Secretaria de Agricultura, Ganadería,

Desarrollo Rural, Pesca y

Alimentación (SAGARPA). El pavo es

producido en 19 entidades  de la

República Mexicana, principalmente

en los estados de Yucatán, con seis

mil 236 toneladas, y  Chihuahua, con

tres mil 215 toneladas, al 30 de

noviembre de 2011 (FAO, 2012).

El guajolote es también producido en

entidades como Estado de México,

5

Puebla, Tabasco, Guerrero, Veracruz,

e Hidalgo, Chiapas, Campeche,

Oaxaca y Tlaxcala.

El control de enfermedades es

esencial para las unidades de

producción avícolas y una

enfermedad común en estas

explotaciones es el Mycoplasma; si

se controlara la incidencia de

micoplasmosis en pavos entre otras

cosas, México podría reducir el índice

de importaciones y comenzar a

producir más toneladas de carne de

pavo para el propio consumo del país

y podría incrementar sus

exportaciones y esto ayudaría

positivamente en la economía del

país.

Material y Métodos.

El trabajo se realizó en el rancho de

la Universidad Autónoma Chapingo

“El trece “ubicado en el municipio de

Huitzilac, Edo. De Morelos. Los pavos

ubicados en en este sitio son para

consumo humano. Se realizaron dos

muestreos de sangre a 116 pavos de

6 semanas de edad. Los pavos se

muestrearon por primera vez el 26 de

mayo del 2013, la muestra se tomó

de la vena debajo del ala (vena

radial), extrayendo el 1% de su peso

vivo (3ml) con el fin de determinar la

presencia de Mycoplasma, se

utilizaron jeringas de 5 ml,

posteriormente se virtieron las

muestras en tubos vacutainer sin

anticoagulante (color rojo) a un

ángulo de 45° y se dejaron reposar

un día bajo temperatura ambiente

para la obtención del suero.

Posteriormente se acondicionaron

dos corrales (encalados, con

bebederos, comederos y cercados)

en donde se separaron al azar 58

pavos en cada uno de estos corrales;

a los dos corrales se les proporcionó

1 bulto de alimento (40 kg) iniciador

para aves de engorda Unión

Tepexpan®.

El día 1 de junio del 2013 se les

aplicó un tratamiento de Tilosina

100mg/ml (T1) a un grupo de 56

pavos, a cada pavo se le peso y se

aplicó la dosis correspondiente ( 30

mg/ kg de peso), posteriormente al

otro grupo de pavos se les aplicó el

tratamiento con Enrofloxacina 50

mg/ml (T2), con la dosis

correspondiente ( 10 mg/kg), esto se

realizó con el fin de disminuir el

6

problema recurrente de

Mycoplasmosis en el rancho “El

trece”, además de conocer la eficacia

de cada tratamiento contra la

bacteria.

El día 7 de julio del 2013 se realizó el

segundo muestreo a los 116 pavos

(58=T1 y 58=T2) del mismo modo

que se realizó en el primer muestreo.

De las muestras obtenidas (3ml) se

les extrajo el suero (1 ml) y se realizó

la prueba serológica ELISA (“enzyme

linked immunosorbent assay”) en el

laboratorio de inmunología de la

Universidad Autónoma Metropolitana

unidad Xochimilco, esta prueba se

basa en el uso de un antígeno o un

anticuerpo marcado con una enzima,

al estar uno de estos componentes

marcados y fijado a un soporte, se

interrumpe la reacción antígeno-

anticuerpo, posteriormente se le

agrega un sustrato específico sobre

la enzima que producirá un color

determinado observable a simple

vista. Debido al número de placas se

limitó a usar 46 muestras al azar

pretratamiento para determinar la

presencia de Mycoplasma

meleagridis y 48 más al azar

postratamiento de los dos

tratamientos (24 del tratamiento con

tilosina y 24 con el tratamiento de

enrofloxacina), esto para observar la

eficacia de los antibióticos contra la

bacteria.

Resultados.

Se obtuvieron 322 muestras, los

cuales se sometieron a la prueba

ELISA con antígeno comercial para

este patógeno, resultando 81

muestras positivas (69.5%) a

Mycoplasma meleagridis. Con las

muestras posttratamiento se midió la

prevalencia de la enfermedad al

tratamiento, siendo 9 pavos

prevalentes (37.5%) usando Tilosina

y 10 pavos prevalentes (41.6%)

usando Enrofloxacina.

De las 46 muestras pretratamiento 20

correspondían a machos (43.5%) y

26 a hembras (56.5%), los resultados

obtenidos de la prueba ELISA

mostraron que de las 46 muestras del

primer muestreo, 32 (69.5%)

resultaron positivas a la presencia de

anticuerpos específicos para

Mycoplasma meleagridis (de las

muestras positivas 23 correspondían

a hembras (71.8%) y 9 correspondían

7

a machos (28.2%) (Cuadro 1 y 3); en

cuanto al segundo muestreo con el

tratamiento de Tilosina (T1) se

observaron 9 positivos (5 machos

(55.5%) y 4 hembras (44.5%)) y 16

negativos, y en el tratamiento con

Enrofloxacina (T2) 10 fueron positivos

(5 hembras (50%), 5 machos (50%))

y 13 negativos (Cuadro 2 y 3).

macho hembra0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

pretratamiento negativopretratamiento positivo

Cuadro 1. Comparación entre hembras y machos positivos a Mycoplasma

pretratamiento.

tilosina enrofloxacina0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

postratamiento negativopostratamiento positivo

Cuadro 2. Comparación de la eficiencia entre tratamientos contra mycoplasma.

8

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A + - + + + + + + + + + +

B - + + + + + + - + - - -

C - + + + - + + + + + - -

D - + + - - + - + + + - +

E - - + + - + - - - - - -

F + + + - + - - + + + - -

G - + + + + - - - - - - -

H - + + - + - - - - - + +

Cuadro 3. Resultados de la prueba ELISA +=antígeno positivo, - = antígeno negativo, + = positivo

a micoplasma pretratamiento, - = negativo a micoplasma pretratamiento, + = positivo a micoplasma

postratamiento, - = negativo a micoplasma postratamiento

Con los resultandos obtenidos en el

primer muestreo (pretratamiento) se

obtuvo que el 69.5% de los pavos

presentaban anticuerpos contra

Mycoplasma meleagridis por lo que

se puede decir que de los 116 pavos,

el 69.5% (81 pavos) posiblemente

presentaba los anticuerpos contra

Mycoplasma meleagridis. En el

segundo muestreo, se obtuvo que de

los 19 pavos que resultaron positivos

post tratamiento, el 47.4% fue

utilizando Tilosina y el 52.6% fue

usando Enrofloxacina (Cuadro 4 y 5),

por lo que se deduce que de los 116

pavos tratados con los dos

tratamientos, aproximadamente 46

pavos continuaron enfermos.

9

Testigo (Pre tratamiento)

Tilosina Enrofloxacina Total (Post tratamiento)

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

PositivosNegativos

Cuadro 4. Comparación del número de pavos positivos y negativos durante la experimentación.

TestigoTilosina

EnrofloxacinaTotal

0

10

20

30

40

50

60

70

PositivoNegativo

Cuadro 5. Comparación del porcentaje de pavos positivos y negativo durante la experimentación

10

Discusión

La Micoplasmosis es una enfermedad

dependiente de varios factores, no

sólo depende exclusivamente del

agente etiológico, sino que la

favorece la disminución de la

capacidad de resistencia a

consecuencia de estados de estrés,

las corrientes de aire, el calor y el frío

excesivos, los cambios de

alojamiento, el transporte y otros

factores (Kleven et al., 2001), en el

rancho “el trece”, todos estos factores

estresantes se hacen presentes lo

cual contribuye a que los pavos

puedan contraer la enfermedad.

El Mycoplasma meleagridis, no sólo

afecta al aparato respiratorio de las

aves sino que afecta a las

membranas sinoviales y

articulaciones, también al tracto

respiratorio. Este Mycoplasma

ocasiona también inmunosupresión

en las aves y facilitan la invasión de

bacterias como la E. coli,

Avibacterium paragallinarum, virus de

Bronquitis infecciosa, Newcastle,

Síndrome de cabeza hinchada entre

otras, influyendo en la severidad de la

enfermedad (Ley et al., 1997;

Feberwee et al., 2006), por lo que se

puede pensar que los pavos

presentes en el rancho no sólo

presentaran Mycoplasmosis.

Debido a que Estados Unidos es el

principal exportador de carne y huevo

fértil de pavo, la incidencia de

mycoplasmosis en México es de

alrededor del 60-65% (SAGARPA,

2010), lo cual se traduce a que

usualmente llegan a México huevos

fértiles ya infectados de Estados

Unidos. La incidencia de

Mycoplasmosis en pavos es baja en

comparación con la de las gallinas de

postura comercial al sur de Lima

utilizando pruebas serológicas de

aglutinación en placa, HI y ELISA

dieron una prevalencia de infección

de 97% (Díaz 1999; Chirinos, 1999),

en nuestro trabajo la incidencia de

Mycoplasmosis en el rancho “el trece”

fue de 69.5%, esto siendo más alto que

la incidencia de Mycoplasmosis en el

país, aunque los resultados sobre la

incidencia concuerdan con respecto

al trabajo de Yamamoto (2005) que

reportó que la prevalencia de

mycoplasma es de alrededor del 78%

de del total de criaderos de aves en

México.

11

Por lo ya antes mencionado es

importante conocer la procedencia y

manejó que ha tenido el huevo o el

recién nacido, así como la expedición

de los certificados de salud

requeridos por la Ley general de

Sanidad Agraria (SENASA, 2013), y

se debe tener en cuenta la compra de

pavipollos libres de Mycoplasma.

La prueba ELISA solo sirve para

determinar la presencia del

anticuerpo específico para el

antígeno de Mycoplasma meleagridis,

pero no indica específicamente si

están infectadas o solamente han

tenido contacto previo con el antígeno

(Lequin, 2005), (Ricci, 2006); de tal

manera que no se pudo determinar

de manera concreta si estaban

infectados, sin embargo los datos

proporcionados por el dueño del

rancho afirman que alrededor de una

cuarta de los pavos que llegan al

rancho se infectaran o están

previamente infectados. Esta

enfermedad predomina en los climas

fríos con temperaturas de 7 a 10°C

donde su incidencia es mayor a 50%

(Center for foos security & public

health, 2007), sin embargo otro punto

importante para este tipo de

infecciones son los problemas

sanitarios, estos deben tener una

prioridad y calidad de atención ya que

afecta a las parvadas, productos y

subproductos: todos estos deben de

estar libres de este tipo de

enfermedades (Teódulo, 2001), esto

concuerda con los resultados ya que

las bajas condiciones higiénicas, las

condiciones climáticas y las

deficientes instalaciones son uno de

los principales vectores posiblemente

de la mycoplasmosis en el rancho “el

trece”.

El control permanente de las aves y

tratar de erradicar la mycoplasmosis

es muy difícil, pero para disminuir la

incidencia de esta enfermedad se

deben de tener medidas higiénicas y

un programa de vacunación para

prevenir la enfermedad, aunque

muchos autores mencionan que el

control de las Micoplasmosis, solo es

factible a través de la eliminación y

sacrificio de los planteles infectados,

reemplazándolos por planteles libres

que deben ser tratados como tales

desde el primer día de vida a partir

del cual, el esfuerzo de saneamiento

debe estar concentrado en la

constancia de implementación de

12

medidas de bioseguridad que

apuntan a conservar el estado de

indemnidad del lote (Ortiz y Kleven,

1992), (Avakian et al., 1992).

Varios autores demostraron in-vitro la

susceptibilidad a los antibióticos de

los Mycoplasmas aviares (Newnham

y Chu, 1965; Griffin, 1969; Lin, 1987).

Basado en estos datos varios

antibióticos fueron usados durante

largo tiempo bajo condiciones

prácticas, por ejemplo la tilosina,

eritromicina, etc. y como resultado la

incidencia de Mycoplasmosis

disminuyó, esto coincide con nuestros

resultados ya que al utilizar tilosina la

prevalencia de la bacteria

Mycoplasma disminuyó de un 69.5%

a 37.5% y con el uso del antibiótico

enrofloxacina de 69.5% de incidencia

disminuyo a 41.6%; basándonos en

estos resultados podemos concluir

que el tratamiento con tilosina s más

efectivo que utilizar enrofloxacin,

aunque (Kleven y Anderson, 1971;

Newnham, 1963) mencionan que los

antibióticos como las tetraciclinas y

eritromicinas, posen una alta

actividad antimicoplásmica.

Conclusión

En los resultados de nuestro

investigación se observó que la

incidencia de micoplasmosis en esta

región fue de 69.83% lo cual es un

problema serio en las exportaciones

avícolas especialmente en áreas con

condiciones de producción no son

óptimas, lo que representa una

problemática en la disminución y la

calidad de la producción de huevos y

carne de pavos, afectando de igual

manera el crecimiento y la ganancia

de peso.

La eficacia de los antibióticos

administrados demostró que la

tilosina (T1) es más eficiente contra

las infecciones causadas por

micoplasma superandolo en un

8.62% en comparación con la

enrofloxacina (T2), de igual manera el

precio del tratamiento con tilosina es

más económico que la enrofloxacina.

Los diagnósticos médicos en la

región de Morelos deben dar a

conocer más a la población acerca de

las características de M. Meleagridis

y así poder tomar en cuenta las

ventajas que estas les confiere como

moduladores en diferentes procesos

13

celulares y/o cofactores en diversas

enfermedades. Por tanto,

consideramos que es importante

profundizar en el estudio y difusión de

ciertos padecimientos en los que

están involucrados estos

microorganismos y sobre todo

proponer tratamientos eficaces y

económicos, minimizando los riesgos

potenciales que puedan generar en la

salud del animal.

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ANEXOS.

Figura 1, 2, 3, 4. Fotografías de los pavos proporcionados para el trabajo de investigación.

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Figura 5. Sangrado del pavo por la vena radial

Figura 6. Pavos muestreados

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Fig. 7 Muestras de sangre en tubos vacutainer sin anticoagulante (color rojo)

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Figura 8. Colocación de comederos y bebederos en los corrales para los pavos en tratamientosFigura 9. Corral para los pavos en tratamiento ya encalado, con bebederos y comederos colocados

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Fig. 10, 11 y 12 prueba serológica ELISA

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