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La aplicación de carbohidratos en arbolado urbano
ISA annual international conference [email protected] 1
La aplicación de carbohidratos como una opción para mejorar la vitalidad y crecimiento del arbolado urbano
Tomás Martínez-Trinidad
Profesor Investigador AdjuntoArboricultura y Dasonomía UrbanaPostgrado en Ciencias Forestales
Annual ISA International Conference
Fotosíntesis: fuente de energía (carbohidratos)
6CO2 + 6H20 C6H1206 +6O2
INTRODUCCIÓN
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RELACIÓN FUENTE-DEMANDA
• Fuente- Producción
(hojas), o liberación(raíz, tallo)
• Demanda- Almacén,
o Uso
http://online.moraine.cc.il.us /WebSupported/BIO112/sourcetos ink.jpg
Introducción
DISTRIBUCIÓN DE RECURSOS
• Defensa
• Mantenimiento
• Crecimiento
• Reproducción
Introducción
• Exudados raíz
• Almacenamiento
Shigo, A. L. 1991. Modern Arboriculture
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Arbolado urbano experimenta diferentes condiciones de estrés
Reservas deEnergía
CrecimientoDefensa
ReproducciónAlmacenamiento
Declinación
Introducción
Introducción
* Apariencia visual- Crecimiento- Tamaño de hoja, color- Densidad de follaje
* Contenido de carbohidratos- Laboratorio (glucosa y almidón)- Tinción de tejidos - almidón- Medidores de glucosa
• Espectrómetro de fluorescencia (Fv/Fm)
* Ohmímetro (Resistencia eléctrica)
MÉTODOS PARA DETERMINAR VITALIDAD
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� ¿Se pueden aplicar carbohidratos de manera exógena para mejorar el crecimiento y vitalidad de los árboles?
Pregunta Principal
EXPERIMENTO 1• Estudiar la distribución espacial y estacional de glucosa y
almidón en árboles de Quercus virginiana.
(Larcher, 1980)
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MATERIALES AND MÉTODOS
- Árboles (10 cm diam.)Quercus virginiana
- 5 m - espaciamiento
Muestras: N,S,E,O
* Raíces (soporte)* Tronco (1 m altura) * Hojas (media de copa) * Ramillas (1 año)
NS
E
� Hielo, secado, molido, y almacenado (viales)
Determinación de glucosa y almidónSigma GAGO-20
� Extracción glucosa� Determinación (650 nm)� Almidón –muestra remanente –
enzima amiloglucosidasa� Colorimétricamente: a 540 nm
� Muestreo: cada estación
Materiales y Métodos
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Materiales y Métodos
� Análisis de datos
- Punto cardinal, tipo tejido, época de año
N-S, E-O (entre árboles y filas)
- Procedimiento GLM
- SPSS v.13
R E S U L T A D O S
� El contenido de carbohidratos no fue afectado porpunto cardinal.
0
20
40
60
80
100
March July September January
Time
Glu
cose
con
cent
ratio
n
mg
g-1
DW
Root
Trunk
Twigs
Leaves
Contenido de glucosa en Quercus virginiana en cuatro fechas diferentes.
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0
20
40
60
80
March July September January
Time
Sta
rch
co
nce
ntr
atio
n
mg
gluc
ose
g-1
DW
Root
Trunk
Twigs
Leaves
Resultados
Contenido de almidón en Quercus virginiana en cuatro fechas diferentes.
� La raíz y tronco presentaron altos contenidos dealmidón durante el periodo de dormancia.
� El contenido de glucosa: hojas > ramillas > tronco yraíz, mientras que el almidón tuvo un patrón inverso.
EXPERIMENTO 2
� Suelo bajo condiciones controladas y en campo
MATERIALES Y MÉTODOS
• Evaluar los efectos de aplicaciones de carbohidratos en elsuelo sobre la actividad microbiana bajo condiciones delaboratorio y en campo.
Carbohidrato Concentración (g L-1)Testigo 0Glucosa 40, 80, 120Almidón 40, 80, 120Mezcla (50% cu) 40, 80, 120
� 3 rep/ tratamiento
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* Laboratorio
- ContenedoresIncubados a 27oC
* Campo- Soluciones
radio 0.5 m
- Ambos casos:Distribución
aleatoria
- Muestreo semanal
Materiales y Métodos
�Método de disoluciones-Bacteria - (N.A)-Actinomicetes - (A)-Hongo - (PDA+RB)
Materiales y Métodos
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�Respiración: Titulación�30 g of suelo (frasco)�3 mL NaOH (vaso)� Incubó 48 hrs.
�2,3 gotas fenolftaleína+1 mL BaCl2* HCl
Materiales y Métodos
(Dr. Zuberer)
� Análisis de datos
- Completamente al azar
- Procedimiento GLM
- SPSS v.13
- Prueba de Dunnett
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Microbio CampoUFC g-1 suelo
LaboratorioUFC g-1 suelo
Hongo 9.8 x 103 (�4.0)† 13 x 103 (�3.1)Actinomicetes 10.7 x 104 (�5.3) 8 x 104 (�3.5)Bacteria 8.5 x 106 (�3.7) 15 x 106 (�4.8)
Medias de UFC para hongo, actinomicetes, bacteriasen suelo tratado con carbohidratos a diferentes
concentraciones.
RESULTADOS
† Desviación estandar
� La técnica de disoluciones no funcionó para encontrar diferencias en la enumeración de poblaciones microbianas del suelo.
Respiración en muestras de suelo tratadas con glucosa, almidón o mezclas 50:50 enconcentraciones diferentes (0, 40, 80, and 120 gL-1) baj o condiciones de laboratorio.*Significativamente diferente con P�0.05 usando la prueba de Dunnett.
Resultados
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Weeks
Control
Starch 120
Starch 80
Starch 40
** * *
0
200
400
600
800
1000
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Weeks
CO
2 Ev
olv
ed (µ
g.g
-1 s
oil)
Control
Glucose 120Glucose 80
Glucose 40
*
*
*
***
*
* *
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
We eks
Control
Mi x 120
Mi x 80
Mi x 40*
*
*
*
*
*
** *
� La respiración en el suelo no fue afectada hasta después de varias semanas de la aplicación de altas concentraciones de almidón.
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0
100
200
300
400
500
600
700
0 1 2 3 4 5 6
W eeks
CO 2
Evo
lved
(µg.
g-1 s
oil)
C ontrol
Glucos e 120
Glucos e 80
Glucos e 40*
*
** **
*
0 1 2 3 4 5 6
Weeks
Control
S tarch 120
S tarch 80
S tarch 40
*
*
*
**
0 1 2 3 4 5 6
Weeks
Cont rol
Mix 120
Mix 80
Mix 40
*
*
**
*
Respiración en muestras de suelo tratadas con glucosa, almi dón o mezclas 50:50 en diferentesconcentraciones (0, 40, 80, and 120 gL-1) baj o condiciones de campo.* Significativamente diferente con P�0.05 usando la prueba de Dunnett.
Resultados
� La respiración en el suelo se incrementó significativamente con la aplicación de carbohidratos bajo condiciones de campo y laboratorio.
Evaluar los efectos de aplicaciones de carbohidratos en elsuelo en el crecimiento y vitalidad de Quercus virginiana.
EXPERIMENTO 3
• Absorción xraíz(azúcares)
• Disponibilidad Nutriente- microorganismos - suelo
• Secuestro de Nutrientes- temporal
http://www.organicare.com/howyardworks .html
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* Tratamiento: soluciones al
suelo
� Árboles -10 cm
MATERIALES Y MÉTODOS
Aplicaciones:Cada 4 meses
(1.5 años)
•10 L por árbol – alrededor – radio de 0.5 m
� Completamente azar
Carbohidrato Concentración (g L-1)
Glucosa 0, 40, 80, 120Almidón 0, 40, 80, 120
Mezcla (50% cu) 0, 40, 80, 120
Materiales y Métodos
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• Crecimiento de raíz: * 4 muestras
(6 cm x 15 cm)* a 0.5 m del tronco* Longitud y diámetro
Programa WinRhizo* Peso seco
Materiales y Métodos
� Crecimiento: - Diámetro, - Área de copa vertical,
Programa ImageJ - Índice de crecimiento
1
12
medición
mediciónmediciónIC
−=
� Análisis de carbohidratos en ramillas
- Muestras raíz (final)
� Fotosíntesis: - LiCor 6200 - 3 hojas
Materiales y Métodos
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• Fluorescencia clorofila10 hojas de 1/3 bajo de
la copa
�Composición isotópica de carbono- ramillas y raíces – 18 meses
* Laboratorio de Isótopos Estables en UC Davis* �13C (estándar PDB).
Materiales y Métodos
• Valores de �13C- Isótopos estables 12C, 13C
azúcar
Planta C3
Pee Dee Belemnite
* Plantas C3: -20 a -34‰
* Plantas C4: -9 a -16.8‰
OPCION POTENCIAL PARA DETERMINAR LA ABSORCIÓN DE AZÚCARES
Azúcares de C4
� � ���
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�Respiración en suelo- 25 mm diam. x 150 mm largo
muestras de suelo (4 meses)- 0.5 m del tronco
* Muestras bolsas de plástico* Hielo Azul
�Análisis de nutrientes (año)- Suelo- Hojas
Materiales y Métodos
� Análisis de datos
- Completamente al azar
- Estructura factorial (concentraciones y carbohidratos)4x3 aumentada por el control
- Procedimiento GLM
- SPSS v.13
* Datos de composición isotópica de carbono
* Prueba de Dunnett
Materiales y Métodos
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0.650.67
0.690.710.730.75
0.770.790.81
0.830.85
Aug '04 Dec '04 Apr '05 Aug '05 Dec '05 Jun '06
Time
Ch
loro
ph
yll
flu
ore
scen
ce
(Fm
/Fv) Glucose Starch Mixture
Efecto general de la aplicación de glucosa, almidón y mezclas 50:50 enfluorescencia de clorofila (Fv /Fm) de Quercus virginiana en diferentes fechas.
A
RESULTADOS
� La aplicación de soluciones en el suelo no tuvieronun impacto significativo en el crecimiento.
0.650.670.69
0.710.730.750.770.790.810.83
0.85
Aug '04 Dec '04 Apr '05 Aug '05 Dec '05 Jun '06
Time
Chlo
roph
yll
fluore
scenc
e (F
m/F
v)
0 40 80 120
Resultados
Efecto general de la aplicación de diferentes c oncentraciones de carbohidratos (0,40, 80 and 120 g L-1) en la fluorescencia de clorofila (Fv /Fm) de Quercus virginianaen diferentes fechas.
0
� El uso de la composición de isótopos de carbono nofuncionó para determinar si los azúcares fueronabsorbidos por las raíces de los árboles.
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Efecto general de diferentes concentraciones de carbohi dratos en el conteni do deglucosa en ramillas de Quercus virginiana.
25
28
31
34
0 40 80 120
Concentration (g L-1)
Glu
cose
(mg
g-1 D
W)
Resultados
� La aplicación de altas concentraciones decarbohidratos causó un alto contenido de glucosa enramillas y variación en la fluorescencia de clorofila,aunque las diferencias fueron pequeñas.
0
20
40
60
80
100
120
140
0 40 80 1 20
Conce ntration (g L -1)
CO
2 E
volv
ed (
µg g
-1 s
oil)
Glucose Starch Mixture
Efecto general de carbohidratos (glucosa, almi dón y mezcla 50:50) en diferentesconcentraciones sobre la respiración en suelo (µg CO2 g-1 s uelo) cuatro mesesdespués de la aplicación de tratamientos.
Resultados
� Altas concentraciones de almidón tuvieron unimpacto en la actividad microbiana cuatro mesesdespués del tratamiento, aunque no produjeron unefecto significativo en vitalidad y crecimiento.
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MATERIALES Y MÉTODOS
• Determinar el efecto de inyecciones con carbohidratos en elcrecimiento y vitalidad de Quercus virginiana.
EXPERIMENTO 4
� Árboles (20 cm ) cerca de College Station
� Tratamiento: Inyecciones al tronco
- macroinfusión
* Micro o macro
* Baja o alta presión
INYECCIONES EN LOS ÁRBOLES
• Solución - al sistemavascular (Xilema)
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Carbohidrato Concentración (g L-1)Glucosa 0, 40, 80, 120Sacarosa 0, 40, 80, 120Mezcla (50% cu) 0, 40, 80, 120
Materiales y Métodos
� 10 L por árbolbase de la raíz
� Aplicaciones: enero año1, año2
� Diámetro� Crecimiento de raíz *� Contenido de carbohidratos� Fotosíntesis� Fluorescencia de clorofila� Composición isotópica de C *
Materiales y Métodos
* Medido a un año de la aplicación
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� Análisis de datos
- Completamente al azar
-Estructura factorial (concentraciones y carbohidratos)4x3 aumentada por el control
- Procedimiento GLM
- SPSS v.13
* Datos de composición isotópica de carbono
* Prueba de Dunnett
Materiales y Métodos
RESULTADOS
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
control glucose mixture 50:50 sucrose
Type of sugar
Diam
eter
Gro
wth
Inde
x(c
m.c
m-1)
Índices de crecimiento en diámetro (cm cm-1) deQuercus virginiana inyectado con 3 tipos deazúcares (glucosa, sacarosa,y mezcla 50:50).
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0
0.20.4
0.60.8
11.21.4
1.61.8
2
0 40 80 120
Carbohydrate Concentration (g L-1)
Tru
nk in
crem
ent
(cm
)
Media general del incremento en diámetro (cm) de Quercusvirginiana inyectado c on diferentes concentraciones decarbohidratos (0, 40, 80 y 120 gL-1).
Resultados
� La mezcla 50:50 (glucosa y sacarosa) causó unmayor incremento de los índices de crecimiento endiámetro.
0
5
1 0
1 5
2 0
2 5
3 0
3 5
4 0
0 40 80 12 0
Ca rbohydra te Conce nt ra tion (g.L -1)
Glu
cose
co
nten
t(m
g.g
-1 D
W)
0
1 0
2 0
3 0
4 0
5 0
6 0
0 40 80 12 0
Ca rbohydra te Conce nt ra tion (g.L -1)
Sta
rch
con
tent
(mg
glu
cose
.g-1
DW
)
Efecto general de inyecciones con diferentes concentraciones de carbohidratos en elcontenido de glucosa para ramillas y almidón en raíces de Quercus virginiana.
Resultados
Ramillas Raíces
� El contenido de glucosa en ramillas y de almidón enraíces mostraron un incremento en árboles tratadoscon las altas concentraciones de carbohidratos.
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0.6
0.65
0.7
0.75
0.8
0 40 80 120
Carbohydrate Concentration (g.L-1)
Chl
orop
hyll
fluor
esce
nce
(Fv/
Fm)
Efecto general de aplicación de carbohidratos por inyecciones altronco en cuatro concentraciones (0, 40, 80, y 120 g L-1) sobre lafluorescencia de clorofila (Fv /Fm) en Quercus virginiana.
Resultados
0
� La fluorescencia de clorofila Fv/Fm se incrementósignificativamente en árboles tratados con altasconcentraciones de carbohidratos.
Tratamiento Raíces RamillasTestigo -26.823 -30.530Glucosa 40 -26.437 -30.430Glucosa 120 -26.823 -30.037Sacarosa 40 -26.697 -29.973Sacarosa 120 -26.697 -29.157*
Composición isotópica de carbono (�13C) en ramillas y raíces de Quercusvirginiana tratados con glucosa y sacarosa a 40 y 120 g L-1.
Resultados
* Significativamente diferentes P�0.05 usando la prueba de Dunnett.
� La composición isotópica de carbono (�13C) nomostró una tendencia clara para corroborar ladistribución de fuentes exógenas de carbohidratos.
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CONCLUSIONES GENERALES
� Las diferencias en la concentración de carbohidratosentre los tejidos durante el año remarcan la necesidadde los órganos del árbol entre los periodos decrecimiento ydormancia.
� Aunque el método de disoluciones no funcionó paradeterminar el efecto de carbohidratos en la actividadmicrobiana del suelo, los resultados con la técnica detitulación sugieren que la aplicación de carbohidratospuede funcionar como un método efectivo y prácticopara incrementar la actividad microbiana en el suelo.
� La inyección con carbohidratos puede mejorar elcrecimiento y vitalidad de Quercus virginiana.Desafortunadamente, los valores de �13C nodemostraron una tendencia que corroborara laabsorción y distribución de fuentes exógenas decarbohidratos.
CONCLUSIONES GENERALES
� La aplicación de carbohidratos al suelo no produjo unefecto notable en el crecimiento de los árboles.Aunque la aplicación de altas concentraciones mostrócambios en el contenido de glucosa en ramillas y lafluorescencia de clorofila en hojas, dichas diferenciasfueron pequeñas yno mostraron una tendencia clara.
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AGRADECIMIENTOS
� Dr. W. Todd Watson (Consejero)� Dr. Michael Arnold � Dr. Leonardo Lombardini� Dr. David Appel
Dudley Bernard, Russell Book, Corey Stover, Tim Rogers, Alejandro Alarcon, Lisbet Islas-Rodríguez
� Environmental Design Inc.� Texas Forest Service� USDA Forest Service� Colegio de Postgraduados� Conacyt� SEP
¿Preguntas?����