Instructivo para la prueba de CoprocultivoCODIGO:

REVISIN:

FECHA:

1.-OBJETIVO

Identificar microorganismos patgenos presentes en materia fecal causantes de infecciones gastrointestinales.

2.- ALCANCE

Aplica para todos los pacientes que acudan a solicitar el anlisis a Laboratorio Santa Mnica. Con sta informacin el mdico se ayuda para confirmar el diagnstico e instituir la terapia adecuada.

3.- POLITICAS

Fase pre analtica:

1. La muestra debe ser de recolectada recientemente (no ms de cuatro horas) en un recipiente estril.2. El paciente no debe estar en tratamiento con antibitico, de ser as, esperar 72 horas despus de concluir su tratamiento.3. Se seguir lo estipulado en las Guas G-LSM-01 y G-LSM-02.

Fase analtica:

1. Tomar la muestra con un hisopo estril.2. Marcar todas las cajas de medios de cultivo con el nmero y nombre del paciente.3. Seguir descripcin de actividad apartado 4.4. En caso de contaminacin durante el proceso se solicitar una nueva muestra.5. Se seguir lo estipulado en las Gua G-LSM-02.

Fase post analtica:

1. Entregar a la secretaria el reporte del resultado en la bitcora de microbiologa.2. Entregar los resultados al paciente en el tiempo convenido, 3 das para los cultivos sin antibiograma, y uno ms si incluye antibiograma.3. Desechar el material usado durante el proceso del cultivo.4. Se seguir lo estipulado en las Gua G-LSM-02.

4.- DESCRIPCIN DE LAS ACTIVIDADESResponsableDescripcin detallada de la actividadRegistro de Calidad (cdigo)

QumicoSe interroga al paciente para saber si la muestra se recolect adecuadamente, si cumple con las condiciones se anota el nombre y tipo de cultivo y se le asigna un nmero con el que se marca cada caja para el estudio en cuestin.

F-LSM-03

QumicoCon un hisopo estril se toma la muestra rotndolo para que se impregne y se hace una siembra directa en los medios McConkey y Agar SS, aparte se toma una porcin aproximadamente del tamao de un grano de frijol y se inocula en el caldo de Tetrationato. Los medios inoculados se incuban por lo menos 18 horas a 35-37 C en atmsfera aerobia.

N/A

QumicoSe revisan las cajas de la siembra directa y se evalan las caractersticas macroscpicas del desarrollo en las cajas de Petri; morfologa de la colonia y cambios en el medio que rodea las colonias. Las colonias aisladas se examinan microscpicamente para determinar su pureza, y morfologa celular buscando colonias sugestivas de patgenos y de acuerdo a las observaciones se selecciona el conjunto de pruebas bioqumicas requerido para la identificacin del aislamiento en gnero y especie. Se inoculan y se incuban a 35-37 C por 18-24 hrs.El caldo enriquecido es resembrado en Agar McConkey y Agar SS, para esto se flamea el asa y se deja enfriar, se sumerge en el medio enriquecido y se inocula cada medio de cultivo. Los medios inoculados se incuban por lo menos 18 horas a 35-37 C en atmsfera aerobia.

N/A

QumicoSe revisan las cajas de la siembra del caldo enriquecido y se evalan las caractersticas macroscpicas del desarrollo en las cajas de Petri; morfologa de la colonia y cambios en el medio que rodea las colonias. Las colonias aisladas se examinan microscpicamente para determinar su pureza, y morfologa celular buscando colonias sugestivas de patgenos y de acuerdo a las observaciones se selecciona el conjunto de pruebas bioqumicas requerido para la identificacin del aislamiento en gnero y especie. Se inoculan y se incuban a 35-37 C por 18-24 hrs.Se leen las pruebas bioqumicas de la siembra directa y se identifica a la bacteria de acuerdo a los resultados.

F-LSM-03

QumicoSe leen las pruebas bioqumicas de la siembra del caldo enriquecido y se identifica a la bacteria de acuerdo a los resultados.F-LSM-03

QumicoSe elabora el reporte en el formato de Resultado de CoprocultivoF-LSM-09

QumicoSe entrega a la secretaria los resultados para su reporte final.F-LSM-03

SecretariaLos resultados son revisados y firmados y se ponen en sobre membretado para entregar al pacienteN/A

5.- CONTROL DE REGISTROSIdentificacin (cdigo)Nombre del registroLugar de almacenamientoResponsable de su proteccinTiempo de retencinDisposicin de los registros

F-LSM-O3

Bitcora de Microbiologarea de Microbiologa e Qumico1 aoArchivo muerto

F-LSM-09Formato de impresin de resultadosLaboratorioQumico1 aoArchivo muerto

6.- GLOSARIO6.1.- SIGLASI.- intermedio.R.- resistente.S.- sensible.

6.2.- DEFINICIONES-Asa: alambre generalmente de platino, recto o con una curva en forma de anillo en el extremo.-Atmsfera aerbica: Presencia de aire o de oxgeno durante el proceso de incubacin.-Pruebas Bioqumica: Pruebas usadas para determinar las caractersticas metablicas por medio de reacciones, que reflejen la identidad nica del organismo y permitan conocer la especie de ste.-Caja de Petri: Cpsula formada por dos discos de cristal o de plstico con borde, uno de los discos es de menor tamao lo que permite introducirlo en el otro. Siendo previamente esterilizados, en el disco menor que forma el fondo de la caja se deposita el medio de cultivo, el conjunto puede ser fcilmente sembrado y colocado en la estufa en posicin invertida.-Caldo: medio de cultivo lquido, consiste en una solucin adecuada de nutrientes en agua para el desarrollo de determinados microorganismos.-Colonia: Poblacin de clulas que crecen a partir de una sola, y pueden observarse macroscpicamente en un medio slido.-Cultivo: a) Mtodo de obtencin de microorganismos mediante siembras controladas en medios adecuados, b) colonias de microorganismos as obtenidos.-Flamear: accin de pasar el asa a travs de la flama para esterilizarla.-Incubacin: Someter los cultivos de microorganismos a una temperatura determinada, temperaturas y condiciones favorables para su desarrollo.-Inculo: introduccin de microorganismos en un medio de cultivo para iniciar un cultivo microbiano.-Medio de cultivo: Sustrato que consiste en una mezcla adecuada de nutrientes para obtener el desarrollo de determinados microorganismos.-Patgeno: Microorganismo capaz de originar y desarrollar una enfermedad.

Bibliografa- Diagnostico Microbiolgico, Koneman, Allen, Dowell, Janda, Sommers, Winn. Ed. Mdica Panamericana, 1992.- Difco & BBL Manual first edition 2008, pgina de Becton Dickson. http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/difcoBblManual.asp-- Manual de Microbiologa aplicada, pgina del laboratorio de Microbiologa de la U.A.M. http://www.azc.uam.mx/cbi/quimica/microbiologia.-Manual of BBL Procedures and Laboratory Procedures, Power, McCuen. Sixth Ed. USA 1988.ELABORADO POR:REVISADO POR:APROBADO POR: