Preparación de un medio de cultivo

bacterianoPresentado por:

Juan José Osorio Buitrago

Mateo Celi Hurtado

Natalia Chamorro Solórzano

Yimmi Pinto Valencia

introducción

• Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.

• El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo.

• debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

• Conocer los diferentes constituyentes de los nutrientes que las bacterias necesitan para su crecimiento.

• Clasificar los medios de cultivo, según: el estado físico, la naturaleza de sus constituyentes y los propósitos de uso.

• Comprender las formas de preparación de los diferentes medios de cultivo y su aplicación.

• Conocer el uso adecuado del microscopio óptico.

Procedimiento a seguir• La practica de laboratorio se llevó a cabo de la siguiente forma:

• Se prepararon 250 ml de medio de cultivo nutritivo , que estaba conformado por :

• 1.5 gramos de tripteína de soya

• 0.75 gramos de Agar agar

• Se agregó la muestra a un Erlenmeyer de 500 ml y se le adicionó agua destilada necesaria para un volumen de 50 ml para obtener una mezcla homogenizada.

Imagen 1. Erlenmeyer con medio de cultivo en preparación.

• Se tapó el medio de cultivo y este se llevó a autoclave durante 20 minutos.

• Se vertió el medio de cultivo en dos cajas de Petri, 20mL a cada una, en un lugar previamente esterilizado.

• Se dejó solidificar el medio de cultivo, y se llevaron las cajas de Petri que lo contenían a la incubadora. Allí, se invirtieron y se guardaron.

Imagen 2. Medio esterilizado

resultados

• El medio de cultivo de la caja de Petri número uno se vio afectado , ya que al haberse invertido esta al momento de verter allí el agar, se presentó una congelación y no se conservó de manera adecuada para cultivo de bacterias.

• El medio de cultivo de la caja de Petri número dos, no se vio afectado por factores externos, ni de errores en el procedimiento. Por tanto, este medio de cultivo, presentó textura suave y gelatinosa.

Imagen 3. Cajas de Petri con medios de cultivo.

Discusión

¿Para que se utiliza un medio sólido? Es utilizado para inhibir el movimiento celular, permitiéndoles crecer de forma aislada visible (Colonias). La textura sólida se da por la adición de agar gelificante. (Madigan et al., 2004).

¿Por qué es fundamental el medio de cultivo para el crecimiento y desarrollo de las bacterias?

El medio de cultivo es fundamental porque suministra los nutrientes y condiciones especiales, necesarios para que se dé un correcto desarrollo de los microorganismos.

Para preparar un medio de cultivo apto es necesario que se encuentre en un medio estéril para que no se contamine de agentes del medio externo o de los materiales que puedan desarrollarse y alterar las pruebas.

Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento.

El medio de cultivo debe oscilar entre 35-37ºC además, se debe proporcionar una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar así que se deseque el medio. Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas entre 15 y 43ºC. Otros como los psicrófilos crecen a 0ºC y los termófilos a 80ºC o incluso a temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los patógenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos, alrededor de 37ºC

Dado que los microorganismos son ubicuos, los medios de cultivos debe ser esterilizados antes de usarse. Para la mayoría de los medios de cultivo estos se realiza por calor, habitualmente mediante calor húmedo en un gran recipiente a presión.

Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del calderín, se va produciendo vapor que desplaza el aire, haciéndolo salir por la válvula de purgado que está abierta. Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de esterilización. (Gónzalez et. al., 2012)

Fase de esterilización: Una vez cerrada la válvula de purgado y alcanzada la temperatura de esterilización previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilización.

Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilización, deja de funcionar la resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presión y temperatura del calderín empieza a bajar poco a poco.

• Se determinó cuál es la importancia de preparar un medio que permita la propagación de organismos microbianos.

• Se reconoció el funcionamiento de la autoclave como principal instrumento de esterilización de medios de cultivo.

• Se clasificaron los medios de cultivo según su estado físico y según las necesidades microbianas.

• Se comprendió ´cómo se preparan los medios de cultivo líquidos y sólidos.

conclusiones

1. MADIGAN, M. T., MARTINKO, J. M. Y PARKER, J.

Brock biology of microorganisms

En el texto: (Madigan, Martinko and Parker, 2003)

Bibliografía: Madigan, M., Martinko, J. and Parker, J. (2003). Brock biology of microorganisms. Upper Saddle River, NJ: Prentice Hall/Pearson Education.

2. MEDIOS DE CULTIVO EN UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Mª Concepción Casado González

Gertrudis Torrico Cabezas

María Medina Anguita

Año de publicación: 2012

Disponible en: https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

Referencias bibliográficas.