INFORMÁTICA DE SISTEMAS DIRECCION
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Sensibilidad antibacteriana de cultivos de Listeria sp. provenientes de carnes y verduras de mercados del distrito
de Trujillo y La Esperanza
TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL
DE BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO
AUTOR: Br. CYNTHIA CHRIS CASTILLO OLÓRTEGUI
ASESOR: Dr. PEDRO MERCADO MARTÍNEZ
TRUJILLO – PERÚ
2014
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Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.
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DIRECTIVOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. Orlando Velásquez Benites
RECTOR
Dra. Vilma Méndez Gil
VICERRECTORA ACADÉMICA
Dr. José Mostacero León
DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS
Dr. William Zelada Estraver
PROFESOR SECRETARIO DE LA FACULTAD DE
CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dra. Bertha Soriano Bernilla
DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO
PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
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MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR
Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en
concordancia con las normas de la Escuela Académica Profesional de Microbiología y
Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.
_________________________
Ms.C. Pedro Alvarado Salinas
PRESIDENTE
________________________
Dr. Pedro Mercado Martínez
SECRETARIO
____________________________
Ms.C. María Nelly Vásquez Valles
VOCAL
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APROBACIÓN
Los profesores que suscriben, Miembros del Jurado Dictaminador, declaran que la
presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobada
por UNANIMIDAD.
_________________________
Ms.C. Pedro Alvarado Salinas
PRESIDENTE
___________________________
Dr. Pedro Mercado Martínez
SECRETARIO
___________________________
Ms. C. María Nelly Vásquez Valles
VOCAL
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CERTIFICACIÓN DEL ASESOR
El que suscribe, Pedro Mercado Martínez, asesor de la tesis: “Sensibilidad
antibacteriana de cultivos de Listeria sp. provenientes de carnes y verduras de
mercados del distrito de Trujillo y La Esperanza”.
CERTIFICA:
Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su
correspondiente proyecto y que el informe ha sido redactado acogiendo las
observaciones y sugerencias alcanzadas. Por ello autorizo a la Br. Cynthia Chris
Castillo Olórtegui , continuar con los procedimientos correspondientes según sus
fines.
________________________________
Dr. Pedro Mercado Martínez
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DEDICATORIA
A Dios, por dejarme vivir todas aquellas experiencias que hacen grande, por estar a mi
lado día a día guiando mis pasos, sacándome de apuros y por ser una verdadera fuente
de amor y sabiduría,
A mi papi, Luis por estar siempre dispuesto a apoyarme en todo lo que decida, porque
gracias a él sé que la responsabilidad se la debe vivir como un compromiso de
dedicación y esfuerzo.
A mi mami Alicia, cuyo vivir me ha mostrado que en el camino hacia la meta se
necesita de fortaleza para aceptar las derrotas y del sutil coraje para derribar miedos.
A mis hermanos July y Oliver, por enseñarme que tener un hermano es lo mejor del
mundo, por su gran cariño mostrado y por el incondicional abrazo en los momentos
difíciles que me motiva y recuerda que detrás de cada detalle existe el suficiente.
A mis abuelos Otilia, Santiago y Herminia, que a pesar de que hoy ya no están conmigo
siempre estuvieron ahí soñando con este momento y motivándome a ser mejor día a
día.
A Erik, esa personita que se cruzó en mi camino y sin pensarlo se volvió parte
importante de mi vida por su cariño y amistad y por enseñarme que hasta lo menos
importate también es importante.
A mis grandes amigos, familiares y a todas aquellas personas que ´participaron
directa o indirectamente en mi desarrollo tanto personal como profesional, gracias por
todas aquellas experiencias brindadas día a día.
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AGRADECIMIENTOS
Al Laboratorio de Fisiología y Genética de la Universidad Nacional de Trujillo, por el
ambiente, todas las facilidades que permitieron la realización de la presente
investigación.
A mi asesor, el Dr. Pedro Mercado Martínez, por haberme brindado su valiosa
orientación con mucho profesionalismo, e invalorable apoyo; por su amistad y consejos
brindados durante la realización de esta tesis.
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PRESENTACIÓN
Señores Docentes, miembros del jurado.
Dando cumplimiento a las disposiciones vigentes emanadas del Reglamento de Grados
y Títulos de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo,
sometemos a vuestra consideración y elevado criterio, el presente informe de Tesis:
“Sensibilidad antibacteriana de cultivos de Listeria sp. provenientes de carnes y
verduras de mercados del distrito de Trujillo y La Esperanza”
Esperando que el jurado se sirva calificar este trabajo según su criterio establecido, a
pesar de la existencia de alguna deficiencia encontrada durante el desarrollo de la
presente investigación.
Trujillo, Abril 2014
_______________________________
Br. Cynthia Chris Castillo Olórtegui
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CONTENIDO
AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ii
MIEMBROS DEL JURADO iii
APROBACIÓN iv
DEL ASESOR v
DEDICATORIA vi
AGRADECIMIENTO vii
PRESENTACIÓN viii
CONTENIDO ix
RESÚMEN xi
ABSTRACT xii
INTRODUCCIÓN 1
OBJETIVOS 11
MATERIAL Y MÉTODO 12
RESULTADOS 15
DISCUSIÓN 20
CONCLUSIONES 25
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 26
ANEXOS 33
ANEXO 01. Rango del nivel de sensibilidad de Listeria sp. frente a
Antibacterianos 34
ANEXO 02. Diámetros de halos obtenidos en Listeria monocytogenes
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proveniente de carnes 35
ANEXO 03. Diámetros de halos obtenidos en Listeria sp. proveniente de
Carnes 38
ANEXO 04. Diámetros de halos obtenidos de Listeria monocytogenes
proveniente de verduras 41
ANEXO 05. Frecuencia de la sensibilidad de los cultivos de Listeria sp.
Carnes y Listeria sp. Verduras aislados de mercados provenientes de la
ciudad de Trujillo frente a los antibacterianos seleccionados 48
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RESUMEN
La Listeriosis está causando gran alarma a nivel mundial a productores de alimentos,
consumidores y autoridades sanitarias. Hasta hace unos años, se consideraba que los
aislados de L. monocytogenes así como las de otras Listeria sp, mostraban una
susceptibilidad a un amplio rango de antibacterianos activos contra bacterias Gram
positivas.
El objetivo de la presente investigación fue determinar la sensibilidad
antibacteriana de los cultivos de Listeria sp. provenientes de carnes y verduras frente a
diferentes antibacterianos, para lo cual se realizó antibiogramas de los cultivos utilizando
el método de Kirby Bauer. A estos cultivos se les reactivó en agar tripticasa de soya,
luego se realizó una suspensión bacteriana de cada cultivo con un patrón de turbidez de
McFarland 0,5; el equivalente a 1.5x108. La suspensión se estrió en placas con Agar
MuellerHinton, se colocaron discos de sensibilidad, se incubó y a las 48 h se leyeron los
resultados. Los antibacterianos usados fueron: Penicilina (10μg); Cefotaxima (30μg);
cefuroxima (30μg); imipenem (10μg); nitrofurantoina (300μg); Rifamicina (5μg),
Tetraciclina (30μg); Cloranfenicol (30μg); clindamicina (2μg); oxaciclina (1μg). En los
cultivos proveniente de carnes de Listeria sp se observa resistencia para todos los
antibacterianos pero en baja frecuencia, L. monocytoges presenta resistencia en algunos
antibacterianos como oxaciclina en 70% y clindamycina 60%, En los cultivos
proveniente de verduras se observa mayor resistencia como L. monocytogenes con
oxaciclina y rifampicina en un 100%. En conclusión todas los cultivos de Listeria sp.
presentan porcentajes de resistencia frente a los antibióticos utilizados, a diferencia L.
monocytogenes, quien no presenta resistencia frente a imipenen, cloranfenicol y tetraciclina.
Palabras clave: Antibacteriano, resistente a antibióticos, sensibilidad
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ABSTRACT
Listeriosis is causing great alarm global food producers , consumers and health
authorities. Until recently , it was considered that isolates of L. monocytogenes and the
other Listeria sp. , showed a susceptibility to a wide range of antibacterial activity
against Gram positive bacteria. The target of this investigation was to determine the
antibacterial sensitivity of crops Listeria sp. from meat and vegetables when various
antibacterial agents for which susceptibility of crops is performed using the Kirby Bauer
method . To these cultures were reactivated in trypticase soy agar , then a bacterial
suspension of each culture was performed using a standard 0.5 McFarland turbidity ;
equivalent to 1.5x108 . The suspension was streaked on agar plates MuellerHinton ,
sensitivity discs were placed , were incubated 48 h and the results were read .
Antibacterial agents used were : Penicillin (10μg); Cefotaxime (30μg); cefuroxime
(30μg) ; imipenem (10μg) ; nitrofurantoin (300μg); Rifamycin (5μg) , Tetracycline
(30μg); Chloramphenicol (30μg) ; Clindamycin (2μg); oxaciclina (1ug) . In cultures of
Listeria sp. from meat sp for all antibacterial resistance is observed but at low
frequencies , L. monocytoges presents some antibacterial resistance as oxaciclina
clindamycina 70% and 60 % , in vegetable crops from higher resistance is noted as L.
monocytogenes with oxaciclina and rifampicin 100% . In conclusion all crops Listeria
sp. have percentages of resistance to the antibiotics used , unlike L. monocytogenes ,
who no resistance to imipenem , chloramphenicol and tetracycline.
Keywords: Antibacterial, resistant to antibiotics, sensitivity
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INTRODUCCIÓN
La Listeriosis es una enfermedad transmitida por alimentos (ETA), aunque es
considerada una zoonosis que puede ser transmitida por contacto directo con
animales infectados (exposición ocupacional). La mayoría de las infecciones
humanas se adquieren por ingestión de alimentos contaminados y de madre a
hijo intrauterino o durante el parto.1 A pesar de presentarse con una baja
frecuencia, en la actualidad es una de las ETAs más letales conocidas, causando
gran alarma a nivel mundial a productores de alimentos, consumidores y
autoridades sanitarias.2
Las bacterias del género Listeria son bacilos anaerobios facultativos, Gram
positivos, se caracterizan por ser microorganismos ubicuos que se encuentran
ampliamente distribuidos: suelos, aguas residuales, comida animal y vegetal,
productos lácteos sin pasteurizar, desechos de mataderos, así como en el tracto
digestivo de humanos y animales asintomáticos.3
La contaminación humana con cepas patógenas de Listeria sp. puede ocurrir a
través de alimentos como leche fluida cruda y pasteurizada, quesos (particular
las variedades blandas), helado, verduras crudas, chorizos fermentados de carne
cruda, carne cruda y cocida de ave de corral, carnes crudas de todo tipo, y
pescado crudo y ahumado.4
Estos microorganismos se pueden encontrar en un
inicio en ínfimas cantidades pero debido al tiempo, al almacenamiento así sea en
frigorífico, y a su posibilidad de crecer en ambientes con altas concentraciones
de CO2. Van incrementándose hasta sobrepasar los 100ufc/g que es la dosis
mínima permisible en algunos países.5
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El género Listeria comprende seis especies: L. monocytogenes, L. ivanovii, L.
seeligeri, L. innocua, L. welshimeri y L. grayi. L. monocytogenes es responsable
en gran parte de la listeriosis que afecta al hombre; se considera un patógeno
oportunista con tasas de mortalidad del 20-30%, todas las cepas de L.
monocytogenes se consideran patógenas, aunque su virulencia es variable.6
Actualmente se han publicado algunos casos raros de infección a humanos
debidos a L. ivanovii y L. seeligeri. En animales, L. monocytogenes también es
responsable de la mayoría de las infecciones, pero también se han registrado
infecciones por L. ivanovii y L. innocua. L. ivanovii ha sido relacionada con
abortos y se la ha considerado como causa de la meningoencefalitis en ovejas.7
Listeria sp es un bacilo Gram positivo, que crece a temperaturas de 1°C a 45 °C,
con temperatura óptima de 30 a 37 °C, móvil a 25°C e inmóvil 37°C; tiene la
habilidad de soportar temperaturas de refrigeración gracias a la acumulación de
solutos crioprotectores y cambios en la composición lipídica de la membrana.8,9
Es capaz de desarrollarse a pH de 4,4 a 9,6 debido al transporte activo de
protones a través de la membrana.10
Asimismo, crece en concentraciones altas de
cloruro de sodio (15 %) y sobrevive en un 16% a 20% de NaCl.2 Es un
microorganismo ambiental que tiene la facultad de adherirse a las superficies,
formando biopelículas para protegerse de la acción de los tratamientos
antibacterianos.9
La amplia distribución de Listeria sp. se debe a la capacidad de sobrevivir
durante periodos de tiempo prolongados en diferentes medios. Por consiguiente,
los alimentos se pueden contaminar en cualquier eslabón de la cadena productiva
y en el almacenamiento en frío.11
El patógeno a pesar de no formar endosporas
es capaz de sobrevivir por largos periodos de tiempo en el medio ambiente, en
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las plantas procesadoras de alimentos y al interior de los refrigeradores
domésticos.2
Aunque L. monocytogenes se ha considerado durante muchos años un patógeno
de animales, su papel significativo como patógeno humano transmitido por
alimentos sólo se hace evidente a partir de 1980, cuando comienzan a aparecer
en la literatura informes documentados de brotes de listeriosis, detectados por
consumo de alimentos cotaminados.9
Una de las principales vías de transmisión de Listeria sp.en las industrias de las
carnes como la de otros alimentos, es la contaminación cruzada debido a: los
manipuladores asintomáticos, la falta de higiene en las superficies de las
instalaciones, tablas de corte, equipos, utensilios, el cruce entre productos
frescos y terminados, la posterior conservación en refrigeración. Debido a que se
trata de una bacteria psicrótrofa, la refrigeración va a reducir la microbiota
competitiva, creando así un ambiente idóneo para su multiplicación, a lo que se
le agrega que este problema se ve agravado dado que Listeria sp. forma
biopelículas o “biofilm” en superficies donde han quedado residuos orgánicos lo
cual dificulta la acción de los higienizantes.12,13
Las carnes crudas en el tejido muscular contiene alrededor de un 75% de agua,
lo que le hace una medio adecuado para el crecimiento de L. monocytogenes, así
como sus propiedades redox ya que la reducción del contenido de oxígeno y el
potencial redox en el musculo “post mortem” conduce a la producción y
acumulación anaeróbica del ácido láctico permitiendo el crecimiento de
microorganismos anaerobios o aerobios facultativos dentro del tejido muscular.
L. monocytogenes es capaz de crecer en carnes, dependiendo de pH, el tipo de
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tejido (macro o graso) el tipo y cantidad de microflora, y la temperatura de
almacenamiento. Normalmente el pH de la carne cruda esta entre los 5.4 a 6.1
óptimo para el crecimiento de la bacteria.14,15
Los alimentos considerados de alto riesgo para contraer listeriosis son los
alimentos listos para el consumo, en los que están considerados aquellos
alimentos que no van a tener ningún proceso de cocción antes del consumo,
estos alimentos varían de un país a otro debido a los hábitos alimentarios, la
disponibilidad de la cadena en frio y la temperatura máxima en el punto de
venta. Estos alimentos listos para consumo están divididos en dos categorías: La
primera categoría son los alimentos listos para el consumo que tienen un alto
riesgo de asociarse con la listeriosis, ya que facilitan el crecimiento de esta
bacteria, entre estos alimentos están: los derivados lácteos con altos contenidos
de grasa como los quesos, mantequillas, etc.; productos de mar crudos;
productos cárnicos y aves en los que el FSIS (Food safety and Inspection
Service); las verduras y frutas que están expuestos a estos microorganismos
debido a que L. monocytogenes sobrevive en suelos y en aguas residuales, estos
alimentos son los que en su mayoría se consumen en ensaladas sin pasar por
algún tratamiento y en muchas ocasiones sin contar con un lavado eficiente.9
Se conoce que hasta el 10-20% de productos vegetales listos para su consumo
pueden estar contaminados con L. monocytogenes incluyendo semillas
germinadas (brotes), lechugas, rábanos, tomates, cebollas, pepinos, coliflores y
setas cultivadas y que algunos brotes de listeriosis se han debido al consumo de
este tipo de productos. La contaminación de estos alimentos acaece a partir del
suelo, el agua, el estiércol animal, la vegetación en descomposición y los
efluentes de las aguas residuales de plantas de tratamiento y potabilización del
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agua, de especial preocupación son los productos ecológicos abonados con
estiércol posiblemente contaminado con L. monocytogenes de animales
enfermos.16
En la segunda categoría, encontramos los alimentos listos para el consumo que
tienen poco riesgo de asociarse con listeriosis, debido a que no facilitan el
crecimiento de L. monocytogenes, entre ellos se encuentran los alimentos
que tienen factores intrínsecos, como pH de 4,4 o menos, actividad de agua de
0,92 o menor, humedad relativa menor de 39 %.9
Las formas clínicas de la enfermedad varían de acuerdo al grupo infectado y las
manifestaciones más comunes son meningitis, meningoencefalitis, septicemia,
aborto, infección prenatal y gastroenteritis. Se cree que el 99 % de los casos de
listeriosis son de origen alimentario, el resto obedece a infección de recién
nacidos a través de la madre infectada o por contagio en las salas de neonatos.
En la transmisión de listeriosis gran variedad de alimentos han aparecido como
vehículos; entre ellos la leche, el queso, la mantequilla, el paté, la carne de res, la
carne de cerdo, las aves, los vegetales, los productos de mar y particularmente
los productos listos para consumo.17
El diagnóstico oportuno y tratamiento temprano con antibacterianos como
ampicilina y aminoglucósidos o cotrimoxazol son efectivos. Sin embargo, la
sintomatología generalmente no permite un diagnóstico temprano, ya que los
primeros signos de un brote son generalmente el aborto y/o la muerte del
individuo. La confirmación de una infección por L. monocytogenes es el
aislamiento de la bacteria del líquido cefalorraquídeo o de la sangre del
paciente.2 L. monocytogenes posee predilección por personas con inmunidad
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celular disminuida, las poblaciones de riesgo son mujeres en estados de
gravidez, ancianos, neonatos y personas inmunocomprometidas.11
Hasta hace unos años, se consideraba que los aislados de L. monocytogenes así
como las de otras Listeria sp, mostraban una susceptibilidad a un amplio rango
de antibacterianos activos contra bacterias Gram positivas.3
El espectro de acción del grupo de los B- Lactámicos como las penicilinas
(Penicilina Amoxicilina y Ampicilina) está dirigido a bacterias no productoras
de ß-lactamasas: gram positivos, algunos fastidiosos y gram negativos. Aunque
se han descrito fracasos clínicos contra la listeriosis en tratamientos con
penicilina o ampicilina, no se ha encontrado ninguna cepa resistente a estos
antibiótos.18
Los antibióticos beta-lactámicos interfieren con la síntesis de la pared celular
bacteriana, específicamente, estos medicamentos se ligan de manera covalente e
inhiben las enzimas traspeptidasas que participan en el último paso de la
formación del peptidoglicano rígido; este componente es especialmente
importante en la pared celular de las bacterias gram positivas. El anillo beta-
lactámico de las Cefalosporinas está unido a un anillo dihidrotiazida cuyo efecto
consiste en conferirle mayor resistencia a la acción de las beta-lactamasas que
las penicilinas originales. Las cefalosporinas en general exhiben una mayor
resistencia a la acción de las beta- lactamasas, una mayor afinidad con los
receptores (PBP) de la pared celular y una mayor capacidad para atravesar y
penetrar las paredes celulares bacterianas. Se las agrupa, hasta la actualidad, en
cuatro generaciones de cefalosporina.(19)
En la cefalosporina de segunda
generación tenemos a la cefuroxima que posee una actividad bactericida contra
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grampositivas y gramnegativas, pudiéndose administrar por todas las vías.21
La
cefalosporina de tercera generación como la cefotaxime posee actividad
bactericida contra Gram positivas pero muy potentes contra gramnegativos de
administración parental en la mayoría de los casos.19
El imipenem es un antibiótico beta-lactámico derivado de la tienamicina y es el
primer miembro de la familia de los antibióticos carbapenem. El imipenem
posee varias características que lo convierten en un antibiótico muy efectivo,
incluyendo: a) la penetración más eficiente a través de la pared celular
bacteriana, b) la resistencia a las enzimas bacterianas, y c) la afinidad por todas
las PBPs (Proteínas de unión a las Penicilinas) bacterianas. El imipenem tiene un
espectro más amplio de actividad que la mayor parte de otros antibióticos beta-
lactámicos, que incluye bacterias Gram-positivas y Gram-negativas aerobias y
anaerobias.20
La clindamicina es un antibiótico semisintético obtenido a partir de la
lincomicina. Es activa in vivo e in vitro, dicha acción es bacteriostática y sobre
todo bactericida, existiendo poca diferencia en la concentración que provoca uno
u otro de estos efectos. Su espectro antimicrobiano es muy reducido, se asemeja
al de la Penicilina G, abarcando sobre todo algunas bacterias grampositivas. La
clindamicina actúa sobre las bacterias inhibiendo la síntesis proteica, uniéndose
a la subunidad 50S de los ribosomas, actuando en dos formas, a)una semejante al
cloranfenicol, impidiendo la unión del complejo aminoácido-ácido ribonucleico
de transferencia al ribosoma; b)inhibiendo el mecanismo de traslocación, al igual
que los macrólidos, paso normalmente necesario para la formación de la cadena
polipeptídica al dejar libre cada vez el lugar del ribosoma donde ha de unirse el
nuevo aminoácido.21
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Las Tetraciclinas (Doxicilina) inhiben la síntesis de proteínas a nivel ribosomal,
de ciertas bacterias gram positivas y negativas. Las tetraciclinas son antibióticos
de amplio espectro antimicrobiano que bloquean la síntesis de proteínas,
impidiendo la unión del ARN de transferencia, que porta el aminoácido, con las
subunidades 30S y 50S que están montadas sobre la cadena de ARN mensajero y
que están produciendo la cadena polipeptídica.. Se ha descrito resistencias a
macrólidos y a tetraciclinas en algunos aislamientos de Listeria sp.; suelen estar
codificadas por algunos plásmidos, aunque también hay casos de resistencia a
tetraciclinas codificada cromosómicamente.3 se puede encontrar alguna cepa de
Listeria sp. resistente.18
El cloranfenicol es un compuesto de amplio espectro, bacteriostático que inhibe
el crecimiento bacteriano al bloquear la transferencia de ácido ribonucleico
soluble a los ribosomas sin embargo se puede encontrar alguna cepa de Listeria
sp. resistente.18
El cloranfenicol, inhibe la síntesis proteica, uniéndose a la
fracción ribosomal 50 S (cerca del sitio de acción de la eritromicina y
clindamicina, a las cuales inhibe competitivamente). El cloranfenicol penetra
fácilmente a las bacterias, por difusión facilitada, impidiendo que el extremo que
contiene aminoácidos del RNAt, se ligue a los sitios de unión.18
La rifampicina posee buena actividad “in vitro” pero selecciona cepas resistentes
durante el tratamiento contra listeriosis con mucha facilidad. (3)
Derivado
semisintético de la rifamicina, antibiótico macrocíclico complejo que inhibe la
síntesis del ácido ribonucleico en una amplia gama de microbios patógenos.
Inhibe la ARN-polimerasa dependiente de ADN de las cepas bacterianas
sensibles, sin afectar los sistemas enzimáticos del huésped.21
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La oxacilina sódica, es un antibiótico betalactámico, de espectro reducido del
grupo de las penicilinas, por lo que se indica en el tratamiento de infecciones
causadas por bacterias Gram positivas, al igual que otros antibióticos
betalactámicos la oxacilina actúa inhibiendo la síntesis de la pared celular
bacteriana. Evita la formación de enlaces cruzados entre las cadenas poliméricas
de peptidoglicano lineal las cuales son un componente importante de la pared
celular de las bacterias gram positivo. Actúa mediante la unión e inhibición
competitiva de la enzima transpeptidasa usada por la bacteria para generar los
enlaces cruzados (D-alanil-alanina) usados en la síntesis del peptidoglicano22
A pesar de que la data refiere una incidencia de resistencia antimicrobiana
relativamente baja en Listeria sp. es oportuno señalar que en los últimos diez
años los cambios en la susceptibilidad casi uniforme del género, representa un
tema de importancia y del cual aún falta mucho por discutir.3
El monitoreo
continuo del curso y la naturaleza de la adquisición y diseminación de resistencia
a antibacterianos por Listeria sp. se ha convertido casi en una exigencia para
todos los aislados procedentes de ambientes, infecciones clínicas y
primordialmente los provenientes de alimentos; ya que constituyen los vehículos
de transmisión primaria de la listeriosis.3
Hoy en día, el uso indiscriminado de antibióticos y la presión selectiva
ambiental realizada por antisépticos, desinfectantes y germicidas ha
generado una respuesta de supervivencia en los microorganismos, que los
capacita para evadir con eficiencia la acción bactericida de algunos agentes,
este uso generalizado de los antibióticos en la industria agrícola, acuícola,
veterinaria y en medicina, ha permitido la supervivencia de las cepas
resistentes; generando desequilibrio ecológico.16,23
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Las industrias en la producción de leche, carne y huevos se convierten en un
consumidor potencial de antibióticos con el objetivo de disminuir los periodos
de crianza y engorde. Para contener la alta incidencia de patógenos de alimentos
se hace necesario aplicar antimicrobianos en el tratamiento terapéutico de
animales infectados que cursan con diarrea, abscesos, bacteremias, mastitis entre
otros; en este procedimiento se administran antimicrobianos de amplio espectro
como cefalosporinas, tetraciclinas, aminoglucósidos, macrólidos,
trimetropim/sulfametoxasol, polimixina B y quinolonas. Estos antibióticos,
que también son empleados a nivel hospitalario, se emplean en los rebaños
como metafilácticos y profilácticos.24
Como es el caso de las granjas lecheras,
los terneros son alimentados de 6 a 8 semanas con leche natural o leche de
reemplazo y se les administra tetraciclinas, penicilinas o sulfonamidas para
prevenir la diarrea y la neumonía.23
En el Perú, en especial en la ciudad de Trujillo la presencia de Listeria sp. en
alimentos como verduras y carnes indican su distribución en la cadena
alimentaria y su contacto directo e indirecto con los antibióticos que se utilizan
comúnmente según la tesis realizadas por Calderon D. y Mercado P. en el 2014
donde se aislaron Listeria sp. a partir de superficies donde se expenden verduras,
y la tesis realizada por Parimango K, y Mercado P. en el 2013 donde se aisló
Listeria sp. a partir de superficies donde se expenden carnes, de los mercados del
distrito de Trujillo y La Esperanza.25,26
Por lo antes expuesto, es importante
realizar el presente estudio en cultivos de Listeria sp. para determinar su
sensibilidad frente a determinados antibacterianos y así conocer, en base a
análisis estadísticos, cual es el antibacteriano que tiene un mejor efecto sobre
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esta bacteria y en qué medida se diferencia esta sensibilidad de acuerdo a la
procedencia de los cultivos, sea de carnes así como de verduras.
OBJETIVOS
Objetivo General:
Determinar la sensibilidad antibacteriana de los cultivos de Listeria
sp. provenientes de carnes y verduras frente a diferentes
antibacterianos.
Objetivos Específicos:
Confrontar la resistencia de Listeria sp. Vs. Listeria monocytogenes
de los cultivos provenientes de carnes frente a 10 antibacterianos más
utilizados.
Confrontar la resistencia de Listeria sp. Vs. Listeria monocytogenes
de los cultivos provenientes de verduras frente a 10 antibacterianos
más utilizados.
Determinar mediante datos estadísticos si existe diferencia signicativa
entre la sensibilidad obtenida de cultivos de Listeria monocytogenes
provenientes de carnes respecto a cultivos de Listeria monocytogenes
provenientes de verduras.
Obtener datos estadísticos sobre la sensibilidad de la Listeria sp. y los
antibacterianos que serían los más recomendables para un posible
tratamiento de listeriosis.
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MATERIALES Y MÉTODOS
1. MATERIAL
1.1. Muestra
40 cultivos de Listeria sp. entre los cuales están 18 cultivos de Listeria
monocytogenes, los que fueron suministrados a partir de la tesis realizadas
por en el 2014 donde se aislaron Listeria sp. a partir de superficies donde se
expenden verduras, y la tesis realizada en el 2013 donde se aisló Listeria sp.
a partir de superficies donde se expenden carnes, de los mercados del
distrito de Trujillo y La Esperanza.25,26
2. MÉTODO
2.1. Reactivación de los cultivos de Listeria sp.
Los cultivos fueron recuperados en placas con agar tripticasa de soya con
0,6 % de extracto de levadura, a 30 ºC por 48 horas
Posteriormente fueron aislados en placas con agar Oxford a 30ºC por 24
horas y luego traspasadas a frascos conteniendo agar nutritivo a 30ºC por
24-48 horas.
2.2. Obtención de la suspensión de Listeria sp. y L. monocytogenes.
Luego de reactivar los cultivos estas fueron transferidas a solución
fisiológica 0,85 %, para la obtención de una suspensión bacteriana con un
patrón de turbidez McFarland 0,5; el equivalente a 1.5x108 UFC/ml.
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2.3. Siembra en placa de la suspensión: Método de Kirby Bauer.
Se prepararon placas Petri con agar Müller Hinton (12 – 15 ml por placa)
a 45º C aproximadamente, estas se dejaron secar por unos minutos en
estufa para eliminar el exceso de humedad.
En un lapso de tiempo óptimo de 15 minutos después de ajustar la
turbidez, se procedió a sembrar la suspensión con ayuda de un hisopo
estéril sobre la superficie de las placas Petri en todas las direcciones.
Sobre la superficie de la placa ya sembrada con la suspensión bacteriana
(inóculo) se colocó con ayuda de una pinza estéril los discos de
antibióticos y se incubó a 37ºC por 24 horas, tras lo cual se procedió a la
lectura e interpretación.
Se aplicó los lineamientos del método del método de Kirby Bauer para
determinar la sensibilidad de Listeria sp. frente a los antibacterianos
Los antibacterianos probados fueron: B-Lactámicos: Penicilinas (10 μg
Penicilina); Cefalosporina: Cefotaxima (30 μg) y cefuroxima (30μg);
Carbapenems (10 μg imipenem); nitrofurantoina (300 μg); Rifamicina (5
μg), Tetraciclinas (30 μg Tetraciclina); Fenicoles (30 μg Cloranfenicol),
clindamicina (2 μg), oxaciclina (1 μg).
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2.4. Medición del halo
Pasado el tiempo de incubación se midió el diámetro (en milímetros) de
la zona alrededor de cada disco, esto fue interpretado de acuerdo a los
lineamientos del National Comitte for Clinical Laboratory Standars
(NCCLS), y se clasificó la sensibilidad de cada cultivo frente a los
antibacterianos ubicándolos como susceptible, intermedio o resistente.
2.5. Análisis de resultados
Los resultados del grado de sensibilidad y resistencia tanto de Listeria sp.
como de específicamente Listeria monocytogenes fueron plasmados en
tablas y cuadros para su mejor visualización y comprensión. Se aplicó
análisis estadísticos (ANOVA) para determinar si existe diferencia
significativa entre los resultados obtenidos.
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RESULTADOS
En la Figura 1 en los cultivos proveniente de carnes de Listeria sp se observa resistencia
para todos los antibacterianos pero en baja frecuencia a diferencia de L. monocytoges
que solo presenta resistencia en algunos antibacterianos especialmente frente a
oxaciclina en un 70% y clindamycina en un 60%.
En la Figura 2 en los cultivos proveniente de verduras se observa que Listeria sp
presenta resistencia frente a todos los antibacterianos a diferencia de L. monocytoges
que presenta resistencia solo frente a algunos antibacterianos especialmente frente a
oxaciclina y rifampicina con un 100% de resistencia.
En la Tabla 1 se observa que el estadístico de prueba (p-valor), entre la sensibilidad de
L. monocytogenes proveniente de carnes frente a L. monocytogenes proveniente de
verduras es menor a 0,05
En la FIGURA 3 Explica que los antibacterianos que están sobre la media aritmética de
la frecuencia de sensibilidad destacan el imipenem penicilina, cloranfenicol y
tetraciclina la en Listeria sp. provenientes de carnes como en las provenientes de
verduras.
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Fig. 1. Frecuencia (%) de sensibilidade antibacteriana enfocada como resistencia, de lós
cultivos de Listeria sp. y L. monocytogenes provenientes de carnes frente a diferentes
antibacterianos.
.
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Fig. 2 Frecuencia (%) de sensibilidade antibacteriana enfocada como resistencia, de lós
cultivos de Listeria sp. y L. monocytogenes provenientes de verduras frente a diferentes
antibacterianos.
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Tabla 1. Análisis de varianza según ANOVA para determinar si existe
diferencia significativa entre la sensibilidad de L. monocytogenes proveniente de
carnes Frente a L. monocytogenes proveniente de verduras.
ANOVA
Estadistico de prueba
FV SC GL CM F P-Valor
Tratamientos 277.588921 1 277.588921 5.54756247 0.019484489
Error 19915.1233 398 50.0379982
TOTAL 20192.7122 399
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Fig. 3. Frecuencia de sensibilidad en % de Listeria sp. provenientes de carnes, &
Listeria sp. provenientes de verduras, evidenciando si el antibiótico que causa la
sensibilidad está o no por encima de la media aritmética.
Donde: IMP=Imipenen; P= Penicilina; NIT=nitrofurantoina; CTX=cefotaxime, CXM=Cefuroxima,
DCI=Clindamycina; OX=oxaciclina; C=Cloranfenicol, RA=Rifampicina; TE=Tetraciclina.
---- Representa la Media Aritmetica
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DISCUSIÓN
Según lo observado en la Figura 1 y 2 en el caso de Listeria sp., nuestros datos
van de acuerdo a Rahimi y col., en el 2012 que hicieron estudios sobre la
resistencia adquirida por Listeria sp. presentes en productos tradicionales en Irán
quienes encontraron un 42% de resistencia de Listeria sp. frente a la penicilina,
un 14,3 % frente a cloranfenicol y un 33,3 % frente a tetraciclina, los resultados
de la resistencia a los antimicrobianos encontrados en este estudio estaban
correlacionados a los antibióticos que se utilizan para tratar la infección en
animales destinados al consumo en Irán. En nuestro estudio encontramos
resistencia presente en Listeria sp. frente a la penicilina en un 10%-20%,
cloranfenicol en 20%-58%, y tetraciclina 20%-58% los resultados ponen de
manifiesto la aparición de bacterias resistentes a estos fármacos.
En el caso de Listeria monocytogenes encontramos en la figura 2 un 38% de
resistencia frente a penicilina concordando con Rahimi y col. que encontraron
resistencia frente a penicilina en un 60% y con Ieren y col. en el 2013 en el
estudio realizado sobre la resistencia de Listeria monocytogenes en ensaladas en
Nigeria que encontraron un alto número de bacterias resistentes a la penicilina
así como a la oxaciclina en un 85,5%, por lo que, el estudio muestra que L.
monocytogenes se encuentran en verduras que se venden en Zaria , Nigeria , por
lo tanto , se debe tomar precaución adecuada en la preparación de estos
vegetales , de consumo tanto para humanos y animales, concordando con nuestro
estudio donde se encontró un 100% de resistencia de L. monocytogenes frente a
la oxaciclina y un 58% de resistencia frente a esta en Listeria sp.
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En la investigación realizada por Gunes A. y col. en el 2012 donde estudio la
sensibilidad de Listeria monocytogenes aislados de variedad de alimentos en
diferentes antibióticos, encontró un 0% de resistencia frente a la tetraciclina,
cloranfenicol, rifampicina y penicila, concordando con la investigación realizada
donde en la figura 1 se puede observar que no se presenta resistencia de L.
monocytogenes frente a penicilina, cloranfenicol y tetraciclina, y en la figura 2
frente a cloranfenicol y tetraciclina, difiriendo con nosotros en el caso de la
rifampicina donde si encontramos resistencia en ambos casos(figura 1 y 2),
donde concordamos con Santos M. y col. en el 2008, que realizaron un estudio
sobre la resistencia de L. monocytogenes en carnes de bovino encontrando
resistencia frente a rifampicina en un 50% y en Listeria sp. en un 85%.
De acuerdo a lo mencionado por Palacian P. y col., en el 2011, el imipenem en el
tratamiento de Listeriosis resulta ser favorable, como lo observamos en la figura
3, La Listeria sp. posee un alto porcentaje de sensibilidad frente al imipenem a
diferencia de los demas antibióticos utilizados y según se observa en la figura 1
y 2 L. monocytogenes posee un 0% de resistencia frente a este antibiótico, este
antibiótico es efectivo contra los Gram positivos según lo indicado por
Peñaherrera E. en el 2013.
En el caso de la clindamycina Santos M. y col. en el 2008 encontraron L.
monocytogenes resistentes en un 100% y Listeria sp. en un 85%, como se
observan en la figura 1 la L. monocytogenes tiene mayor % de resistencia a este
antibiótico que Listeria sp. En el caso de la nitrofurantoina existen bacterias
resistentes a esta en porcentajes altos en el caso de la figura 1 y en % bajos en el
caso de la figura 2, por lo que diferimos con Balsalobre B. y Hernadez J. en el
2004 que indica que no se presentaron cepas resistentes a la nitrofurantoina, a
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diferencia de Marcenac L. Fernandez J. y Paolaso W. quienes encontraron cepas
resistentes a este antibiotico.
L. monocytogenes presenta resistencia natural a las cefalosporinas de tercera
generación como lo menciona Ruiz Z. y col. en el 2008, sobre resistencia
antimicrobioana y a desinfectantes de Listeria sp. donde se dejan entrever la
pérdida de opciones terapéuticas. En este sentido la CLSI (Clinical and
Laboratory Standard Institute, USA) orienta la terapia claramente al uso de
Penicilina y Amoxicilina y restringe las cefalosporinas debido a la resistencia
intrínseca del microorganismo, en nuestra tesis en el estudio de las
cefalosporinas de segunda (cefuroxima) y tercera generación (cefotaxima)
ensayadas, tenemos un mayor prcentaje de resistencia en la cefotaxime que en la
cefuroxima por lo que se ha mostrado susceptibilidad moderada. Debido a la
pobre actividad o la resistencia de las cefalosporinas de segunda y tercera
generación contra L. monocytogenes, Cormican y Jones en 1995, confirmaron
que las cefalosporinas no deben ser utilizadas clínicamente para el tratamiento
de la listeriosis como se puede observar claramente en la figura 3.
Para la obtención de resultados estadísticos, se realizó el estudio de análisis de
varianza (ANOVA) según se muestra en la tabla 1 que indica que existe
diferencia significativa entre los cultivos de Listeria monocytogenes
provenientes de carnes sobre las provenientes de verduras ya que el estadístico
de prueba (p-valor) es menor que el nivel de significancia (α), por lo que se
rechaza Ho (no hay diferencia significativa) y se acepta el H1 (hay diferencia
significativa) obteniendo que el tamaño de halos varía de acuerdo a la fuente de
obtención del cultivo.36
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Como se puede observar en la figura 1,2 y 3, el porcentaje de sensibilidad varía
de acuerdo a la fuente del que se obtienen los cultivos donde vemos que la
sensibilidad de los provenientes de carnes se diferencian de los provenientes de
verduras, y existe diferencia significativos con respecto al tamaño de halos de
cada grupo como se muestra en la tabla 1, de acuerdo con Conter M. y col. en el
2007, en su estudio realizado sobre la Sensibilidad a los antimicrobianos de
Listeria monocytogenes aisladas de alimentos donde estudia la resistencia de L.
monocytogenes aislada de carnes Vs las aisladas de pescado encontrando un p<
0,01 donde indica la diferencia signicativa, esto también es mencionado por
Aureli P. y Col., en el 2003 que indica que la sensibilidad de los cultivos
obtenidas de carnes de pollo son diferentes a la sensibilidad de las cultivos
obtenidas de carnes rojas.
Vega J. Y Mercado P. en el 2013 hicieron un estudios con respecto a la
variación de sensibilidad de las especies de Listeria y encontraron que los
antibióticos a utilizar, y su grado de sensibilidad varían dependiendo de la
especie en estudio, lo que se puede observar en la figura 1 y 2 donde se observa
variación en cuanto a la sensibilidad de las especies: Listeria monocytogenes Vs
Listeria sp.
Según lo observado en la figura 3 los antibióticos que se encuentran por encima
de la media pueden ser los más efectivos ante una posible infección de listeriosis
entre los que tenemos a imipenem, cloranfenicol, cefotaxime, penicilina y la
tetraciclina; Como podemos ver en la figura 1 y 2 algunos de estos antibióticos
no provoca resistencia en L. monocytogenes, entre los que tenemos al imipenen,
cloranfenicol, y tetraciclina por lo que son los más adecuados para el tratamiento
de L. monocytogenes según el estudio realizado por Gunes A. y col. en el 2012.
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Ninguno de estos antibióticos crean un 100% de sensibilidad por lo que Noriega
R, y col. en el 2008, recomienda combinar a 2 o más antibacterianos para un
tratamiento más efectivo, mostrando casos que fueron tratados con ampicilina y
gentamicina y luego a falta de ampicilina parenteral en Chile, se usó penicilina y
gentamicina, esta última los primeros siete a 10 días, muchos expertos
recomiendan esta asociación con gentamicina para lograr un efecto sinérgico,
dada la actividad bacteriostática de los β-lactámicos sobre L. monocytogenes.
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CONCLUSIONES
Todas los cultivos de Listeria sp. presentan porcentajes de resistencia
frente a los antibióticos utilizados, a diferencia L. monocytogenes, quien
no presenta resistencia frente a imipenen, cloranfenicol y tetraciclina.
Existe variación de sensibilidad entre especies de L. monocytoges Vs
Listeria sp.
Existe diferencia significativa con respecto a los halos obtenidos de
Listeria monocytogenes provenientes de carne con respecto a los halos
obtenidos de L. monocytogenes provenientes de verduras.
Los Cutivos de Listeria sp. presentan mayor sensibilidad por encima de
la media artmetica, al Imipenem, cloranfenicol, cefotaxime, penicilina y
la tetraciclina.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Rossi L, Paiva A, Tornese M, Chianelli S, Troncoso A. Brotes de infección
por Listeria monocytogenes: Una revisión de las vías que llevan a su
aparición. Chil Infect 2008; 25 (5): 328-335.
2. SchöbitZ R, Ciampi L, y Nahuelquin Y. Listeria monocytogenes un peligro
para la industria alimentaria. Agro sur. Chile 2009; 37 (1): 1-8
3. Villalobos L. y Martínez R. Susceptibilidad antimicrobiana de Listeria spp.
aisladas de alimentos durante el periodo 2003-2004. Cumaná, Venezuela.
Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2006; 26:31-34
4. Organización Mundial de Salud animal Listeria monocytogenes. Manual
de la OIE sobre animales terrestres. 17° edit. 2008. capítulo 2.9.7
5. Gamboa A, Mejía D, Moreno P, Buitrago S, Peréz K, et al. Antimicrobial
susceptibility of Listeria monocytogenes, listeria ivanovii, and listeria species
isolated from swine processing facilities in Colombia. J Swine Health Prod.
2013; 21(1):10-21
6. Nekazaritzaco E, Segurtazunarako, Euskal F. Listeria monocytogenes.
ELIKA-Granja Modelo. Araba. 2006; 1- 13
7. Organización Mundial de Salud animal. Listeria monocytogenes. Manual de
la OIE sobre animales terrestres. 5° edit. 2004. capítulo 2.10.14
8. Larraín D, Carvajal J. Los Aspectos Fisiopatológicos Y Moleculares
Involucrados En El Traspaso De Listeria monocytogenes A Través De La
Barrera Placentaria. (Una Revisión Bibliográfica).Boletín Escuela De
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medicina U.C, Pontificia Universidad Católica De Chile. Chile 2008;
33(1):20-30.
9. Muñoz A, Vargas M, Otero L, Díaz A, Guzmán V. Presencia de Listeria
monocytogenes en alimentos listos para el consumo, procedentes de plazas de
mercado y supermercados de cadena, Bogotá, D.C, 2002-2008. Biomédica
2011; 31:428-39.
10. Gandhi M, Chikindas M. Listeria: A foodborne pathogen that knows how
to survive. Int J Food Microbiol 2007; 113: 1-15
11. Torres K. Sierra S. Poutou R. Carrascal A. Mercado M. Patogénesis de
Listeria monocytogenes, microrganismo zoonótico emergente. MVZ
Córdova. Colombia 2005; 10(1):511-543
12. Marco N. Listeria monocytogenes en productos cárnicos LPC. Resistencia
a los antibióticos (trabajo fin de Máster).España: Departamento de
Producción Animal y Ciencia de los Alimentos, Universidad Zaragoza; 2011-
2012
13. Chávez R. Evaluación del control de Listeria monocytogenes usando
métodos físicos y químicos en condiciones de laboratorio y sobre superficies
contaminadas en relación al tiempo. Trujillo: Universidad Nacional de
Trujillo; 2011.
14. Rojas C. Evaluación de cuatro desinfectantes Sobre Listeria
Monocytogenes aislada de Productos Cárnicos Crudos de una Planta de
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28
Procesados en Bogotá (Tesis e Grado). Bogotá: Pontífice Universidad
Javeriana; 2007.
15. Dickson, J.S., Koohmaraie, M. Cell Surface Charge Characteristic and
Their Relationship to Bacterial Attachement to Meal Surfaces. Applied and
Environmental Microbiology 1989; 55:832-836.
16. Perez L, Sigaran P. Determinación de la resistencia en cepas de Listeria
monocytogenes aislada a partir de muestras de espinaca Spinacea oloracea
utilizando germicidas para la desinfección de alimentos (tesis para optar
licenciatura). El Salvador: Universidad del salvador; 2012.
17. Gallegos J. Arrieta G. Máttar S. Poutou R. Trespalacios, A. Carrascal A.
Frecuencia de Listeria spp., en quesos colombianos costeños. MVZ Córdoba,
Colombia 2007; 12(2) : 996-1012
18. Malbrán C. Métodos estandarizados para la determinación de la sensibilidad
antimicrobiana en bacterias aisladas de animales: test de difusion por discos y
test de dilución. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas.
Departamento Bacteriología. Servicio Antimicrobianos. Buenos Aires,
Argentina. 2001
19. Arguedas J. Cefalosporinas. Actualización en farmacoterapia. Octubre del
2003: www.ampd.com.
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Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.
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29
20. Cohen J, Leverstein-Van Hall MA; Dutch Working Party on the Detection of
Highly Resistant Microorganisms. Guideline for phenotypic screening and
confirmation of carbapenemases in Enterobacteriaceae. Int J Antimicrob
Agents. 2010 Sep; 36(3): 205-10.
21. Vives A, Medvedodvsky D, Rothilin R. Inhibidores de la pared bacteriana.
2004.
22. Martineza A, Sanchez F. Mecanismo de acción de los antibióticos. Agencia
de salud pública, Barcelona. España 2007. Disponible en:
www.doyma.es/jano
23. Ruiz Z, Poutou A, Carrascal K. Resistencia antimicrobiana y a
desinfectantes de Listeria spp. NOVA- publicación científica en ciencias
biomédicas: 6(10);101-236.
24. Marino M. GW Domains of the Listeria monocytogenes invasion protein
InlB are SH3-like and mediate binding to host ligands. Eur Mol Biol Org J.
2002; 21:5623-5634.
25. Calderon D, Mercado P. Aislamiento de especies de Listeria sp. obtenidos
de superficies donde se expende verduras, en los mercados de la ciudad de
Trujillo, Departamento de La Libertad, Perú en los meses de diciembre-
febrero del 2013(tesis para título).Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo;
2013
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30
26. Parimango K, Mercado P. Aislamiento de especies de Listeria sp. obtenidos
de superfiies donde se expende carnes, en los mercados de la ciudad de
Trujillo, Departamento de La Libertad, Perú en los meses de diciembre-
febrero del 2013.Trujillo: Universidad Nacional de Trujillo; 2013.
27. Rahimi, E., H. Momtaz, A. Sharifzadeh, A. Behzadnia, M. S. Ashtari, S.
Zandi Esfahani, M. Riahi & M. Momeni. Prevalence and antimicrobial
resistance of Listeria species isolated from traditional dairy products in
Charar Mahal & Bakhtiary, Iran. Bulg. J. Vet. Med 2012; 15: 115−122.
28. Ieren I, Bello M, Kwaga P. Occurrence and antibiotic resistance profile of
Listeria monocytogenes in salad vegetables and vegetable salads sold in
Zaria, Nigeria. Afr. J. Food Sci 2013; 7(9): 334-338.
29. Gunes A, Kocan D, Cosansu S, Ayhan K, Juneja V, Materon L. Antibiotic
and Bacteriocin Sensitivity of Listeria monocytogenes Strains Isolated from
Different Foods. Food and Nutrition Sciences 2012; 3: 363-368. Disponible
en: http://www.SciRP.org/journal/fns.
30. Santos P, Franco M, Oliveira T, Santos B. Resistência antimicrobiana de
bactérias do gênero Listeria spp. isoladas de carne moída bovina. Braz. J. vet.
Res. anim. Sci 2008; 45 (2): 116-121.
31. Palacián R, Cameo R, Arazo G, Marco L, Revillo P. Infecciones por
Listeria monocytogenes. Rev Esp Quimioter 2011;24(2):112-114.
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32. Peñaherrera W. Uso De Antibacterianos En El Área De Clínica Del
Hospital “JOSÉ CARRASCO ARTEAGA”. Universidad de Cuenca Ecuador.
Tesis previa a la obtención del título de magister en atención farmacéutica
2013.
33. Balsalobre B, Hernández J. Resistencias a antibióticos en Listeria
Monocytogenes y Salmonella entérica aislados de alimentos de origen
animal. Rev. salud ambienta 2004;4(1-2): 42-46.
34. Marcenac L, Fernandez J, Palasso W. Sensibilidad de L. monocytogenes a
20 drogas antibacterianas. Bol. A. N. de Medicina 1980;Vol. 5 :8 -20.
35. Cormican M, Jones R. Antimicrobial activity of cefotaxime tested against
infrequently isolated pathogenic species (Unusual Pathogens). Diagn
Microbiol Infect Dis 1995; 22:43–8.
36. Manterola C, Pineda V. El valor de “p” y la “significación
estadística”.Aspectos generales y su valor en la práctica clínica*
Interpretation of medical statistics. Rev. Chilena de Cirugía 2008; 60(1): 86-
89.
37. Conter M, Paludi D, Orio D, Ianeri A. Antimicrobial susceptibility of
Listeria monocytogenes isolated from food and food-processing environment.
Ann. Fac. Medic. Vet. di Parma 2007; 27: 157-164.
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38. Aureli P, Ferrini A, Mannoni V, y Col. Susceptibility of Listeria
monocytogenes isolated from food in Italy to antibiotics. Int J Food Microbiol
2003; 83:325–30.
39. Vega J, Mercado P. Sensibilidad antibacteriana de cultivos de Listeria sp.
aislados de lugares de expendio de pollo y quesos en mercados de la ciudad
de Trujillo (Perú). REBIOLEST 2013; 1(2): e28.
40. Noriega R, Ibáñez V, González A, Yamamoto C, Astudillo D, González V,
y Col. Listeria monocytogenes: Informe de un aumento de casos en mujeres
embarazadas y revisión de la literatura. Rev Chil Infect 2008; 25 (5): 342-
349.
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ANEXOS
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ANEXO 01
Tabla 2: Rango del nivel de sensibilidad de Listeria sp. frente a antibacterianos
Antibacteriano Sensibilidad
Sensible Intermedio Resistente
cefotaxime ≥ 18 15–17 ≤ 14
Penicilina ≥28 20-27 ≤19
nitrofurantoina ≥ 17 15–16 ≤ 14
Imipenem ≥ 16 14–15 ≤ 13
Cefuroxima ≥ 18 15–17 ≤ 14
Clindamycina ≥ 21 15-20 ≤ 14
Oxaciclina ≥ 13 11-dic ≤ 10
Cloranfenicol ≥ 21 18–20 ≤ 17
Rifampicina ≥ 19 17–18 ≤ 16
Tetraciclina ≥ 23 19–22 ≤ 18
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ANEXO 02
Tabla 3: Diámetros de halos obtenidos en Listeria monocytogenes proveniente de carnes.
Nº Cultivo Antibacteriano Diámetro del Halo Nivel de sensibilidad
1
cefotaxime 11.74 R
nitrofurantoina 14 R
imipenem 28.5 S
penicilina 28 S
cefuroxima 16 I
clindamycina 8 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 19 I
Tetraciclina 24 S
cefotaxime 13.64 R
nitrofurantoina 15 I
imipenem 23.41 S
penicilina 27 I
2 cefuroxima 8.5 R
clindamycina 9.12 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 20 I
Tetraciclina 21 I
cefotaxime 16.4 I
nitrofurantoina 13.4 R
imipenem 23.5 S
penicilina 27.8 S
3 cefuroxima 15 I
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 25 S
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cefotaxime 17.6 S
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 29 S
4 cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 18 I
Tetraciclina 23.5 S
cefotaxime 18.27 S
nitrofurantoina 17 S
imipenem 24.9 S
penicilina 28.9 S
cefuroxima 7.5 R
5 clindamycina 10 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 5.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 22 I
cefotaxime 21 S
nitrofurantoina 21 S
imipenem 31 S
penicilina 28 S
cefuroxima 23 S
6 clindamycina 13 R
rifampicina 24 S
oxacilina 11 I
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 22 I
cefotaxime 16 I
nitrofurantoina 23 S
imipenem 15 I
7 penicilina 20 I
cefuroxima 14 R
clindamycina 18 I
rifampicina 26 S
oxacilina 12 I
cloranfenicol 20 I
Tetraciclina 29 S
imipenem 30 S
penicilina 25 I
8 cefuroxima 20 S
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clindamycina 16 I
rifampicina 25 S
oxacilina 10 R
cloranfenicol 24 S
Tetraciclina 22 I
cefotaxime 18 S
nitrofurantoina 21 S
imipenem 26 S
penicilina 28 S
9 cefuroxima 23 S
clindamycina 17 I
rifampicina 18 I
oxacilina 11 I
cloranfenicol 18 I
Tetraciclina 26 S
cefotaxime 18 S
nitrofurantoina 19 S
imipenem 23 S
penicilina 32 S
cefuroxima 18 S
10 clindamycina 22 S
rifampicina 19 S
oxacilina 6 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 22 I
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ANEXO 03
Tabla 4: Diámetros de halos obtenidos en Listeria sp. proveniente de carnes.
Nº Cultivo Antibacteriano Diámetro del Halo Nivel de sensibilidad
1
cefotaxime 16.8 I
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 25 I
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 14 R
Tetraciclina 13.5 R
2
cefotaxime 21.5 S
nitrofurantoina 19.5 S
imipenem 7.5 R
penicilina 29 S
cefuroxima 10.5 R
clindamycina 5.5 R
rifampicina 12 R
oxacilina 12.8 S
cloranfenicol 23.5 S
Tetraciclina 27.6 S
3
cefotaxime 8.5 R
nitrofurantoina 6.56 R
imipenem 9.48 R
penicilina 6.5 R
cefuroxima 13.79 R
clindamycina 13.48 R
rifampicina 21.5 S
oxacilina 15.45 S
cloranfenicol 8.5 R
Tetraciclina 19 I
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4
cefotaxime 15 I
nitrofurantoina 16 I
imipenem 19 S
penicilina 23 I
cefuroxima 34 S
clindamycina 21 S
rifampicina 21 S
oxacilina 20 S
cloranfenicol 33 S
Tetraciclina 24 S
5
cefotaxime 22 S
nitrofurantoina 23 S
imipenem 24 S
penicilina 27.5 S
cefuroxima 10 R
clindamycina 25 S
rifampicina 26 S
oxacilina 20 S
cloranfenicol 24 S
Tetraciclina 25 S
6
cefotaxime 22 S
nitrofurantoina 22 S
imipenem 25 S
penicilina 28 S
cefuroxima 30 S
clindamycina 27 S
rifampicina 19 S
oxacilina 16 S
cloranfenicol 25 S
Tetraciclina 23 S
7
cefotaxime 18 S
nitrofurantoina 21 S
imipenem 20 S
penicilina 21 I
cefuroxima 30 S
clindamycina 21 S
rifampicina 19 S
oxacilina 19 S
cloranfenicol 25 S
Tetraciclina 20 I
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cefotaxime 17 I
nitrofurantoina 17 S
imipenem 25 S
penicilina 29 S
cefuroxima 29 S
clindamycina 26 S
rifampicina 23 S
oxacilina 11 I
cloranfenicol 23 S
Tetraciclina 27 S
9
cefotaxime 23 S
nitrofurantoina 20 S
imipenem 19 S
penicilina 20 I
cefuroxima 25 S
clindamycina 23 S
rifampicina 18 I
oxacilina 16 S
cloranfenicol 35 S
Tetraciclina 13 R
10
cefotaxime 21 S
nitrofurantoina 19 S
imipenem 23 S
penicilina 27.9 S
cefuroxima 18 S
clindamycina 22 S
rifampicina 19 S
oxacilina 6 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 25 S
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ANEXO 04
Tabla 5: Diámetros de halos obtenidos e Listeria monocytogenes proveniente de verduras.
Nº Cultivo Antibacteriano Diámetro del Halo Nivel de sensibilidad
1
cefotaxime 13.79 R
nitrofurantoina 13.48 R
imipenem 22 S
penicilina 20 I
cefuroxima 19 S
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 22 S
Tetraciclina 24 S
2
cefotaxime 16.11 I
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 16.92 R
cefuroxima 10.27 R
clindamycina 8.5 R
rifampicina 11.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 20 I
3
cefotaxime 17.12 S
nitrofurantoina 15 I
imipenem 22 S
penicilina 23 I
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 18 I
Tetraciclina 23.9 S
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4
cefotaxime 18 S
nitrofurantoina 16.8 S
imipenem 24.27 S
penicilina 20 I
cefuroxima 9.7 R
clindamycina 6 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 20 I
Tetraciclina 19 I
5
cefotaxime 14.82 R
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 16.5 R
cefuroxima 15.6 I
clindamycina 13 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 23 S
6
cefotaxime 16.14 I
nitrofurantoina 13.4 R
imipenem 22 S
penicilina 24 I
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 20 I
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7
cefotaxime 19.11 S
nitrofurantoina 12.11 R
imipenem 23.5 S
penicilina 16.5 R
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 21 S
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 20 I
Tetraciclina 25 S
8
cefotaxime 18.11 S
nitrofurantoina 10.12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 21 I
cefuroxima 16 I
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 24 S
Tetraciclina 22 I
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Tabla 6: Diámetros de halos obtenidos en Listeria sp.proveniente de carnes.
Nº Cultivo Antibacteriano Diámetro del Halo Nivel de sensibilidad
1
cefotaxime 18.24 S
nitrofurantoina 14.12 R
imipenem 22 S
penicilina 16.5 R
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 8.12 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 18 I
Tetraciclina 16 R
2
cefotaxime 18.21 S
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 16.5 R
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 22 I
3
cefotaxime 15.28 I
nitrofurantoina 13.68 R
imipenem 20.5 S
penicilina 28 S
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 14 R
Tetraciclina 22.6 S
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cefotaxime 24.27 S
nitrofurantoina 16.92 S
imipenem 10.27 R
penicilina 26 I
cefuroxima 11.5 R
clindamycina 7.5 R
rifampicina 16.81 R
oxacilina 13 S
cloranfenicol 17.5 R
Tetraciclina 18.15 R
5
cefotaxime 7.38 R
nitrofurantoina 9.54 R
imipenem 15 I
penicilina 28 S
cefuroxima 18 S
clindamycina 15.42 I
rifampicina 28.5 S
oxacilina 16.5 S
cloranfenicol 8.5 R
Tetraciclina 23.2 S
6
cefotaxime 10.5 R
nitrofurantoina 4.5 R
imipenem 17.26 S
penicilina 27.8 S
cefuroxima 23.5 S
clindamycina 14.5 R
rifampicina 9.7 R
oxacilina 7.3 R
cloranfenicol 10.2 R
Tetraciclina 3.5 R
7
cefotaxime 16.8 I
nitrofurantoina 10.43 R
imipenem 26.4 S
penicilina 28 S
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 11.2 I
cloranfenicol 14 R
Tetraciclina 12 R
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cefotaxime 16.8 I
nitrofurantoina 10.43 R
imipenem 26.4 S
penicilina 28 S
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 6.5 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 11.2 I
cloranfenicol 14 R
Tetraciclina 12 R
8
cefotaxime 23.5 S
nitrofurantoina 16.5 S
imipenem 8.5 R
penicilina 28.9 S
cefuroxima 16.3 I
clindamycina 4.5 R
rifampicina 17.23 I
oxacilina 13.12 S
cloranfenicol 22 S
Tetraciclina 16.23 R
9
cefotaxime 11.5 R
nitrofurantoina 7.46 R
imipenem 14.5 I
penicilina 29 S
cefuroxima 12.4 R
clindamycina 12 R
rifampicina 23.5 S
oxacilina 17.5 S
cloranfenicol 9.23 R
Tetraciclina 6.5 R
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cefotaxime 10.5 R
nitrofurantoina 4.5 R
imipenem 12.84 R
penicilina 29 S
cefuroxima 23.5 S
clindamycina 16.5 I
rifampicina 8.5 R
oxacilina 6.5 R
cloranfenicol 10.5 R
Tetraciclina 4.5 R
11
cefotaxime 18.24 S
nitrofurantoina 14.12 R
imipenem 22 S
penicilina 29 S
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 8.12 R
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 18 I
Tetraciclina 23 S
12
cefotaxime 18.21 S
nitrofurantoina 12 R
imipenem 23.5 S
penicilina 16.5 R
cefuroxima 8.5 R
clindamycina 15 I
rifampicina 10.5 R
oxacilina 4.5 R
cloranfenicol 21 S
Tetraciclina 22 I
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ANEXO 05
TABLA 07. Frecuencia de la sensibilidad de los cultivos de Listeria sp. Carnes y
Listeria sp. Verduras aislados de mercados provenientes de la ciudad de Trujillo frente a
los antibacterianos seleccionados.
Antibacteriano Frecuencia (%) de sensibilidad de:
L.sp Carnes L.sp Verduras
cefotaxime 60.00 50.00
nitrofurantoina 65.00 15.00
imipenem 85.00 75.00
penicilina 60.00 40.00
cefuroxima 50.00 20.00
clindamycina 40.00 5.00
rifampicina 55.00 10.00
oxacilina 35.00 20.00
cloranfenicol 65.00 40.00
Tetraciclina 55.00 35.00
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