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LA CMARA DE NEUBAUERAlumna:

LA CMARA DE NEUBAUERLa cmara de Neubauer consiste en una lmina microscpica, poco ms grande que un portaobjetos tradicional, con marcas en cuadrantes de medidas conocidas. Observndose con ayuda de un microscopio es posible percibir en la misma la existencia de tres tipos de cuadrantes denominados A, B, C que juntos forman un cuadrado mayor.

CUADRANTES DE LA CAMARA DE NEUBAUEREstos cuadrantes tienen diferentes sub-divisiones, lo que hace que el criterio para elegir el cuadrante en el que se contar esporas sea el tamao de las esporas a cuantificarse. Por lo general muy pequeas esporas se cuentan en el cuadrante C, el tamao intermedio en el cuadrante B, mientras que las esporas grandes se cuentan en el cuadrante A.La superficie total integrada por nueve cuadrantes es de 9 mm2y cada cuadrante (A, B y C) son cuadrados de 1 x 1 mm. Se utilizan cubreobjetos (especialmente para su uso en una cmara Neubauer), dando como resultado una profundidad de 0,1 mm, que permite obtener un volumen de 0,1 mm3 en cada cuadrante.

APLICACIONES DE LA CMARA DE NEUBAUERSe utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio el numero de partculas (leucocitos, hemates, bacterias), por unidad de volumen de un lquido. Clases de cmaras:- Neubauer Improved: Es el ms utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2).- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de clulas en lquidos orgnicos (LCR, Lquido sinovial).TCNICAS DE CONTEOSe cuenta todas las celdas dentro de una zona de medicin definida. Ejemplo:Recuento de leucocitos en una rea de 4mm2 utilizando los cuadrados enumerados 1,3,7,9; se debe incluir en el recuento los leucocitos que se observan sobre las lneas de cada cuadrado revisado.Clculo de nmero de leucocitos en un mm3 de sangre:1.- Usar la siguiente formula:

TCNICAS DE CONTEOEl recuento se puede realizar tanto en el cuadrado grande central como en los de las esquinas, dependiendo del tamao de las clulas en estudio. En este ejemplo realizaremos el recuento en el cuadrado central.Cuando colocamos la muestra bajo el cubreobjetos, la suspensin celular alcanza una altura de 0,1 mm. Teniendo estos datos en cuenta, y si consideramos uno de los cuadrados grandes, el volumen contenido en ste ser de:1 x 1 x 0,1 = 0,1 mm3= 10-4mlCon el objetivo 10X del microscopio hay que localizar la zona de recuento (uno de los cuadrados grandes). Para contar las clulas se cambia al objetivo 40X. Se cuentan las clulas contenidas en todos los cuadrados medianos (25 si hemos elegido como zona de recuento el cuadrado grande central o 16 si hemos elegido una de las esquinas) de acuerdo con el siguiente criterio:Hay que contar todas las clulas que estn dentro de cada cuadrado mediano y aquellas que estn tocando los lados superior y derecho de dicho cuadrado (aunque estn parcialmente fuera). Siguiendo este criterio, en la figura se contaran las clulas en color verde, y no se contaran las clulas en color rojo.

Si hemos contabilizado N clulas en uno de los cuadrados grandes (o sea, en 25 cuadrados medianos), la concentracin de nuestra muestra ser:N x 104cel/mlSi para hacer el recuento hemos tenido que concentrar o diluir la muestra inicial, hemos de tener en cuenta este factor de concentracin-dilucin (f):N x 104x f cel/mlSuspensin celular inicial = suspensin celular diluida x factor de concentracin-dilucin