Inmunologia
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![Page 1: Inmunologia](https://reader036.fdocuments.es/reader036/viewer/2022072004/563dbb80550346aa9aadb6ee/html5/thumbnails/1.jpg)
Frotis de Sangre tinción de giemsa
Neutrófilos Monocitos Linfocitos
Eosinófilos
Neutrófilo
Linfocito
EosinófiloMonocito
Basófilo
![Page 2: Inmunologia](https://reader036.fdocuments.es/reader036/viewer/2022072004/563dbb80550346aa9aadb6ee/html5/thumbnails/2.jpg)
Composición leucocitaria de la sangre
![Page 3: Inmunologia](https://reader036.fdocuments.es/reader036/viewer/2022072004/563dbb80550346aa9aadb6ee/html5/thumbnails/3.jpg)
Protocolo de tinción para citometría de flujo de células de la sangre
1. Preparación de la muestra1. Centrifugar y resuspender las células en buffer de lisis de eritrocitos.
Incubar 3’.2. Lavar con PBS, centrifugar y resuspender las células en el buffer de tinción
(SB: Staining buffer).3. Contar las células y preparar una suspensión de 107 células/ml.4. Colocar 100μl de la suspensión por tubo.
2. Tinción de las células1. Bloquear con suero fetal bovino 10% en SB2. Agregar 10 μl de la dilución de anticuerpo monoclonal correspondiente a
cada tubo.3. Incubar aprox. 30’, lavar con 1ml de SB, centrifugar y resuspender las
células en:• SB (muestras que no pueden ser fijadas, tinciones con anticuerpo
primario y secundario)• Fijador (formaldehido 2 o 4%)
3. Análisis de las células en el citómetro de flujo.